醫院病原體檢測方法

① 感染性疾病病原檢查方法有哪些

感染（infection）是病原體（pathogen）和人體在一定條件下相互作用的病理過程，感染的病原體包括各種細菌、病毒、寄生蟲、真菌、支原體、衣原體、螺旋體等。病原體的來源可分為外源性和內源性感染兩種類型。外源性感染是由於外界的病原體侵入人體，如志賀菌、結核分枝桿菌、人免疫缺陷病毒（HIV）等引起的感染。內源性感染是人體內經常寄生的微生物，如大腸埃希菌、腸球菌、某些真菌等在一定條件下引起的感染。感染後是否引起感染性疾病（infection diseases）與病原體的數量、毒力和人體的抵抗力有關，並決定感染的發生、發展和結局。病原體感染後機體可以出現不感染、隱性感染（covert infection）、顯性感染（overt infection）、持續性感染（persistent infection）或病原體攜帶狀態（carrier state）幾種類型。感染性疾病是由於感染的病原體毒力強、數量多，超過了機體的抵禦能力，定植在機體一定部位增殖、擴散或蔓延、釋放毒素，引起機體免疫病理反應，導致組織、器官等損傷，生理功能紊亂，並出現一系列的臨床症狀和體征。感染性疾病的檢查主要包括病原體的檢查、感染的血清學試驗等，並由此確定感染性疾病的發生和性質；通過病原體的葯物敏感試驗、耐葯株監測和醫院感染的監測報告，為臨床感染性疾病的最佳治療葯物選擇，採取最有效的預防措施，防止感染的傳播或流行提供及時、有效的實驗數據。
隨著現代社會與臨床醫學的發展，目前感染性疾病的流行病學特點發生了明顯變化，主要體現在以下幾個方面：①由強毒性病原體引起感染的疾病，如鼠疫、白喉、傷寒、天花、小兒麻痹逐漸減少或絕跡，而條件致病的病原體引起的感染、醫院感染逐漸增多。②由新的病原體、原有的病原體變異引起的新感染性疾病，如艾滋病（AIDS）、瘋牛病、O157出血性腸炎、嚴重急性呼吸綜合征（severe acute respiratory syndrome, SARS）等陸續出現。③以前的感染性疾病，如淋病、梅毒、結核病等又重新流行。④多重耐葯株，如耐萬古黴素的腸球菌（VRE）、耐苯唑西林的葡萄球菌（MRS）、耐異煙肼的結核桿菌等，導致抗感染治療無效或低效。因此，臨床感染性疾病的檢查應密切結合上述新的變化趨勢進行。
細菌感染所致的感染性疾病占首位；病毒性感染在人群中的發生率最高，但不一定致病；真菌感染的發病率近年來顯著上升；寄生蟲，如隱孢子蟲、卡氏肺孢子蟲、滴蟲等感染開始受到普遍關注。病原體的檢查是臨床確診感染性疾病的主要手段，根據需要鑒定到一定水平即可。例如，作為臨床病原學診斷，細菌感染只需鑒定到種，必要時才進一步鑒定；若進行流行病學調查，細菌鑒定應達到血清型或基因型。臨床病原體檢查必須通過採集標本，經過各種試驗後才能明確診斷。標本採集質量的好壞直接影響診斷結果，早期採集、無菌採集、適當與適量採集是確保查明病原體的前提。臨床病原體檢查的方法有多種，包括塗片檢查、分離培養、血清學鑒定和分子生物學診斷（molecular biological diagnosis）等，可根據臨床需要和標本類型進行選擇。臨床標本分離培養的陽性結果最具確診意義，但陰性結果並不能完全除外病原體感染的可能。病原體抗原成分檢測可早期、快速診斷感染性疾病，陽性結果表明感染病原體的存在。分子生物學診斷為病原體感染的早期、快速、敏感、特異診斷成為可能，但應排除假陽性或假陰性結果。

② 病原微生物基因檢測和其他檢測有什麼不同

病原微生物檢測方法包括：

傳統金標准：特殊染色鏡檢，培養葯敏試驗等確定病原菌和耐葯基因

免疫學方法：酶聯免疫技術通過已知的抗體或抗原來檢測病原體的抗原或抗體

PCR檢測：用已知引物引導未知片段中微量待測基因片段擴增

基因晶元：通過微加工將百萬計的基因探針與核酸雜交檢測技術

核酸雜交：探針和核酸按鹼基互補配對原則締成異質雙鏈檢測

宏基因組：從樣品中提取總核酸，構建宏基因組文庫測序分析檢測

病原微生物宏基因檢測法相比於其它方法：其利用宏基因組檢測樣本總核酸鑒定微生物的種類，檢測范圍更廣，一次性可分析10635種微生物，包括RNA病毒，速度快48小時能完成交付，檢測樣本靈活，

重點：

1、可檢出新發病原，解決想不到，

2、可檢也罕見病原，解決沒想到，

3、可檢出低頻率突變，解決做不到，

達瑞基因

③ 2021天津醫療衛生檢驗學：梅毒檢測方法

梅毒是由蒼白(梅毒)螺旋體引起的慢性、系統性性傳播疾病。主要通過性途徑傳播，臨床上可表現為 一期梅毒 、 二期梅毒 、 三期梅毒 、 潛伏梅毒 和先天梅毒(胎傳梅毒)等。梅毒在考試中的常考難點為梅毒的檢測方法，目前，在醫學上梅毒常用的檢測方法主要分為兩類，一類是病原學檢測;另一類是血清學檢測。

一、病原學檢測法：以直接觀察病原體為目的的檢測，目前在臨床上應用的較少，能夠開展的醫院也不多。病原學檢測包括：①暗視野顯微鏡檢查。②鍍銀染色檢查。

二、血清學檢測則又包括兩大類：

(一)以非梅毒螺旋體抗原的血清試驗：

①VDRL(性病研究實驗室試驗)。

②USR(不加熱血清反應素試驗)。

③RPR(加速血漿反應素環狀卡片試驗)。

④TRUST(甲苯胺紅不加熱血清試驗)。

目前RPR和TRUST是我國主要採取的兩種非梅毒螺旋體抗原血清檢測方法。

(二)以梅毒螺旋體抗原的血清試驗：

①FTA-ABS(密螺旋體熒光抗體吸收)

②TPPA/TPHA(梅毒密螺旋體凝集試驗)

③TP-ELISA(酶聯免疫吸附試驗)

④CIA(發光法)

⑤GICA(膠體金免疫層析法)

⑥WB(蛋白印跡試驗)

⑦PCR聚合酶鏈反應

⑧梅毒螺旋體IgM抗體檢測

通過檢查血液中的抗體來判斷是否感染的檢測，是目前在臨床上廣泛被採用的檢驗梅毒的手段。

(三)目前臨床上檢測梅毒較常用的檢測方法有及其優缺點：

1.化學發光法ELISA：其敏感度及特異性較高，在操作中可以同一時間進行多份抗體檢驗，該方法較簡單，常用來進行大批量的篩查。

缺點：結果陽性不能區分既往感染和現症感染。

2.TRUSTRPR：該方法操作簡便、迅速，適用於大量標本檢測。用於臨床初篩試驗、梅毒的病程和療效觀察。

缺點：TRUST在硬下疳出現後4周才能檢出，對一期梅毒檢出率較低，適合診斷二期梅毒。還易出現生物學假陽性反應;肉眼觀察結果，判斷主觀。

3.TPPA：敏感性和特異性均較高，能夠作為非梅毒螺旋體抗原血清學試驗初篩陽性標本的確證試驗。

缺點：手工操作，步驟繁瑣，對操作人員要求較高。結果依賴肉眼判斷且不宜保存，不適用於大批量篩查實驗。

以上通過將梅毒檢測方法分為兩個方向，總結了在臨床檢測中的常用方法，考生可根據具體問題具體分析。

④ mNGS檢測呼吸道病原體

文獻信息：

文獻：Metagenomic Sequencing Detects Respiratory Pathogens in Hematopoietic Cellular Transplant Patients
中文：宏基因組測序檢測造血細胞移植患者的呼吸道病原體
雜志：American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. IF:13.204
時間：2017年7月
單位：加利福尼亞大學

摘要：

下呼吸道感染是造血細胞移植(HCT)接受者住院和死亡的主要原因。盡管如此，由於傳統診斷法在預防性抗菌劑的設置中產量降低，抗體滴度降低，以及來自罕見機會微生物的感染，病因往往無法確定。mNGS可能提供更強的診斷，通過進行無需培養臨床樣本的微生物組成的綜合檢測。通過捕捉微生物和人類RNA, mNGS還允許同時通過轉錄組分析宿主免疫反應, 可以提供快速(< 48 h)和可行的微生物學的數據精確傳染病診斷。

1 樣本、常規臨檢：

由於HCT受者明顯需要加強LRTI診斷，我們根據密歇根大學HUM00043287協議，先後納入了22名因急性呼吸系統疾病住院的成人HCT受者，他們在2012年1月25日至2013年5月20日期間接受了支氣管鏡檢查和BAL檢查。對所有患者進行標准護理 BAL微生物學檢測 ，包括 細菌、分枝桿菌、真菌和巨細胞病毒的半定量培養;麴黴半乳甘露聚糖檢測;jirovecii肺孢子蟲銀染色;流感A/B、呼吸道合胞病毒和人偏肺病毒;和人皰疹病毒-6聚合酶鏈反應 ，具體方法見在線補充(4)。對血液和鼻咽部樣本的補充診斷由治療醫師自行決定，具體見表1和在線補充(4)。

2 建庫、測序、分析：

用250 μl BAL構建RNA和DNA測序文庫，並根據已建立的方法進行雙端Illumina測序。病原體檢測利用定製的生物信息學管道來區分臨床樣本中的病原體和背景微生物污染物（參考2，3）。使用由每百萬讀序列(rpM)排列的核苷酸reads乘以每個屬相對於無模板對照的nt和nr Z-scores之和所組成的排序分數[score = rpMnt×(Znt + Znr)]。

參考2： Actionable diagnosis of neuroleptospirosis by next-generation sequencing. N Engl J Med 2014
參考3： Illuminating uveitis: metagenomic deep sequencing identifies common and rare pathogens. Genome Med 2016
方法：sequence-based ultra-rapid pathogen identification (SURPI)

3 評估標准

微生物鑒定被歸類為病原體確認，如果：1)臨床試驗和mNGS發現了微生物, 2) 存在致病性在肺部的文獻證據, 和3) 得分至少兩倍比其他相同類型的微生物(病毒、細菌或真菌)中確定病人。如果mNGS單獨識別了微生物，且符合標准2和3，則認為微生物是新的潛在病原體;所有其他微生物都被認為是不太可能或不確定的病原體。結果分別由病毒PCR或細菌16S rRNA基因測序獨立證實，如(參考4)所述。

4 結論：

總而言之，我們利用元基因組測序的持續改進來擴大LRTI診斷急性呼吸系統疾病HCT受者的能力。我們證明，與目前的微生物診斷相比，mNGS具有更大的檢測微生物的能力，並且能夠將病原體檢測與宿主反應和氣道微生物組同步分析相結合。

參考：
臨床上那些潛藏的病原體，可以用宏基因組測序「揪出」嗎？

⑤ 支原體衣原體怎麼檢查

問題一：怎樣檢查支原體和衣原體 10分 原體和衣原體檢查都是提取尿道分泌物，然後進行化驗。最好停用抗生素10天後去醫院檢查，避免出現「假愈」現象。如果前列腺已經感染需要與尿道炎同時治療，尿道前端刺癢應該是尿道炎症狀。停葯後做一下葯敏試驗，試驗與支原體、衣原體檢查同時進行，到時候別忘了提醒醫生。葯敏試驗的目的是根據身體對葯物敏感性合理用葯，既防止錢財鄲必要浪費，又能有效治療。
祝你早日恢復健康

問題二：在婦科檢查中，什麼叫衣原體，支原體檢查 衣原體、支原體是引起人體感染的一種非常小的微生物，它的特徵主要有幾點，一個是它感染人體初期的症狀不是很明顯，經常我們發現的時候，它已經時間比較長了，已經感染了其他的組織或器官了。所以初期症狀不明顯。第二個特點，衣原體、衣原體造成的危害是比較大的，尤其是對生殖系統。第三，衣原體支原體的治療相對來說是比較困難的。
1、支原體一般對泌尿生殖系統的感染有三種，解脲支原體，人型支原體，還有生殖道支原體，還有感染呼吸系統，引起肺炎，我們叫肺炎支原體，一般來說支原體有四型。
支原體是一類大小和結構復雜程度介於病毒和細菌之間，能在人工培養基中生長、增殖的最小原核微生物。大小約為 0.3～0.4μm，難以在顯微鏡下看清楚。由於支原體缺乏細胞壁，故在形態上呈多形性。迄今，已知的支原體有150多種，廣泛分布在自然界中。寄居於人類的支原體有16種，其中寄居在人泌尿生殖道中的常見支原體包括解脲支原體、人型支原體、生殖支原體、靈長類支原體、嗜 *** 支原體、穿通支原體等6種。由於口和生殖器接觸，有時寄居於泌尿生殖道的支原體（如解脲支原體、人型支原體、生殖支原體、穿通支原體）偶爾可在口咽部分離出來。相反，有些寄居在口咽部的支原體（如發酵支原體、唾液支原體、肺炎支原體）也可出現在泌尿生殖道中。解脲支原體、人型支原體和生殖支原體等三種支原體是目前在正悄喊醫學領域最受重視的支原體。
支原體不耐乾燥，對熱抵抗力差，煮沸或高溫、紫外線均能輕易將支原體殺滅。同時，支原體易被脂溶劑、清潔劑、常用消毒劑，如酒精、酚、甲醛、來蘇爾等滅活。
2、衣原體常說的是說只有沙眼衣原體，可以感染我們的眼睛，也可以感染我們的泌尿生殖系統，衣原體在臨床上是比較大的一個話題。
衣原體是自然界中傳播很廣泛的病原體。多呈球狀、堆狀，有細胞壁，以一般寄生在動物細胞內。從前它們被劃歸病毒，後來發現自成一類。是一種比病毒大、比細菌小的原核微生物，呈球形，直徑只有O.3-0.5微米，它無運動能力，衣原體廣泛寄生於人類，哺乳動物及鳥類，僅少數有致病性。
衣原體為革蘭氏陰性病原體，是一種專性細胞內微生物，沒有合成高能化合物ATP、GTP的能力，必須由宿主細胞提供，因而成為能量寄生舉野物。衣原體是一類能通過細胞濾器，有獨特發育周期、嚴格細胞內寄生的原核細胞型微生物。
主要是通過性接觸傳播，進入生殖道後，喜歡進入粘膜細胞內生長繁殖，在女性引起子宮內膜炎、輸卵管炎、盆腔炎、尿道炎等。在男性可引起尿道炎、附睾炎、直運數腸炎等炎症。女性感染沙眼衣原體，會引起不孕、異位妊娠(宮外孕)、流產、死胎、胎膜早破、早產等。

問題三：衣原體檢查方法有哪些 衣原體是引起非淋菌性尿道炎(宮頸炎)的主要病原微生物的一種。衣原體分為三種，即沙眼衣原體、鸚鵡熱衣原體和肺炎衣原體。引起性病是沙眼衣原體。沙眼衣原體具有細胞壁、核糖體、DNA和RNA，具有合成蛋白質、核酸和脂類的能力，但不能產生三磷酸腺苷，因而完全依靠宿主細胞提供必需的能量，所以沙眼衣原體是一類在真核細胞內寄生的微生物，即在細胞內寄生是其特點。沙眼衣原體引起的疾病，除非淋菌性尿道炎外，還有沙眼、包涵體性結膜炎、性病淋巴肉芽腫、衣原體性宮頸炎、輸卵管炎、副睾炎、直腸炎、新生兒肺炎等。臨床對沙眼衣原體的檢查方法包括：1、塗片直接鏡檢：主要用於眼部標本，診斷沙眼，姬姆薩染色後在上皮細胞內查找包涵體。2、抗原檢測：①直接免疫熒光抗體檢測法。②酶聯免疫吸附試驗。這兩種方法均有快速、簡單、敏感性高的優點，廣泛應用於新近感染的臨床診斷。缺點是死菌也可被檢測到，易出現假陽性。3、細胞培養：此法操作復雜，操作條件要求高，但是檢測衣原體的「金標准」。4、血清學試驗：主要用於流行病學調查，對診斷急性輸卵管炎、附睾炎、肛周炎和嬰兒衣原體肺炎有價值。5、分子生物學技術：包括核酸探針檢測法、核酸擴散技術(PCR)、連接酶鏈反應等，敏感性均高。正常參考值： 正常人 陰性(譚立明)

問題四：男性支原體衣原體怎麼檢查 您好！
最准確的應該尿道取樣，衣原體化驗一般50分鍾出結果，支原體做細菌培養，3天出結果，檢查出致病菌後在針對性用葯，並且日常需要注意衛生，檢查的前三天避免同房，最好夫妻同治。
感謝您關注問病網，祝您健康！

問題五：女性支原體衣原體的檢查方法 1 快速抗原檢測：多採用單克隆抗體直接免疫熒光法檢測標本中的衣原體還可應用2I―IsA法加入抗衣原體抗體酶標抗體18G及底物進行比色定量檢測這兩種方法簡便敏感.2 血常規：周圍血白細胞計數一般正常嗜酸性粒細胞增多.3 PcR技術 普通PcR技術檢測肺炎衣原體特異性DNA具有快速簡便特異的優點敏感性高於細胞分離技術但在檢測咽拭於標本中效果不夠理想用套式PcR(nPcR)檢測可顯著提高其敏感性.4 x線檢查：衣原體肺炎胸片無特異性多為單側下葉浸潤表現為節段性肺炎嚴重者呈廣泛雙側肺炎沙眼衣原體肺炎胸片顯示雙側廣泛間質和肺泡浸潤過度充氣征比較常見偶見大葉實變.5 血清學檢查 採用補體結合試驗著恢復期血清抗體效價比急性期血清效價增高 4倍或4倍以上即有診斷意義但無早期診斷意義微量免疫熒光法(MrF)適用於沙眼衣原體.6 直接塗片鏡檢：取咽分泌物痰呼吸道教膜或其他部位標本做塗片進行GZmesa染色原體染成紅色始體染成深藍色沙眼衣原體包涵體因含有糖原801染色染成褐色.7 衣原體分離 肺炎衣原體培養最好用Hela細胞或Hep一2細胞一般取氣管或鼻咽吸取物作為臨床標本及時接種目前衣原體鑒定多採用Hela細胞或Hep一2細胞培養後通過特異性單克隆熒光抗體法(MFA)該技術敏感性高特異性強如能早期採集標本可在48h內獲得陽性結果。

⑥ 傳染病監測的技術方法都有哪些

一、病原學檢查
1、病原體的直接檢出：許多傳染病可通過顯微鏡或肉眼檢出病原體而明確診斷，如從血液或骨髓塗片中檢出瘧原蟲、利什曼原蟲、微絲蚴、回歸熱螺旋體等；從大便塗片中檢出各種寄生蟲卵及阿米巴原蟲等；從腦脊液離心沉澱的墨汁塗片中檢出新型隱球菌等；肉眼觀察糞便中的絛蟲節片和從糞便孵出的血吸蟲毛蚴等。
2、病原體分離：細菌、螺旋體和真菌可用人工培養基分離培養，如傷寒桿菌、志賀桿菌、霍亂弧菌、鉤端螺旋體和新型隱球菌等。立克次體需經動物接種或細胞培養才能分離出來，如斑疹傷寒、恙蟲病等。病毒分離一般需細胞培養，如登革熱、脊髓灰質炎等。用以分離病原體的檢材可採用血液、尿、便、腦脊液、痰、脊髓和皮疹吸出液。
3、特異性抗原檢測：可較快地提供病原體存在的證據，其診斷意義較抗體檢測更為可靠。常用方法有凝集試驗、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、酶免疫測定（EIA）、熒光抗體技術（FAT）、放射免疫測定（RIA ）、流式細胞檢測（FCM）等，必要時可作核酸定量檢測、基因晶元技術檢查。
4、特異性核酸檢測：可用分子生物學檢測方法，如放射性核素或生物素標記的探針作DNA印跡法或RNA印跡法，或用聚合酶鏈反應（PCR）或反轉錄PCR（RT-PCR）檢測病原體的核酸。必要時還可作原位聚合酶鏈反應（PCR）。
二、特異性抗體檢測
在傳染病的早期，特異性抗體在血清中往往尚未出現或滴度很低，而在恢復期或後期抗體滴度有顯著升高，故在急性期及恢復期雙份血清檢測其抗體由陰性轉為陽性或滴度升高4倍以上有重要診斷意義。特異性IGM抗體的檢出有助於現存或近期感染的診斷。蛋白印跡法（WB）（又稱免疫印跡法）的特異性和靈敏度都很高。常用於艾滋病的確定性診斷。

⑦ 病原微生物中細菌常見檢測方法有哪些

1、快速測試片技術法

快速測試片是指以紙片、紙膜、膠片等作為培養基載體，將特定的培養基和顯色物質附著在上面，通過微生物在上面的生長、顯色來測定食品中微生物的方法。

細菌總數檢測紙片的研製始於 20 世紀 80 年代，其主要優點是簡便、實用、經濟、操作性強。近年來以濾紙和美國某公司的 Petrifilm 為載體的測試片已開始被廣泛應用。

2、生物電化學方法

生物電化學方法是指通過電極測定微生物產生或消耗的電荷，從而提供分析信號的方法。微生物在滋生代謝過程中，培養基的電化學性質如電流、電位、電阻和電導等會發生變化，所以可以通過檢測分析這些電化學參量的變化來實現對微生物的快速測定。

常見的有：阻抗分析法、電位分析法、電流分析法等。生物電化學方法具有測量快速、直觀、操作簡單、測量設備成本低和信號的可控性等特點。

3、微菌落技術

微菌落是指細菌生長繁殖早期在固相載體上所形成的只能藉助於顯微鏡觀察的微小菌落。微菌落技術具有快速、經濟、實用的特點，其研究始於 20 世紀50年代，定量測定技術從 20 世紀 70 年代開始，國外已有報道將該法應用於水、食品中細菌總數的快速檢測。

4、氣相色譜法

氣相色譜應用到微生物的檢測中，主要是依據不同微生物的化學組成或其產生的代謝產物各異，利用上述色譜檢測可直接分析各種體液中的細菌代謝產物、細胞中的脂肪酸、蛋白質、氨基酸、多肽、多糖等，以確定病原微生物的特異性化學標志成分，協助病原診斷和檢測。

5、高效液相色譜法

利用高效液相色譜檢測可分析各種體液中的細菌代謝產物、病原微生物等，以確定病原微生物的特異性化學標志成分，協助病原診斷和檢測。

⑧ 鑒定未知病原體的技術有哪些

鑒定未知病原體的技術雀明棗可以用快速測試片技術法，具體介紹如下：

快速測試片是指以紙片、紙膜、膠片等作為培養基載體，將特定的培養基和顯色物質附著在上面，通過微生物在上面的生長、顯色來測定食品中微生物的方法。

細菌總數檢測紙片的研製始於20世紀80年代，其主要優點是簡便、實用、經濟、操作性強。近年來槐閉以濾紙和美國某公司的Petrifilm為載體的測試片已開始被廣泛應用。

每個人一生中可能受到150種以上的病原體感頃拆染，在人體免疫功能正常的條件下並不引起疾病，有些甚至對人體有益，如腸道菌群（大腸桿菌等）可以合成多種維生素。