1. 如何判斷革蘭氏染色法結果是否正確
革蘭氏染色法 最常用的細菌鑒別染色法之一。未經染色之細菌,由於其與周圍環境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難觀察。染色後細菌與環境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特徵,而用以分類鑒定。革蘭氏染色屬復染法,即將標本固定後,先用龍膽紫染色,雀坦粗加碘液媒染後用酒精脫色,再用稀釋復紅復染。染色後除可以看到細菌形態外,還可將細菌分為兩大類,即不被酒精脫色而保留紫色者為革蘭氏陽性菌(G+)。被酒精脫色復染成紅色者為革蘭頃鎮氏陰性菌(G-)。革蘭氏染色原理尚不肯定,可能與細菌所帶核糖核酸、細菌壁結構通透性、等電點等因素有關。致病菌如金黃色葡萄球菌、綠色溶血性鏈球菌、肺炎球菌、白喉桿菌、碳疽桿菌等屬革蘭氏染色陽性菌。百日咳桿菌、大腸桿菌、傷寒桿菌、痢疾桿信晌菌、霍亂弧菌、流行性腦膜炎雙球菌、淋病雙球菌等均屬革蘭氏陰性。所以根據細菌的革蘭氏染色性質,可以縮小鑒定范圍,有利於進一步分離鑒定,以對疾病做出診斷。又由於各種抗生素的抗菌譜不同,革蘭氏染色尚可做為選用抗生素的參考。
參考資料: http://www.foodmate.net/topic/term/14217.html
2. 什麼是革蘭氏染色法染色過程應注意什麼
一、定義
革蘭氏染色法是由1884年由丹麥醫師gram創立的一種復染色法,用以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特徵,對其進行分類鑒定。
二、染色原理
1、g﹢菌:細胞壁厚,肽聚糖網狀分子形成一種透性屏障,當乙醇脫色時,肽聚糖脫水而孔隙縮小,故保留結晶紫-碘復合物在細胞膜上。呈紫色。
2、gˉ菌:肽聚糖層薄,交聯鬆散,乙醇脫色不能使其結構收縮,其脂含量高,乙醇將脂溶解,縫隙加大,結晶紫-碘復合物溶出細胞壁,番紅染液復染後呈紅色。
三、染色目的
在細胞發放之前,利用標準的革蘭氏染色法對即將發放的細胞懸液進行檢測,判斷細胞懸液中是否含有革蘭氏陽性菌或革蘭氏陰性菌。
四、染色方法步驟
1
、塗片:取滅過菌的載玻片於實驗台上,用移液槍吸取10ul待檢樣品滴在載玻片的中央,用燒紅冷卻後的接種環將液滴塗布成一均勻的薄層,塗布面不宜過大。
2、
乾燥:將標本面向上,手持載玻片一端的兩側,小心地在酒精燈上高處微微加熱,使水分蒸發,但切勿緊靠火焰或加熱時間過長,以防標本烤枯而變形。
3、固定:固定常常利用高溫,手持載玻片的一端,標本向上,在酒精燈火焰處盡快的來回通過2-3次,共約2-3秒種,並不時以載玻片背面加熱觸及皮膚,不覺過燙為宜(不超過
60℃),放置待冷後,進行染色。
4、
初染:在塗片薄膜上滴加草酸銨結晶紫1-2滴,使染色液覆蓋塗片,染色約1min。
5
、水洗:斜置載玻片,在自來水龍頭下用小股水流沖洗,直至洗下的水呈無色為止。
6
、媒染:用100-1000ul移液槍吸取約300ul碘液滴在塗片薄膜上,使染色液覆蓋塗片,染色約1min。
7
、水洗:斜置載玻片,在自來水龍頭下用小股水流沖洗,直至洗下的水呈無色為止。
8
、脫色:斜置載玻片,滴加95%乙醇脫色,至流出的乙醇不現紫色為止,大約需時20-30s,隨即水洗。
9
、復染:在塗片薄膜上滴加沙黃染液1-2滴,使染色液覆蓋塗片,染色約1min。
10
、水洗:斜置載玻片,在自來水龍頭下用小股水流沖洗,直至洗下的水呈無色為止。
11
、乾燥、觀察:用吸水紙吸掉水滴,待標本片干後置顯微鏡下,用低倍鏡觀察,發現目的物後滴一滴浸油在玻片上,用油鏡觀察細菌的形態及顏色,紫色的是革蘭氏陽性菌,紅色的是革蘭氏陰性菌。
五、注意事項
1、革蘭氏染色成敗的關鍵是酒精脫色。如脫色過度,革蘭氏陽性菌也可被脫色而染成陰性菌;如脫色時間過短,革蘭氏陰性菌也會被染成革蘭氏陽性菌。脫色時間的長短還受塗片厚薄及乙醇用量多少等因素的影響,難以嚴格規定。
2、染色過程中勿使染色液乾涸。用水沖洗後,應吸去玻片上的殘水,以免染色液被稀釋而影響染色效果。
3、選用幼齡的細菌。g+菌培養12h-16h,e.coli培養24h。若菌齡太老,由於菌體死亡或自溶常使革蘭氏陽性菌轉呈陰性反應。
3. 染色體檢查貨車核型分析是確診哪類遺傳病的主要方法
染色體檢查貨車核型分析是確診哪類遺傳病的主要方法是染色體病。遺傳病是指由遺傳因素決定的疾病,是指由於遺傳物質發生改變導致的疾病,而不是顧名思義的指遺傳病都是一定有家族遺傳的病。現代遺傳學將人類遺傳病分為5類:染色體病、單基因病、喊閉晌多基因病、體細胞遺傳病、線粒體遺傳病。染色體病是遺傳病的一種。正常人共有23對染色體,一條來源自父親,一條來源自母親,其中性染色體是決定人類性別的,女性是X染色體,男性Y染色體,所以人類共24種類型染色體。當這些染色體結構或數鄭鋒目發生異常時,就會引起染色體病。在染色病中,最態鍵常見的就是唐氏綜合征,又名21三體,先天愚型。所以孕期一般要常規行唐氏篩查,高風險的孕婦需要進一步行產前診斷。
4. 免疫組化是什麼
第一、免疫組化,主要是用於病理診斷預後判斷和治療效果的預測,能夠提高病理診斷水平,對臨床有指導意義。例如惡性黑色素兆世瘤HMB45為陽性表達,可以幫助明確診斷。除此之外,還有用於疾病的病理診斷和分型、探討其發病機制,例如胃腸道間質瘤其C-kit基因突變碧猜謹可以用悔基靶向葯物治療,效果較好。
5. 免疫組織化學染色法的檢查過程
用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法,稱熒光抗體法。用已知的熒光抗原標記物示襪敏蹤或檢查相應抗體的方法,稱熒光抗原法。免疫熒光組織化學分直接法、間接法和補體法。一、直接法(1) 檢查抗原方法這是最簡便、快速的方法,用已知特異性抗體與熒光素結合,製成特異性熒光抗體,直接用於細胞或組織抗原的檢查。此法特異性強,常用於腎穿刺,皮膚活檢和病原體檢查,其缺點是一種熒光抗體只純弊能檢查一種抗原,敏感性較差。(2)檢查抗體方法將抗原標記上熒光素,用此熒光抗原與細胞或組織內相應抗體反應,而將抗體在原位檢測出來。二、間接法(1)檢查抗體(夾心法)方法此法是先用特異性抗原與細胞或組織內抗體反應,再用此抗原的特異性熒光抗體與結合在細胞內抗體上的抗原相結合,抗原夾在細胞抗體與熒光抗體之間,故稱夾心法。(2)檢查抗體方法用已知抗原細胞或組織切片,加上待檢血清,如果血清含有切片中某種抗原的抗體,抗體結合在抗原上,再用間接熒光抗體(抗種屬特異性IgG熒光抗體)與結合在抗原上的抗體反應,在熒光顯微鏡下可見抗原抗體反應部位呈現明亮的特異性熒光。此法是檢驗血清中自身抗體和多種病原體抗體的重要手段。(3)檢查抗原法此法是直接法的重要改進,先用特異性抗體與細胞標本反應,隨後用緩沖鹽水洗去未與抗原結合的抗體,再用間接熒光抗體與結合在抗原上的抗體結合,形成抗原-抗體-熒光抗體的復合物。同直接法相比熒光亮度可增強3或4倍。此法除靈敏性高外,它只需要制備一種種屬間接熒光抗體,可以適用於同一種屬產生的多種第一抗體的標記顯示,這是現在最廣泛應用的技術。三、補體法(1)直接檢查組織內免疫復合物方法用抗補體C3熒光抗體直接作用組織切片,與其中結合在抗原抗體復合物上的補體反應,而形成抗原-抗體-補體—抗補體熒光抗體復合物,在熒光顯微鏡下呈現陽性熒光的部位就是免疫復合物上補體存在處,此法常用於腎穿刺組織活檢診斷等。(2)間接檢查組織內抗原方法常將新鮮補體與第做好族一抗體混合同時加在抗原標本切片上,經37℃孵育後,如發生抗原抗體反應,補體就結合在此復合物上,再用抗補體熒光抗體與結合的補體反應,形成抗原-抗體-補體—熒光抗體的復合物,此法優點是只需一種熒光抗體可適用於各種不同種屬來源的第一抗體的檢查。[1]四、雙重免疫熒光組織化學標記方法在同一組織標本上需要同時檢查兩種抗原時要進行雙重熒光染色,一般均採用直接法,將兩種熒光抗體(如抗A和抗B)以適當比例混合,加在標本上孵育後,按直接法洗去未結合的熒光抗體,抗A抗體用異硫氰酸熒光素標記,發黃綠色熒光;抗B抗體用TMRITC或RB200標記,發紅色熒光,可以明確顯示兩種抗原的定位。
6. 常用的鑒別染色法屬於
1 細胞生物學
2 因為常用的鑒別染色法,如吉姆薩染色法、透明質酸酶染色法等,都是用於細胞棚搭轎學和組織學的研究中,用於鑒別和區分不同種類的細胞或組織。
3 此外,鑒別染色法還常用於醫學診斷中,比如常見的鏈肆血液常規染色法,可以通過染色的方式看出血液中的不同細胞類型和數量,幫助醫生進行疾病診斷和枝斗治療。
7. 染色體怎麼檢查
染色體的檢查包括傳統的細胞核型分析、熒光原位雜交即FISH、現代分子生物學技術、定量熒光聚合酶鏈式反應、多重連接探針擴增技術MLPA、二代測序、比較基因組雜交aCGH等方法。建議你到西寧現代婦產醫院咨詢,醫療設備專業水平都很高
8. 疑似豬肺疫病料塗片鏡檢常用染色方法
瑞氏染色。疑似豬肺疫病料塗片鏡檢常用染色方法,病料組織或體液塗片用瑞氏染色、美藍染色或姬姆薩染色鏡檢,見菌體多呈卵圓形,兩端著色較深,像兩個並列的球菌。如只在肺臟內見有極少數的巴氏桿菌,而其餘臟器沒有見到,並且肺雹碧納臟又無源沒明顯病變時,是帶菌豬而不能診斷為豬肺疫慧巧。