血清輸液檢測方法

1. 臨床上常用的血清學檢查方法有哪幾種

主要有沉澱試驗、凝集試驗、補體結合試驗、中和試驗及與標記抗體有關的試驗。

（1）凝集試驗

包括玻板凝集法、全血平板凝集法、試管凝集法和瓊脂擴散法。

①全血平板凝集反應

此法常用於傳染性鼻炎、雞白痢、雞傷寒、雞慢性呼吸道病等禽病的檢疫和監測。

②瓊脂擴散反應

當適當比例的抗原抗體在含有電解質的瓊脂網狀基質中自由擴散相遇時，形成肉眼可見的白色沉澱線。此法常用於雞傳染性法氏囊病、雞馬立克氏病、禽流感、禽腦脊髓炎、禽腺病毒感染等病的診斷，還常用於抗體監測和血清學流行病學調查。

（2）血凝與血凝抑制試驗

試驗原理：某些病毒能夠與人或動物的紅細胞發生凝集，稱為血凝反應（HA）。這種凝集反應可被加入的特異性血清所抑制，稱為紅細胞凝集抑制試驗，即血凝抑制反應（HI）。

此方法常用於雞新城疫、禽流感、雞產蛋下降綜合征等病毒的診斷和血清學監測。

2. 用血清檢測是指把人的血輸進血清還是血清輸進人體

將血液抽出之後自然放返老置一段時間，隨著血液凝固，會逐漸析出淡黃色的液體，而這個液體就渣世或是血清，使用血清檢測，就是說使用上述析出的黃色液體進行檢測，當然如果因為其他情況造成血清受到影響，比如紅細胞被破壞，飲食後有大量乳糜微粒等情況，就會影響血清的檢測結果。
使用血清檢測的項目主要有免疫學檢驗和臨如伍床生化檢驗的項目。

3. 採集血清檢驗標本時應

採集血清檢驗標本時應注意的事項御銷：

4. 豬病常用的血清學診斷方法有哪些

抗原和相應的抗體在動物體內或體外都能發生特異性結合反應，這種反應稱為抗原抗體反應，習慣上把體內的抗原抗體反應稱為免疫反應，體外的抗原抗體反應稱為血清學反應，因為抗體主要存在於血清中。

血清學反應可以用已知的抗體檢查未知的抗原，也可用已知抗原測定未知的抗體。人們根據抗體能與相應抗原發生反應並出現可見的抗原—抗體復合物的原理，設計了許多血清學診斷方法，不僅可以檢測動物體內乃至體外的病原微生物，或其抗原性成分，而且還可以測定動物機體對病原微生物的侵襲或對其抗原成分的免疫反應。在抗原—抗體復合物成不可見狀態時，可以通過瓊脂擴散、凝集實驗以及酶標記等指示系統，使其變為可見或可測狀態。

目前已知的血清學診斷方法很多，現僅介紹幾種在目前條件下規模化豬場通過學習都能做到的診斷方法：

（1）凝集試驗豬病診斷過程中常用的操作方法有以下幾種：

①全血平板凝集試驗實踐中主要用於細菌性疾病的抗體檢測和抗原（經分離培養後）的鑒定。現舉例用已知豬丹毒抗原（丹毒桿菌的純培養液）測定被檢豬血清中的抗體。其操作步驟如下：

a.材料豬丹毒凝集抗原，玻片，9號針頭，酒精棉球，酒精燈，鉑耳（取血環）等。b.操作用鉑耳取已知抗原1滴，置於玻片上。用酒精棉球擦拭針頭，鉑耳在酒精燈上灼燒消毒。用針頭刺破被檢豬的耳靜脈，以鉑耳取血與玻片上的抗原等量混合，在2～3分鍾內觀察結果。c.結果判定出現顆粒狀的凝集，為陽性反應。否則為陰性。

②試管凝集試驗是一種定量法，用於測定被檢血清或其他體液中有否某種抗體及其效價，可做臨床的輔助診斷，或用於流行病學監測。在豬場中，本法常用於豬布氏桿菌病的診斷。

A.材料布氏桿菌病試管凝集抗原（1∶20倍稀釋），布氏桿菌病陽性血清、陰性血清（1∶25倍稀釋），稀釋液（0.5 %石炭酸生理鹽水），滅菌小試管，1毫升吸管，試管架，待檢血清等。B.操作取試管7支置於試管架上，設陽性和陰性血清及抗原對照各1支，測定管4支，以後每增加1個樣品，只需增加4支測定管。

按表10示意稀釋血清，加抗原，完成後每支試管內應含1毫升液體。

5. 常用的血清蛋白質含量測定方法有哪些

四種血清總蛋白質的測定的方法：

1.基於蛋白分子中含有酪氨酸和色氨酸而使用的酚試劑比色法 由於各種蛋白質分子中上述兩種氨基酸的組成比例不同，特別是白蛋白含色氨酸為0.2%，而γ-球蛋白中含量達2%-3%，導致較大的差異。Lowry的改良法在酚試劑中加入Cu2+，集中原法和雙縮脲反應兩者的作用，使呈色靈敏度提高。其中75%的呈色依賴於Cu2+.反應產物最佳吸收峰在650-750nm，方法靈敏度為雙縮脲方法的100倍左右。有利於檢測較微量的蛋白質。但試劑反應仍易受多種化合物的干擾。

2.紫外測定法 採用280nm和215/225紫外吸收值，計算蛋白質含量280nm 是由於蛋白質分子中存在芳香族氨基酸所致。方法的特異性和准確性受蛋白分子中該種氨基酸的含量比例影響甚大。尿酸和肝紅素在280nm附近有干擾。紫外區200-225nm是肽健的強吸收峰。在此區域其吸收值為280nm的10-30倍，將血清稀釋1000-2000倍可以消除干擾物質的影響。

3.採用沉澱反應進行散射比濁法 用磺柳酸、三氯醋酸等配方，此方法甚為簡便，不需特殊儀器，技術關鍵在於：①選擇最佳試劑濃度及溫度；②混勻技術；③選用的標准；④待測標本中的蛋白濃度。

4.染料結合法 蛋白質可與某些染料特異結合，如氨基黑（amino black）與考馬亮藍（comassive brilliant blue ）。這一性質除了可以用於電泳後的蛋白質區帶染色，亦可用於總蛋白質的定量。缺點是多種蛋白質與染料的結合力不一致。考馬亮藍在與蛋白質結合後的吸收峰從465nm移向595nm，這一性質可用分光光度法來定量檢測。

6. 臨床化學檢驗血液標本的採集和處理知識

臨床化學檢驗血液標本的採集和處理知識

臨床檢驗的目的是為臨床提供准確可靠的實驗診斷依據。為了保證實驗數據的可靠性，在檢驗醫學中必須堅持全面質量控制(totalqualitycontrol,TQC。即指對影響臨床檢驗結果可靠性的各方面因素及各個環節進虛槐罩行質量控制)和全過程質量控制(即指對實驗工作的全過程進行質量控制和質量管理)。下面是我為大家帶來的臨床化學檢驗血液標本的採集和處理知識，歡迎閱讀。

一、臨床化學檢驗血液標本的定義

臨床化學檢驗血液標本是指為完成某項或多項臨床化學檢驗項目而採集的一定量的血液，包括抗凝及非抗凝血。

二、血液標本的採取

(一)採取部位

1.靜脈采血：應用最多的采血方式。常用的靜脈為肘前靜脈、腕背靜脈，小兒和新生兒有時用頸靜脈和前囟靜脈。

2.動脈采血：主要用於血氣分析時。常用的動脈為股動脈、肱動脈、橈動脈和臍動脈。

3.毛細血管采血：適用於僅需微量血液的試驗或嬰幼兒。常用部位為耳垂、指端，小兒有時為大趾和足跟。采血針刺入皮膚深度應為2mm(<2.5mm),采血局部應無炎症、水腫等。

(二)標本類型

臨床化學檢驗血液標本分為血清、血漿和全血3種。血清和血漿為臨床常用，除前者不含纖維蛋白原外，其餘多數化學成分無差異;全血只有在紅細胞內成分與血漿成分相似時才用;血氣分析、血紅蛋白電泳等時用全血，一般臨床化學分析多不用全血。

三、全血處理為血清或血漿

血液標本採取後應盡可能早地自然地使血清(漿)從與血細胞接觸的明汪全血中分離出來。一般應於采血後2h內分離出血清或血漿。全血處理為血清或血漿分為離心前、離心中和離心後三個階段，對各不同階段均有具體要求。

(一)離心前階段

即指標本採集到離心處理前的一段時間。

1.血清：標本離心前一般應令其自行凝集，不可用木棍等剝離凝血塊。通常於室溫(22~25oC)放置30~60min血標本可自發完全凝集;冷藏標本凝集緩慢;加促凝劑時凝集加快(標本採集後應輕輕顛倒混合5~10次，以確保促凝劑作用)。

2.血漿：需用血漿標本時，必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，而且采血後必須立即輕輕顛倒采血管混合5~10次(以確保抗凝劑發揮作用)，5~10min後即可分離出血漿。

3.冷藏標本：標本冷藏可抑制細胞代謝，穩定某些溫度依賴性成分?但全血標本一般不能冷藏;血鉀測定標本冷藏不得超過2h。血液中兒茶酚胺、pH/血氣、氨、乳酸、丙酮酸、胃泌素、甲狀腺激素等檢測時需用製冷的標本。

標本需要冷藏(2~8oC)時，標本採取後應立即將標本置於冰屑或冰水混合物(不可用大冰塊)，並且必須保證標本與製冷物充分接觸，保證製冷物達到標本的高度。

4.代謝抑制劑和防腐劑：某些添加劑加入血液標本中能抑制細胞代謝，可以防止血液標本貯存時分析物濃度的變化。血液葡萄糖測定時，如在差鬧血液中加入氟化鈉，在血細胞未分離的情況下，葡萄糖在22~25oC時可穩定24h，2~8oC時可以穩定48h;但在新生兒和兒童標本，由於紅細胞壓積高，用氟化鈉難以控制細胞的糖酵解作用;甲醛-草酸鉀抗凝保存劑不適合血糖測定;氟化鈉-麝香草酚混合劑因能抑制酶活性，不適用於酶學測定。

5.標本採集現場：(1)標本採集後應盡快送往實驗室，尤其當收集區溫度超過22oC時此點更為重要;(2)血液標本採集後血管必須加塞、管口向上、垂直放置，以減少管中內容物振動，促進凝血完全，防止標本蒸發、污染和外濺等;(3)已收集的血液標本應溫和地處理，要防止標本管振盪所造成的溶血;溶血可影響測定結果。有嚴重影響(使結果升高)的項目有：乳酸脫氫酶、血清門冬氨酸氨基轉移酶、血清鉀和血紅蛋白;引起值得注意的影響的項目有：血清鐵(↑)、血清丙氨酸氨基轉移酶(↑)和血清甲狀腺素(↓);輕度受影響(增加)的有：總蛋白、白蛋白、血清磷、血清鎂、血清鈣和酸性磷酸酶;(4)應避免對光線敏感的'分析物暴露在人造光或太陽光(紫外線)照射下。如VA、VB6、β-胡蘿卜素、卟啉、膽紅素等測定時，標本管應該用鋁箔或類似物質包裹保護起來。

6.標本運送：全血標本應盡快從采血現場運送至實驗室，如果運送距離較遠，特別是因分析物穩定性有影響，必要時可於采血現場分離出血清或血漿後，再送往實驗室;標本運送過程中要注意標本的包裝、溫度要求、處理方法等，要確保分析成分的穩定性;標本管在運送過程中要保持管口封閉、向上垂直放置。

7.實驗室接受標本及離心標本准備：(1)要有標本收取記錄(應認真核對檢驗中清單，對有關情況要認真記錄，標本接收及處理應簽字登記);(2)對接受的標本要予以分類准備離心;(3)實驗室接受標本後應仍保持標本管於密閉封口、管口向上，垂直位放置。管塞移去後血中CO2丟失，會造成pH增加，離子鈣和酸性磷酸酶減少，尤其pH變化會影響某些檢測結果的准確性;(4)標本凝集時間要充分;加抗凝劑的血液標本可以立即離心;加促凝劑的標本可於采血後5~15min盡早離心;抗凝的全血標本(鋅、鋰、原卟啉等測定時)可以不離心;(5)冷藏(2~8oC)標本應保持這個溫度直到准備離心。推薦用溫度控制離心機;(6)離心標本前不主張用小木棒或類似器材去剝離附著於試管壁和管塞上的凝塊，人為剝離會誘導溶血。如果必須露出試管壁或取下管塞時，一定要十分注意，動作一定要輕柔。

(二)離心階段

即指標本處於離心機里的一段時間。

1.離心時間和相對離心力(RCF)：臨床化學分析血液標本離心時，RCF(1000~1200)×g，離心時間為5~10min。

2.溫度控制離心：離心時產熱不利於分析物穩定，臨床化學分析血液標本離心時必須採用溫度控制離心機。一些溫度依賴性分析物(如促腎上腺皮質激素、環腺苷酸、兒茶酚胺等)應在4oC分離;無特殊溫度要求的分析物，離心溫度應設定在20oC~22oC;溫度低於15oC可以人為地使血鉀測定值增高;冷藏運送的標本必須在要求的溫度下離心。

3.關於再離心：標本離心最好一次完成，若需再次離心，應距上次離心相隔時間很短;對於含有分離物質的血標本絕不可以再離心。

(三)離心後階段

指標本離心後和用於檢測的血清或血漿被取出一定量之前的一段時間。

1.血清或血漿與接觸的血細胞和凝塊的分離應在采血後盡快(2h內)完成。

2.分離的血清或血漿的貯存：實驗室的室溫和血清或血漿的貯存溫度、時間，是分析物穩定性和測定結果准確性的重要參數。(1)於22oC~25oC血清或血漿的保存不超過8h;(2)實驗於8h內不能完成時，血清或血漿應置2oC~8oC保存;(3)48h內不能完成的實驗項目，或分離的血清或血漿需貯存48h以上時，應於-20oC保存;(4)標本不可反復凍融(只能凍融一次)，且不可貯存於無霜冰箱(可造成樣品溫度變化);(5)離心後分離凝膠(凝膠屏障)上面的血清可保存2~5天，但必須保證凝膠的完整性;但應用非凝膠分離物質時，離心後必須立即將血清或血漿移出。(6)血清或血漿必須保存於密閉的試管中。

四、血清或血漿分離物質

是指將血清或血漿從全血中分離出來的物質，包括凝膠物質與非凝膠物質。

(一)凝膠物質

為一類具有特定粘度和特殊比重(介於血清或血漿與凝塊之間的比重)的惰性凝膠物質，用(1000~1100)×gRCF離心10min，能在血清或血漿與凝塊之間形成不可穿透的凝膠屏障，從而將血清或血漿與其接觸的血細胞、凝塊分開。

(二)非凝膠物質

是由惰性物質(玻璃、塑料、纖維、毛氈等)構成的小珠、盤、濾器、纖維塞等組成。具有介於血清或血漿與凝塊之間的比重，將其輕輕加入血管中，用(1000~1100)×gRCF離心10min時，可透過血液移動至血清或血漿與血細胞、凝塊之間，形成一個界面，使血清或血漿被分離出來。

(三)完整的凝膠管系統

該系統是由一個真空采血管(硅化塑料管)、內含惰性凝膠物質、促凝劑或抗凝劑組成。使用時要注意該產品必須具有相應性能證書和有效期，並且必須在其有效期內正確使用。

隨著檢驗方法日益完善，高精檔次的自動化儀器的大量應用，以及檢驗的科學管理和檢驗工作人員技術水平不斷提高，明顯降低檢測過程中的影響因素和干擾，而分析檢測前的各類影響或干擾因素相對增多。現代檢驗醫學對檢測標本的留取與收集提出較高的要求，而廣大就診患者也必需了解留取標本的基本知識，遵照囑托，配合檢驗人員，以使檢驗結果更准確准確可靠。

門診檢驗常見的標本一般包括血液(指血，靜脈血)、尿、糞便、腦脊液、胸水、腹水、前列腺液、精液、陰道分泌物等，這些標本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。

標本採集注意事項

一、血液標本

盡量避免生理因素的影響，有些生理因素，如吸煙、進食、運動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化，有些甚至還有晝夜變化。採集血液標本的條件應盡量一致為宜，如無法避免，應說明在標本上註明該因素。

1.外周血

一般選取左手無名指內側采血，該部位應無凍瘡，炎症，水腫，破損。如該部位不符合要求，以其他手指部位代替。對燒傷病人，可選擇皮膚完整處采血。由於部分血液常規檢測(如白細胞計數、分類等)受生理因素影響波動過大，比較時宜便條件盡量一致。出、凝血功能的檢測項目(如血小板計數，出血時間或凝血時間等)的檢測，不宜服用抗凝、促凝葯物，以免影響測定結果。

2.靜脈血

除涉及各種止血和血栓檢測等項目需採用抗凝靜脈血血漿外，目前絕大多數檢測項目的分析檢測可直接採用靜脈血的血清。在血清檢測項目中，有些(如血糖，血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大，一般以清晨空腹血標本為宜，有些在血中衰變較快(血清酶活性測定如ACP活性等)，0～4℃貯存活性減弱也不一，這些項目的檢測必須及時而快速，有些(如肌酸激酶等)受運動等因素影響較大。抽血時避免溶血的發生也十分重要，尤其涉及血鉀，LDH等的測定。切忌在輸液的同側靜脈抽血做各項檢驗。

二、尿液標本

同血標本一樣，尿液標本受飲食、運動、葯物量等因素的影響也較大，特別是飲食的影響，故一般來說晨尿優於隨機尿。晨尿是指清晨起床後的第一次尿標本，較濃縮和酸化，有形成分(如血細胞，上皮細胞，管形)相對集中便於觀察。隨機尿即隨意一次尿，留取方便，但受飲食、運動、葯物影響較甚，易於出現假陽性和假陰性結果，如飲食性蛋白尿，飲食性糖尿，維生素C干擾潛血結果等。餐後尿(午餐後2小時收集的患者尿液)適用於尿糖，尿蛋白和尿膽原的檢查，此時的尿標本可增加試驗敏感性，檢出較輕微的病變。12小時尿細胞計數，即Addis(前晚8時排空膀胱後留取至次日8時的所有尿液)，因時間較長，細菌易繁殖，須加入防腐劑甲醛。

24小時尿(第一天晨8時排空膀胱後留取至次日晨8時的所有尿液)中化學物質的定量，包括蛋白，糖，Ca2十等，檢測不同的物質，選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用於尿細菌培養，要求無菌，沖洗外明後留取標本。所有尿標本的收集都應足量，最少12m1，最好50ml，定時尿須全部收集，對女性患者應避免陰道分泌物、經血污染尿標本。

三、糞便標本

糞便標本的檢測對判斷消化系統疾病有重要參考價值。採集時要求用干凈的件簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便，對外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計數應收集24小時糞便。查痢疾阿米巴滋養體應於排便後立即檢查，從有膿血和稀軟處取材，保溫送檢。

查日本血吸蟲蟲卵時應取粘液、膿血部分，孵化毛蚴時至少留取30g糞便，且需盡快處理。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子於晚12時或清晨排便前自肛門周圍皺處處拭取並立即鏡檢。隱血試驗(化學法)，試驗前3日禁食肉類及含動物血食物並禁服鐵劑，維生素C等整理搜集。所有糞便標本採集後1小時內應檢查完畢，以防止有形成分受消化酶及pH的破壞。

四、腦脊液標本

腦脊液標本採集後立即送檢，放置過久將影響檢驗結果：如細胞變性，破壞，導致計數和分類不被：有些化學物質如葡萄糖等將分解含量減少：細菌發生自溶影響細菌的檢出率。腦脊液抽取後一般分裝三個無菌管，第一管作細菌培養，第二管作化學分析和免疫學檢查，第三管作一般性狀及顯微鏡檢查，三管順序不宜顛倒。因標本採集較難，全部送檢和檢測過程應注意安全。

五、胸腹水標本

與腦脊液標本一樣，採集後的標本注意安全，及時送檢。一般也分裝三管，一管作常規細胞學檢查，一管生化檢查，一管細菌培養，順序以與腦脊液相同為宜。

六、前列腺液標本

前列腺液標本由前列腺按摩後採集，液量少時直接滴在載玻片上及時送檢，須注意防止標本蒸干，量多時收集在潔凈乾燥的試管中。若按摩不出前列腺液，可檢查按摩後的尿液沉渣。

七、陰道分秘物標本

陰道標本採集前24小時應禁止房事、盆浴、明道檢查、明道灌洗及局部上葯等.取材所用器械需要清潔。一般用鹽水浸濕棉拭子自陰道或陰道彎後部、宮頸管口取材，制生理鹽水塗片後觀察分泌物標本，經期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標本。

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7. 病毒感染的血清學診斷方法

常用的血清學方法有中和試驗、補體結合試驗、血凝抑制試驗等傳統的方法，以及應用免疫學標記技術發展的酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、放射免疫試驗（RIA）及免疫熒光試驗（IF）等特異、靈敏的微量血清學方法。
1.中和試驗（NT）是指病毒在活體內或細胞培養中，被特異性抗體中和而失去感染性的一種試驗。它既可用來檢查患病後或人工免疫後機體血清中抗體的增長情況，也可用來鑒定病毒或研究其抗原結構。中和抗體特異性高、持續時間較長，因此流行病學調查也常用此指征。
2.血凝抑制試驗許多病毒能凝集雞、豚鼠、人等的紅細胞，稱為血凝現象。這種現象能被相應抗體所抑制，稱血凝抑制試驗。其原理是相應抗體與病毒結合後，阻抑了病毒表面的血凝素與紅細胞的結合。
3.酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、放射免疫試驗（RIA）及免疫熒光試驗（IF）參見第八節細菌感染的血清學診斷方法的介紹。
4.蛋白印跡試驗（Westernblot，WB）用於檢測HIV抗體，是HIV感染的確認試驗。應用WB也可檢測病毒抗原，但一般不常用。
5.檢測病毒核酸的分子生物學試驗檢測患者血清等標本或病毒培養物中病毒基因或核酸片段的技術有多種：①病毒核酸擴增試驗即聚合酶鏈反應（PCR）；②核酸雜交技術，包括點雜交、原位雜交、DNA-DNA印跡雜交（Southernblot）及RNA-DNA印跡雜交（Northernblot）等；③基因晶元技術（genechip）；④病毒基因測序等。目前，分子生物學技術日益廣泛地應用於對病毒及其感染的檢測和研究中。

8. 血液檢驗標本採集方法有哪些

血液檢驗標本採集方法有哪些

血液檢驗標本分為全血、血漿、血清等。全血標本主要用於臨床血液學檢查,例如血細胞計數和分類、形態學檢查等;血漿標本適合內分泌激素、血栓和止血檢測血清標本多適合於臨床化學和免疫學的檢測。按照血標本採集部位的不同，分為靜脈血、動脈血和毛細血管血三種。絕大多數檢查採用靜脈血,少數檢查如血氣分析、乳酸和丙酮酸測定等需要採集動脈血，毛細血管血主要用於各種微量法檢查或大規模普查。下面是我為大家帶來的血液檢驗標本採集方法有哪些的知識，歡迎閱讀。

一、靜脈血採集方法、注意事項和採集樣品所用材料的安全處置

1、止血帶或壓脈器：採集靜脈血時，止血帶壓迫靜脈時間不宜過長,以不超過 40 秒為宜，

否則容易引起淤血、靜脈擴張，並且影響某些指標的檢查結果,如乳酸升高、pH 值降低、K + 、Ca 2+ 、肌酸激酶升高等。

2、采血時間與部位：大多數化驗檢查要求清晨、空腹、採集靜脈血應盡可能避免在輸液同時取血,輸液不僅使血液稀釋，而且對實驗室檢查結果發生嚴重干擾，特別是血糖和電解質。

3、避免溶血、雜質污染：采血器具必須無菌、乾燥、潔凈.避免特別用力抽吸和推注、避

免化學污染和細菌污染引起的溶血。因為紅細胞的某些成分與血清(漿)不同，樣本溶血可使

紅細胞某些成分釋放,影響實驗室檢查結果。

4、血樣的採集：血樣要求在每一天的同一時間採集，理想的時間是早晨 7：00 到 8：00，尤其是監測為目的時，更要保證標本採集時間的統一。最後一次食物和液體攝入應在前

一天下午 6：00 到 7：00 (急診檢驗例外)。血樣採集應在不服葯期間，如在早晨服前。血樣採集時，患者應仰卧位，采血點應在同一靜脈區，通常為手臂靜脈。

5、標本採集後須立即送檢，放置過久影響檢驗結果。當取血不順利時,切忌在同一處反復

穿刺，易導致標本溶血或有小凝塊，影響檢測結果。

6、採集血培養標本時應先注射厭氧瓶，盡量減少接觸空氣時間。

7、微量元素測定採集標本的'注射器和容器不能含游離金屬。

8、採集樣品所用材料的安全處置：使用後的采血針、注射器針頭等銳器物應當直接放入不能刺穿的利器盒內或毀型器內進行安全處置，禁止對使用後的一次性針頭復帽，禁止用手直接接觸使用過的針頭、刀片等銳器物;注射器針筒、棉簽等其他醫療廢物放入黃色醫療廢物袋中，醫療廢物和生活垃圾分類收集存放。消毒毀形後的醫療廢物必須交給指定的醫療廢物處理廠，不得擅自廢棄。

二、臨床化學/ 免疫檢驗標本

臨床化學/免疫檢驗多用非抗凝血標本,最好使用真空負壓采血管。

標本採集主要注意事項有：

1、化學項目大多數需要空腹采靜脈血，多個單項化學檢測項目組合檢驗時一般可采管血;

2、采血量視檢查項目多少不同而異，通常為 4.0～5 .0ml;

3、多個組合檢測項目同時采血時應按下列順序采血：

血培養 ——無添加劑管凝血管 ——有添加劑管

有添加劑管的順序為：櫞酸鹽管 ——肝素管 ——EDTA 管——草酸鹽/氟化鈉管

4、不論是抗凝血還是非抗凝血，為了縮短血清或血漿與血細胞的接觸時間，血液標本收集後，須盡可能早地將血清或血漿從全血中分離出來，避免由此而影響檢驗結果的准確性。從血液標本採集開始，必須在2h 內將全血處理為血清或血漿。

1)血清(非抗凝血)：采血後標本於 22～25℃(室溫)15～30min 後可自行(自發)完全凝固，禁用木棍和玻棒等剝離凝塊;冷藏標本凝集較慢，加促凝劑者凝集加快。

2)血漿(抗凝血)：應採用抗凝管采血,采血後立即顛倒混合 5～10 次，采血後數分鍾內可

離心分離血漿。

3)冷藏標本：用於穩定血液中溫度依賴性成分(抑制細胞代謝)的檢測項目，標本於 2～8℃冷藏(標本採集後立即置於冰箱中，冷藏必須充分);標本需冷藏的測定項目有：兒茶酚胺、胃泌素、甲旁素、PH/血氣、NH3、乳酸、丙酮酸等。全血標本一般不冷藏，血鉀測定標本冷藏不得>2h。全血標本切忌冷凍。

4)代謝抑制劑和防腐劑的應用：用於抑制細胞代謝。血標本中加入氟化鈉後，血細胞未

分離情況下血標本中 Glu，22～25℃穩定 24h.2～8℃穩定 48h;氟化鈉不適用於新生兒及兒童的 Glu 測定(因兒童 PCV 高，細胞糖酵解難以控制);氟化鈉一麝香草酚混合劑不適合酶學檢測(因氟化鈉一麝香草酚混合劑抑制酶活性));甲醛草酸鉀抗凝保存劑不適用於血糖測定。

三、紅細胞沉降率(血沉，ESR )檢測標本

靜脈採集枸櫞酸鈉(109mmol/L，即 32.06g/L)抗凝血(枸櫞酸鈉抗凝管采血)，黑帽管。

采血注意事項：

1、單獨采 1 管血，准備采血至 2 ml 刻度線(抗凝劑：全血=1：4);

2、采血後立即上下顛倒混合 5~10 次;

3、采血後應盡快送檢(必須 2h 內檢測)。

四、血常規(全血細胞分析)檢驗標本

一般用 EDTA 1.5～2.2mg/ml 抗凝(EDTA 抗凝采血管-紫帽管)。

采血注意事項：

1、采血後立即上下顛倒混勻，5～10 次.不可用力震盪;

2、應按抗凝管刻度采血至 2ml，可不用空腹;

3、采血後應盡快送檢(需顯微鏡觀察形態的標本采血後應及時推片固定，因為超過 2

小時 WBC 形態會發生改變);

4、血型與血常規可采 1 管血。

五、75 克葡萄糖耐量試驗(OGTT )/ 胰島素釋放試驗/C-肽釋放試驗

1、病人准備：試驗前 3 日，每日進食碳水化合物量不低於 250-300 克，且維持正

常活動，影響試驗的葯物(如：咖啡因、口服避孕葯、水楊酸鹽等)應在 3 日前停用，

試驗前病人應 10～16 小時不進食。

2、標本採集：臨床上常用方法是清晨抽空腹血後，口服 75 克葡萄糖，再於給糖後

0.5、1、2、3 小時各采血 2ml /1 次(共 5 次)。

3、標本保存：采血後 1 小時內分離血清並及時冷藏送檢或採用血糖專用抗凝管采

血，於 2～8℃保存。

4、注意事項：胰島素測定受溶血影響較大，采血時應避免溶血。

六、高血壓系列檢驗標本

1、高血壓三項(腎素、血管緊張素 I、II)

1)病人准備：β-阻斷劑、血管擴張劑、利尿劑及甾體激素、甘草等影響體內腎素水平，一般要在停葯後 2 周測定腎素活性(PRA)，利血平等代謝慢的葯物應在停葯 3 周測定。不宜停葯的病人改服胍乙啶等影響 PRA 較小的降壓葯。鈉攝入量影響機體 PRA 水平，故病人測定 PRA 前 3 天應適當減少食鹽攝入量，最好同時測定取血前 24 小時尿鈉含量，以供分析PRA 結果時參考;

2)標本採集：靜脈取血 4～5ml，拔除針頭後緩慢注入到專用抗凝管中,蓋好管塞後上

下顛倒5次,混勻後2500轉/分,離心5～10分鍾,分離血漿,將血漿裝入專用血漿管後低溫送檢。如不能立即送檢,需盡快冰凍保存(-15℃)。溶血標本不能檢測;

3)標本類型、標本量：專用抗凝管采血，分離血漿，取 2ml 送檢;

4)標本保存：低溫冰箱保存(-15℃以下)，可保存 2 個月;

5)注意事項：申請單上應註明抽血時的體位(卧位：病人在早上 6-8 時起床前，取靜脈血;立位：病人起床後活動3 小時，取靜脈血。)和飲食情況(普食飲食、低鈉飲食);標本未及時分離血漿、反復凍融、溶血、保存不當、使用過期抗凝管等均可使結果受到影響。

2、醛固酮

1)病人准備：留樣前應停服利尿劑至少 3 周，停服抗高血壓葯物 1 周;

2)標本採集：血漿醛固酮測定應採用肝素抗凝，採集後立即分離血漿，置-20℃保存

待測;尿液標本則留取 24 小時尿量，用 10～15mL 濃鹽酸防腐;

3)申請單上註明：抽血時的體位(卧位、立位)和飲食情況(普食飲食、低鈉飲食);

尿液標本要准確記錄 24 小時尿量。

七、皮質醇標本採集及注意事項

正常人皮質醇的分泌存在晝夜節律，一般為早上 8 點或下午 4 點采血，送檢時請務必在申請單上註明采血時間。

八、流式細胞術檢測項目的標本採集及注意事項

1 、淋巴細胞亞群系列

標本要求：EDTA 或肝素抗凝全血 2ml(推薦 EDTA 抗凝)

注意事項：該系列項目在不同年齡段的細胞數參考值不盡相同，所以送檢時請務必在

申請單上註明病人年齡。

2 、白血病免疫分型

標本要求：肝素抗凝骨髓或全血2ml

注意事項：請使用白血病免疫分型專用申請單

3、人類白細胞抗原 B27 檢測(HLA-B27)/ 陣發性睡眠性血紅蛋白尿症(PNH)檢

測標本要求：EDTA 或肝素抗凝全血 2ml備註：保證新鮮標本，流式細胞術檢測項目需要 24 小時內送檢;

九、微量元素檢測標本採集要求

1、所有采血人員要經過嚴格培訓並熟悉采血過程，知曉操作技術對微量元素(尤其

是鉛和鋅)檢測質量的影響。

2、采血人員應戴乳膠或聚乙烯手套，若手套塗粉，需用靜脈采血皮膚清潔法處理手套

後進行操作。

3、血鉛檢測采血時按順序用 0.2%硝酸、純水、碘酒、酒精清潔采血區皮膚，防止環境

對血鉛檢測的污染。

4、橡皮塞對鋅有污染，故普通采血管不可使用，請使用本中心提供的專用管。

5、採集方法：採集靜脈血 0.5-1.0mL，採集後馬上輕輕顛倒混勻，粘上條形碼，裝入

自封袋送檢。

6、如不能及時送檢，應放置 2-8℃冰箱保存。

7、標本凝固或含凝塊，不能檢測。

十、遺傳學檢測標本採集要求

1、標本採集：外周血標本可使用中心配送的肝素抗凝管(遺傳專用)和采血針進行採集，採集後立即將試管輕輕顛倒混勻，以免凝血;臍帶血標本、骨髓標本可以在穿刺成功後，打開中心配送的肝素抗凝管蓋，將臍帶血或骨髓注入採集管中，立即將試管輕輕顛倒混勻，以免凝血，請注意無菌操作，不要污染管蓋。請避免使用注射器採集標本後直接注入採集管的方式進行標本採集，以免引起溶血;請勿使用 EDTA 等抗凝管採集標本。

2、標本量：外周血、臍帶血、骨髓各 4ml;

3、標本送檢：合格標本須於采血後當天送至遺傳實驗室，故請於標本採集後及時通知艾

迪康工作人員接收標本;標本有溶血、凝血現象，也視為不合格標本。骨髓標本應盡快送

至實驗室。

4、標本保存：標本採集後置於 18～25℃保存，不可冷凍，不可放置於高溫環境中。

5、申請單填寫：請完整填寫申請單，尤其是標本採集時間、性別、病史、臨床診斷等。

十一、基因檢測標本採集要求

1、所有用於基因診斷的標本必須用無菌試管或容器留取，嚴禁使用肝素抗凝管，採集標

本時注意無菌操作。

2、為避免污染，送檢基因診斷標本項目需單人單項目單管。

3、採集方法：

1)血液標本

抽取病人靜脈血，置無菌試管中室溫自然凝固或 2000 轉/分離心，取分離出的 EDTA 抗凝血漿/血清送檢;

2)女性分泌物標本

(1) 分泌物標本采樣應在非月經期進行;采樣前 3 天內不使用陰道內葯物，不沖洗陰道;24 小時內不應有性行為;

(2)採集時先用棉簽將宮頸口或尿道口過多的分泌物輕輕擦去，更換棉拭子，將棉拭子伸入宮頸，通過上皮交界處，旋轉 3～5 周，以保證取得較多的柱狀上皮標本，對於懷疑HPV 感染的患者，盡量採集病變部位標本，可提高 HPV 的檢出率。將取樣後的棉拭子放入配套的軟管中，旋緊管蓋;

(3)男性分泌物標本先清潔尿道口，將棉拭子伸入男性尿道 1cm，旋轉 3～5 次獲得標本，將取樣後的棉拭子放入配套的軟管中，旋緊管蓋;

(4)皰疹液或疣體標本：對於生殖器或肛周有疣狀體增生，懷疑為尖銳濕疣者，宜直接採集疣體組織置於標本管中送檢。備註：疣體標本時，需要在申請單上的標本類型欄處寫上“疣體”。

4 、標本保存：檢測靶核酸為 DNA 的標本，可在 2～8℃下保存 3 天;檢測靶核酸為 RNA

的標本，應保存在-20℃下。

十二、骨髓檢查的要求和注意事項

1、塗片要求：二張血片，六張骨髓片，懷疑白血病則需八張骨髓片。骨髓血片註明“B”，骨髓片註明“M”，以示區別。

2、申請單注意事項：

1)病例摘要:應填寫全面，尤其是肝、脾、淋巴結、出血狀況等與血液病相關的症狀以及葯物的應用等均應填寫清楚;

2)化驗結果：血常規結果一定不能缺，如果可能，MCV、MCH、MCHC及分類也一並填上;

3)採取骨髓部位也應填上，如果採取骨髓時不順，應重抽，以免耽誤病人;

4)寫上主治醫生聯系方式，如科室電話、手機號碼等(以便與臨床密切聯系)。

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9. 測定血清總蛋白的參考方法是

、總蛋白檢測方法:凱氏定氮法

將血清與強酸一起加熱消化,使血清中的含氮化合物轉化為銨鹽,再加鹼使銨鹽成為氨進經蒸餾分離出來,最後用酸滴定測定氮量,按每克氨相當於6.25g蛋白質計算蛋白質的濃度。

2、總蛋白檢測方法:雙縮脲法

蛋白質中的肽鍵(-CONH-)在鹼性條件下與Cu2+絡合成紫紅色復合物,產生的顏色強度在一定范圍內與蛋白質含量成正比。

3、總蛋白檢測方法:酚試劑法

蛋白質分子中的酪氨酸殘基和色氨酸殘基能夠和酚試劑中的磷鎢酸-磷鉬酸反應生成藍色化合物。Lowry改良法在酚試劑中加入Cu2+,提高了呈色的靈敏度,其中75%呈色靠銅離子產生。Lowry改良法的靈敏度為雙縮脲法的100倍左右。

總蛋白檢測方法

4、總蛋白檢測方法:UV法

這種方法是在280nm波長,直接測試蛋白。選擇Warburg公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。蛋白質測定過程非常簡單,先測試空白液,然後直接測試蛋白質。從而顯得結果很不穩定。蛋白質直接定量方法,適合測試較純凈、成分相對單一的蛋白質。

5、總蛋白檢測方法:BCA法

原理 BCA(bicinchonininc acid)與二價銅離子的硫酸銅等其他試劑組成的試劑混合一起即成為蘋果綠,即BCA工作試劑。在鹼性條件下,BCA與蛋白質結合時,蛋白質將Cu2+還原為Cu+,工作試劑由原來的蘋果綠色變為紫色復合物。562nm下其光吸收強度與蛋白質濃度成正比。

BCA蛋白濃度測定試劑盒,Abbkine的蛋白質定量試劑盒(BCA法)提供一個簡單,快捷,兼容去污劑的方法,准確定量總蛋白。