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atp含量檢測的方法

發布時間:2023-04-15 22:25:19

⑴ 手持ATP熒光檢測儀的ATP方法使用和評價

ATP熒光檢測法能在十幾秒內實現檢測,它大大提升了傳統細菌培養法24-48小時的工作效率,ATP方法的實現包括儀器、試劑和如何使用三大要素。 是影響准確性和一致性的關鍵之一,可按照<<醫院消毒衛生標准附錄A(規范性附錄)采樣及檢查方法>>等規范要求再參照手持式ATP儀說明書采樣、檢測、計算得出結果並記錄報告。采樣:(面積類)將ATP拭子采樣棒一支在物體表面或雙手指曲面從指跟到指端來回塗擦個兩次(一隻手塗擦面積約30cm2),並隨之轉動采樣拭子。(體積類橋羨賣)將ATP拭子采樣棒一支在待測液體充分浸濕。檢測:將拭子放入手持ATP儀,獲得被測樣本與細菌污染程度相對應的ATP生物熒光值,得出菌落數指標(詳見下文操作步驟及定標評價)。另外天隆牌ATP儀自帶的專用軟體能自動將ATP熒光值儲存、處理和傳輸。
以上取樣、檢測全過程在1分鍾之內快速完成,比起24-48小時的傳統細菌培養優勢巨大。細菌數量與細菌內所含ATP量有明確的相關性,通過檢測ATP含量可間接得出細菌數量,即ATP熒光檢測儀檢測結果顯示的發光值——相對照度單位RLU讀數與常規細菌培養法結果菌落數CFU具有很高的相關敏逗性,兩者沒有統計上的顯著差異,因此這也是ATP熒光法細菌檢測的理論基礎。舉例來說,某食品加工廠上班前使用ATP檢測儀對生產工人進行手衛生檢測,檢測值<80RLU合格參考值時,判定洗手消毒合格;檢測值≥80RLU合格參考值時判定洗手消毒不合格,需要重新洗手直至滿足規定的合格參考值才能上崗工作,合格參考值(如80)的確定需科學合理,不同應用場合不建議規定統一的參考值,須根據不同品牌ATP熒光儀、ATP試劑、被測對象潔凈度不同要求等具體情況和對一定量的檢測數據進派岩行統計學分析來確定。

⑵ promga atp 檢測試劑盒三種型號怎麼選擇

三種型號的檢測方法都為一步法生物發光檢測,靈敏度(384孔板)均為10個活細胞,反應時間都在10分鍾。不同之處是各盒子的試劑組成不同,對巧瞎實驗應用及操作上也不一樣。可根據實際需要來選擇。以下為各試劑盒檢測原理及包含規格。

1、CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay,基於活細胞ATP含量檢測的快速細胞活力檢測法。在國內外被廣泛應用和公認的高靈敏度發光檢測法,細胞活力檢測的金標准

厚百(holdbio)以上回答為你選擇以上試劑盒時源山提供參考。祝實驗順利!

⑶ 怎麼使用atp生物熒光檢測儀,有人懂嗎

ATP生物熒光檢測儀操作使用方法,供大家參考:
1、開機預熱,30秒後即進入工作狀態;
2、將一體化試劑采樣棉簽棒從超凈管中拔出准備采樣;
3、對被測物進行采樣;
4、采樣完後放進超凈管中旋緊密封;
5、按壓一體化試劑棒頂部使密封腔內試劑自動流入超凈管中與棉簽棒上標本發生ATP反應;
6、按壓儀器頂部橙黃色按鈕使試劑艙蓋自動彈開;
7、將正在發生反應的一體化試劑插入儀器試劑艙接受檢測;
8、經過十幾秒檢測時間儀器完成標本檢測,自動顯示、存儲、傳輸ATP檢測結果。

⑷ 細菌總數的檢驗方法是什麼

細菌總數是水質參數之一,指單位體積水中的細菌總量。其檢驗方法是:在玻璃平皿內,接種一毫升水樣或稀釋水樣於加熱液化的營養瓊脂培養基中,冷卻凝固後在37°C培養24小時,培養基上的菌落數或乘以水樣的稀釋倍數即為細菌總數。有的國家把培養溫度定為35°C或其他溫度,也有把培養時間定為48小時的。

⑸ 什麼是ATP檢測

ATP是生物的直接能量供體,生命活動所需的能量最終都以ATP的形式來提供。每種生物體內的ATP含量一般都在某一范圍內。熒光素是一種在氧氣存在的情況下,能氧化發出熒光的分子。ATP拭子配有裂解液和反應液兩種溶液,樣品首先與裂解液接觸,裂解液中將使樣品中的菌體裂解,釋放出體內的ATP。再與反應液混合,反應液中的熒光素酶催化熒光素與氧氣的反應,利用ATP釋放的能量發出熒光,發光強度與ATP的量成正比。儀器可讀出熒光強度,輸出為RLU值,反應出ATP的量,進而可推算出樣品中菌體含量范圍。拭子方面你可以看看賽思銳的,聽說最近開發二代產品比國外的好

⑹ 有沒有辦法可以測定細胞內ATP含量

有沒有辦法可以測定細胞內ATP含量
ATP檢測試劑盒(ATP Assay Kit)可以用於檢測普通溶液、細胞或組織內的ATP(adenosine 5'-triphosphate)水平。細胞和組織樣品一步裂解即可完成樣品制備,檢測靈敏度高達1nmol/L,化學發光可以持續穩定達30分鍾,並且獲得的樣品還可以同時進行Western檢測。
ATP,作為最重要的能量分子在細胞的各種生理、病理過程中起著重要作用。ATP水平的改變,會影響細胞的功能。通常細胞在凋亡、壞死或處於一些毒性狀態下,ATP水平會下降,而高葡萄糖刺激等對於一些細胞可以上調細胞內ATP水平。通常ATP水平的下降表明線粒體的功能受損或下降,在細胞凋亡時ATP水平的下降通常和線粒體的膜電位下降同時發生。
樣品制備非常簡單。本試劑盒提供了可以用於細胞和組織裂解的ATP檢測裂解液,簡單裂解後即可用於ATP檢測。無需進行高氯酸或三氯乙酸(TCA)抽提,或樣品裂解後的煮沸等繁瑣操作。

⑺ 現場快速檢測儀atp熒光檢測儀可以測定水質的什麼

1、atp熒光檢測儀(水質微生物檢測儀器)儀器可快速檢測各種水質中微生物、細菌含量。設備為全新升級產品,大屏幕觸摸顯示屏,代替傳統按鍵。操作採用生物化學反應方法檢測ATP含量,ATP熒光檢測儀基於螢火蟲發光原理,利用「熒光素酶—熒光素體系」快速檢測三磷酸腺苷(ATP)。ATP拭子含有可以裂解細胞膜的試劑,能將細胞內ATP釋放出來,與試劑中含有的特異性酶發生反應,產生光,再用熒光照度計檢測發光值,微生物的數量與發光值成正比,由於所有生物活細胞中含有恆量的ATP,所以ATP含量可以清晰地表明樣品中微生物與其他生物殘余的多少,用於判斷衛生狀況。
2、儀器特點:
實用性 —— 可根據環境檢測需求設定上下限值,做到數據快速評估預警,表面潔凈度快速篩查。
靈敏度高 —— 10-15~10-18 mol
速度快 —— 常規培養法18-24h以上,而ATP只需要十幾秒鍾 .
可行性 —— 微生物數量與微生物體內所含ATP有明確的相關性。 通過檢測ATP含量,可間接得出反應中微生物數量
可操作性 —— 傳統培養方法需要在實驗室由經過培訓的技術人員進行操作;而ATP快速潔凈度檢測操作非常簡便,只需簡單的培訓即可由一般工作人員進行現場操作。
體驗更好 —— 試子套管採用插拔式靈活設計,可定期清洗長期使用,延長儀器壽命。

⑻ atp提取為什麼沸水浴

(1)熒光素酶 發光強岩碼度與ATP的含量成正比 (2)溫度 (磷酸)緩沖液 化學能→光能粗祥哪 (宴早3)e 熒光素濃度、ATP濃度 (4)大致相同且相對穩定

⑼ 求助,如何檢測細胞的ATP

您好3M微生物快速檢測片包括:細菌總數測試片,乳酸菌測試片,大腸菌群測試片,大腸桿菌(同時檢測大腸菌群)測試片,金黃色葡萄球菌測試片,黴菌酵母菌測試片,腸桿菌科測試片,環境李斯特測試片,快速大腸菌群測試片,高靈敏度大腸菌群測試片,沙門和李斯特試劑盒,3M快速塗抹棒,電子移液槍,ATP熒光檢測儀。3M微生物快速檢測片是一種檢測微生物的快速檢測方法,操作簡單,結果准確,只需要三步即可完成,接種,培養,判讀。不需要很熟練的化驗技巧。Petrifilm能減少測試時間。對於大腸菌群測試時間能從48小時以上減少到24小時,對於大腸菌群,測試時間能從120小時減少到24小時,而金黃色葡萄球菌的測試時間能從96小時以上減少到24小時。操作簡單,無須驗證實驗,結果准確。因此,使用Petrifilm,你將能得到更好的現金流,減少庫存和儲存的費用,更好的財務控制以及贏得更有利的市場時間。

⑽ 微生物是怎樣獲得所需ATP的

我這里有一篇文獻是關於ATP熒光技術檢測細菌生長的
《熒光快檢:生物感測器的應用不是夢——訪沈陽中科靚馬生物工程有限公司技術總監金振華教授》
ATP熒光法是根據螢火蟲發光原理開發的快速檢測技術。螢火蟲會發光是由於它能合成將化學物質的化學能轉變為光能的生物催化劑,螢火蟲熒光素酶(簡稱蟲光素酶,luciferase)、蟲熒光素(D-luciferin)以及ATP(三磷酸腺苷,所有細胞生物都能產生的能源物質)。在有氧條件下,蟲熒光素酶催化蟲熒光素生成氧化熒光素並發出熒光。如果具備上述條件,即使在螢火蟲體外的系統也可以發出熒光。早在20世紀50年代末,美國太空總署就已經利用螢火蟲熒光素酶建立了快速超微量ATP檢測技術,60年代末曾對地球土壤樣本的ATP進行了檢測,螞春並分別在日後探測月球、火星是否存在生命中得到應用。基於蟲光素酶的ATP檢測商業應用則始於80年代後期。最初,是通過養殖螢火蟲幼蟲獲得蟲光素酶,隨著基因工程技術的發展和應用,科學家從螢火蟲細胞中取出編碼螢火蟲酶的基因,並將其引入細菌細胞。這樣,通過生物發酵在短短的十幾個小時內就可以得到大量的蟲光素酶。
2003年沈陽中科靚馬引入由中科院發育所金振華教授發明的「含熒光素酶基因的新型菌株及蟲光素酶的生產」專利項目,經過幾年的產業化探索,終於在2005年後開始批量生產擁有自主知識產權的蟲光素酶、蟲熒光素制劑,並於2007年完成相關檢測產品的配套,實現了食品樣品的細菌總數快速檢測。基於蟲光素酶的ATP熒光檢測原理蟲光素酶只有在ATP存在時才會催化蟲熒光素發生反應,並產生熒光。因此,如果在蟲光素酶、蟲熒光素過量的情況下,螢光強弱將只取決於反應系統中ATP的數量。以樣品中細菌檢測為例,細胞數越多,ATP數量也越多,發出的熒光就越強。也就是說,在特定條件下,熒光值與ATP的數量是呈線性相關的;而且,熒光值很容易通過光度計准確計量。所以,在排除樣品中非細菌ATP干擾的情況下,只要得到相對熒光值和細菌細胞數的關系曲線,然後根據純ATP的相對熒光值與細胞數的標准曲線,就能快速確定樣品中細菌的細胞數。
ATP快檢系統的組成部件及其作用目前,依據螢火蟲發光原理並用於生物量、酶和代謝產物檢測的應用系統已經有很多種。盡管各類檢測系統的應用目的、操作方法、樣品來源各不相同,但在組成上都悶擾耐包括以下幾個部分。
1.試劑系統試劑系統包括促使熒光反應發生所需的所有反應試劑和ATP有效提取試劑。具體包括體細胞裂解試劑組、細菌細胞裂解試劑組和熒光反應試劑組。體細胞裂解試劑組可以專一有效地裂解樣品中的非細菌細胞(體細胞)並釋放ATP出ATP,然後通過過濾比色杯底部的濾膜將其排除。細菌細胞裂解試劑組主要作用是,有效地裂解細菌細胞並釋放出ATP以便檢測。同時,為了避免ATP降解而影響檢測結果的李衡真實性,細菌細胞裂解試劑應能使ATP降解的酶迅速失活。熒光反應試劑組則包括能與樣品中細菌ATP相互作用並發出熒光的蟲螢光素和蟲光素酶。
2.取樣器及樣品預處理裝置該部分包括可以定量取得不同物理狀態待檢樣品的取樣器,用於加壓排出體細胞ATP的加壓器、供反應用的帶膜比色杯,杯架以及用於樣品濃縮的專用濃縮器等。
3.微量光度計微量光度計,即微量熒光檢測儀器。按具體需要,光度計除了用於計量、顯示熒光值的屏幕外,還具備與個人電腦或自動列印機聯用的外介面,以便記錄、儲存有關數據資料以供產品質量或衛生監控趨勢分析。
ATP快速檢測技術的優勢一般來說,要實現快速檢測有賴於待檢樣品在反應過程能夠產生易於檢測的聲、光、磁等信號。ATP熒光快速檢測就是由於產生了容易檢測的熒光而實現的。在衛生監測方面,它具有常規檢測無法比擬的優勢。實踐和文獻資料都表明,用快檢系統檢測到的熒光值,即總ATP值(指來自細菌和事物殘渣兩部分的ATP)作為衛生監測指標,無論是「時效性」或實際效果都大大優於通過目測或細菌平皿計數的效果。因此,有觀點認為,可以用ATP的總量作為判斷衛生狀況是否良好的一個標准。
1.快速、准確常規平皿計數法檢測細菌總數,是讓細菌在LB培養基上培養成肉眼可見的細菌菌落。由於樣品稀釋不均等原因,一個菌落往往由兩個或多個細菌細胞構成,而且LB培養基只適合需氧或半需氧細菌的生長。因此,只能得到此類細菌的數量。採用ATP熒光快檢法可檢測到所有細菌、真菌和藻類,且1-5分鍾即可得到實時檢測結果,操作簡單,時間短。平皿計數法則需要1-5天,所得結果難以反映實際衛生狀況。
2.樣品量少由於蟲光素酶對ATP的反應非常靈敏,通過發光反應能夠檢測低於0.1皮克分子(10-12mol)ATP,因此,可用於低細菌含量樣品的檢測。例如經過0.45um膜過濾除菌後的啤酒細菌含量很低,不是常規方法所能檢測出的,而通過ATP熒光法的濃縮處理可以檢出。ATP快速檢測技術的應用「ATP熒光法細菌總數快速檢測系統」在全程監測中的應用自20世紀90年代至今,根據螢火蟲發光原理研發成功並投放市場的產品已有多種,如中科靚馬開發的「ATP熒光法細菌總數快速檢測系統」可用於食品、飲料、乳品加工生產的全程監測:在生產加工前,可用於生產設施清潔、消毒效果的檢測,原輔料細菌總數的檢測;在加工生產過程中,可用於生產設備關鍵控制點(例如供水、通風閥門)的衛生學監測,影響乳品發酵飲料、酒類特殊微生物總數的檢測;在加工生產後,可用於成品污染細菌總數的檢測。另外也可用於環保、水政、海關檢疫等執法部門對各種樣品中微生物(細菌總數)的快速檢測。ATP快檢在HACCP中的應用通過對食品生產線或周邊衛生環境的研究發現,如果用平皿計數法得到的生產線上某點的細菌總數很少或無菌,而通過ATP熒光檢測法得到的ATP值很高,那麼該檢測點在之後容易大量滋生微生物。經過分析後認為,通過ATP熒光檢測得到的ATP總值來自殘渣和微生物兩部分。並且多數情況下,來自微生物的比例較小。因此,可以通過ATP熒光檢測的ATP值判斷檢測點是否會被重新污染,而不必通過依據細菌細胞ATP值折算的細菌菌落總數來判斷,但是關鍵是要確定不同生產線不同檢測點的ATP臨界值。據此,發達國家已經將ATP熒光法檢測用於HACCP中,對食品原料及經過清潔、消毒後的食品原料接觸表面是否達到衛生標准做出評估;然後對容易引起微生物污染的關鍵部位實施重點監控。例如,通過ATP快速檢測,可以判斷已經達到衛生標準的部位或表面,在常規消毒後到新一輪生產的間歇時間,是否存在污染的可能性;進而制訂出既符合本單位情況,又符合衛生要求的ATP數值范圍。掌上ATP快速檢測儀的應用目前,掌上ATP快速檢測儀已經應用於生活的方方面面,在食品方面的應用主要是對飯店、列車上的餐具進行衛生狀況的檢測。我國鐵道部決定,在2008年奧運會之前,將在列車上採用沈陽中科靚馬生物工程有限公司掌上快速檢測儀代替之前採用間接檢測氯離子的方法對餐具進行衛生檢測。此外,基於蟲光素酶的ATP快速檢測還可應用於其它更多領域和目的的檢測,如用於自來水檢測、桶裝水無菌狀況的檢測、部隊野戰飲食中炭疽桿菌的檢測及環境監測、臨床檢測等。

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