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檢測牛肉氨基酸的方法

發布時間:2023-03-29 16:35:52

Ⅰ 國標 氨基酸的檢測方法

國家標准檢測食品中的氨基酸是採用先將食品中蛋白質經鹽酸水解成為游離氛基酸,經氨基酸分析儀的離子交換柱分離後,與印三酮溶液產生顏色反應,再通過分光光度計比色瀏定氨基酸含量。

Ⅱ 牛肉是否含有蛋白質的實驗是什麼

牛肉是否含有蛋白質的實驗是凱氏定氮法測定

牛肉含有豐富的蛋白質,氨基酸。牛肉中的肌氨酸含量比任何其它食品都高,它對增長肌肉、增QL量特別有效,襪氏能提高機體抗病能力,對生長發育及手術後、病後調養的人在補充失血和修復組織等方面特別適宜。

實驗工具

1、儀器,K1160全自動凱氏定氮儀,SH420F石墨消解儀,分析天平。

2、試劑,硫酸(分析純),催化劑片(分析純無水硫酸鉀3g和分析純無水硫酸銅0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑,40%氫氧化鈉。

實驗方法

1、取樣,將牛肉樣品粉碎,精確稱取1.0g左右(精確值0.1mg),用稱量紙包好放入消化管內,然後分別加棚好李入3g硫酸鉀與0.2g硫酸銅,沿消化管壁加硫酸10mL。

2、消解利用石墨消解爐進行消解,將消化管鏈遲放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統,消化過程採用曲線升溫模式,設定消解參數。

3、測試,將消化管放置於凱氏定氮儀上,定氮儀參數。

Ⅲ 檢驗氨基酸用什麼方法

1.茚三酮反應,氨基酸與其發生反應縮合成藍色物質。除開脯氨酸和羥脯氨酸,他們與其反應生成黃色衍生物。
2.桑格反應,氨基酸與其反應會生成黃色的2,4-二硝基氨基酸,可以用於鑒定多肽或蛋白質的N端氨基酸。
3.艾德曼反應(DNFB反應),即氨基酸與苯異硫氰酸反應生成相應的苯氨基硫甲醯氨基酸。

Ⅳ 食品中氨基酸的測定,有簡單方法

氨基酸(amino acids):含有氨基和羧基的一類有機化合物的通稱。生物功能大分子蛋白質的基本組成單位,是構成動物營養所需蛋白質的基本物質。是含有一個鹼性氨基和一個酸性羧基的有機化合物,氨基一般連在α-碳上。
氨基酸的結構通式:構成蛋白質的氨基酸都是一類含有羧基並在與羧基相連的碳原子下連有氨基的喚轎賣有機化合物,目前自然界中尚未發現蛋白質中有氨基和羧基不連在同一個碳原子上的氨基酸。
其理化特性大致有:

1)都是無色結晶。熔點約在230°C以上,大多沒有確切的熔點,熔融時分解並放出CO2;都能溶於強酸和強鹼溶液中,除胱氨酸、酪氨酸、二碘甲狀腺素外,均溶於水;除脯氨酸和羥脯氨酸外,均難溶於乙醇和乙醚。

2)有鹼性[二元氨基一元羧酸,例如賴氨酸(lysine)];酸性[一元氨基二元羧酸,例如谷氨酸(Glutamic acid)];中性[一元氨基一元羧酸,例如丙氨酸(Alanine)]三種類型。大多數氨基酸都呈顯不同程度的酸性或鹼性,呈顯中性的較少。所以既能與酸結合成鹽,也能與鹼結合成鹽。

3)由於有不對稱的碳原子,呈旋光性。同時由於空間的排列位置不同,又有兩種構型:D型和L型,組成蛋白質的氨基酸,都屬L型。 由於以前氨基酸來源於蛋白質水解(現在大多為人工合成),而蛋白質水解所得的氨基酸均為α-氨基酸,所以在生化研究方面氨基酸通常指α-氨基酸。至於β、γ、δ……ω等的氨基酸在生化研究中用途較小,大都用於有機合成、石油化工、醫療等方面。氨基酸及其 衍生物品種很多,大多性質穩定,要避光、乾燥貯存。
1、茚三酮反應 (ninhydrin reaction)


ninhydrin reaction
在加熱條件下,氨基酸或肽與茚三酮反應生成紫色(與脯氨酸反應生成紅色)化合物的反應。
茚三酮反應,即:所有氨基酸及具有游離α-氨基的肽與茚三酮反應都產生藍紫色物質,只有脯氨酸和羥脯氨酸與茚三酮反應產生黃色物質。
此反應十分靈敏,根據和逗反應所生成的藍紫色的深淺,在570nm波長下進行比色就可測定樣品中氨基酸的含量,也可以在分離氨基酸時作為顯色劑對氨基酸進行定性或定量分析。在法醫學上,使用茚三酮反應可採集嫌疑犯在犯罪現場留下來的指紋。因為手汗中含有多種氨基酸,遇茚三酮後起顯色反應。

2、坂口反應 (Sakaguchi reaction)

坂口反應;Sakaguchi reaction
本法廣帆巧泛用於精氨酸的分析與測定。精氨酸與α-萘酚在鹼性次溴酸鈉(或次溴酸鉀)中發生反應,得到如左式的紅色產物:當用茚三酮方法發現可能有精氨酸時,可用此法檢測確證。單取代的胍基衍生物如章魚肉鹼、胍基乙酸等對此反應敏感,顯示正反應。該反應可用於精氨酸的定性和定量測定。

3、米隆反應

HgNO3+HNO3+熱 紅色 (檢驗酚基 酪氨酸有此反應)

4、Folin-Ciocalteau反應

磷鎢酸-磷鉗酸 藍色 (檢驗酚基 酪氨酸有此反應)

5、黃蛋白反應

濃硝酸煮沸 黃色 (檢驗苯環 酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸有此反應)

6、Hopkin-Cole反應(乙醛酸反應)

乙醛酸+濃硫酸 乙醛與濃硫酸接觸面處產生紫紅色環 (檢驗吲哚基 色氨酸有此反應)

7、Ehrlich反應

P-二甲氨基苯甲醛+濃鹽酸 藍色 (檢驗吲哚基 色氨酸有此反應)

8、硝普鹽試驗

Na2(NO)Fe(CN)2*2H2O+稀氨水 紅色 (檢驗巰基 半胱氨酸有此反應)

9、Sulliwan反應

1,2萘醌、4磺酸鈉+Na2SO3 紅色 (檢驗巰基 半胱氨酸有此反應)

10、Folin反應

1,2萘醌、4磺酸鈉在鹼性溶液 深紅色 (檢驗α-氨基酸)

據我了解 武漢武達生物科技用頭發提取氨基酸技術生產的胱氨酸、亮氨酸、酪氨酸等系列產品,是世界公認的綠色生化製品,因此,可以說全球80%以上的氨基酸市場是屬於我們的,這就給我們提供了一個極好的發展空間。

Ⅳ 檢驗氨基酸用什麼方法

你若是問蛋白質,我可以直接告訴你又雙縮脲試劑(中學階段),但氨基酸的檢驗比蛋白質麻煩多了。 一、氨基酸的分離和檢測氨基酸的分離和檢測手段,以往用化學分析法、層析法、比色法、氣相色譜法、氨基酸自動分析儀。隨著高效液相色譜及填料的發展,HPLC在氨基酸檢測方面顯示了其特有的優越性。但大多數氨基酸無紫外吸收和熒光發射特性,為提高分析檢測靈敏度和分離選擇特性,通常將氨基酸衍生,衍生方式有柱前衍生法與柱後衍生法。HPLC與各種衍生相結合的氨基酸分析技術,構成了具有廣泛適用性的現代氨基酸分析技術。 二、鑒定是哪種氨基酸,不同的氨基酸要用不同的方法。1、茚三酮反應 (ninhydrin reaction) 茚三酮(弱酸環境加熱) 紫色(脯氨酸、羥脯氨酸為黃色) (檢驗α-氨基) 2、坂口反應 (Sakaguchi reaction) 丙氨酸 α-萘酚+鹼性次溴酸鈉 紅色 (檢驗胍基 精氨酸有此反應) 3、米隆反應(又稱米倫氏反應) HgNO3+HNO3+熱 紅色 (檢驗酚基 酪氨酸有此反應,未加熱則為白色) 4、Folin-Ciocalteau反應(酚試劑反應) 磷鎢酸-磷鉗酸 藍色 (檢驗酚基 酪氨酸有此反應) 5、黃蛋白反應 濃硝酸煮沸 黃色 (檢驗苯環 酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸有此反應) 6、Hopkin-Cole反應(乙醛酸反應) 加入乙醛酸混合後徐徐加入濃硫酸 乙醛與濃硫酸接觸面處產生紫紅色環 (檢驗吲哚基 色氨酸有此反應) 7、Ehrlich反應 P-二甲氨基苯甲醛+濃鹽酸 藍色 (檢驗吲哚基 色氨酸有此反應) 8、硝普鹽試驗 Na2(NO)Fe(CN)2*2H2O+稀氨水 紅色 (檢驗巰基 半胱氨酸有此反應)

Ⅵ 氨基酸的檢測方法有哪些

1. 分光光度法氨基酸檢測:主要是利用氨基酸與衍生劑發生化學反應,產生藍紫色化合物,該化合物在某一波長處有最大吸收峰,根據吸收值大小得到氨基酸含量。常用的衍生劑為茚三酮。
2. 毛細管電泳法氨基酸檢測:根據分離原理的不同,可分為毛細管區帶電泳、毛細管凝膠電泳、毛細管等電電泳、毛細管等速電泳以及膠束電動力學毛細管電泳。其中,毛細管區帶電泳和膠束電動力學毛細管電泳可用於氨基酸檢測。
3. 近紅外光譜法氨基酸檢測:利用有機化合物的含氫基團在特定波長區域躍遷,產生光譜的變化,結合統計學方法間接地實現氨基酸的定量檢測。
4. 氣相色譜法氨基酸檢測:將氨基酸衍生化處理變為容易氣化的物質,根據氣態樣品中各組分在流動相和固定相中的分配系數的不同,實現對氨基酸的定量分析。
5. 高效液相色譜法氨基酸檢測:是最常用的一種氨基酸檢測方法。由於大多數氨基酸本身沒有紫外吸收和熒光反應,因此需要對樣品進行衍生化處理將其轉化為有紫外吸收和發射熒光的物質,衍生可分為柱前衍生和柱後衍生。

Ⅶ 測定氨基酸含量的方法有幾種

1)稱乾重法.可用離心法或過濾法測定.優點:可適用於一切微生物,缺點:無法區別死菌和活菌.
2)比濁法.原理:由於微生物在液體培養時,原生質的增加導致混濁度的增加,可用分光光度計測定.優點:比較准確.
3)測含氮量,大多數微生物的含氮量占乾重的比例較一致,根據含氮量再乘以6.25即可測得其粗蛋白的含量.
4)血球計數板法.優點:簡便、快速、直觀.缺點:結果包括死菌和活菌.
5)液體稀釋法.對未知菌樣作連續的10倍系列稀釋,經培養後,記錄每個稀釋度出現生長的試管數,然後查MPN表,再根據樣品的稀釋倍數就可計算其中的活菌含量.優點:可計算活菌數,較准確.缺點:比較繁瑣.
6)平板菌落計數法.取一定體積的稀釋菌液塗布在合適的固體培養基,經培養後計算原菌液的含菌數.優點,可以獲得活菌的信息.缺點:操作繁瑣,需要培養一定時間才能獲得,測定結果受多種因素的影響.

Ⅷ 簡述氨基酸的檢測方法。

氨基酸的分別測定可利用基於離子交換樹脂層析分離法的氨基酸自動分析儀,非專用的高效液相色譜儀也可測定。速度快、解析度和靈敏度高的薄層層析可做氨基酸定性檢測。化學法測定多數只能針對某一種或數種氨基酸。磷酸銅試劑與尿液中氨基酸和肽類生成藍色絡合物,可測定總尿液氨基酸;色氨酸可用熒光分光光度法測定;尿中羥脯氨酸可用比色法測定;苯丙氨酸可採用苯丙氨酸氧化酶或苯丙氨酸脫氫酶法;谷氨醯胺測定可採用谷氨醯胺酶偶聯谷氨酸脫氫酶;支鏈氨基酸包括亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸均被亮氨酸脫氫酶催化而測定。

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