白蛋白檢測方法

❶ 測定血清總蛋白的參考方法是

、總蛋白檢測方法:凱氏定氮法

將血清與強酸一起加熱消化,使血清中的含氮化合物轉化為銨鹽,再加鹼使銨鹽成為氨進經蒸餾分離出來,最後用酸滴定測定氮量,按每克氨相當於6.25g蛋白質計算蛋白質的濃度。

2、總蛋白檢測方法:雙縮脲法

蛋白質中的肽鍵(-CONH-)在鹼性條件下與Cu2+絡合成紫紅色復合物,產生的顏色強度在一定范圍內與蛋白質含量成正比。

3、總蛋白檢測方法:酚試劑法

蛋白質分子中的酪氨酸殘基和色氨酸殘基能夠和酚試劑中的磷鎢酸-磷鉬酸反應生成藍色化合物。Lowry改良法在酚試劑中加入Cu2+,提高了呈色的靈敏度,其中75%呈色靠銅離子產生。Lowry改良法的靈敏度為雙縮脲法的100倍左右。

總蛋白檢測方法

4、總蛋白檢測方法:UV法

這種方法是在280nm波長,直接測試蛋白。選擇Warburg公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。蛋白質測定過程非常簡單,先測試空白液,然後直接測試蛋白質。從而顯得結果很不穩定。蛋白質直接定量方法,適合測試較純凈、成分相對單一的蛋白質。

5、總蛋白檢測方法:BCA法

原理 BCA(bicinchonininc acid)與二價銅離子的硫酸銅等其他試劑組成的試劑混合一起即成為蘋果綠,即BCA工作試劑。在鹼性條件下,BCA與蛋白質結合時,蛋白質將Cu2+還原為Cu+,工作試劑由原來的蘋果綠色變為紫色復合物。562nm下其光吸收強度與蛋白質濃度成正比。

BCA蛋白濃度測定試劑盒,Abbkine的蛋白質定量試劑盒(BCA法)提供一個簡單,快捷,兼容去污劑的方法,准確定量總蛋白。

❷ 測定血清白蛋白時臨床上常使用的方法是

正確答案:A
解析：本題考查瞎老血清白蛋白測定常用的方法，血清白蛋白測定一般採用溴銷旦甲酚綠比色磨斗升法，它是目前首先推薦的白蛋白定量方法
。

❸ 尿蛋白高通過什麼方法檢查

一般來說健康成人尿總蛋白上限為150到200毫克每天，白蛋白尿上限為30毫克每天，尿蛋白檢測方法有以下一些方法，第一試紙法，可測最低限為10到20毫克每分升，如果患者的尿ph大於8.0，血液污染可呈假陽性，稀釋尿可以呈假陰性，如果試紙法僅顯示為少量蛋白，而酸沉澱法有大量蛋白，應當警惕有無球蛋白或者是其他經驗蛋白。
二，尿蛋白定量，近年來發現隨機一次尿的尿蛋白肌酐比值或者是白蛋白肌酐比值水平與尿蛋白定量有很好的相關性。
三，尿白蛋白，需要通過放射免疫分析法或者是競爭酶聯免疫吸附法進行檢測，微量白蛋白尿指的是尿白蛋白排泄率在20到200微克每分鍾，或者尿白蛋白定量30到300毫克每天。

❹ 血清白蛋白測定注意事項

血清總蛋白測定一般採用雙縮脲比色法，它是目前首先推薦的蛋白質定量方法。此法的原理是蛋白質分子中的肽鍵在鹼性條件下與二價銅離子（Cu2+）作用生成藍紫色的化合物，這種顏色反應強度在一定濃度范圍內與蛋白質含量成正比，經與同樣處理的蛋白標准液比較，即可求得蛋白質含量。此反應的優點是清、球蛋的反應性相近，操作簡單，重復性好，干擾物質少，為首選的常亮知規方法，其缺點是靈敏度較低。
1.黃疸血清，嚴重溶血，葡萄糖，酚酞及溴磺酞鈉對本法有明顯干擾，故用標本空白管來消除。但如標本空白管吸光度太高，可影鎮冊響測定的准確度。
2.高脂血症混濁血清會干擾比色，可採用下述方法消除：取2支帶塞試管或離心管，各加待測血清O.1ml.再加蒸餾水0.5ml和丙酮10ml，塞緊並顛倒混勻10次後離心，傾去上清液。將試管倒立於濾紙上吸去殘余液體醫|學教育網整理。向沉澱中分別加入雙縮脲試劑及雙縮脲空白試劑，再進行與上述桕同的其他操作和計御鍵宏算

❺ 蛋白濃度測定的方法具體有哪些

蛋白濃度測定的方法：

1. 紫外分光光度法

紫外光譜吸收法測定蛋白質含量是講蛋白質溶液直接在紫外分光光度計中測定的方法，不需要任何試劑，操作簡單且易回收。蛋白質溶液在280nm附近有強烈的吸收，這是由於蛋白質中酪氨酸、色氨酸殘基而引起的，所以光密度受這兩種氨基酸含量的支配。另外核蛋白或提取過程中雜有的核酸對測定結果引起極大誤差，其最大吸收在260nm。所以同時測定280及260nm兩種波長的吸光度，通過計算可得較為正確的蛋白質含量。

2. 雙縮脲法

利用半飽和硫酸銨或27.8％硫酸鈉——亞硫酸鈉可使血清球蛋白沉澱下來，而此時血清白蛋白仍處於溶解狀態，因此可把兩者分開，這種利用不同濃度的中性鹽分離蛋白的方法稱為鹽方法。鹽析分離蛋白質的方法不僅用於臨床醫學，而且還廣泛地用於生物化學研究工作中，如一些特殊蛋白質—酶、蛋白激素等的分離和純化。

蛋白質和雙縮脲一樣，在鹼性溶液中能與銅離子形成紫色絡合物（雙縮脲反應），且其呈色深淺與蛋白質的含量成正比，因此可於蛋白質的定量測定。

但必須注意，此反應並非蛋白質所特有，凡分子內有兩個或兩個以上的肽鍵的化合物以及分子內有—CH2—NH2等結構化合物，雙縮脲反應也呈陽性。本實驗用27.8％硫酸鈉—亞硫酸鈉溶液稀釋血清，取出一部分用雙縮脲反應測定蛋白質的含量，剩餘部分則用濾紙過濾，使析出的球蛋白與白蛋白分離，取出濾液用同一反應測定白蛋白的含量。總蛋白與白蛋白含量之差即球蛋白的含量。白蛋白與球蛋白之比即所謂的白／球比值。

3. Folin-酚試劑法

目前實驗室較多用Folin-酚法測定蛋白質含量，此法的特點是靈敏度高，較雙縮脲高兩個數量級，較紫外法略高，操作稍微麻煩，反應約在15分鍾有最大顯色，並最少可穩定幾個小時，其不足之處是干擾因素較多，有較多種類的物質都會影響測定結果的准確性。其原理是蛋白質中含有酚基的酪氨酸，可與酚試劑中的磷鉬鎢酸作用產生蘭色化合物，顏色深淺與蛋白含量成正比。

4. 考馬氏亮藍G-250

此方法是1976年Bradform建立。染料結合法測定蛋白質的優點是靈敏度較高，可檢測到微量蛋白，操作簡便、快迅，試劑配製極簡單，重復性好，但干擾因素多。考馬氏亮藍G－250具有紅色和青色兩種色調、在酸性溶液中游離狀度下為棕紅色，當它通過疏水作用與蛋白質結合後，變成藍色，最大吸收波長從465nm轉移到595nm處，在一定的范圍內，蛋白質含量與 595nm的吸光度成正比，測定595nm處光密度值的增加即可進行蛋白質的定量。

以上便是實驗室中常見的幾種蛋白濃度測定的方法，另外還有凱氏定氮法和BCA法，有凱氏定氮法結果最精確，但操作復雜，BCA法又以其試劑穩定，抗干擾能力較強，結果穩定，靈敏度高而受到歡迎。

❻ 尿微量白蛋白的尿微量檢測

尿微量白蛋白指高於正常，但常規方法無法檢出的白蛋白尿，他的檢測作為早期腎損害診斷的重要指標已受到廣泛重視，測定方法包括放射免疫法、ELASA法等。應用較多的是免疫透射比濁法，但報告方式不一，有的以每升尿中白蛋白量表示，有的以24小時排泄量表示，常用的報告方式是以白蛋白/肌酐比值報告。我們以不同表示方法對正常人尿白蛋白的正常值進行了統計分析，並對部分高血壓、糖尿病患者進行測定，現報告如下。 1.儀器與方法：尿微量白蛋白測定試劑盒，肌酐測定試劑盒均購於凱創公司。儀器應用瑞士產Cobas MIRA plus全自動生化分析儀。尿白蛋白測定，取標本10 ml，1 500×g離心10分鍾，取上清10 μl，加緩沖液250 μl，抗血清50 μl，測定波長340 nm，反應溫度37℃，測定時限300秒，5點定標，范圍5～200 mg/L。肌酐採用Jaffe′s法，尿標本預先用生理鹽水30倍稀釋測定。
2.對象：對照組，健康人70例(男43例，女27例)，平均年齡41.2歲(21～54歲)，均排除高血壓、糖尿病及其他和腎病有關病史。糖尿病組，42例(男28例，女14例)，平均年齡51.2歲(34～72歲)，病程2～20年。高血壓組，62例(男39例，女23例)，平均年齡44.5歲(31～71歲)，血壓范圍160～190/95～120 mmHg，病程2～27年。臨床診斷Ⅰ期21例，Ⅱ期41例，其中Ⅱ期患者以眼底動脈硬化或心臟改變為診斷依據，尿常規分析蛋白定性均為陰性。
3.標本：對照組均分別留取24小時尿和隨機尿，測定24小時白蛋白和每升白蛋白及白蛋白/肌酐比值，並以不同方法計算正常值，患者組均取隨機尿測定白蛋白及肌酐，以白蛋白/肌酐比值報告，以上標本均當日測定。 1.不同計算方法尿白蛋白正常值：以mg/L計算，范圍2.2～41.7，均值12.7；以mg/gCr計算，范圍2.7～26.1，均值8.1；以mg/24 h計算，范圍2.4～34.3，均值11.4。因尿白蛋白值呈非正態分布，低值無臨床意義，在建立參考范圍時以百分位數法按單側值95%上限確定。從以上結果可見，不同計算方法的結果正常值范圍有明顯差異，尤以每升結果報告時，由於受尿量影響較大，正常范圍較寬，這樣易使部分異常標本落入正常范圍而延誤診斷。
2.高血壓組：診斷Ⅰ期、Ⅱ期高血壓的標準是以是否累及血管、臟器為依據，我們測定的41例Ⅱ期患者中，常規尿蛋白定性均未發現腎臟損害，診斷是以眼底改變和心電圖改變為主。我們將測定結果依據高血壓病期、病程、舒張壓水平分組進行統計，結果。Ⅰ期21例，范圍4.6～38.2 mg/gCr，均值17.8 mg/gCr；Ⅱ期41例，范圍5.1～62 mg/gCr，均值29.7 mg/gCr；舒張壓95～105 mmHg 34例，范圍4.6～43.4 mg/gCr，均值16.4 mg/gCr；舒張壓106～120 mmHg 28例，范圍5.0～62 mg/gCr，均值31.2 mg/gCr；病程2～10年19例，4.6～40.2 mg/gCr，均值13.1 mg/gCr；病程11～15年，28例，范圍4.6～54.2 mg/gCr，均值19.3 mg/gCr；病程16～27年，15例，范圍5.1～62 mg/gCr，均值37.2 mg/gCr。上述結果中以正常值? mg/gCr為界，Ⅰ期高血壓中有4例超過正常值，Ⅱ期高血壓中有14例超過正常值，說明這些患者已有輕度腎損害。尤其1期高血壓中有五分之一患者出現尿白蛋白異常，尿白蛋白的值與病程及血壓水平相關。
3.糖尿病組：42例糖尿病患者按病程分組，2～10年28例，尿白蛋白為5.2～39.6 mg/gCr，均值21.2 mg/gCr，大於25 mg/gCr 13例；11年以上組14例，結果為10.4～68.
1 mg/gCr，均值29.4 mg/gCr，大於25 mg/gCr 8例。通過了解病史並分析結果，堅持長期口服葯物或注射胰島素治療者與不經常治療兩者結果間有明顯差異(P?.01)。
測定尿微量白蛋白最理想的方法是留取24小時標本，但因留取困難，在實際應用上受到限制。隨機尿測定是目前最常用，最易行的方法。但應同時測定肌酐，因每日肌酐排除量相對恆定，可避免尿量變化對結果的影響。
尿微量白蛋白測定是一種靈敏、簡便、快速的測定方法，易於在常規實驗室中廣泛應用，對早期腎損害的診斷遠遠優於常規定性或半定量試驗。

❼ 常用的血清蛋白質含量測定方法有哪些

四種血清總蛋白質的測定的方法：

1.基於蛋白分子中含有酪氨酸和色氨酸而使用的酚試劑比色法 由於各種蛋白質分子中上述兩種氨基酸的組成比例不同，特別是白蛋白含色氨酸為0.2%，而γ-球蛋白中含量達2%-3%，導致較大的差異。Lowry的改良法在酚試劑中加入Cu2+，集中原法和雙縮脲反應兩者的作用，使呈色靈敏度提高。其中75%的呈色依賴於Cu2+.反應產物最佳吸收峰在650-750nm，方法靈敏度為雙縮脲方法的100倍左右。有利於檢測較微量的蛋白質。但試劑反應仍易受多種化合物的干擾。

2.紫外測定法 採用280nm和215/225紫外吸收值，計算蛋白質含量280nm 是由於蛋白質分子中存在芳香族氨基酸所致。方法的特異性和准確性受蛋白分子中該種氨基酸的含量比例影響甚大。尿酸和肝紅素在280nm附近有干擾。紫外區200-225nm是肽健的強吸收峰。在此區域其吸收值為280nm的10-30倍，將血清稀釋1000-2000倍可以消除干擾物質的影響。

3.採用沉澱反應進行散射比濁法 用磺柳酸、三氯醋酸等配方，此方法甚為簡便，不需特殊儀器，技術關鍵在於：①選擇最佳試劑濃度及溫度；②混勻技術；③選用的標准；④待測標本中的蛋白濃度。

4.染料結合法 蛋白質可與某些染料特異結合，如氨基黑（amino black）與考馬亮藍（comassive brilliant blue ）。這一性質除了可以用於電泳後的蛋白質區帶染色，亦可用於總蛋白質的定量。缺點是多種蛋白質與染料的結合力不一致。考馬亮藍在與蛋白質結合後的吸收峰從465nm移向595nm，這一性質可用分光光度法來定量檢測。

❽ 血清白蛋白的測定方法

通過雙縮脲試劑可與蛋白質發生有顏色產物的反應方法來測定。

人血漿白蛋白是凍干制劑應為白色或灰白色的疏鬆體，液體制劑和凍干制劑溶解後，溶液為略粘稠、黃色或綠色至棕色澄明液體，不應有異物、混濁和沉澱。

白蛋白蛋白占血漿膠體滲透壓卜埋的80%，主要調節組織與血管之間水分的動態平衡。由於白蛋白分子量較高，與鹽類及水分相比，透過膜內的速度較慢，因此使白蛋白的膠體滲透壓與毛細血管的靜力壓相抗衡，以此來維持正常與恆定的血漿容量。

在血液循環中，1g白蛋白可保留18ml水，故每5g白蛋白保留循環內水分的能力約相當於100ml血漿或200ml全血的功能，可起到增加循環血容量和維持血漿膠體滲透壓的作用。

血昌沖漿白蛋白蛋白對某些離子和化合物有較高親和力，能與這些物質可逆結合，發揮轉運功能。白蛋白還為機體提供大量的氨基酸儲備。50ml20%人血漿白蛋白的氨基酸儲備功能相當於400ml全血。

(8)白蛋白檢測方法擴展閱讀：

葯理作用

白蛋白蛋白占血漿膠體滲透壓的80%，主要調節組織與血管之間水分的動態平衡。由於白蛋白分子量較高，與鹽類及水分相比，透過膜內的速度較慢，因此使白蛋白的膠體滲透壓與毛細血管的靜力壓相抗衡，以此來維持正常與恆定的血漿容量。

在血液循環中，1g白蛋白可保留18ml水，故每5g白蛋白保留循環內水分的能力約相當於100ml血漿或200ml全血的功能，可起到增加循環血容量和維持血漿膠體滲透壓的作用。

血漿白蛋白蛋白對某些離子和化合物有較高親和力，能與這些物質可逆結合，發揮轉運功能。白蛋白還為機體提供大量的氨型迅螞基酸儲備。50ml20%人血漿白蛋白的氨基酸儲備功能相當於400ml全血。

❾ 監測蛋白質含量

蛋白質含量測定主要有五種方法,分別是凱式定氮法、雙縮脲法、紫外吸收法、酚試劑法和考馬斯亮藍法。

1.凱氏定氮法：

蛋白質是含氮的化合物。食品與濃硫酸和催化劑共同加熱消化,使蛋白質分解,產生的氨與硫酸結合生成硫酸銨,留在消化液中,然後加鹼蒸餾使氨游離,用硼酸吸收後,再用鹽酸標准溶液滴定,根據酸的消耗量來乘以蛋白質換算系數,即得蛋白質含量。因為食品中除蛋白質外,還含有其它含氮物質,所以此蛋白質稱為粗蛋白。

2.雙縮脲定氮法：

在強鹼性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡合物,稱為雙縮脲反應。凡具有兩個醯胺基或兩個直接連接的肽鍵,或能過一個中間碳原子相連的肽鍵,這類化合物都有雙縮脲反應。紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質濃度成正比,而與蛋白質分子量及氨基酸成分無關,故可用來測定蛋白質含量。測定范圍為1~10mg蛋白質。干擾這一測定的物質主要有:硫酸銨、Tris緩沖液和某些氨基酸等。

3.紫外吸收定寬前氮法：

蛋白質分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸殘基的苯吵旦環含有共軛雙鍵,使蛋白質具有吸收紫外光的性質。形成顏色產物的量取決於蛋白質的濃度。實際測定時,必須預先用標准蛋白質溶液製作一個標准校正曲線,通常用牛血清白蛋白水溶液做蛋白質標准溶液。

不同濃度的標准蛋白質溶液加入雙縮脲試劑後,反應生成的顏色產物用紫外-可見分光光度計在540nm 波長下測定吸光度,以雙縮脲試劑加緩沖或水作空白對照。然後將測得的值分別對蛋白濃度(mg/ ml) 作圖,得標准曲線。

未知蛋白樣品用雙縮脲試劑做同樣處理,根據測得吸光度值在標准曲線上直接查得未知蛋白質樣品中得蛋白質濃度。進行紫外吸收法測定時,由於蛋白質吸收高峰常因pH的改變而有變化,因此要注意溶液的pH值,測定樣品時的pH要與測定標准曲線的pH相一致。

4.酚試劑法：

此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin —酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生深藍色的原因是:

①在鹼性條件下,蛋白質中的肽鍵與銅結合生成復合物。

②Folin—酚試劑中的磷鉬酸鹽—磷鎢酸鹽被蛋白質中的酪氨酸和苯丙氨酸殘基還原,產生深藍色(鉬蘭和鎢蘭的混合物)。在一定的條件下,藍色深度與蛋白的量成正比。

5.考馬斯亮藍法：

考馬斯亮蘭G-250染料,在酸性溶液中與蛋白質結合,使染料的最大吸收峰的位置(λmax),由465nm變為595nm,溶液的顏色也由棕黑色變為蘭色。經研究認為,染料主要是與蛋白質中的鹼性氨基酸(特別是精氨酸)和芳香族氨基酸殘基相結合。在595nm下測定的吸光度值A595,與蛋白質濃度成正比。

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檢查過程

(1) 標准法制定標准曲線取14支試管，分兩組按下表a平行操作。繪制標准曲線：以A595nm為縱坐標，標准蛋白含量為橫坐標，在坐標紙上繪制標准曲線。

(2) 微量法制定標准曲線取12支試管，分兩組按下表b平行操作。繪制標准曲線：以A595nm為縱坐標，標准蛋白含量為橫坐標，在坐標紙上繪制標准曲線。

(3) 未知樣品蛋白質濃度測定測定方法同上，取合適的未知樣品體積，使其測定值在標准曲線的直線范圍內。根據所測定的A595nm值，在標准曲線上查出其相當於標准蛋白的量，從而計算出未知樣品的蛋白質濃度(mg/ml)。

參考資料網路——蛋白質含量測定

❿ 尿微量白蛋白——你們都是怎麼測的呢

上海瑞金醫院內分泌科現在有2種方法:1)
隨機尿,2)
24h尿,早8點到第2天早8點.我都做過.以24h為准.