1. 抗體檢測怎麼檢測(核酸、抗原、抗體檢測)
自 2020 年新冠疫情爆發以來,「核酸檢測」作為一項檢測是否感染的重要指標,開始反復出現在我們的生活中。2022 年 3 月 10 日,國務院應對新型冠狀病毒肺炎疫情聯防聯控機制綜合組發布通知,決定推進「抗原篩查、核酸診斷」的檢測模式,在核酸檢測基礎上增加抗原檢測作為補充。
抗原檢測是什麼?和其他的檢測手段有什麼不同?這篇文章,我們以新型冠狀病毒為例,講講常見的快速篩查手段,聊聊相關的原理以及適用范圍。
想要對一種疾病或是一種物質進行篩查,我們首先要弄清楚的就是「從何下手」的問題,其次是「如何檢測」,讓微觀世界的變化反映到我們眼前,幫助我們作出判斷。
我們面對的是病毒。根據大家耳熟能詳的中學生物課知識,病毒是一類由遺傳物質和蛋白質外殼組成的類生命體 。如果想對病毒的感染情況進行探測,就需要從它的組分下手。接下來的內容,希望大家帶著自己中學的生物知識閱讀。
以目前正在困擾我們的 SARS-CoV-2 為例。它屬於冠狀病毒科下,冠狀病毒亞科的乙型冠狀病毒屬,是已知的第七種能夠感染人類的冠狀病毒。所有的冠狀病毒都是具有 包膜 的 正義單鏈 RNA 病毒 ,也就是說,它們的遺傳物質是一條單獨的 RNA 鏈,並且這條 RNA 鏈可以直接作為 mRNA(信使 RNA)參與翻譯,指導蛋白質的合成。
編號為NPRC 2020.00002的毒種,圖片由國家病原微生物資源庫(中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所)提供。
我們現在的目的是檢測標本中是否存在這種病毒,無論是檢測它本身,還是檢測病毒帶來的產物,能夠下手的方向也就是兩種:蛋白質外殼(包膜)、遺傳物質。
順著這個邏輯,那最顯而易見的方法就是檢查它「能不能看到」,但病毒本體小得很,SARS-CoV-2 的直徑在 80-120 nm,要想每個標本都拿電鏡過一遍是不現實的,人力物力和財力都撐不住。那麼更經濟實惠的方法,就是通過某些措施,讓 病毒的組分 ,或是因為病毒而出現的 某些特殊物質 積攢到一定數量級後發光、變色,出現 宏觀表現 。
那麼我們的問題就轉化成了,選擇一種可以觀察到宏觀尺度變化的方法,和病毒的組分、病毒引發的某種物質產生關聯。我們能選擇的物質也擺在檯面上:病毒的遺傳物質,在這里是它的 RNA;病毒的包膜,也就是蛋白質外殼;以及,如果你還記得一些基礎的生物知識,人體的免疫系統會在感染病毒之後產生抗體以抵抗入侵,它也是不錯的選材。
我們目前採用的幾種檢測方式,也就從這些物質(以及它們的相關物質)脫胎而來,分別為針對遺傳物質的核酸檢測,針對包膜的抗原檢測,以及針對抗體的血清抗體檢測。
作為病毒的遺傳物質,核酸序列載寫了能夠鑒定病毒為某一特定種的基因特徵,因此核酸陽性,也就意味著病毒在體內存在過。
我們目前進行的「核酸檢測」其實分為兩個部分。平常我們進行的「捅鼻子」「捅嗓子」取樣和後續的定性是第一部分。在取得標本之後,因為病毒量太少,樣本會在實驗室中進行一定次數的擴增,並根據熒光反應結果來判定陽性陰性。
第二部分,確定為陽性的樣本,還需要通過基因測序,確定樣本病毒的分型,以便溯源。這一步已經不屬於日常篩查的范疇,但在流行病學調查上具有重大意義,如果有興趣了解,可以參看 Wikipedia 簡要了解。
我們平常參與的作為 篩查 工具的核酸檢測,指的就是採集到定性的第一部分。
在感染了 SARS-CoV-2 之後,咽拭子、痰、下呼吸道分泌物、血液等標本中均可發現病毒核酸。不同部分標本核酸檢測的陽性率有一定差異,隨著病程進展,各個部位的檢出率也會發生變化。
我們習慣稱呼的「鼻拭子」與「咽拭子」,其實都是採集咽腔後壁的分泌物與組織,前者採集鼻咽,後者採集口咽。也有採用其他標準的,比如唾液等亦可作為檢測標本,本質上也是不同地區規定有差異
鼻(咽)拭子與(口)咽拭子已經是綜合了陽性率與便利程度的考量。糞便和尿液等其實也可以作為標本採集的對象。而且根據一項對 31 例患者的研究,肛拭子的准確率要高於鼻咽與口咽采樣,尤其病程後期,肛拭子確診病例的鼻拭子陽性率不到 30%。 4 但顯然,由於操作的限制,它無法作為早期篩查的首選手段。
接下來的工作,就是從獲取的那一點點標本中提取核酸。由於樣本中病毒的數量級很小,不足以拿來分析,還需要將其擴增並標記。需要用到的同樣是高中學過的知識:聚合酶鏈式反應(PCR)——這一步看起來麻煩,但由於它的原理和工序已經研究成熟,實際操作中只需要加好試劑送機器,整個核酸檢測的過程里最麻煩的還是讓待測者安安分分弄來標本(笑)。
各地疾控機構或檢測中心會采購合適的核酸 提取試劑盒 與核酸 檢測試劑盒 。提取試劑盒負責將 RNA 從混雜的樣本(細胞碎屑、分泌物、灰塵等雜質)中提取出來,常見的有磁珠法、離心柱法和釋放劑法,不同提取方法可能對後期檢測的准確度略有影響 。之後,提純出的 RNA 就會移交給檢測試劑盒(也有一些試劑盒將兩者合一),進行之後的工序。
檢測試劑盒帶著樣本在機器中進行的過程,就是這個檢測中最主要的反應:RT-qPCR(實時定量逆轉錄聚合酶鏈反應)。
接下來需要你撿起高中生物的知識。一般的 PCR 反應有以下幾步:
加熱:讓雙鏈 DNA 解旋變形,成為兩條單鏈; 退火:讓混合的單鏈 DNA 與根據需要復制的片段而設計好的引物結合; 延伸:調整溫度,讓 DNA 聚合酶順著引物開始工作,復制出新鏈,形成新的雙鏈。在對病毒的探測中,我們要做的工作也無非上面幾步,只是需要多出兩樣東西:
在第一次反應之前,使用 逆轉錄酶 (依賴 RNA 的 DNA 聚合酶),合成病毒單鏈 RNA 的互補鏈,組合成 cDNA ; 在退火與延伸的階段,除了引物和所需的酶外,還需要 TaqMan 探針 。你可以把 TaqMan 探針這樣理解:它的主體部分是一段寡核苷酸鏈,被設計成能和一小部分需要復制的基因片段配對成雙鏈的樣子;它一端接了一個熒光分子,另一端接了一個開關(淬滅基團),兩者和探針相連時,熒光就會被淬滅基團壓制,探測不到。退火時,這個探針會和引物一起結合在要復制的單鏈片段上。在延伸的過程中,DNA 聚合酶會把擋在面前的障礙物切碎,其中就包括這段探針,淬滅基團和熒光分子就這樣分離,熒光就表現出來。
隨著循環數的增多,擴增的 DNA 片段和熒光也越來越多。對比每個循環的熒光亮度和前若干次循環的基準亮度,我們就能得出目前的 DNA 片段量,也可以直接用循環數和熒光亮度做定性的判斷。
那麼具體復制哪一部分呢?既然要探測病毒,那我們就選取最有代表性的核酸片段。現行的標准中,ORF 基因與 N 基因是常用的檢測位點。
檢測試劑盒負責的就是將提取出的 RNA(樣本)投入後,根據試劑盒上的程序說明,設定對應的 PCR 溫度與時長,由機器控制完成擴增過程,在固定的環節收集熒光信號,記錄對應的循環數(Ct 值)。判斷陰性陽性 / 是否還具有傳染力的標准,就是看熒光信號達到閾值時,目前循環數是多少。根據目前現行的《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第九版)》,解除隔離管理的標准為 Ct 值 ≥ 35 。和此前通行的 ≥40 標准相比,出院與解除隔離的時間會大大縮短 。
經 RT-PCR 的核酸檢測到現在都是確診的金標准,因為它在方法學的角度看來,(理論上)可以做到 100% 准確。但核酸檢測耗時長、對環境與操作人員要求高,在環境條件達不到標准、物資與儀器不齊全等情況下,大批量的核酸檢測會帶來巨大人力與財力消耗。
在本次疫情中,我們採用的免疫測定包括了快速抗原檢測與抗體檢測,它以 抗原-抗體反應 為基本原理,旨在通過抗原與抗體快速的中和效應,以較少的時間成本探測樣本中是否存在待測物。兩者都屬於免疫層析法的范疇。
以盒裝方式出現、可以自行操作的抗原檢測就很適合作為物資不足、自我測定等情況下的補充。
核酸檢測檢查的是病毒的(標志性)遺傳物質,是病毒的「內里」。那麼(快速)抗原檢測檢查的就是病毒的「外在」,直接檢查完整的病毒顆粒。目前通過審批的抗原檢測試劑盒包括三種類型:膠體金法、乳膠法、熒光免疫層析法。三者內在原理一致。但其中熒光免疫層析法試劑盒仍然需要專用的檢測儀或紫外線手電筒,不適合家庭自測;膠體金法和乳膠法則都是將檢查結果轉化成肉眼可見的條帶,差別在於用於標記上色的物質不同。
當然,抗原檢測自然有它的劣勢在,它的 假陰性率 (是陽性但顯示陰性)要更高,可能導致漏檢錯檢。但放在一杯茶就能出結果的時間優勢面前,准確性上的差距在某些特定情況下可以暫時讓步。
圖源:How the SARS-CoV-2 EUA Antigen Tests Work | ASM.org
和核酸檢測相比,抗原檢測增加了「鼻拭子」這一采樣途徑,降低了個人自測的難度。拭子上的樣本在緩沖液中洗脫,取液體滴加在加樣孔後,液體會因為毛細作用,帶著潛在的抗原,經過一片預載了抗體的區域(結合墊,conjugate pad)。
這片區域上的抗體,是抗目標抗原(SARS-CoV-2)的單克隆抗體,每一個抗體分子都和特別的標記結合,它們與樣本中的抗原發生反應,形成抗原-抗體復合物,並隨著毛細作用向下一條帶流去。
緊接著經過的是檢測線(T 線,test line),在檢測線上附著的同樣是抗目標抗原的單克隆抗體,你可以理解成這里的東西和結合墊上的一樣,只是沒帶標記。此時,如果受測者已經感染了 SARS-CoV-2,他留在樣本中的抗原形成的抗原-抗體復合物,會在此處與固定在線上的抗體再次結合。在這里,這些帶著標記的復合物不斷沉積,最終會顯示出一條或深或淺的條帶。條帶的顏色來源,就是之前結合墊上的抗體分子附著的標記,在膠體金法中是膠體狀態的金顆粒,在乳膠法中是上色的乳膠滴,在熒光法中是熒光分子。所以你在使用這類試紙時,會發現剛剛加樣結束,液體剛開始擴散的時候,擴散的最前端會有一點點很淡的顏色不斷推移,這就是還沒有固定沉積的標記的顏色。
接下來,液體繼續擴散,經過質控線(C 線,control line),在質控線上附著的是另一種抗體——『抗「抗目標抗原的單克隆 抗體 」 的 單克隆 抗體 』,簡稱「 二抗 」。這種新的抗體是讓上一種抗體在另一種動物的免疫系統中反應得來的,比如結合墊的抗體來自兔,那這里的抗體就來自羊,是羊抗兔的單克隆抗體。也就是說, 二抗的抗原是 之前在 結合墊上的抗體 。這條線就是為了檢測液體有沒有正常擴散、結合墊上的抗體有沒有失效等等而存在的。此時,液體中剩餘的大量來自結合墊的抗體就會作為抗原,與質控線上的二抗發生抗原抗體反應,形成復合物,顯出一條明顯的條帶。
由於結合墊上的抗體非常充裕,這條質控線條帶會出現得非常快、非常顯色,而檢測線由於抗原(病毒)數量不一定,顯色速度會有差別,但一般在 15 分鍾內就足夠判斷結果。所以不要看 C 線很明顯,T 線隱隱約約就覺得「沒事了」, T 線不管深淺,只要有,就是陽性 。
具體操作方面,可以參考醫政醫管局發布的 教學視頻。目前國家也在逐步推廣抗原自測試劑盒,在一定程度上可以減輕未來醫療與街道的壓力。
除了前兩種檢測手段外,還有一種使用不太多,但同樣重要的檢測方法,就是同屬免疫測定方法的「血清抗體檢測」。
抗體檢測採用的試劑盒與抗原檢測非常接近,但標本的限制更大——由於檢測的對象變成了抗體,標本就必須是明確有抗體存在的血液(或血漿、血清)。而且人體在初次感染病毒後,並不會第一時間內產生抗體。抗體能夠明確達到被檢測的數量級,一般是在初次感染(或接種疫苗)的一到兩周之後。這些條件限制了抗體檢測不能作為確診性質的檢查。目前,血清抗體檢測僅作為一定情況下檢查疫苗是否生效,或查驗受測者近期是否感染過新冠病毒的方法。
在人體中有五種抗體,分別是 IgA、IgD、IgE、IgG 和 IgM。IgA 主要負責黏膜免疫。IgD 與免疫反應激活有關。IgE 抵禦寄生蟲,同時也參與過敏反應。剩下的 IgG 與 IgM 就是對抗病原體的過程中,免疫系統派出的主力軍。
SARS-CoV-2 作為病原體,人體經刺激主要分泌的就是 IgG 與 IgM 兩種。現有的抗體檢測試劑盒,主要也是針對人體對 SARS-CoV-2 的 N 蛋白(核衣殼蛋白)或 S 蛋白(刺突蛋白)產生的 IgG 與 IgM。
抗體試劑盒的檢測裝置外觀和抗原檢測別無二致。二者的差別就是上文中提到的結合墊、檢測線、質控線上附著的物質。
這次,加樣孔中滴入的樣本可能有對 SARS-CoV-2 的抗體。因此,結合墊上就應當是帶了標記物的抗原——當然不可能放活病毒上來。一般這里使用的都是設計檢測的抗原蛋白,比如前文提到的 N 蛋白或 S 蛋白,或是重組病毒,無論是哪種,它都必須包含受體結合域(RBD)作為抗體結合的靶點。在檢測線上,附著的就是抗 IgM 或抗 IgG 抗體,以捕獲結合了抗原的抗體蛋白。最後,質控線上附著抗原的特異性抗體,捕獲剩餘的游離抗原。
總的說來,三種檢測方式針對的是不同的需求,互有優勢,互相補充。核酸檢測作為金標准,直接查驗病毒的 RNA,負責看被檢者帶不帶病毒;抗原檢測作為快速檢測方法,查的是病毒的蛋白質,但准確度不如核酸檢測,對傳染力強的感染者更有效;抗體檢測查的是疫苗有沒有生效、人近期有沒有感染過病毒。
近期,新冠疫情在各地卷土重來。Omicron 變種與此前流行的 Delta 變種相比,雖然病死率與重症率明顯下降,但潛伏期更短,病毒復制速度更快,傳染力明顯增強。希望大家在這樣的環境中保持健康。
2. 關於非典的一個問題
概述
傳染性非典型肺炎是一種急性的呼吸系統感染,世界衛生組織(WHO)於3月15日將其名稱公布為嚴重急性呼吸道癥候群(,SARS)。SARS是由一種新病原引起的,臨床主要表現為肺炎,在家庭和醫院有顯著的聚集現象 ,目前在國內部分地區有病例發生。
非典型肺炎實際是與由細菌引起的所謂典型肺炎不同的一組肺炎,曾泛指細菌以外的病原體所致的肺炎。現在主要指由支原體、衣原體、軍團菌、立克次體、腺病毒以及其他一些不明微生物引起的急性呼吸道感染伴肺炎。這些病原體亦稱非典型病原體。非典型肺炎主要通過近距離空氣飛沫和密切接觸傳播,是一種呼吸道急性傳染病,有比較強的傳染力。
病原
世界衛生組織宣布,正式確認冠狀病毒的一個變種是引起非典型肺炎的病原體。科學家們說,變種冠狀病毒與流感病毒有親緣關系,但它非常獨特,以前從未在人類身上發現,科學家將其命名為「SARS病毒」(SARS是「非典」學名的英文縮寫)。香港衛生專家排除了它與甲型流感和乙型流感病毒有關的可能性,與1997年出現的H5N1禽流感病毒也沒有聯系。據香港衛生官員說,非典型肺炎通常由病毒引起,例如流感病毒、腺病毒和其他呼吸道病毒。非典型肺炎也可能由生物體引起。
傳染性非典型肺炎是由變種冠狀病毒(SARS病毒)引起的一種新的呼吸系統傳染性疾病。「它中間是圓形,四周有灰色的陰影,最外圍是一個個緊挨著的突起部分。」在電鏡下清晰看到的一切,病毒的樣子「有點像『自由女神』頭頂的帽子,稱作『日冕病毒』或者『冠狀病毒』。基本上確認它是這次非典型肺炎的病原體。」
病原學研究動態
將研磨後的肺標本切片提取液分別注入小鼠的大腦、雞胚和體外培養的細胞中。」「鼠、雞胚、細胞」是三種不同的病毒培植體。30個小時後,除雞胚外,其他兩個病原培植體已經發生了變化:「接種病毒的10隻老鼠中有8隻都出現致病反應,其中2隻已死亡。」細胞的病變同樣顯著,「電鏡下的細胞出現了病變的網狀結構」。由於是第一次接種,各種變化都還沒有表現出一定的規律性,接下來要不斷地把致病小鼠的肺切片提取液再去感染更多的小鼠和細胞,以獲得更穩定的病原體。7天後,在電鏡中看到 了「冠狀病毒」。
「冠狀病毒並非全新的稀罕病毒,但現有從人類身體上發現的所有三種冠狀病毒,都只會引致普通感冒、輕微咳嗽和發燒,絕少能引起肺炎並發症死亡,這些都和非典型性肺炎的高傳染性和致死性是迥然不同的。
採集了30份非典型肺炎病人的血清,利用『免疫熒光法』將分離病毒與這30份血清進行血清學檢測,結果有23份反應呈陽性,這直接說明了冠狀病毒與『非典』病原有最密切的關系。而反轉錄PCR方法進行病毒的DNA序列測定顯示,分離出的病原體與已知冠狀病毒基因同源性達到64%,那麼還有36%的不同是因為什麼呢?這在基本確認非典型肺炎的病原體的同時,還說明這次的冠狀病毒是基因變異後的全新品種。
根據這種冠狀病毒侵入人體的特點,建議公眾要勤洗手,這可能比戴口罩要更重要。因為這種病毒能在空氣中存活4到5個小時,手會成為它們的依附體,而手又經常接觸眼、口等身體部位,這些黏膜組織的外殼蛋白會成迷冠狀病毒與人體細胞相結合的受體,進而成為病毒進入人體的通道。」
而這種基因的變化究竟又是如何發生?在4月11日的一次簡單過夜實驗中,通過替代一個基因將2月份分離出的對鼠致命的冠狀病毒轉化為感染貓細胞的病毒,這個結果支持了非典型肺炎的病原體可能是在動物和人類病毒相遇時,發生基因交換時而產生的推斷。將分離出的冠狀病毒導入貓冠狀病毒的一個基因片段,這個基因編碼一種外殼蛋白可以識別並幫助穿透貓細胞。幾小時後,小鼠冠狀病毒的一些病毒粒子的外殼蛋白基因變成了貓的外殼基因,因而可以感染貓細胞了,這證明了冠狀病毒以這種方式改組基因能力實在不同尋常。冠狀病毒通過基因改變能夠輕易地改變感染宿主,非典型肺炎(SARS)病毒也很可能是現有動物交換感染給人類後突變成的一種更致命的形式。
接下是建立一個「動物實驗模型」,為冠狀病毒的最終確認提供結論性證據,完成病毒遺傳序列測序的全部實驗,真正弄清病原體的來龍去脈 。
中國公布「非典」元兇冠狀病毒圖
「非典型肺炎」元兇冠狀病毒圖
「非典型肺炎」元兇冠狀病毒圖
流行病學
SARS流行病學
SARS是中國廣東省首先發現的一種新的疾病。最早的病例出現在2002年11月中旬。目前已有17個國家報告發現了SARS病例。
WHO對目前大范圍流行的SARS進行調查研究,並將在適當時候發布確實信息以避免不真實信息。
衛生部門公布目前SARS累計病例達2781例,死亡111例。全球范圍內可能SARS病例的死亡率為4%。
大多數SARS發生在青壯年。這種疾病傳染模式反映了醫護人員、他們的家人和有社會關系的接觸者以及國際間旅行者多處於該年齡段。基於目前的數據,兒童較之成人更少受到SARS的傳染威脅。
SARS的傳染最常見於親密接觸的情況下,包括暴露於傳染性的飛沫以及直接與傳染性體液接觸。
中國2月SARS發病為高峰,之後仍有新病例的報告。截至今天為止中國大陸SARS累計病例1290例,死亡55例。
香港特別行政區是僅次於中國大陸的SARS暴發最嚴重的地區,累計病例998例,死亡30例。期間發病的高峰是3月27日到4月1日於陶大花園住宅公寓發生的疾病的暴發。醫護人員的感染仍有發生。香港的衛生權威人士正在加強感染的控制,以及相應的社區防範措施。
加拿大可能SARS病例有97例,死亡10例。截至今天暴發大部分局限於多倫多。所有病例的流行病學調查都顯示有與一家醫療機構有關,或與確診為SARS的病例有過親密接觸。加拿大疾病暴發顯示年老且通常患有慢性疾病的病人的死亡率更高。
越南感染控制和公共衛生措施有效地實施使得河內疾病的暴發得到很好的控制。3月24日後疾病傳染的新發病例就少有報告。自2月26日疾病暴發後死亡有4例。
新加坡3月中旬疾病暴發達到最高峰,此後新發病例逐漸下降,包括兩家醫院醫護人員、住院病人和訪客的群聚性暴發。截至4月10日累計病例126例,死亡9例。新加坡目前正在調查發生在新加坡綜合醫院的一起新的群聚性疾病暴發,這次暴發涉及52人,均來自兩間病房57號和58號,其中包括19例可能病例和33例可疑病例。這次暴發的源頭是3月24日在該醫院治療與SARS無關的慢性病的一名病人,由於該病人當時沒有明顯的SARS症狀,因此沒有根據相應的措施進行及時隔離。
美國的病例繼續上升達到154例。美國的病例數包括可能和可疑病例。目前美國病人傳染給醫護工作者的病例很少發生。截至目前沒有死亡病例「受影響」地區的定義每天根據最新病例數和疾病傳播模式更新。流行病學數據顯示所有新發的病例都可以追溯到曾經到過「受影響」地區或與確診為SARS的病人有過直接接觸。
傳染性強,主要通過短距離飛沫傳播、接觸病人呼吸道分泌物及密切接觸傳播。人群普遍易感,醫護人員是本病的高危人群。潛伏期約為二至十二天之間,通常在四到五天。傳染性主要在急性期(發病早期),尤以剛發病時為強。當非典型肺炎病人被隔離及採取抗病毒、提高機體免疫力等治療措施後,機體開始識別病毒並出現針對SARS的特異性免疫反應來抵抗和中和病毒。隨著疾病的康復,SARS病毒逐漸被機體所清除,其傳染性也隨之消失。
傳播途徑
該病有一定的傳染性,可通過短距離飛沫、接觸呼吸道分泌物等途徑傳播。
診斷
1.流行病學史
1.1與發病者有密切接觸史,或屬受傳染的群體發病者之一,或有明確傳染他人的證據;
1.2發病前兩周內曾到過或居住於報告有傳染性非典型肺炎病人並出現繼發感染病人的城市等條件被列為「非典」的流行病學診斷標准。
2.症狀與體征
起病急,以發熱為首發症狀,體溫一般>38℃,偶有畏寒;可伴有頭痛、關節酸痛、肌肉酸痛、乏力、腹瀉;常無上呼吸道其他症狀;可有咳嗽,多為乾咳、少痰,偶有血絲痰;可有胸悶,嚴重者出現呼吸加速,氣促,或明顯呼吸窘迫。肺部體征不明顯,部分病人可聞少許濕羅音,或有肺實變體征。
實驗室檢查發現「外周血白細胞計數一般不升高,或降低;常有淋巴細胞計數減少」的情況以及胸部 X線檢查為「肺部有不同程度的片狀、斑片狀浸潤性陰影或呈網狀改變,部分病人進展迅速,呈大片狀陰影;常為雙側改變,陰影吸收消散較慢。肺部陰影與症狀體征可不一致」等情況應考慮為「非典」。若檢查結果陰性,1-2天後應予復查。同時要注意抗菌葯物治療無明顯效果。
衛生部除了給出疑似診斷標准和臨床診斷標准外,還提示臨床上要注意排除上感、流感、細菌性或真菌性肺炎、艾滋病合並肺部感染、軍團病、肺結核、流行性出血熱、肺部腫瘤、非感染性間質性疾病、肺水腫、肺不張、肺栓塞、肺嗜酸性粒細胞浸潤症、肺血管炎等臨床表現類似的呼吸系統疾患。
3.實驗室檢查 外周血白細胞計數一般不升高,或降低;常有淋巴細胞計數減少。
4.胸部X線檢查
肺部有不同程度的片狀、斑片狀浸潤性陰影或呈網狀改變,部分病人進展迅速,呈大片狀陰影;常為雙側改變,陰影吸收消散較慢。肺部陰影與症狀體征可不一致。若檢查結果陰性,1-2天後應予復查。
5.抗菌葯物治療無明顯效果
疑似診斷標准:符合上述1+2+3條或2+3+4條。
臨床診斷標准:符合上述1.1+2+4條及以上,或1.2+2+3+4或1.2+2+4+5條。
包括流行病學史、症狀與體征、實驗室檢查、胸部 X線檢查和抗菌葯物治療無明顯效果等5個方面。
鑒別診斷:臨床上要注意排除上感、流感、細菌性或真菌性肺炎、艾滋病合並肺部感染、軍團病、肺結核、流行性出血熱、肺部腫瘤、非感染性間質性疾病、肺水腫、肺不張、肺栓塞、肺嗜酸性粒細胞浸潤症、肺血管炎等臨床表現類似的呼吸系統疾患。
新診斷方法:包括使用PCR技術,PCR是一種體外基因復制技術,可在幾十分鍾內把基因擴增到數百萬倍以上,使基因便於檢測。
據悉,新的檢驗方法將不局限於對血樣的監測,痰液、唾液和漱口液也可成為快速檢測的依據。自從快速檢驗SARS的消息公布以來,已有多家軍、地醫院送來血樣,要求軍事醫學科學院協助檢測。
非典型肺炎出院診斷參考標准
同時具備下列三個條件:
1、未用退熱葯物,體溫正常7天以上;
2、呼吸系統症狀明顯改善;
3、胸部影像學有明顯吸收。
臨床表現
■高燒
非典型肺炎的症狀如下:
1.首先病人高燒(38度以上)、乾咳、氣短或呼吸困難發冷、頭痛、食慾不振、身體不適、皮疹和腹瀉。並沒有一般流感的流涕、咽痛等症狀,也沒有通常感冒常見的白色或黃色痰液,偶有病人痰中帶血絲,病人出現呼吸急促的現象,個別病人出現呼吸窘迫綜合症;
2.非典型肺炎病人白細胞正常或下降;
3.X光胸片特點與臨床狀況分離,一般的肺炎先有很重的臨床表現,後在X光胸片上可以看到肺部有陰影變化;但此次則是在臨床症狀還不嚴重時,X光片中已顯示病人肺部有絮狀陰影,並呈快速發展趨勢;
4.通常時高燒患者應用抗生素都會有明顯效果,但此病用抗生素大多無效。大多數非典型肺炎病人可自愈,個別病情惡化凶險,約有7%的病人需做人工呼吸。
■潛伏期
關於非典型肺炎的潛伏期有多種說法,一般認為是2-12天,通常在4-5天。衛生專家說,非典型肺炎的死亡率在3%-5%之間。患者可能引起並發症,最短在五天之內病情急劇惡化。男女之間發病無差別,從年齡看青壯年佔70%。因最初起病時防護措施不夠,醫務人員屬非典型肺炎高發人群,在家庭和醫院有聚集現象。
■飛沫
打噴嚏或咳嗽的飛沫是非典型肺炎病原體傳播的途徑之一,通常在大約一米以內通過飛沫傳播,直接接觸患者分泌物也會受感染。這種病毒還可間接傳播,它在離開人體後可存活三至六個小時。衛生專家沒有排除病毒由空氣傳染的可能性。非典型肺炎患者應該隔離。醫務工作者和探視者在與患者密切接觸時應該戴有效的口罩、眼鏡、圍裙、頭罩和手套。
■可疑病例
2003年2月1日後,表現有發熱(>38℃)和一項或更多的呼吸系統症狀,包括咳嗽、氣短或呼吸困難,有以下一項或多項行為:在發病前十天曾赴流行地區(根據WHO2003年3月16日修訂資料,包括中國廣東及香港、越南河內、新加坡和加拿大多倫多);發病前10天內與已診斷為SARS病例有密切接觸史,密切接觸指護理過SARS病例、與SARS病例共同生活、直接接觸過SARS病例的呼吸道分泌液和體液。
■可能病例
1.合乎可疑病例定義者,且經胸部X光攝片證實為肺炎表現或有呼吸窘迫綜合症現象者;
2.任何原因無法解釋的呼吸系統疾病導致的死亡病例,屍檢結果顯示呼吸窘迫綜合症的病理改變並且沒有明確病因;
3.除了發燒與呼吸道症狀外,SARS尚可能伴隨:頭痛、肌肉僵硬、食慾不振、身體不適、意識紊亂、皮疹及腹瀉等症狀體征。
該病主要表現為急性起病,以發熱為首發症狀,偶有畏寒,同時伴有頭痛、關節酸痛和全身酸痛、乏力。有明顯的呼吸道症狀:乾咳、少痰,個別病人偶有血絲痰,部分病人出現呼吸加速、氣促等上呼吸道病毒感染症狀,多數病人症狀較輕。
高燒38度以上、乾咳少痰應該是『非典』的必備症狀
治療方法
(一)一般性治療:休息,適當補充液體及維生素,避免用力和劇烈咳嗽。密切觀察病情變化(多數病人在發病後14天內都可能屬於進展期)。定期復查胸片(早期復查間隔時間不超過3天)、心、肝、腎功能等。每天檢測體表血氧飽和度。
(二)對症治療:
1、有發熱超過38.5℃者,全身酸痛明顯者,可使用解熱鎮痛葯。高熱者給予冰敷、酒精擦浴等物理降溫措施。
2、咳嗽、咳痰者給予鎮咳、祛痰葯。
3、有心、肝、腎等器官功能損害,應該作相應的處理。
4、氣促明顯、輕度低氧血症者應早給予持續鼻導管吸氧。
兒童忌用阿司匹林,因該葯有可能引起Reye綜合征。
(三)治療上早期選用大環內脂類、氟喹諾酮類、β-內醯胺類、四環素類等,如果痰培養或臨床上提示有耐葯球菌感染,可選用(去甲)萬古黴素等。
(四)糖皮質激素的應用:建議應用激素的指征為:①有嚴重中毒症狀;②達到重症病例標准者。應有規律使用,具體劑量根據病情來調整。兒童慎用。
(五)可選用中葯輔助治療,治療原則為:溫病,衛、氣、營血和三焦辨證論治。
(六)可選用抗病毒葯物。
(七)可選用增強免疫功能的葯物。
(八)重症病人的處理和治療:
1、有明顯呼吸困難或達到重症病例診斷標准要進行監護。
2、可使用無創正壓通氣首選鼻罩CPAP的方法。常用的壓力水平為4-10cmH2O。應選擇適當的罩,並應持續應用(包括睡眠時間),暫停時間不超過30分鍾,直到病情緩解。推薦使用無創正壓通氣的標准:呼吸次數>30次/分;吸氧3-5升/分條件下,SaO2<93%;
3、嚴重呼吸困難和低氧血症,吸氧5升/分條件下SaO2<90%或氧合指數<200mmHg,經過無創正壓通氣治療後無改善,或不能耐受無創正壓通氣治療者,應該及時考慮進行有創的正壓通氣治療。
4、一旦出現休克或MODS,應及時作相應的處理。如果處理有困難或條件不足,應及時請有關專家會診。
中醫治療
非典型肺炎屬於中醫「熱病」范疇,病因為感受疫毒時邪,病位在肺。其基本病機特點為:熱毒痰瘀,壅阻肺絡,熱盛邪實,濕邪內蘊,耗氣傷陰,甚則出現氣急喘脫的危象。在此基礎上,專家根據所針對的不同人群以及地區氣候特點,分別對易感人群的預防、不同類型和不同病期患者的治療提供了指導性意見。其預防方案是在實施「社區綜合性預防措施(試行)」的基礎上,建議參考使用以提高人群對非典型肺炎的抵抗力為目的,中醫預防措施:
一般健康人群服用的中葯處方一:鮮蘆根二十克、銀花十五克、連翹十五克、蟬衣十克、僵蠶十克、薄荷六克、生甘草五克,水煎代茶飲,連續服用七至十天。
處方二:蒼術十二克、白術十五克、黃芪十五克、防風十克、藿香十二克、沙參十五克、銀花二十克、貫眾十二克,水煎服,一日兩次,連續服服七至十天。
處方三:貫眾十克、銀花十克、連翹十克、大青葉十克、蘇葉十克、葛根十克、藿香十克、蒼術十克、太子參十五克、佩蘭十克,水煎服,一日兩次,連續服用七至十天。
與非典型肺炎病例或疑似病例有接觸的健康人群在醫生指導下服用的中葯處方:生黃芪十五克、銀花十五克、柴胡十克、黃芩十克板藍根十五克、貫眾十五克、蒼術十克、生苡仁十五克、藿香十克、防風十克、生甘草五克。水煎服,一日兩次,連續服用十至十四天。
治療在衛生部疾病控制司制定的「非典型肺炎病例或疑似病例的推薦治療方案和出院診斷參考標准(試行)」等防治技術方案的基礎上,為進一步提高非典型肺炎的臨床療效,建議醫生根據實際情況,參考使用以下中醫葯治療方法,對非典型肺炎病例或疑似病例按照中醫辨證論治的原則,因地制宜,分期分證,進行個體化治療。同時還要根據病情變化,適時調整治法治則,隨證加減。
早期:早期患者以熱毒襲肺、濕遏熱阻為病機特徵。臨床上分為熱毒襲肺、濕熱阻遏、表寒里熱夾濕三種證候類型。屬熱毒襲肺證者,宜清熱宣肺,疏表通絡,可選用銀翹散合麻杏石甘湯加減;屬濕熱阻遏證者,宜宣化濕熱,透邪外達,可選用三仁湯合升降散加減,如濕重熱輕,亦可選用霍朴夏苓湯;屬表寒里熱夾濕證者,宜解表清里,宣肺化濕,可選用麻杏石甘湯合升降散加減。
中期:中期患者以疫毒侵肺,表裡熱熾,濕熱蘊毒,邪阻少陽,疫毒熾盛,充斥表裡為病機特徵。臨床上分為疫毒侵肺、表裡熱熾,濕熱蘊毒,濕熱郁阻少陽,熱毒熾盛四種證候類型。屬疫毒侵肺、表裡熱熾證者,宜清熱解毒、瀉肺降逆,可選用清肺解毒湯;屬濕熱蘊毒證者,宜化濕辟穢、清熱解毒,可選用甘露消毒丹加減;屬濕熱郁阻少陽證者,宜清泄少陽、分清濕熱,可選用蒿芩清膽湯加減;屬熱毒熾盛證者,宜清熱涼血、瀉火解毒,可選用清瘟敗毒加減。
極期:極期患者以熱毒壅盛,邪盛正虛,氣陰兩傷,內閉外脫為病機特徵。臨床上分為痰濕瘀毒、壅阻肺絡,濕熱壅肺、氣陰兩傷,邪盛正虛、內閉喘脫三種證候類型。屬痰濕瘀毒、壅阻肺絡證者,宜益氣解毒、化痰利濕、涼血通絡,可選用活血瀉肺湯;屬濕熱壅肺、氣陰兩傷證者,宜清熱利濕、補氣養陰,可選用益肺化濁湯;屬邪盛正虛、內閉喘脫證者,宜益氣固脫、通閉開竅,可選用參附湯加減。
恢復期:恢復期患者以氣陰兩傷,肺脾兩虛,濕熱瘀毒未盡為病機特徵。臨床上分為氣陰兩傷、余邪未盡,肺脾兩虛兩種證候類型。屬氣陰兩傷、余邪未盡證者,宜益氣養陰、化濕通絡,可選用李氏清暑益氣湯加減;屬肺脾兩虛證者,宜益氣健脾,可選用參苓白術散合葛根芩連湯加減。
預防措施
專家提醒市民從五個方面做好預防保護措施避免被感染:
一是保持生活、工作環境的空氣流通;
二是可用食用酸醋熏蒸消毒空氣;
三是勤洗手;
四是凡與病人接觸者需戴口罩,注意手的清潔和消毒;
五是根據天氣變化,注意防寒保暖,多參加鍛煉,增強自身抵抗疾病的能力,防止疾病的發生。
如出現上述類似症狀時,應及時到醫院就診。
■空氣消毒
每次開窗10-30分鍾,使空氣流通,病菌排出室外。有條件的還可以用一些經衛生行政部門批準的空氣消毒劑,按照其使用說明進行噴霧或者熏蒸消毒。
■地面消毒
進行濕式清掃,以免塵土飛揚而將病菌帶入空氣中,同時應注意地面保持乾燥。
■物體消毒
桌椅、熱水瓶、把手、開關、地面、廁所、浴池等可用500mg/L 有效氯消毒劑噴灑或擦拭,像水龍頭、廁所門把手以及比較潮濕的地方,病菌容易沾染和繁殖,要重點消毒。
■餐具消毒
可連同剩餘食物一起煮沸10-20分鍾。餐具可用500mg/L有效氯,或用0.5%過氧乙酸浸泡消毒0.5-1小時。餐具消毒時要全部浸入水中,消毒時間從煮沸時算起。
■手的消毒
經常用流動水肥皂洗手,在飯前、便後、接觸污染品後最好用250-1000mg/L 1210消毒劑或250-1000mg/L 有效碘的碘伏或用經批準的市售手消毒劑消毒。
■衣被、毛巾等的消毒 棉布類與尿布等可煮沸消毒10-20分鍾,或用0.5%過氧乙酸浸泡消毒0.5-1小時,對於一些化纖織物、綢緞等只能採用化學浸泡消毒方法。