維生素a檢測方法

A. 維生素A含量測定的方法有哪些

維生素A為用1g含270萬單位以上的維生素A醋酸酯結晶加精緻植物油製成的油溶液。維生素A膠丸為取維生素A，加精煉食用植物油（在0℃左右脫去固體脂肪）溶解並調整濃度後製成。2005版《中國葯典》二部附錄（VIIJ）收載了其含量測定方法。x0dx0a文獻報道的方法：x0dx0a馬莉等用RP-HPLC法測定維生素A的含量。儀器：島津LC-10AT。色譜柱：HuupersilODS（150mm×4.6mm）；流動相為96%甲醇；流速：1.0ml/min；檢測波長：325nm；柱溫：25℃。x0dx0a黃雙路等用鹽酸溶解維生素A膠丸的膠殼後，以環己烷萃取內容物，採用紫外分光光度法測定含量，最大吸收峰波長在326～329nm之間。x0dx0a李枝端等用三點校正法測定維生素A的含量。維生素A醋酸酯測定波長：λ1=316nm，λ2=328nm，λ3=340nm；維生素A醇測定波長：λ1=310nm，λ2=325nm，λ3=334nm。

B. 如果身體缺乏維生素ABCD，有什麼辦法可以自查

如果身體缺乏維生素ABCD，有什麼辦法可以自查？

維生素是體內必不可少的微量元素之一，如檢查維生素缺乏，需要到正規的三甲醫院掛內分泌科或者普內科行常規檢查。

c

維生素是人體內必須的一種化合物質，缺乏維生素會導致人體出現各種各樣的疾病例如表麵皮膚乾燥、缺乏彈性、人體內缺乏營養物質，甚至會導致胃腸道功能減退及對營養物質的吸收、代謝能力降低從而引發各種繼發性疾病，引發胃潰瘍、胃炎等疾病，除此之外會導致患者精神狀態不佳、脾氣暴躁、記憶力下降等精神系統疾病，幼兒缺乏維生素會導致身體發育障礙。所以，缺乏維生素應該進行血液檢查，價格在20-50元不等，可以有效檢查出身體內缺乏的維生素。

C. 維生素A和維生素E的化學檢驗方法

第一篇高效液相色譜法
2原理
樣品中的維生素A及維生素E經皂化提取處理後，將其從不可皂化部分提取至有機溶劑中。用高效液相色譜法C18反相柱將維生素A和維生素E分離，經紫外檢測器檢測，並用內標法定量測定。最小檢出量分別為VA：0.8ng；α－E：91.8ng；γ－E：36.6ng；δ－E：20.6ng。
3試劑
實驗用水為蒸餾水。試劑不加說明為分析純。
3.1無水乙醚：不含有過氧化物。
3.1.1過氧化物檢查方法：用5mL乙醚加1mL 10%碘化鉀溶液，振搖1min，如有過氧化物則放出遊離碘，水層呈黃色或加4滴0.5%澱粉液，水層呈藍色。該乙醚需處理後使用。
3.1.2去除過氧化物的方法：重蒸乙醚時，瓶中放入純鐵絲或鐵末少許。棄去10%初餾液和10%殘餾液。
3.2無水乙醇：不得含有醛類物質。
3.2.1檢查方法：取2mL銀氨溶液於試管中，加入少量乙醇，搖勻，再加入10%氫氧化鈉溶液，加熱，放置冷卻後，若有銀鏡反應則表示乙醇中有醛。
3.2.2脫醛方法：取2g硝酸銀溶於少量水中。取4g氫氧化鈉溶於溫乙醇中。將兩者傾入1L乙醇中，振搖後，放置暗處兩天(不時搖動，促進反應)，經過濾，置蒸餾瓶中蒸餾，棄去初蒸出的50mL。當乙醇中含醛較多時，硝酸銀用量適當增加。
3.3無水硫酸鈉。
3.4甲醇：重蒸後使用。
3.5重蒸水：水中加少量高錳酸鉀，臨用前蒸餾。
3.610%抗壞血酸溶液(m/V)：臨用前配製。
3.71∶1氫氧化鉀溶液。
3.810%氫氧化鈉溶液(m/V)。
3.95%硝酸銀溶液(m/V)。
3.10銀氨溶液：加氨水至5%硝酸銀溶液中，直至生成的沉澱重新溶解為止，再加10%氫氧化鈉溶液數滴，如發生沉澱，再加氨水直至溶解。
3.11維生素A標准液：視黃醇(純度85%)或視黃醇乙酸酯(純度90%)經皂化處理後使用。用脫醛乙醇溶解維生素A標准品，使其濃度大約為1mL相當於1mg視黃醇。臨用前用紫外分光光度法標定其准確濃度。
3.12維生素E標准液：α－生育酚(純度95%)，γ－生育酚(純度95%)，δ－生育酚(純度95%)。用脫醛乙醇分別溶解以上三種維生素E標准品，使其濃度大約為1mL相當於1mg。臨用前用紫外分光光度法分別標定此三種維生素E的准確濃度。
3.13內標溶液：稱取苯並〔e〕芘(純度98%)，用脫醛乙醇配製成每1mL相當於10μg苯並〔e〕芘的內標溶液。
3.14pH1～14試紙。
4儀器和設備
4.1實驗室常用設備。
4.2高壓液相色譜儀帶紫外分光檢測器。
4.3旋轉蒸發器。
4.4高速離心機
4.4.1小離心管：具塑料蓋1.5～3.0mL塑料離心管(與高速離心機配套)。
4.5高純氮氣。
4.6恆溫水浴鍋。
4.7紫外分光光度計。
5操作步驟
5.1樣品處理
5.1.1皂化
稱取1～10g樣品(含維生素A約3μg，維生素E各異構體約為40μg)於皂化瓶中，加30mL無水乙醇，進行攪拌，直到顆粒物分散均勻為止。加5mL 10%抗壞血酸，苯並〔e〕芘標准液2.00mL，混勻。加10mL1：1氫氧化鉀，混勻。於沸水浴上迴流30min使皂化完全。皂化後立即放入冰水中冷卻。
5.1.2提取
5.1.2.1將皂化後的樣品移入分液漏斗中，用50mL水分2～3次洗皂化瓶，洗液並入分液漏斗中。用約100mL乙醚分兩次洗皂化瓶及其殘渣，乙醚液並入分液漏斗中。如有殘渣，可將此液通過有少許脫脂棉的漏斗濾入分液漏斗。輕輕振搖分液漏斗2min，靜置分層，棄去水層。
5.1.3洗滌
5.1.3.1用約50mL水洗分液漏斗中的乙醚層，用pH試紙檢驗直至水層不顯鹼性(最初水洗輕搖，逐次振搖強度可增加)。
5.1.4濃縮
5.1.4.1將乙醚提取液經過無水硫酸鈉(約5g)濾入與旋轉蒸發器配套的250～300mL球形蒸發瓶內，用約10mL乙醚沖洗分液漏斗及無水硫酸鈉3次，並入蒸發瓶內，並將其接至旋轉蒸發器上，於55℃水浴中減壓蒸餾並回收乙醚，待瓶中剩下約2mL乙醚時，取下蒸發瓶，立即用氮氣吹掉乙醚。立即加入2.00mL乙醇，充分混合，溶解提取物。
5.1.5將乙醇液移入一小塑料離心管中(4.4.1)，離心5min(5000rpm)。上清液供色譜分析。如果樣品中維生素含量過少，可用氮氣將乙醇液吹乾後，再用乙醇重新定容。並記下體積比。
5.2標准曲線的制備
5.2.1維生素A和維生素E標准濃度的標定方法
取維生素A和各維生素E標准液若干微升，分別稀釋至3.00mL乙醇中，並分別按給定波長測定各維生素的吸光值。用比吸光系數計算出該維生素的濃度。測定條件如下表所示。
表1
標 准 加入標準的量
s，μl 比吸光系數
波 長
λ，nm
視 黃 醇
γ－生育酚
δ－生育酚
α－生育酚 10.00
100.0
100.0
100.0 1835
71
92.8
91.2 325
294
298
298

濃度計算：


5.2.2標准曲線的制備
本方法採用內標法定量。把一定量的維生素A、γ－生育酚、α－生育酚、δ－生育酚及內標苯並〔e〕芘液混合均勻。選擇合適靈敏度，使上述物質的各峰高約為滿量程70%，為高濃度點。高濃度的1/2為低濃度點(其內標苯並〔e〕芘的濃度值不變)，用此二種濃度的混合標准進行色譜分析，結果見色譜圖。維生素標准曲線繪制是以維生素峰面積與內標物峰面積之比為縱坐標，維生素濃度為橫坐標繪制，或計算直線回歸方程。如有微處理機裝置，則按儀器說明用二點內標法進行定量。
本方法不能將β－E和γ－E分開，故γ－E峰中包含有β－E峰。
5.3高效液相色譜分析
5.3.1色譜條件(推薦條件)
5.3.1.1預柱：ultrasphere ODS 10μm，4mm×4.5cm。
5.3.1.2分析柱：ultrasphere ODS 5μm，4.6mm×25cm。
5.3.1.3流動相：甲醇∶水＝98∶2。混勻。於臨用前脫氣。
5.3.1.4紫外檢測器波長：300nm。量程0.02。
5.3.1.5進樣量：20μL。
5.3.1.6流速：1.7mL/min。
5.4樣品分析
取樣品濃縮液20μL，待繪制出色譜圖及色譜參數後，再進行定性和定量。
5.4.1定性：用標准物色譜峰的保留時間定性。
5.4.2定量：根據色譜圖求出某種維生素峰面積與內標物峰面積的比值，以此值在標准曲線上查到其含量。或用回歸方程求出其含量。
6計算


式中：X2——某種維生素的含量，mg/100g；
C——由標准曲線上查到某種維生素含量，μg/mL；
V——樣品濃縮定容體積，mL；
m——樣品質量， g。
用微處理機二點內標法進行計算時，按其計算公式計算或由微機直接給出結果。
7結果的允許差
同一實驗室，同時測定或重復測定結果相對偏差絕對值≤10%。
第二篇比色法
8原理
維生素A在三氯甲烷中與三氯化銻相互作用，產生藍色物質，其深淺與溶液中所含維生素A的含量成正比。該藍色物質雖不穩定，但在一定時間內可用分光光度計於620nm波長處測定其吸光度。
9試劑
本實驗用水均為蒸餾水。
9.1無水硫酸鈉：同3.3。
9.2乙酸酐。
9.3乙醚：同3.1。
9.4無水乙醇：同3.2。
9.5三氯甲烷：應不含分解物，否則會破壞維生素A。
9.5.1檢查方法
三氯甲烷不穩定，放置後易受空氣中氧的作用生成氯化氫和光氣。檢查時可取少量三氯甲烷置試管中加水少許搖振，使氯化氫溶到水層。加入幾滴硝酸銀液，如有白色沉澱即說明三氯甲烷中有分解產物。
9.5.2處理方法
試劑應先測驗是否含有分解產物，如有，則應於分液漏斗中加水洗數次，加無水硫酸鈉或氯化鈣使之脫水，然後蒸餾。
9.625%三氯化銻－三氯甲烷溶液：用三氯甲烷配製25%三氯化銻溶液，儲於棕色瓶中(注意勿使吸收水分)。
9.71∶1氫氧化鉀溶液。
9.8維生素A或視黃醇乙酸酯標准液：同3.11。其標定方法同5.2.1。
9.9酚酞指示劑：用95%乙醇配製1%溶液。
10儀器和設備
10.1實驗室常用設備。
10.2分光光度計。
10.3迴流冷凝裝置。
11操作步驟
維生素A極易被光破壞，實驗操作應在微弱光線下進行，或用棕色玻璃儀器。
11.1樣品處理：根據樣品性質，可採用皂化法或研磨法。
11.1.1皂化法：適用於維生素A含量不高的樣品，可減少脂溶性物質的干擾，但全部試驗過程費時，且易導致維生素A損失。
11.1.1.1皂化：根據樣品中維生素A含量的不同，稱取0.5～5g樣品於三角瓶中，加入10mL 1∶1氫氧化鉀及20～40mL乙醇，於電熱板上迴流30min至皂化完全為止。
11.1.1.2提取：將皂化瓶內混合物移至分液漏斗中，以30mL水洗皂化瓶，洗液並入分液漏斗。如有渣子，可用脫脂棉漏斗濾入分液漏斗內。用50mL乙醚分二次洗皂化瓶，洗液並入分液漏斗中。振搖並注意放氣，靜置分層後，水層放入第二個分液漏斗內。皂化瓶再用約30mL乙醚分二次沖洗，洗液傾入第二個分液漏斗中。振搖後，靜置分層，水層放入三角瓶中，醚層與第一個分液漏鬥合並。重復至水液中無維生素A為止。
11.1.1.3洗滌：用約30mL水加入第一個分液漏斗中，輕輕振搖，靜置片刻後，放去水層。加15～20mL 0.5mol/L氫氧化鉀液於分液漏斗中，輕輕振搖後，棄去下層鹼液，除去醚溶性酸皂。繼續用水洗滌，每次用水約30mL，直至洗滌液與酚酞指示劑呈無色為止(大約3次)。醚層液靜置10～20min，小心放出析出的水。
11.1.1.4濃縮：將醚層液經過無水硫酸鈉濾入三角瓶中，再用約25mL乙醚沖洗分液漏斗和硫酸鈉兩次，洗液並入三角瓶內。置水浴上蒸餾，收回乙醚。待瓶中剩約5mL乙醚時取下，用減壓抽氣法至於，立即加入一定量的三氯甲烷使溶液中維生素A含量在適宜濃度范圍內。
11.1.2研磨法：適用於每克樣品維生素A含量大於5～10μg樣品的測定，如肝的分析。步驟簡單，省時，結果准確。
11.1.2.1研磨：精確稱2～5g樣品，放入盛有3～5倍樣品重量的無水硫酸鈉研缽中，研磨至樣品中水分完全被吸收，並均質化。
11.1.2.2提取：小心她將全部均質化樣品移入帶蓋的三角瓶內，准確加入50～100mL乙醚。緊壓蓋子，用力振搖2min，使樣品中維生素A溶於乙醚中。使其自行澄清(大約需1～2h)，或離心澄清(因乙醚易揮發，氣溫高時應在冷水浴中操作。裝乙醚的試劑瓶也應事先放入冷水浴中)。
11.1.2.3濃縮：取澄清提取乙醚液2～5mL，放入比色管中，在70～80℃水浴上抽氣蒸干。立即加入1mL三氯甲烷溶解殘渣。
12測定步驟
12.1標准曲線的制備
准確取一定量的維生素A標准液於4～5個容量瓶中，以三氯甲烷配製標准系列。再取相同數量比色管順次取1mL三氯甲烷和標准系列使用液1mL，各管加入乙酸酐1滴，製成標准比色列。於620nm波長處，以三氯甲烷調節吸光度至零點，將其標准比色列按順序移入光路前，迅速加入9mL三氯化銻－三氯甲烷溶液。於6s內測定吸光度，將吸光度為縱坐標，以維生素A含量為橫坐標繪制標准曲線圖。
12.2樣品測定
於一比色管中加入10mL三氯甲烷，加入1滴乙酸酐為空白液。另一比色管中加入1mL三氯甲烷，其餘比色管中分別加入1mL樣品溶液及1滴乙酸酐。其餘步驟同標准曲線的制備。
13計算


式中：X——樣品中含維生素A的量，mg/100g(如按國際單位，每1國際單位＝0.3μg維生素A)；
c——由標准曲線上查得樣品中含維生素A的含量，μg/mL；
m——樣品質量，g；
V——提取後加三氯甲烷定量之體積，mL；
100——以每百克樣品計。

D. 維生素A可採用的含量測定方法為

是非水滴定法。

維生素A為用1g含270萬單位以上的維生素A醋酸酯結晶加精緻植物油製成的油溶液。維生素A膠丸為取維生素A，加精煉食用植物油（在0℃左右脫去固體脂肪）溶解並調整濃度後製成。2005版《中國葯典》二部附錄（VIIJ）收載了其含量測定方法。

馬莉等用RP-HPLC法測定維生素A的含量。儀器：島津LC-10AT。色譜柱：HuupersilODS（150mm×4.6mm）；流動相為96%甲醇；流速：1.0ml/min；檢測波長：325nm；柱溫：25℃。

(4)維生素a檢測方法擴展閱讀：

維生素a缺乏病：

維生素A缺乏病又稱蟾皮病，是一種維生素A缺乏所致的營養障礙性疾病，表現為皮膚乾燥和粗糙，四肢伸側圓錐形毛囊角化性丘疹、夜盲、角膜乾燥和軟化等，目前此病在國內已罕見。

維生素A是維持一切上皮組織健全所必須的物質，其中以眼、呼吸道、消化組，尿道及生殖系統等上皮影響最顯著。維生素A缺乏時，上皮乾燥，增生及解化。

E. 什麼是維生素A檢測呢

維生素A測定就是檢測維生素A的含量。維生素A的化學名為視黃醇，是最早被發現的維生素。維生素A有兩種。一種是維生素A醇，是最初的維生素A形態（只存在動物性食物中）；另一種是胡蘿卜素，在體內轉變為維生素A的預成物質（可從植物性及動物性食物中攝取）；維生素A的計量單位是USP單位、IU單位、RE單位等3種。

維生素A的測定方法：

1、原理：維生素A在三氯甲烷中與三氯化銻相互作用，產生藍色物質，其深淺與溶液中所含維生素A的含量成正比。該藍色物質雖不穩定，但在一定時間內可用分光光度計於620nm波長處測定其吸光度。

2、儀器實驗室常用設備分光光度計迴流冷凝裝置。

3、試劑本實驗所用試劑皆為分析純，所用水皆為蒸餾水。

（1） 無水硫酸鈉 Na2SO4；

（2） 乙酸酐；

（3） 乙醚 不含有過氧化物；

（4） 無水乙醇 不含有醛類物質；

（5） 三氯甲烷應不含分解物，否則會破壞維生素A，檢查方法：三氯甲烷不穩定，放置後易受空氣中氧的作用生成氯化氫和光氣。檢查時可取少量三氯甲烷置試管中加水振搖，使氯化氫溶到水層。加入幾滴硝酸銀溶液，如有白色沉澱即說明三氯甲烷中有分解產物；

（6） 25%三氯化銻-三氯甲烷溶液 用三氯甲烷配製25%三氯化銻溶液，儲於棕色瓶中（注意避免吸收水分）；

（7） 50%氫氧化鉀溶液（KOH） W/V；

（8） 維生素A標准液 視黃醇（純度85% Sigma）用脫醛乙醇溶解維生素A標准品，使其濃度大約為1ml相當於1mg視黃醇。臨用前用紫外分光光度法標定其准確濃度；

（9） 酚酞指示劑 用95%乙醇配製1%溶液。

F. 如何用簡單的化學方法鑒別維生素A，維生素B，維生素C

維生素A為淡黃色油狀液體，不溶於水，可使溴水褪色。
維生素B有12種，你說的哪一種？
【維生素B1在鹼液中可被鐵氰化鉀氧化生成硫色素，色素轉溶於正丁醇(或異丁醇、異戊醇)中，顯現於酸中消失的藍色熒光。方法如下:取本品約5mg，加氫氧化鈉試液2.5ml使其溶解，加鐵氰化鉀試液0.5ml與正丁醇5ml，強力振搖2min，放置使成兩液層，上層醇液即顯強烈的藍色熒光，加酸使成酸性，熒光即消失，再加鹼使成鹼性，則熒光復現。】
維生素C，水溶性，酸性（pH指示劑檢測），還原性（銀氨溶液黑色沉澱）。