1. 常用的蛋白質電泳方法有哪些
聚丙烯醯胺凝膠電泳:這是一種活性電泳,可以分析混合樣品,並且可用特異檢測手段檢測目標物條帶。
SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳:最常用的變性電泳,可以用來測定蛋白質分子量。比層析法測定要好。
2. 什麼叫電泳技術分離或分析蛋白質常用的電泳方法有哪些
電泳懸浮於樣品溶液(有機的或無機的,生命或無生命的)帶電粒子,朝向相反的電荷移動的現象的電極的電場的影響下的頻帶本身。
分離方法:(一)醋酸纖維素薄膜電泳
(二)凝膠電泳
(三)IEF
(d)其他電泳
這些單獨的步驟具體是指的 http://www.zhyico.com/ news_jsview.asp? ID = 2501
我希望對你有所幫助
3. 怎麼看蛋白質電泳分析結果圖,以及它的原理是什麼
雙向電泳就是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合。
1.先進行等電聚焦電泳(按照蛋白等電點pI分離):在膠中加入雙性電解質溶液,加上電場後建立穩定PH梯度,蛋白質溶液加入後建立電場,蛋白以不同PI分離開來。
2.然後再進行SDS-PAGE(按照分子大小):將上一步的膠加上橫向電場,同一PI中聚集的蛋白,由於分子量不同而分開。
經染色(一般是銀染)得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖。
二維電泳使用於蛋白組學研究,對大批量蛋白篩選鑒定中存在很大優勢,通過不同膠做對比,把不同處的膠割出來單獨鑒定。
通過對尿蛋白電泳的蛋白條帶的特徵進行分析可以判斷尿液中蛋白的分子大小,可以區分出低分子蛋白尿、中分子蛋白尿、高分子蛋白尿和混合型蛋白尿,為臨床腎臟病的診斷提供幫助。如高分子蛋白尿,分子量范圍在5萬到100萬,蛋白條帶包括白蛋白及其以上蛋白條帶,以白蛋白為主。低分子蛋白尿,分子量范圍在1萬到7萬,蛋白條帶在白蛋白和以下蛋白,以小分子蛋白質條帶為主。
4. 電泳圖蛋白質的怎麼看
電泳圖蛋白質這樣看。
1、直接將帶條帶的凝膠放在凝膠呈像系統中進行定量分析。
2、將所需要的條帶剪切下來,用X體積蒸餾水溶解,通過紫外分光光度計在280納米條件下,測定吸光度值。根據儀器目前標准曲線計算蛋白質濃度,與蒸餾水體積相乘,得到蛋白質質量。
3、如果樣品中含有熒光成分,可以進行熒光分析。
電泳圖譜(electrophoregram)是通過電泳將一個混合物樣品(如血清)在支持介質上分成區帶。但須將電泳條經過染色,使區帶顯示出來而得電泳圖譜。還可以進一步在光密度計上進行掃描而獲得記錄圖譜。
帶電粒子在電場的作用下,向著與其電性相反的電極移動的現象,稱為電泳。利用帶電粒子在電場中移動速度不同,對混合物各組份進行分離、純化和測定的技術稱為電泳技術。
可分離的樣品即可以是大分子的蛋白質、多糖、核酸,也可以是小分子的氨基酸,核苷等。
電泳方式差別很大.但基本原理是一致的,即:待分離樣品中各種分子在同一pH下帶電性質和帶電量以及分子本身大小、形狀等性質的差異,使帶電分子在電場中產生不同的遷移速度,從而實現對樣品分離、鑒定或提純。
5. 測量蛋白質等電點的方法有哪些謝謝
交錯分配法。
對一種特定的蛋白質,在不同鹽系統中,pH和其分配系數之間的關系應不同,而在等電點時,得到的均為不帶電時分子的分配系數。
對不同的鹽系統,其等電點時的分配系數應相等,兩條pH和分配系數關系的曲線必交於一點,該點所對應的pH值即為該特定蛋白質的等電點。根據這一原則測定蛋白質等電點的方法,稱為交錯分配法。
特性
蛋白質在溶液中有兩性電離現象。假設某一溶液中含有一種蛋白質。當pI=pH時該蛋白質極性基團解離的正負離子數相等,凈電荷為0,此時的該溶液的是pH值是該蛋白質的pI值。某一蛋白質的pI大小是特定的,與該蛋白質結構有關,而與環境pH無關。
在某一pH溶液中當pH>pI時該蛋白質帶負電荷,反之pH<pI時該蛋白質帶正電荷,pH=pI時該蛋白質不帶電荷。人體內pH=7.4;而體內大部分蛋白質的 pI<6; 所以人體內大部分蛋白質帶負電荷。
以上內容參考:網路-蛋白質等電點