Ⅰ 風濕病的免疫檢驗
風濕病的免疫檢驗
自身免疫病(AID)是指由於過度而持久的自身免疫反應導致組織器官損傷並引起相應器官病變或臨床症狀的一類疾病。風濕病是一類涉及到關節、軟骨、肌肉等結締組織的慢性疾病。下面是我為大家帶來的風濕病的免疫檢驗的知識，歡迎閱讀。
一、抗核抗體測定
(Antinuclear antibody ,ANA) ANA是抗細胞核多種成分的自身抗體，無種屬及器官特異性。ANA可分為抗DNA抗體、抗組蛋白抗體、抗非組蛋白抗體、抗核仁抗體及其他細胞成分抗體。這些抗體共同組成ANA譜。
抗核抗體(ANA)的檢查最常用於篩查全身性風濕病和自身免疫病。ANA的檢查可觀察到能與細胞核內的核酸和蛋白抗原起反應的自身抗體。細胞內可能存在對多種抗原起反應的抗體。只有某種抗體的效價很高時，IFA才能加以鑒別。
1、homogenous(均質型)
又稱彌散型，相應的抗原是雙鏈DNA和組蛋白復合物。常見於SLE，特別是腎臟受累病人。也可見於其它結締組織病，如：風濕性關節炎，MCTD，乾燥綜合征，硬皮病，慢性活動性肝炎及原發性膽汁性肝硬變。
2、Peripheral(周邊型)
相應的抗原為雙鏈DNA，多見於活動性SLE病人。
3、Speckle(斑點型)
主要是針對ENA的抗體，包括Sm，RNP，SSA，SSB，Scl-70。一般認為低效價的斑點型ANA不是結締組織病特有的，實際上不代表臨床異常。高效價的抗Sm抗體多與SLE有關。高效價的抗RNP自身抗體見於MCTD，但也見於SLE。抗SSA和抗SSB抗體，見於S.S，也可見於SLE。當病人有抗SSA抗體時，通常以皮膚表現和光過敏為主。，也存在於ANA陰性狼瘡和新生兒狼瘡。Scl-70抗體與硬皮病有關。
4、Nucleoli(核仁型)
其靶抗原是與RNA分子相關的核蛋白。多見於硬皮病。
5、Centromere(著絲點型)
抗著絲點抗體(ACA)，多見於全身性硬皮病的CREST綜合征。
常用檢測方法為IFA、ELISA、免疫印跡法、RIA、免疫斑點法、膠體金標斑點免疫滲濾法等。其中IFA是應用較廣的一種方法。一般採用鼠肝切片或Hep-2細胞為底物抗原片，當加入病人血清時，病人血清中的ANA可與細胞中相應抗原成分結合。再加入熒游標記抗人IgG，在熒光顯微鏡下可見細胞核內亮綠色熒光。
〖參考值〗 <1:10或陰性
〖臨床意義〗
ANA陽性見於多種疾病，常用於風濕病及自身免疫病的診斷。SLE患者陽性率在95%以上，且效價常在1：80以上。在其他風濕病如RA、系統性硬化症、皮肌炎、乾燥綜合征 (SS)、混合結締組織病(MCTD)等也可陽性。其他如肝病，病毒感染等也可呈低效價陽性。
〖注意事項〗
在大約1%的正常人的體內可測到低效價的非特異性抗核抗體，80歲以上老人的檢出率可高達50%。高效價的ANA一般與活動期SLE密切相關。採用Hep-2細胞檢測ANA，可見到不同的染色模型。
此外，口服避孕葯的婦女也可檢測到ANA。
二、可提取性核抗原(Extractable nuclear antigen ENA)抗體
ENA是細胞內許多小分子的RNA和多肽組成的非組蛋白的酸性核蛋白顆粒。分布在細胞質中的稱為小細胞漿核糖核蛋白(scRNPs);分布在細胞核內的稱為小細胞核核糖核蛋白(snRNPs)。目前已發現的有20餘種，其中常用的抗ENA抗體有如下幾種。
(一)抗Sm抗體
Sm是病人Smith的縮寫。Sm抗原屬於SnRNP，由5個RNA和多肽組成，抗原表位在29KD、28KD和13.5KD多肽上，抗Sm抗體是酸性糖蛋白，是SLE的標記抗體。
(二) 抗nRNP(u1RNP)抗體
u1RNP是u1RNA和蛋白質組成的，抗原表位在73KD、32KD和17.5KD多肽上，是混合結締組織病(MCTD)的重要血清標志。
(三)抗SSA抗體
SS為乾燥綜合征的縮寫。此抗體又稱抗RO抗體。SSA抗原是RNA和蛋白質復合物，抗原表位在52KD多肽上，主要見於原發性乾燥綜合征患者及SLE。
(四)抗SSB抗體
SSB抗體常伴隨SSA抗體同時出現，又稱抗La抗體，SSB抗原屬於SnRNP，是含有RNA和50KD蛋白質的復合物。抗原表位在45KD、47KD和48KD多肽上。與SSA抗體並存對診斷SS有特異性。
(五)抗Scl-70抗體
Scl-70抗原表位在86KD、70KD的片段上，是DNA拓撲異構酶I的降解產物，抗Scl-70抗體幾乎僅見於硬皮病，陽性率30%左右。
(六)抗Jo-1抗體
Jo-1抗體是組氨醯tRNA合成酶，抗原表位在55KD多肽，抗Jo-1抗體是多發性肌炎和皮肌炎的標記抗體，陽性率25-40%。
(七)抗核糖體抗體
核糖體在核仁合成，然後轉入胞漿，抗原表位在大亞基上的38KD、16KD和15KD多肽上。抗核糖體抗體陽性主要見於SLE，陽性率20-30%。
檢測以上抗體的方法主要有：對流免疫電泳法(CIE)、雙相免疫擴散法，免疫印跡試驗(IBT)，免疫斑點技術和ELISA法等。一般採用兔胸腺或牛胸腺提取物或細胞提取物作為抗原。近年來，應用分子重組抗原制備的試劑盒已投入市場。
〖參考值〗陰性
〖臨床意義〗
1. 抗n RNP抗體：見於35-40%的SLE病人，在MCTD病人中陽性率可達95-100%，也可見於其他風濕性疾病。
2. 抗Sm抗體：主要見於SLE及重疊綜合征，急性期病人75%為陽性。一般SLE患者30-40%陽性率。但Sm抗體陽性者90%以上為SLE，故稱之為SLE的標記抗體。
3. 抗SSA和抗SSB抗體：見於40-45%的SS病人。抗SSA抗體也可見於25%的SLE病人及其他風濕性疾病;抗SSA抗體與新生兒狼瘡和先天性傳導阻滯有關。抗SSA抗體也可見於病毒感染等非風濕性疾病。抗SSB抗體對原發性乾燥綜合征較特異，但陽性率僅27%左右。
4. 抗Scl-70抗體：一般僅見於系統性硬化症病人，陽性率20-60%。
5.抗Jol-1抗體見於30%的多發性肌炎病人及10%的皮肌炎病人。抗Jol-1抗體與多發性肌炎病人間質性肺炎的發生率增加有關。
6.抗rRNP 抗體：主要見於SLE患者，陽性率20%左右，與中樞神經系統病變有關，多在疾病活動期出現。
〖注意事項〗
判斷試驗結果時要結合臨床表現作出評價，也應根據試驗方法來作出解釋。對流免疫電泳法和雙相擴散法敏感性低，但特異性較高;免疫印跡法、斑點免疫法及ELISA方法敏感性提高，但特異性相對減少。
三.抗雙鏈DNA抗體(Antidouble-stranded DNA ， A-dsDNA，)
A-dsDNA 對SLE有高度特異性，是針對細胞核脫氧核糖核酸的自身抗體。臨床上常用的檢測方法有：①Farr¡®s法：125I-DNA與待檢標本中的A-dsDNA形成免疫復合物，加飽和硫酸銨使復合物沉澱，以γ計數器分別測定上清中游離及沉澱物中已結合的125I-DNA含量，可計算出血清中A-dsDNA的結合活性。
②ELISA法：將小牛胸腺DNA包被在微孔板中，加入病人血清，如有A-dsDNA則結合到微孔板上，加入酶標抗人IgG，加入底物顯色後經酶標儀比色可知血清中A-dsDNA抗體的量。
③免疫熒光法：採用馬疫錐蟲或短膜蟲作為基質，加入病人血清。血清中的A-dsDNA與膜上的天然DNA結合，加入熒游標記抗人IgG。馬疫錐蟲和短膜蟲的動基體會發出綠色熒光。
④金標斑點法：雙鏈DNA包被於硝酸纖維膜上，加入病人血清，加入金標記抗人IgG，如有A-dsDNA存在，會顯示紅色斑點。
〖參考值〗依方法不同參考值也有不同。
Farr¡®s法：≤ 0.20 免疫熒光法：<1:10ELISA法：依試劑盒而定，一般<70u
金標法：陰性
〖臨床意義〗
A-dsDNA 陽性對 SLE 有較高的特異性。大約60%的活動性 SLE 病人會出現 A-dsDNA。其他風濕性疾病也會出現，但陽性率非常低，如RA、S.S。
〖注意事項〗
假陽性結果非常少見，但陰性亦不能排除SLE的診斷。
四.抗中性粒細胞胞漿抗體( Antineutrophil cytoplasmic antibody,ANCA) 測定
ANCA是針對中性粒細胞胞漿多種成分的 自身抗體，主要有髓過氧化物酶(MPO)和蛋白酶3( Proteinase 3 ，PR3)的抗體 。主要用於診斷Wegener 肉芽腫和系統性血管炎，特別是伴有腎病、呼吸疾病或其他類型血管炎引起多器官損害的患者。檢測方法有IFA、ELISA、 IBT等。
〖參考值〗 陰性。
〖臨床意義〗
免疫熒光法檢查ANCA陽性一般分為兩種熒光類型，一種是胞漿型，稱為cANCA，一種是核周型，稱為pANCA。cANCA產生彌漫性細胞漿染色，是針對PR3的抗體 ，一般見於wegener肉芽腫病(WG)，特別是腎和肺受累的病人。pANCA產生核周染色，是針對MPO的抗體 ，主要見於系統性血管炎病人。
在WG病人中，cANCA陽性率在活動期可達80%，且有較高的抗體效價。在緩解期抗體陽性率低，且效價下降，或完全消失。
〖注意事項〗
ANCA 陽性也可見於 Good-Pastare¡®s 綜合征和SLE病人。WG的診斷不能單純依賴ANCA的結果，還要結合其他臨床表現，試驗室檢查和組織病理學檢查才能確定。ANCA效價不能完全反應疾病的活動以及對治療的反應。pANCA 陽性不是特異性的抗MPO抗體，也可以是抗粒細胞胞漿中其他酶的抗體，如彈性蛋白酶，組織蛋白酶G等。ANCA檢測應注意排除其他自身抗體的交叉反應，如ANA。因其可產生假陽性應注意鑒別，並進行ANA檢測。
五、抗線粒體抗體(Antimitochondrial antibody,AMA)
AMA是以細胞漿中的線粒體為抗原的一種自身抗體，無器官和種屬特異性。一般採用大鼠腎及胃作為抗原基質，採用IFA檢測，陽性可見大鼠腎和胃的細胞漿呈現細顆粒狀熒光。
採用免疫印跡法可將與線粒體抗原的反應分為從M1到M9九種類型，高效價的M2和M9型自身抗原與原發性膽汁性肝硬變相關。目前已有檢測M2的ELISA試劑盒供應。
〖參考值〗 陰性 >1：10 為陽性
〖臨床意義〗
AMA是原發性膽汁性肝硬化的標記抗體，陽性率達90%，並且50%患者抗體效價達1：1280或更高。此外，也可見於慢性活動性肝炎、隱匿性肝硬化。肝外阻塞性黃疸患者AMA常陰性，因此可作為鑒別診斷的一個指標。正常人中陽性率<10%，且效價較低。
六.抗平滑肌抗體(Antismooth muscle antibody，ASMA )
ASMA是抗肝細胞膜上一種肌動球蛋白的自身抗體。這種肌動球蛋白與平滑肌有交叉抗原性，因此與平滑肌有反應。一般採用IFA法，以大鼠胃作為抗原基質，陽性可見胃壁平滑肌呈現亮綠色熒光。
〖參考值〗 陰性，>1：10為陽性
〖臨床意義〗
主要見於明顯活動期的自身免疫性肝炎患者，陽性率在80%以上，效價 在1：80以上。急性病毒性肝炎早期ASMA也可陽性，且早於 HBsAg出現。其他疾病如傳染性單核細胞增多症、SS、RA、支原體肺炎、腫瘤和病毒感染者也有不同程度的陽性率。正常人中僅有2%陽性。
七. 抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA)和抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA)
ATGA 是由甲狀腺炎引起的自身抗體 ，抗原是一種糖蛋白。ATGA有器官特異性而無種屬特異性。ATMA 的抗原是甲狀腺濾泡上皮細胞胞漿內的脂蛋白。常用檢測方法有：IFA、IHA、RIA、ELISA等。
〖參考值〗
IHA： 血清效價 ≤1：32， >1：32為陽性，ATGA 和ATMA
ELISA：正常為陰性，P/N < 2.1，>2.1 為陽性, ATGA 和 ATMA
RIA：ATGA <30%;ATMA <15%
l〖臨床意義〗
主要見於橋本甲狀腺炎、甲亢、甲低患者，也可見於甲狀腺瘤、惡性貧血、重症肌無力、Edison 病和肝臟疾病等。SLE及其他自身免疫病也有一定的陽性率。
正常人也可檢出這兩種抗體 ，並且隨著年齡的增長，陽性率增加，特別是40歲以上婦女，可達18%左右。
應該注意到，有的患者ATGA陰性，但ATMA陽性，因此兩種抗體同時檢測可提高抗甲狀腺自身抗體的檢出水平。
八. HLA-B27測定
HLA-B27 抗原為人類MHC I類 抗原B位點的表達產物，可分為幾種亞型。HLA -B27的檢測方法有多種，補體依賴性微量細胞毒法(CDMA);流式細胞儀法;玫瑰花法;ELISA法;等電聚焦法等。近來應用PCR法檢測HLA-B27，敏感而特異，並且可進行B27亞型的分析。
l〖參考值〗
非洲-美洲人：3-4%;l 高家索人：6-8%;l 亞洲人：1%。
〖臨床意義〗
強直性脊柱炎(AS)患者HLA-B27陽性率為90-95%。大約42%的青年類風濕關節炎(JRA)存在HLA-B27，Reiter¡®s 綜合征患者陽性率大約79%。此外，腸病性關節炎、銀屑病性關節炎也有一定的陽性率。RA病人陽性率不高。
〖注意事項〗
在評價HLA-B27陽性結果時應結合臨床表現綜合考慮，不能單純依靠此結果作出診斷。
其他免疫指標及檢測
C反應蛋白(C-Reactive Protein，CRP )
CRP是一種急性時相蛋白，由肝細胞合成，可與肺炎球菌細胞壁C多糖發生沉澱反應，故稱CRP。在各種炎症的急性期或組織創傷時，血清CRP濃度急劇升高。CRP不僅可結合多種細菌( bacteria ),真菌(fungi)及原蟲(protozoal)體內的多糖物質，而且在鈣離子存在下，還可以結合磷脂醯膽鹼和核酸。結合後的復合體具有激活補體(complement)的作用。〖參考值〗 <8mg/L
〖臨床意義〗
血清CRP 升高多見於：急性、慢性細菌感染;組織損傷壞死;急性心肌梗死;各種炎症;外科手術;腫瘤浸潤;急性風濕熱和活動性類風濕關節炎，以及其它關節炎性疾病。但病毒性感染一般CRP不升高，因此可作為病毒性感染和細菌性感染的'鑒別指標。
〖注意事項〗
CRP測定方法不同，在判定結果時應予考慮。此外，雌激素、口服避孕葯可使CRP增高，皮質激素和抗炎葯可使CRP下降。
類風濕因子(Rheumatoid Factor，RF)
RF是一種自身抗體，可與變性的IgG發生反應，與IgG 的Fc段結合。RF可分為IgG、IgM、IgA、IgD和IgE五型。凝集試驗檢測的主要為IgM型RF。RF主要見於類風濕性關節炎(rheumatoid arthritis RA)，也可見於其他結締組織病及其他疾病。檢測方法有乳膠凝集試驗、致敏羊紅細胞凝集法、速率散射比濁法、ELISA法等。
〖參考值〗
乳膠法：陰性或<1：20 速率散射比濁法：<30IU/ml
〖臨床意義〗
RF見於90%以上的RA病人，效價常在1：160以上，含量多>80IU/ml。，一般方法所檢測的大部分是IgM-RF。
關於RF分型，臨床應用尚不廣泛。多數作者認為：IgM-RF效價高低可在一定程度上反映RA的活動性，但無明確的密切關系;IgG-RF與RA患者的滑膜炎、血管炎和關節外症狀密切相關;IgA-RF見於RA、硬皮病、Felty綜合征和系統性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus， SLE)，也是RA臨床活動性的一個指標;IgE-RF 除RA患者外，也見於Felty綜合征和青年型RA。高水平 IgM-RF陽性病人預後較差。
從早期RA患者的X線片分析，IgM-RF持續陽性的病人更易發生骨侵蝕。IgA-RF在SS病人中陽性率較高;IgE-RF在惡性關節炎病人中陽性率較高。在RA病人，高效價RF存在並伴有嚴重的關節功能受限時，常提示預後不良。
〖注意事項〗
正常人也可有4%左右的陽性率。隨年齡增加，RF的檢出率會增加。RA病人RF也可陰性，不能單純依靠RF陽性來診斷RA。RF還可見於其它多種疾病，其中最常見的是乾燥綜合征(S.S)， 發生率在90%以上，且含量一般較高。其它常見的RF陽性的疾病有： SLE、系統性硬化症、高球蛋白血症、結節病、梅毒、麻風、病毒感染、肝硬化等等。有些效價可在1：160以上，含量在80IU/ml以上，在解釋結果時應予注意。
冷球蛋白(Cryoglobulin CG，)
冷球蛋白是一種球蛋白，4℃時發生沉澱，30 ℃易聚合，37℃又溶解。CG分為三類：
1.I型(單克隆型)：大多為IgM或IgG 型，無抗補體作用。
2.II型(混合型)：兩種或兩種以上單克隆Ig混合，以IgM+IgG最常見，也可見IgA+ IgG;IgG+IgM+IgA等。有抗補體作用。
3. III型(多克隆型)： 沒有單克隆蛋白。
其檢測方法有血球壓積管法(定性)和分光光度計法(定量)。
〖參考值〗 定性法：陰性 定量法：<80μg/ml。
〖臨床意義〗
SLE 病人血清中可出現混合型CG。在血管炎、腎小球腎炎、淋巴細胞增生性疾病也可陽性。在巨球蛋白血症或多發性骨髓瘤病人伴雷諾氏現象時與I型冷球蛋白血症有關。 II型冷球蛋白血症與自身免疫病例如血管炎、腎小球腎炎、SLE、RA 和 SS 有關。在某些感染如肝炎、傳染性單核細胞增多症、巨細胞病毒感染和弓形蟲病也可出現。
小結:
胞漿抗體
Hep-2細胞具有許多胞漿抗原。如有特異性胞漿抗體存在，可出現強陽性胞漿熒光。包括抗線粒體抗體(AMA)、抗核糖體抗體、抗肌動蛋白抗體即抗平滑肌抗體(ASMA)、抗高爾基體抗體、抗絲抗體(如Vimentin)。一般最有意義的是AMA和ASMA，可是熒光染色Hep2細胞卻不能鑒定這兩種抗體，可應用鼠腎和鼠胃切片作進一步分析。
系統性風濕病活動期的評價
自身抗體檢測以診斷全身性疾病比監測該病活動更有意義。但抗dsDNA抗體效價卻與活動性有關。應定期檢測抗dsDNA抗體的效價及C3、C4的含量。以及測定循環免疫復合物(CIC)的含量。ESR和CRP在炎症反應時常常升高。RA病情加重時，CRP明顯增高。SLE活動期，CRP一般正常。
器官特異性自身免疫性疾病
組織抗體
許多自身抗體可採用IFA測定，用鼠腎和胃的切片能測出抗線粒體、平滑肌、肝腎微粒體和胃壁細胞的抗體。甲狀腺組織切片可測定抗甲狀腺自身抗體。
自身免疫性肝病
在肝臟病變中，ANA陽性率可達40-80%。抗線粒體抗體(AMA)與原發性膽汁性肝硬變有關。特別是高效價的M2和M9線粒體抗原。
約一半的自身免疫性肝炎的病人有較高效價的ASMA。此外，肝腎微粒體抗體(LKMAs)，抗可溶性肝抗原(SLA)抗體，抗肝細胞膜抗體等也可用於自身免疫性肝病診斷和監測。
其他
腎臟疾病常測定的抗體有抗dsDNA抗體，抗腎小球基底膜抗體等，還可測定CIC，以及作腎組織活檢進行熒光染色。
韋格納肉芽腫病是一種發生於上下呼吸道的壞死性血管炎，也累及腎臟，病人常死於腎和肺衰竭。檢查抗中性粒細胞胞漿抗體(ANCAs)是診斷指標之一。也可通過ELISA測定抗髓過氧化物酶抗體，抗蛋白酶3抗體，有助於診斷和鑒別診斷。
胃腸道疾病中，惡性貧血與抗胃壁自身抗體有關，與抗內因子抗體的相關性達75%。抗胰島細胞抗體(ICAs)，抗谷氨酸脫羧酶抗體(GADA)與I型糖尿病有一定關系。重症肌無力病人可出現抗骨骼肌抗體。多發性肌炎和皮肌炎可有抗Pm1和抗Jo-1抗體。抗心肌抗體常見於心肌梗死、心臟手術或心肌損傷後。
;Ⅱ 間接免疫熒光抗核抗體檢測怎麼看
看有熒光增強標記的地方。間接免疫熒光抗核抗體檢測技術是直接免疫熒光技術的改進。待檢細胞首先用未標記的抗體處理，使之與特異的抗原形成復合物，然後再用抗抗體的熒游標記抗體著色，即可檢測出特異抗原在細胞中的存在部位，具有熒光增強效應。
間接免疫熒光法（IIF）這是進行抗核抗體、抗核仁抗體和抗胞漿抗體篩選檢測的最有效方法。在些檢測系統中，以組織培養細胞和器官的冷凍片切為反應底物。
Ⅲ 抗核抗體（ANA）高應該和什麼疾病有關
ANA包含一組自身抗體，無種屬和器官特異性，見於多種疾病，缺乏特異性。在自身免疫性疾病中，細胞核常成為自身免疫反應的靶子。ANA主要是指對核內成分所產生的抗體，此外也包括對核內成分相同的物質所產生的抗體。所以，ANA是抗核酸抗體和抗核蛋白抗體的總稱。通常是7sIgG，但也可以是19sIgM。中國醫學健康網 【正常值】間接免疫熒光試驗：陰性.酶免疫染色試驗:陰性。PAP染色法:陰性.ANT和抗ds-DNA抗體聯合測定：陰性。臨床最常用的ANA測定方法是間接免疫熒光抗核抗體（IFANA）檢測。臨床上以血清稀釋度大於1:6以上判定為陽性。 抗核抗體的核型:ANA的核型有一些臨床參考價值.某種核型可能伴有某種特定的ANA和風濕病 ，但這種關聯是不可靠的，況且當血清中含有多種抗體時，隨血清稀釋度不同，可能會表現不同核型.核型的價值大部分被測定特異抗體所代替.但熟知核型的斟基本臨床意義仍然是風濕科醫師的基本功之一。 ANAs的熒光染色分型見附表.其中常見的有以下幾種: 1.均質型:核質染色均勻一致，此型與抗組蛋白抗體和抗DNA抗體有關; 2.顆粒型（斑點型）:核質染色呈斑點狀，核膜存在，此型多與可溶性核抗原（ENA）抗體有關，多見於混合型結締組織病. 3.核周（核膜）型:即周邊型.熒光包繞在核膜周圍，多與抗雙鏈DNA抗體有關，主要見於累及腎臟的SLE患者，且和疾病的活動性明顯有關，緩解期以均質型多見. 4.核仁型:僅核仁染色，與4~6sRNA抗體有關，在系統性硬化症中較常見，也可見於口和眼乾燥及關節綜合征等. 5.著絲點型:處於分裂時相的Hep-2細胞為底物可出現依著絲點散在排列的特殊點狀圓形，與斑點型的區別是前者核膜消失. 間接免疫熒光抗核抗體（IFANA）檢測的核型與臨床意義 鏡下核型分裂相核染色相關抗體常見疾病 周邊型均染抗ds-DNA抗體或抗脫氧核糖核蛋白（ds-DNA+組蛋白，DNP）高滴度僅見於SLE 均質型均染抗組蛋白抗體、抗DNA抗體引起狼瘡細胞形成見於所有的結締組織疾病(CTD)、SLE、RA及葯物性SLE 顆粒型粗顆粒型 細顆粒型抗U1RNP抗體、抗Sm抗體、抗SS-A/Ro抗體、抗SS-B/La抗體、抗nRNP抗體、抗Scl-70抗體、抗PCNA抗體等抗鹽水可提取的核抗原(ENA)抗體見於SLE、RA、PSS和SS、MCTD.顆粒型熒光陰性則無需免疫印跡法進行抗ENA抗體的特異性檢測 核仁型細顆粒抗RNA聚合酶-1抗體、抗核仁小分子RNA（TH抗原）抗體、抗PM-Scl抗體、抗核糖體抗體、抗U3-RNP抗體硬皮病，也見於DM、RA、SS、SLE等 著絲點型趨向於線性染色抗RNA抗體、抗PM-Scl抗體硬皮病、尤其是硬皮病的CREST綜合症80%陽性 核糖體型SLE 核膜型陰性抗Lamins（核層素）抗體，多與dsDNA有關SLE、狼瘡腎炎 胞漿型 其他臨床意義:（1）SLE:約99%（86%~100%）的活動期SLE病人ANA陽性，其滴度也常>1:80，但它的特異性差.對於未經治療的疑似患者，多次檢查抗核抗體，若結果陰性，應考慮其他疾病的可能.ANA陽性本身不能確診任何疾病，但ANA陽性且伴有特徵性狼瘡症狀則支持狼瘡診斷.ANA陰性幾乎可除外SLE的診斷.但應注意有5%的SLE病人ANA可為陰性，這其中大部分為抗SSA抗體、抗SSB抗體陽性，因為測定ANA通常用鼠肝或鼠腎做底物，而這些組織核內含SSA、SSB、Jo-1、rRNP抗原相對較少，所以不易測出其相應抗體.可加做人喉癌上皮細胞為底物的方法進行檢測. 有人認為效價滴度可作為反映病情的參考指標.由於抗脫氧核糖核蛋白因子，尤其是抗脫氧核糖核酸因子與病情活動性有關，當病性好轉或用大量皮質激素治療後，其滴度下降甚至完全消失.一般說來抗核抗體滴度的高低大多數與病性的好轉，惡化是平行的.即認為ANA在狼瘡活動期陽性率和滴度均增高，在緩解期陽性率和滴度均減低.但總的來說ANA抗體陽性與疾病的活動相關性不大. （2）其他結締組織病:可見於盤狀紅斑性狼瘡、皮肌炎、類風濕關節炎、硬皮病、乾燥綜合征、血管炎等.在非狼瘡性結締組織病中，ANA陽性率為50%，ANA作為自身免疫性結締組織疾病的篩選試驗必須強調中高滴度. （2）正常人:只有少數ANA陽性.一般當血清稀釋度1:4時，男性有3%陽性，女性有7%陽性，而80歲以上健康老年人陽性率可達49%. （3）其他疾病:消化系疾病（如慢活肝、潰瘍性結腸炎）、造血系統疾病
Ⅳ 臨床免疫檢驗常用的分析技術
臨床免疫檢驗常用的分析技術
臨床免疫檢驗常用的分析技術有哪些你知道嗎?下面是我為大家帶來的臨床免疫檢驗常用的分析技術的知識，歡迎閱讀。
一、免疫標記技術：2種分類
1.(1) 免疫組化技術(immunohistochemical technique): 用於組織切片或其他標本中抗原抗體的定位(2)免疫測定(immunoassay): 用於液體標本中抗原或抗體的測定.
2.(1) 免疫熒光技術 (2) 酶免疫技術 (3) 放射免疫技術(4) 金標技術(5)化學發光技術
酶免疫技術—固相酶免疫技術―酶聯免疫吸附測定(ELISA)
ELISA方法類型與操作步驟
雙抗體夾心法：檢測抗原最常用的方法
原理(操作步驟)： (1) 特異性抗體包被載體形成固相抗體. (2) 洗去未結合的抗體和雜質. (3) 加入待測樣品，使其中相應抗原和固相抗體呈特異性結合成復合物. (4) 再洗滌除去未結合的物質.(5) 加酶標抗體，使之與固相上的抗原呈特異性結合.(6) 經充分洗滌後除去未結合的游離酶標記抗體.(7) 加入相應酶的底物，固相化的酶催化底物變成有色產物，顏色反應的程
度與固相上抗原的量有關.
適用范圍：檢測抗原的最常用方法 ,用此方法檢測的`抗原，應至少有2個以上結合位點，故不能用以測定半抗原物質。
2、競爭法：(可用於測定抗原或抗體)
原理(操作步驟)：以測定抗原為例(1) 將特異性抗體包被載體，使形成固相抗體,(2) 洗去雜質，待測孔中同時加待測標本和酶標記抗原，使之與固相抗體反應。如待測標本中含有抗原，則與酶標記抗原共同競爭結合固相抗體。待測標本中抗原量越多，酶標記抗原結合量越少(3) 洗滌除去游離酶標記物後，加底物顯色(4) 結果是不含受檢抗原的對照孔，其結合的酶標記抗原最多，顯色最深。對照孔與待測孔顏色深度之差代表受檢標本中的抗原量。待測孔越淡, 標本中抗原量越多。
3、間接法：(可檢測各種相應抗體)
原理(操作步驟)：(1) 將特異性抗原包被載體，使形成固相抗原; (2) 洗去未結合的物質,加入待測樣品，使其中待測的特異性抗體與固相抗原相結合形成固相抗原抗原復合物;(4)再經洗滌後，固相上僅留下特異性抗體; (5) 加酶標抗人球蛋白(酶標抗抗體)，使與固相復合物中抗體結合，從而使待測抗體間接標記上酶;(6) 洗滌除去多餘的酶標抗體，固相結合酶量就代表待測抗體的量; (7) 最後加入底物顯色，其顏色深淺可代表待測抗體量。
免疫熒光法---抗核抗體的檢測
二、沉澱反應
可溶性抗原與相應抗體特異性結合所出現的反應。反應分為兩個階段:(1) 抗原抗體特異性結合;(2) 形成可見的免疫復合物。
三、凝集反應
細菌和紅細胞等顆粒性抗原與相應抗體結合後，出現肉眼可見的凝集(agglutination)現象。
凝集反應的發生分為兩個階段：(1)抗原抗體的特異結合;(2)出現可見的顆粒凝聚。
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