牛奶中抗生素檢測方法

① 根據檢測原理不同,食品中抗生素殘留的檢測方法可分為哪幾種

分為四種：酶抑制率法 分光光度法 膠體金法 滴定分析法

酶抑制率法

在一定條件下，有機磷和氨基甲酸酯類農葯對膽鹼酯酶正常功能有抑製作用，其抑制率與農葯的濃度呈正相關。正常情況下，酶催化神經傳導代謝產物（乙醯膽鹼）水解，其水解產物與顯色劑反應，產生黃色物質，在412nm處測定吸光度隨時間的變化值，計算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量的有機磷或氨基甲酸酯類農葯的存在。

分光光度法

不同的物質由於其分子結構不同，對不同波長光的吸收能力也不同，因此具有其特有的吸收光譜。即使是相同的物質由於其含量不同，對光的吸收程度也不同。標准曲線法就是利用這一特性來測定物質含量，先配製一系列濃度由小到大的標准溶液，分別測定出它們的A值，以A值為橫坐標，濃度為縱坐標，作標准曲線。在測定待測溶液時，操作條件應與製作標准曲線時相同，以待測液的A值從標准曲線上查出該樣品的相應濃度。

膠體金法

將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在膜上，膠體金標記試劑（抗體或單克隆抗體）吸附在結合墊上，當待檢樣本加到試紙條一端的樣本墊上後，通過毛細作用向前移動，溶解結合墊上的膠體金標記試劑後相互反應，再移動至固定的抗原或抗體的區域時，待檢物與金標試劑的結合物又與之發生特異性結合而被截留，聚集在檢測帶上，產生顯色反應。當光源照射到檢測帶，反射光被收集並轉化為電信號，根據信號的強弱即可判斷被測物質的陰陽性。

滴定分析法

滴定分析法是將一種已知准確濃度的試劑溶液，滴加到被測物質的溶液中，直到所加的試劑與被測物質按化學計量定量反應為止，根據試劑溶液的濃度和消耗的體積，計算被測物質的含量。

② 怎樣辨別有抗奶

要想辨別「有抗奶」和「無抗奶」，目前有多種方法可供檢測。一是TTC法，它是乳業現行國家標准中規定的檢測方法，針對青黴素、鏈黴素、慶大黴素、卡那黴素4類抗生素有效，但耗時較長且精度無法估計，檢測限大於10ppb。二是美國Snap檢測法，主要針對β-內醯胺類抗生素，採用酶聯免疫法，對於青黴素檢測精度可達到5ppb，幾分鍾即可讓「有抗奶」現出原形，一般用於乳品廠商對原料奶進行快速篩選；三是高效液相色譜檢測法，它檢測的種類和范圍更廣，數據更精確，但程序復雜操作難度大，一般只有質量監管機構和科研檢測機構才使用。此外，今年光明還在業內率先增加了歐盟ECLIPSE 50方法(簡稱E50方法)，它主要針對β-內醯胺類，磺胺葯物，四環素類葯物，大環內酯物，氨基配糖類30多種抗生素，對抗生素檢測具有廣譜性，從而更有效地保證了乳品安全。

③ 請教檢測食物含抗生素的簡單方法（我是老師想做這方面實驗）

牛奶中抗生素殘留的幾種常用檢測方法
隨著奶牛飼養業的發展，抗生素在預防和治療奶牛疾病方面得到廣泛的應用。生鮮牛奶中抗生素的來源主要是：第一，治療泌乳期病牛時使用的抗生素會從奶牛體內移行到乳腺殘留進入牛奶中，資料表明治療後的奶牛，其擠出的牛奶5天內都有抗生素殘留；其二，為了預防奶牛疾病並提高產量，在奶牛飼料中添加抗生素也會造成牛奶中抗生素的殘留；第三，由於牧場管理不善，擠奶、儲奶沒有嚴格的衛生制度和配套的設施，人為添加或造成牛奶抗生素的污染。
牛奶中含有抗生素，不僅對人的健康造成很大的危害，而且對乳品加工企業帶來經濟損失（因無法生成酸奶和乳酪）。因此必須嚴格控制牛奶中抗生素殘留，除了要做好科學飼養、精心管理；正確擠奶和預防疾病外，還要規范抗生素的使用，按國標中有關規定，用葯後的奶牛5天後所產的牛奶才可作為原料乳，並且要檢測其殘留。世界糧農組織（FAO）、世界衛生組織（WHO）、歐盟（EC）及美國的食品和葯品管理局（FDA）等對食品中抗生素最大殘留量都有明確的規定，我國也有鮮奶中抗生素殘留量檢驗標准（GB4689.27—94）。
目前，鮮奶中抗生素殘留的檢測方法大致分為三類：生物測定法（微生物測定法、放射受體測定法）、免疫法（放射免疫法、熒光免疫法、酶聯免疫法）、理化分析法（波譜法、色譜及聯用技術）。下面介紹幾種常用的牛奶中抗生素殘留檢測方法。
TTC法
TTC法是我國鮮奶中抗生素殘留量檢驗標准（GB4689.27—94）的檢測法，屬生物檢測法。其測定原理基於抗生素對微生物的抑製作用。如果牛奶中含有抗生素，則加入菌種（嗜熱鏈球菌）經培育2.5~3小時後,加入TTC指示劑(三苯基四氮唑)不發生還原反應,所以樣品呈無色狀態;如果牛奶中不含抗生素,則樣品呈紅色.這樣實驗後樣品顏色不變的為陽性,樣品染成紅色的為陰性。
TTC法的具體操作步驟:
1.菌液制備:將單菌種(嗜熱鏈球菌)以脫脂乳為培養基,在36±1℃培養箱中培養15小時後,再以脫脂乳以至於1:1稀釋待用;
2.取待檢樣液9mL,在80℃水浴加熱5分鍾後冷卻到37℃以下,加活菌液1mL,在36℃±1℃水浴2小時,加入4%的TTC指示劑0.3mL, 36℃±1℃水浴培養30分鍾;
3.若樣液顏色不變為陽性,呈紅色為陰性;若陽性的樣液,再置於水浴中培養30分鍾,不顯色的為陽性,呈紅色為陰性.
TTC法測定各種抗生素的靈敏度為:青黴素:4ppb,鏈黴素:500ppb,慶大黴素:400ppb,卡那黴素:5000ppb.它具有費用低,易開展的優點;缺點是耗時長，要求操作人員需有一定專業知識且實驗過程中菌液的制備、水浴過程式控制制都要求嚴格遵守操作規程，否則易出現假陽性，以致出現檢驗結果的不穩定性。
Delvotest? sp法（戴爾沃檢測法）
該法最早在香港傳到廣東的，其使用是基於20世紀80年代初香港要求廣東出口的生奶必須「無抗」且要求採用Delvotest法檢測。該方法也是生物測定法，其試劑是由荷蘭DSM公司生產並由AOAC認證。原理是利用微生物—嗜熱芽胞菌在64℃條件下培養2.5～3小時後會產酸,酸引起指示劑BCP(溴甲酚紫)變為黃色;若牛奶樣品中不含抗生素,培養後樣品呈黃色,如樣品中含有抗生素, 嗜熱芽胞菌生長受到抑制而無法產酸,指示劑將不變色.
Delvotest? sp 法的操作步驟:
1.以無菌操作將一片營養葯片夾放入小試管內;
2.用微量移液管將0.1mL牛奶樣品注入小試管內;
3.把小試管放入已預熱至64℃的水浴箱或恆溫器中培養;
4).定時3小時取出觀察顏色變化.如果底部2/3的固體介質是黃色,則為陰性, 如果底部2/3的固體介質是紫色,則為陽性.
Delvotest? sp 法具有廣譜性,可檢測到?-內醯胺類抗生素在內的更多抗生素,如磺胺類、四環素類、大環內酯類、氨基糖苷類、氯黴素等，其中對青黴素和磺胺類抗生素特別靈敏. 其靈敏度為：青黴素:3ppb,鏈黴素:300ppb,慶大黴素:400ppb,卡那黴素:2500ppb。Delvotest? sp 法集操作方便，嚴格實用，容易判斷，結果可靠，費用適中等優點；但也易出現假陽性，實驗證明：當牛奶樣品中添加微生物防腐劑（如乳酸鏈球菌素—Nisn）或樣品中有足夠的洗滌劑殘留時，便可影響嗜熱芽胞菌生長而使實驗為陽性。
Snap?法
該方法是酶聯免疫法，由美國IDEXX公司生產其檢測分析儀及其試劑盒，均獲得AOAC認證，它利用了竟爭酶聯免疫技術。其基本原理是用特異性抗體將固相載體激活，加入含待測抗原的溶液和一定量的酶標記抗原在45℃±5℃共同保溫，使樣品內的抗生素與內置抗生素標志物竟爭與固定的抗體結合，然後進行洗滌和顯色，內置抗生素標志物與固定的抗體結合形成的復合體，通過酶的作用分解可形成有色物質，通過測定色度並與參照物對照，就可以確定結果是陽性或陰性。
Snap?法操作步驟：
1.加入乳樣於樣品管中,搖勻,加熱樣品和檢測板5分鍾;
2.加入乳樣於樣品孔中,當激活圓環開始退卻時,按Snap鍵;
3.反應4分鍾,由Snap?讀數儀讀取並列印結果.檢測讀數小於1.05時判為陰性,大於1.05時判為陽性.
Snap?法是一種將酶化學反應的敏感性和抗原抗體免疫反應的特異性相結合的方法,其敏感性和特異性好,檢測的靈敏度以普遍使用的?-內醯胺類計：青黴素:5ppb,阿莫西林:10ppb,氨苄西林:10ppb,頭孢西林:8ppb.其他抗生素如四環素等的檢測,則需購買相應的試劑來檢測. Snap?法檢測結果快速准確, 9分鍾內即可檢測出牛奶中?-內醯胺類、四環素類、磺胺類等抗生素的殘留含量，且有半定量的讀數，可監控牧場用葯的情況；檢測儀器穩定性良好，結果重現性高，整個檢測過程簡單方便；但需購置專用儀器和試劑，成本較高。
高效液相色譜檢測法
它是一種理化檢測方法,是利用抗生素分子中的基團所具有的特殊反應來測定其含量.檢測的過程採用了氣相色譜理論,通過高壓液相和高靈敏度的檢測器,分離速度快、效率高和操作自動化。一般要經過樣品的提取、脫蛋白、離心、層析柱凈化、衍生化等步驟，能檢測抗生素的具體含量，敏感性較高，但檢測程序復雜，費用較高，需購買色譜儀等檢測設備，不適合小型檢驗室。
傳統的抗生素檢測方法不少,有的操作煩瑣,有的實驗條件要求高,有的檢驗時間太長;這些不僅會給乳製品生產企業造成經濟上和時間上的損失,而且檢測結果常常會被原輔材料和人為操作等因素所影響.鑒於牛奶中抗生素殘留是涉及人類健康的公共衛生問題,乳品企業及牧場應重視和加強檢測工作,應用一些簡單、快速和准確性高的方法來監控產品的質量，保證消費者的健康。
http://szddi.com/foodonline/newsdetail.asp?id=15933

反應原理
本產品主要是利用抗原與抗體的特異性免疫化學反應的基本原理來進行的。在整個反應當中,樣品中氯黴素含量越多，反應呈色就越淡。反之，樣品中氯黴素含量越少，則呈色越深。
試劑盒組成
1、微量測試孔：每條8孔，每板12條
2、氯黴素標准溶液：
0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35 ppb、4.05 ppb，1.5ml/瓶
3、10倍濃縮萃取稀釋液：一瓶，30ml/瓶
4、10倍濃縮洗滌液：一瓶，30 ml /瓶
5、氯黴素酶標記物： 一瓶，8 ml/瓶
6、底物溶液：一瓶，12 ml/瓶
7、反應終止液：一瓶，13 ml/瓶
使用說明
A、注意事項
1、使用前先將氯黴素標准溶液6瓶，濃縮萃取稀釋液，濃縮洗滌液，酶標記物，底物溶液及微量測試孔條置於室溫下，回溫30分鍾。
2、原倍萃取稀釋液及洗滌液配製
用蒸餾水將10倍濃縮萃取稀釋液及濃縮洗滌液分別以1： 9的比例稀釋(即1mL濃縮液+9mL蒸餾水)，即可作為樣品萃取稀釋液與微孔板清洗液。
3、回溫後，取出所需微量測試孔條，將剩餘板條立即放回鋁箔袋中用膠帶封好，置於4oC保存。
B、樣品制備
1.待測物為生乳，則依以下方法進行處理 (5倍稀釋)
取100ul待測生乳加入400ul萃取稀釋液，振盪混合後備用。
2.待測物為蜂蜜，則依以下方法進行處理
a.取2g蜂蜜、4ml蒸餾水與2ml 乙酸乙酯置入離心管中，震盪約5分鍾，使其充分混合均勻。
b.離心10分鍾(3000rpm)，取0.5ml上清液(乙酸乙酯)至玻璃管中，於50℃下氮氣吹乾(溫度請勿超過50oC)。
c.加入0.5ml萃取稀釋液，震盪約10秒鍾後備用。
3. 待測物為血清、則依以下方法進行處理
a.抽取待檢動物血液，離心或靜置取其較透明之上層液(血清層)使用，注意不要有溶血。
b.將3ml血清加入離心管中，再加入6ml乙酸乙酯，震盪混合約30秒。
c.離心10分鍾(3000rpm)，取2ml上層液(乙酸乙酯)至玻璃管中，於50oC下氮氣吹乾。
d.於此玻璃管中加入正己烷2ml，先將殘余物完全溶解後，再加入1 ml萃取稀釋液，震盪約30秒鍾。
e. 離心10分鍾(3000 rpm)，用吸管吸去上層液(正己烷) 及中間乳化層部分，棄掉。再吸取下層液(水層)備用。
f.若有乳化現象，請先將大部分上層液(正己烷)取出後，再將玻璃管置入80oC水中，隔水加熱約5~10分鍾，可改善乳化情形。
4. 待測物為雞肉或魚、蝦，則依以下方法進行處理
a.將3克樣品剪碎後放入50 ml離心管中，再加入6ml乙酸乙酯，並以均質機均質約1分鍾，再震盪約30秒。
b.離心10分鍾(3000rpm)，取2ml上清液(乙酸乙酯)至玻璃管中，於50oC下氮氣吹乾。
c.於此玻璃管中加入正己烷2 ml，先將殘余物完全溶解後(若未能完全溶解，可能會導致回收率降低)，再加入1 ml萃取稀釋液，震盪約30秒鍾。
d.離心10分鍾(3000 rpm)，用吸管吸去上層液(正己烷) 及中間乳化層部分，棄掉。再吸取下層液(水層)備用。
e.若有乳化現象，請先將大部分上層液(正己烷)取出後，再將玻璃管置入80oC水中，隔水加熱約5~10分鍾，可改善乳化情形。待測物為血清、則依以下方法進行處理
5.待測物為內臟(肝、心等)，則依以下方法進行處理(5倍稀釋)
同上述步驟a~d，但下層液吸出後，再以萃取稀釋液稀釋5倍(即下層液50ul加萃取稀釋液200ml)。
6.待測物為飼料，則依以下方法進行處理(10倍稀釋)
同上述步驟a~d，但下層液吸出後，再以萃取稀釋液稀釋10倍(即下層液30ul加萃取稀釋液270ml)。
C、操作步驟
本產品的酶標記物與氯黴素標准溶液均直接使用，無需再稀釋。
1、於適當微孔中分別加入100mL標准溶液(0,0.05,0.15,0.45,1.35和4.05ppb)。
2、在另外的微孔中加入100mL 已完成前處理的樣品溶液。
3、再於每一微孔中另再加入50mL酶標記物。
4、輕敲盤子四周，使其充分混合後於室溫下避光靜置溫育1小時。
5、將微孔中的反應液甩掉，再將洗液加滿每一微孔後甩掉，重復洗3次。
6、最後一次甩掉後，在吸水紙上拍干。
7、於每一微孔中加入底物溶液100mL後，輕敲盤子四周，使其充分混合。
8、於室溫下避光靜置溫育20分鍾。
9、於每一微孔中加入100mL反應終止液。
10、用酶標儀於波長450nm下判讀。
D、判定
1. 計算B/B0值。用樣品或標准液吸光度值(B)除以零標准吸光度值(B0)再乘以100%。
2. 以B/B0值為縱坐標，以標樣濃度的對數值為橫坐標，做標准半對數曲線。
3. 根據每個樣品的B/B0值就可從曲線上讀出相對應樣品的濃度。
4. 由於樣品經過了預先稀釋，因此根據標准曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋倍數。
E、標准曲線

F、靈敏度
氯黴素試劑檢測盒的平均檢測下限為 0.05ppb，此濃度之吸光值與陰性標准溶液(0ppb)之吸光值有明顯的差異。
G、 特異性
針對以下抗生素進行交叉反應之測試，結果如下：
Chloramphenicol =100%
Chloramphenicol(free base) <0.1%
Gentamycin <0.1%
Tetracycline <0.1%
Penicillin G <0.1%
Sulfamethazine <0.1%
H、再現性
針對氯黴素檢測試劑盒精密度測試，重復6次，所得不同濃度標准溶液的吸光值變異系數(%CV)如圖2所示，顯示氯黴素試劑盒有很高的再現性:

I、回收率
生乳(添加1.0ppb)104~117%
蜂蜜(添加0.3ppb)90~110%
蝦及魚肉(添加0.5ppb)95~110%
雞肉(添加0.5ppb) 90~120%
血清(添加0.5ppb)100~120%
內臟(添加1.0ppb) 100~120%
飼料(添加2.0ppb)80~110%

氯黴素檢測試劑盒
簡介
氯黴素(Chloramphenicol)是一種廣譜抗生素。由於其具有效果好以及價格低廉等優點，目前已被普遍應用於各類家禽、家畜、水產品及蜂製品的各種傳染性疾病的治療。然而氯黴素有其嚴重的副作用,它會抑制人體骨髓的造血功能，從而引起再生障礙性貧血和粒細胞缺乏症。目前，我國已禁止其使用。
我公司採用國內外先進的工藝與技術，研發出氯黴素ELISA檢測試劑盒，簡化了樣品處理方式，使用簡便，省時省力省錢，整個操作過程不到90分鍾。本產品檢測范圍廣(雞肉、魚、蝦、蟹、牛奶、血清、肌肉、組織、飼料與蜂蜜等)，回收率為80%－120%，靈敏度可達到0.05ppb，是各類企業及各級政府檢測機構的理想產品。
簡單
1． 樣品提取方便快捷。
2． 90分鍾得到結果。
3． 只需基本的實驗室設備。
4． 操作人員只需最基本的實驗知識。
准確
1． 結果重現性高。
2． 精確至0.05ppb。
3． 與其它抗體的交叉反應率極低。
技術支持
我們為用戶提供最方便、快捷、周到的服務。
產品規格
包裝：每包96孔
靈敏度: 0.05ppb
測試區間：0.05ppb－4.05ppb
檢測時間：80分鍾(提取後)
儲存條件：2-8℃

http://www.practical-bio.com.cn/htm/procts_05.htm

④ TTC法檢測牛奶中抗生素殘留的詳細方法

TTC法
TTC法是我國鮮奶中抗生素殘留量檢驗標准（GB4689.27—94）的檢測法，屬生物檢測法。其測定原理基於抗生素對微生物的抑製作用。如果牛奶中含有抗生素，則加入菌種（嗜熱鏈球菌）經培育2.5~3小時後,加入TTC指示劑(三苯基四氮唑)不發生還原反應,所以樣品呈無色狀態;如果牛奶中不含抗生素,則樣品呈紅色.這樣實驗後樣品顏色不變的為陽性,樣品染成紅色的為陰性。
TTC法的具體操作步驟:
1.菌液制備:將單菌種(嗜熱鏈球菌)以脫脂乳為培養基,在36±1℃培養箱中培養15小時後,再以脫脂乳以至於1:1稀釋待用;
2.取待檢樣液9mL,在80℃水浴加熱5分鍾後冷卻到37℃以下,加活菌液1mL,在36℃±1℃水浴2小時,加入4%的TTC指示劑0.3mL, 36℃±1℃水浴培養30分鍾;
3.若樣液顏色不變為陽性,呈紅色為陰性;若陽性的樣液,再置於水浴中培養30分鍾,不顯色的為陽性,呈紅色為陰性.
TTC法測定各種抗生素的靈敏度為:青黴素:4ppb,鏈黴素:500ppb,慶大黴素:400ppb,卡那黴素:5000ppb.它具有費用低,易開展的優點;缺點是耗時長，要求操作人員需有一定專業知識且實驗過程中菌液的制備、水浴過程式控制制都要求嚴格遵守操作規程，否則易出現假陽性，以致出現檢驗結果的不穩定性。

⑤ 乳品最好的抗生素檢測方法是什麼啊，急求！！

目前，鮮奶中抗生素殘留的檢測方法大致分為三類：生物測定法、免疫法、理化分析法。下面介紹幾種常用的牛奶中抗生素檢測方法。
（1）TTC法屬生物檢測法：
如果牛奶中含有抗生素，則加入菌種（嗜熱鏈球菌）經培育2.5~3小時後,加入TTC指示劑(三苯基四氮唑)不發生還原反應,所以樣品呈無色狀態;如果牛奶中不含抗生素,則樣品呈紅色.
（2）戴爾沃檢測法：
該法也是生物測定法，是利用微生物—嗜熱芽胞菌在64℃條件下培養2.5～3小時後會產酸,酸引起指示劑BCP(溴甲酚紫)變為黃色;若牛奶樣品中不含抗生素,培養後樣品呈黃色,如樣品中含有抗生素, 指示劑將不變色.
（3）Snap法
檢測結果快速准確, 9分鍾內即可檢測出牛奶中B-內醯胺類、四環素類、磺胺類等抗生素的殘留含量，且有半定量的讀數，可監控牧場用葯的情況；檢測儀器穩定性良好，結果重現性高，整個檢測過程簡單方便；但需購置專用儀器和試劑，成本較高。
（4）高效液相色譜檢測法
它是一種理化檢測方法,一般要經過樣品的提取、脫蛋白、離心、層析柱凈化、衍生化等步驟，能檢測抗生素的具體含量，敏感性較高，但檢測程序復雜，費用較高，需購買色譜儀等檢測設備，不適合小型檢驗室。
（5）納米膠體金層析法
該方法是基於競爭法膠體金免疫層析技術，將檢測液加入試紙卡上的樣品孔，檢測液中的抗生素與金標墊上的金標抗體結合形成復合物，若抗生素在檢測液中濃度低於100ng/mL，未結合的金標抗體流到T區時，被固定在膜上的抗生素BSA偶聯物結合，逐漸凝集成一條可見的T線；若抗生素濃度高於100ng/mL，金標抗體全部形成復合物，不會再與T線處抗生素BSA偶聯物結合形成可見T線。未固定的復合物流過T區被C區的二抗捕獲並形成可見的C線。C線出現則表明免疫層析發生，即試紙有效.結果解釋
陰性：C線顯色，T線肉眼可見，無論顏色深淺均判為陰性。
陽性：C線顯色，T線不顯色，判為陽性。
無效：C線不顯色，無論T線是否顯色，該試紙均判為無效。
保存和穩定性
4-30℃陰涼乾燥處保存，不可冷凍，避免陽光直曬，生產日期起18個月內有效。
納米膠體金層析法適用於樣品的初篩，檢測時間短，出結果速度快，且能在常溫下保存18個月之久，操作簡單，無需任何專業的技術，沒有檢測環境的需求不管是奶農還是奶站工作人員還是專業的檢測人員，都可以方便使用。

對比的話最後這個方法好些（納米膠體金層析法）， 抗生素檢測卡只需要9分鍾就搞定價格還算不錯給你個網址看看：
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⑥ 牛奶抗生素檢測有什麼好方法

牛奶中抗生素殘留的幾種常用檢測方法 隨著奶牛飼養業的發展，抗生素在預防和治療奶牛疾病方面得到廣泛的應用。生鮮牛奶中抗生素的來源主要是：第一，治療泌乳期病牛時使用的抗生素會從奶牛體內移行到乳腺殘留進入牛奶中，資料表明治療後的奶牛，其擠出的牛奶5天內都有抗生素殘留；其二，為了預防奶牛疾病並提高產量，在奶牛飼料中添加抗生素也會造成牛奶中抗生素的殘留；第三，由於牧場管理不善，擠奶、儲奶沒有嚴格的衛生制度和配套的設施，人為添加或造成牛奶抗生素的污染。 牛奶中含有抗生素，不僅對人的健康造成很大的危害，而且對乳品加工企業帶來經濟損失（因無法生成酸奶和乳酪）。因此必須嚴格控制牛奶中抗生素殘留，除了要做好科學飼養、精心管理；正確擠奶和預防疾病外，還要規范抗生素的使用，按國標中有關規定，用葯後的奶牛5天後所產的牛奶才可作為原料乳，並且要檢測其殘留。世界糧農組織（FAO）、世界衛生組織（WHO）、歐盟（EC）及美國的食品和葯品管理局（FDA）等對食品中抗生素最大殘留量都有明確的規定，我國也有鮮奶中抗生素殘留量檢驗標准（GB4689.27—94）。 目前，鮮奶中抗生素殘留的檢測方法大致分為三類：生物測定法（微生物測定法、放射受體測定法）、免疫法（放射免疫法、熒光免疫法、酶聯免疫法）、理化分析法（波譜法、色譜及聯用技術）。下面介紹幾種常用的牛奶中抗生素殘留檢測方法。 TTC法 TTC法是我國鮮奶中抗生素殘留量檢驗標准（GB4689.27—94）的檢測法，屬生物檢測法。其測定原理基於抗生素對微生物的抑製作用。如果牛奶中含有抗生素，則加入菌種（嗜熱鏈球菌）經培育2.5~3小時後,加入TTC指示劑(三苯基四氮唑)不發生還原反應,所以樣品呈無色狀態;如果牛奶中不含抗生素,則樣品呈紅色.這樣實驗後樣品顏色不變的為陽性,樣品染成紅色的為陰性。 TTC法的具體操作步驟: 1.菌液制備:將單菌種(嗜熱鏈球菌)以脫脂乳為培養基,在36±1℃培養箱中培養15小時後,再以脫脂乳以至於1:1稀釋待用; 2.取待檢樣液9mL,在80℃水浴加熱5分鍾後冷卻到37℃以下,加活菌液1mL,在36℃±1℃水浴2小時,加入4%的TTC指示劑0.3mL, 36℃±1℃水浴培養30分鍾; 3.若樣液顏色不變為陽性,呈紅色為陰性;若陽性的樣液,再置於水浴中培養30分鍾,不顯色的為陽性,呈紅色為陰性. TTC法測定各種抗生素的靈敏度為:青黴素:4ppb,鏈黴素:500ppb,慶大黴素:400ppb,卡那黴素:5000ppb.它具有費用低,易開展的優點;缺點是耗時長，要求操作人員需有一定專業知識且實驗過程中菌液的制備、水浴過程式控制制都要求嚴格遵守操作規程，否則易出現假陽性，以致出現檢驗結果的不穩定性。 Delvotest? sp法（戴爾沃檢測法） 該法最早在香港傳到廣東的，其使用是基於20世紀80年代初香港要求廣東出口的生奶必須「無抗」且要求採用Delvotest法檢測。該方法也是生物測定法，其試劑是由荷蘭DSM公司生產並由AOAC認證。原理是利用微生物—嗜熱芽胞菌在64℃條件下培養2.5～3小時後會產酸,酸引起指示劑BCP(溴甲酚紫)變為黃色;若牛奶樣品中不含抗生素,培養後樣品呈黃色,如樣品中含有抗生素, 嗜熱芽胞菌生長受到抑制而無法產酸,指示劑將不變色. Delvotest? sp 法的操作步驟: 1.以無菌操作將一片營養葯片夾放入小試管內; 2.用微量移液管將0.1mL牛奶樣品注入小試管內; 3.把小試管放入已預熱至64℃的水浴箱或恆溫器中培養; 4).定時3小時取出觀察顏色變化.如果底部2/3的固體介質是黃色,則為陰性, 如果底部2/3的固體介質是紫色,則為陽性. Delvotest? sp 法具有廣譜性,可檢測到?-內醯胺類抗生素在內的更多抗生素,如磺胺類、四環素類、大環內酯類、氨基糖苷類、氯黴素等，其中對青黴素和磺胺類抗生素特別靈敏. 其靈敏度為：青黴素:3ppb,鏈黴素:300ppb,慶大黴素:400ppb,卡那黴素:2500ppb。Delvotest? sp 法集操作方便，嚴格實用，容易判斷，結果可靠，費用適中等優點；但也易出現假陽性，實驗證明：當牛奶樣品中添加微生物防腐劑（如乳酸鏈球菌素—Nisn）或樣品中有足夠的洗滌劑殘留時，便可影響嗜熱芽胞菌生長而使實驗為陽性。 Snap?法 該方法是酶聯免疫法，由美國IDEXX公司生產其檢測分析儀及其試劑盒，均獲得AOAC認證，它利用了竟爭酶聯免疫技術。其基本原理是用特異性抗體將固相載體激活，加入含待測抗原的溶液和一定量的酶標記抗原在45℃±5℃共同保溫，使樣品內的抗生素與內置抗生素標志物竟爭與固定的抗體結合，然後進行洗滌和顯色，內置抗生素標志物與固定的抗體結合形成的復合體，通過酶的作用分解可形成有色物質，通過測定色度並與參照物對照，就可以確定結果是陽性或陰性。 Snap?法操作步驟： 1.加入乳樣於樣品管中,搖勻,加熱樣品和檢測板5分鍾; 2.加入乳樣於樣品孔中,當激活圓環開始退卻時,按Snap鍵; 3.反應4分鍾,由Snap?讀數儀讀取並列印結果.檢測讀數小於1.05時判為陰性,大於1.05時判為陽性. Snap?法是一種將酶化學反應的敏感性和抗原抗體免疫反應的特異性相結合的方法,其敏感性和特異性好,檢測的靈敏度以普遍使用的?-內醯胺類計：青黴素:5ppb,阿莫西林:10ppb,氨苄西林:10ppb,頭孢西林:8ppb.其他抗生素如四環素等的檢測,則需購買相應的試劑來檢測. Snap?法檢測結果快速准確, 9分鍾內即可檢測出牛奶中?-內醯胺類、四環素類、磺胺類等抗生素的殘留含量，且有半定量的讀數，可監控牧場用葯的情況；檢測儀器穩定性良好，結果重現性高，整個檢測過程簡單方便；但需購置專用儀器和試劑，成本較高。 高效液相色譜檢測法 它是一種理化檢測方法,是利用抗生素分子中的基團所具有的特殊反應來測定其含量.檢測的過程採用了氣相色譜理論,通過高壓液相和高靈敏度的檢測器,分離速度快、效率高和操作自動化。一般要經過樣品的提取、脫蛋白、離心、層析柱凈化、衍生化等步驟，能檢測抗生素的具體含量，敏感性較高，但檢測程序復雜，費用較高，需購買色譜儀等檢測設備，不適合小型檢驗室。 傳統的抗生素檢測方法不少,有的操作煩瑣,有的實驗條件要求高,有的檢驗時間太長;這些不僅會給乳製品生產企業造成經濟上和時間上的損失,而且檢測結果常常會被原輔材料和人為操作等因素所影響.鑒於牛奶中抗生素殘留是涉及人類健康的公共衛生問題,乳品企業及牧場應重視和加強檢測工作,應用一些簡單、快速和准確性高的方法來監控產品的質量，保證消費者的健康。 納米膠體金層析法 該方法是基於競爭法膠體金免疫層析技術，將檢測液加入試紙卡上的樣品孔，檢測液中的抗生素與金標墊上的金標抗體結合形成復合物，若抗生素在檢測液中濃度低於100ng/mL，未結合的金標抗體流到T區時，被固定在膜上的抗生素BSA偶聯物結合，逐漸凝集成一條可見的T線；若抗生素濃度高於100ng/mL，金標抗體全部形成復合物，不會再與T線處抗生素BSA偶聯物結合形成可見T線。未固定的復合物流過T區被C區的二抗捕獲並形成可見的C線。C線出現則表明免疫層析發生，即試紙有效. http://www.quicking.cn/chinese/content.asp?MoleType=3&ChannelID=3&id=174 膠體金法操作步驟： 1．將採集的牛奶樣品進行編號，置於常溫（20-30℃）室內。（低溫牛奶流動性差，不適合進行試紙層析測試） 2．搖勻牛奶，用吸管取1mL加入到離心管中，7000rpm離心3-4分鍾至分離出脂肪層。脂肪層下5mm處液體（脫脂牛奶）即為待測液。 3．取出試紙條，用吸管吸取3滴待測液滴於加樣孔中， 4．5分鍾後判斷結果，10分鍾後的結果無效。 http://www.quicking.cn/chinese/content.asp?MoleType=3&ChannelID=3&id=156 結果解釋 陰性：C線顯色，T線肉眼可見，無論顏色深淺均判為陰性。 陽性：C線顯色，T線不顯色，判為陽性。 無效：C線不顯色，無論T線是否顯色，該試紙均判為無效。 保存和穩定性 4-30℃陰涼乾燥處保存，不可冷凍，避免陽光直曬，生產日期起18個月內有效。 納米膠體金層析法適用於樣品的初篩，檢測時間短，出結果速度快，且能在常溫下保存18個月之久，操作簡單，無需任何專業的技術，沒有檢測環境的需求不管是奶農還是奶站工作人員還是專業的檢測人員，都可以方便使用。

⑦ 抗生素類檢測牛奶的檢測試劑有哪些磺胺類也屬於嗎

北京華安麥科有：
Ø 抗生素類：氯黴素試劑盒/試紙條、氟喹諾酮總量試劑盒/試紙條、呋喃四項代謝物試劑盒、鏈黴素試劑盒、慶大黴素試劑盒/試紙條、磺胺類多殘留試劑盒/試紙條、四環素類試劑盒/試紙條、金黴素試劑盒、土黴素試劑盒、β內醯胺類快速檢測試紙條、牛奶中總抗生素快速檢測試劑盒
另外還有：
Ø 毒素類：黃麴黴毒素M1試紙條、黃麴黴毒素M1試劑盒、黃麴黴毒素M1免疫親和柱
Ø 添加類：三聚氰胺檢測卡、三聚氰胺試劑盒、己烯雌酚試劑盒、雙酚A試劑盒、β內醯胺酶試紙條、β內醯胺酶試劑盒（定性）
Ø 維生素等成分：葉酸檢測試劑盒/免疫親和柱、生物素試劑盒/免疫親和柱、維生素B12檢測試劑盒/免疫親和柱、乳鐵蛋白檢測試劑盒/免疫親和柱
http://www.magnech.com/_d271053508.htm

⑧ 牛奶廠主要檢測方式有什麼

理化檢測法：理化檢測法是通過抗生素分子的特殊反應或性質，如高效液相色譜法，測定其鹼性基含量的方法，氣相色譜法、比色法、熒光分光光度法等，最常用的是高效液相色譜及其組合技術。

這些方法不僅可以用於定性分析，而且可以用於定量檢測，檢測速度快，靈敏度、特異性和解析度都很高，重復性好，應用廣泛。但其檢測要求高，需要昂貴的檢測設備，檢測程序復雜，檢測成本高，且普遍用於科研，難以推廣到基層應用。

1、高效液相色譜法：高效液相色譜（HPLC）是近年來發展最快的一種快速分離分析技術。介紹了氣相色譜原理，採用高壓泵、高效固定相、高靈敏度檢測器等技術，實現了分離速度快、效果好、操作自動化，幾乎所有待測化合物包括高極性／離子型化合物和大分子物質都能用高效液相色譜法測定。