A. 總鐵結合力的測定
建立一種靈敏度高、選擇性好的鉻天青B血清總鐵結合力的直接測定法。方法 在pH4.5的條件下,結合鐵從轉鐵蛋白釋放,鉻天青B與血清中的鐵和過量的鐵標准液發生顯色反應,再加入鹼性緩沖液,在pH7.8的條件下,轉鐵蛋白從鐵和鉻天青B復合物中吸引鐵與其結合,溶液的吸光度值下降與血清總鐵結合力濃度呈正比。對反應條件和方法性能進行系統研究。結果 顯色絡合物的最大吸收波長為630nm,線性可達130.0μmol/L,回收率為98.3%~99.2%,批內變異系數為2.7%,批間變異系數為3.8%,與碳酸鎂作吸附劑的手工比色法比較有良好相關性,回歸方程為Y=0.994X+0.40,r=0.993。70例健康成人血清總鐵結合力含量為51.3~76.3μmol/L。結論 該法試劑穩定,具有操作快速、靈敏、簡便和結果准確等優點,適宜於血清總鐵結合力的手工測定和自動化分析。
B. 檢測鐵蛋白的方法有哪些
檢測血清FER的方法有放射免疫測定法、酶免疫測定法、免疫比濁法、化學發光免疫分析法等。
目前臨床主要採用免疫透射比濁法通過全自動生化儀檢測和化學發光免疫分析儀進行檢測。前者的檢測原理是將兔抗人鐵蛋白抗體交聯於膠乳顆粒上,與待測樣品中鐵蛋白在液相中相遇,立即形成抗原抗體復合物,並形成一定濁度,與通過同樣處理的校準品比較,即可計算出樣品中FER的含量。該方法測定范圍寬,精密度、准確度高,特異性好,是一種簡單、快速、准確的自動化分析方法。
化學發光免疫分析法(以貝克曼公司ACESS全自動化學發光免疫分析儀為例)原理是採用雙抗體夾心法檢測待測樣品中的鐵蛋白,包被介質為磁性微粒子,以增大與抗原的接觸面積,提高敏感性,標記的酶為ALP,底物為貝克曼研製的AMPPD,經ALP水解後可以長時間持續、穩定發光,除了有免疫透射比濁法的特異性高、精密度高、測定范圍寬以外,敏感性也大大提高。