色譜檢測黃麴黴毒素方法

1. 家庭如何檢驗黃麴黴素

一步式黃麴黴毒素檢測金標試紙法是利用單克隆抗體而設計的固相免疫分析法。

由此產生的一步式黃麴黴毒素快速檢測試紙可在5—10分鍾完成對樣品中黃麴黴毒素的定性測定，藉助黃麴黴毒素標准樣品這種方法能估算黃麴黴毒素的含量，非常適用於現場測試和進行大量樣品的初選。

薄層分析法(TLC)是檢測黃麴黴素最為經典的方法，也是以前最為常用的方法，至今仍為一些檢測機構所用，也是一種國標方法。其原理是針對不同的試樣，用適宜的萃取溶劑將黃麴黴素從試樣中萃取出來，經柱層析凈化後，再在薄板上展開後分離。

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HPLC法是近年來發展起來的一種檢測方法。其原理是在高效液相色譜儀上添加柱後衍生系統分離，再用熒光檢測器測定。與其配套的柱後衍生系統有碘衍生化法、溴衍生化法及較為先進的電化學衍生化法和光化學衍生化法。當前，該方法大多用免疫親和柱來凈化、分離，其凈化效果優異。

該法能准確地分離不同種類的黃麴黴素(例如：AFB1、AFB2、AFG1和AFM1等)，檢測速度快且定性與定量准確，檢測限低，可作為仲裁法使用，但儀器設備價格昂貴，前處理方法相對繁瑣，若用到免疫親和柱則會使試樣檢測費用增加，對操作人員的身體健康仍存在一定的危害。

2. 如何檢測黃麴黴毒素M1

檢測黃麴黴M1的方法一般就是免疫親和層析凈化高效液相色譜法和酶聯免疫吸附法（試劑盒）這兩種方法。前一種方法主要使用到高效液相，後一種使用的是酶標儀。由於高效液相色譜法費用高試用繁瑣，所以現在市場上檢測黃麴黴M1主要還是酶聯免疫法。

CSY-E96H黃麴黴毒素快速檢測儀 （黃麴黴素快速檢測儀|黃麴黴素檢測儀|黃麴黴毒素測試儀）採用固相酶聯免疫吸附ELISA的原理,即酶聯免疫法；可定量檢測糧食、食品、飼料、油脂、乳製品、葯物、飲料、牛奶、酒等產品中的黃麴黴毒素(B1，B2，G1，G2 M1 M2 AFM1、AFP1、AFQ1、AFB1-2，3-環氧化物）含量。並且可以連接食品安全監控系統，黃麴黴毒素快速檢測儀、葯物殘留檢測儀廣泛應用於產品質量監督檢驗、衛生防疫、環境保護、工商管理、水產品批發市場、面製品生產基地、養殖場、糧庫、超市、商場、各大食品安全監測系統等部門。

3. 黃麴黴毒素B1的檢測方法

GB2761-2014《食品安全國家標准 食品中真菌黴素的限量》中對於黃麴黴毒素B1的限量以及檢測方法做了修改，嬰幼兒配方食品及嬰幼兒輔助食品按照GB5009.24規定的方法測試，其他食品按照GB/T18979規定的方法測定。 TLC法是測定黃麴黴毒素的經典方法，是中國測定食品及飼料中AFT黃麴黴素B1(AFB1)的標准方法之一（GB/T5009.23-2006）。其原理是針對不同的樣品，用適宜的提取溶劑將AFB1從樣品中提取出來，經溶劑萃取純化，再在薄層板上層析展開，分離，利用AFB1的熒光特性，根據熒光斑點的大小和強弱，比較測定黃麴黴毒素含量。
TLC有單項展開法和雙向展開法，TLC法由於設備簡單，易於普及，所以國內外仍在使用，但由於該法樣品前處理繁瑣，且提取和凈化效果不夠理想，提取液中雜質較多因而在展開時影響斑點的熒光強度，而雙向展開雖避免了雜質干擾，增加了靈敏度，但增加了操作步驟和時間。 酶聯免疫法檢測AFB1的理論基礎是抗原抗體反應，其採用單克隆或多克隆抗體技術，具有特異性強、分析時間短等優點。其原理是抗原（或抗體）吸附於載體上的免疫吸附劑和用酶標抗體（或抗原）與標本中的待測物（抗原或抗體）起特異的免疫學反應，最後用測定酶活力的方法來增加測定的敏感度。大體分為2類：一是用雙抗體夾心法檢測樣本中的AFTB1， 二是用競爭法檢測樣本中的AFTB1,。為了使用方便，目前國內外已研製了酶標記免疫吸附測定試劑盒及配套儀器,方法也被列入國家標准(GB/T5009.22 1996第二法)。
但由於ELISA法中酶的活性易受反應條件影響，因此ELISA法測定結果穩定性較差，分析結果的准確性不高，容易出現假陽性結果。 一般來說，組織中黃麴黴毒素含量很低，而液相色譜串聯質譜法具有比高效色譜法更高的靈敏度和准確性，如今這種方法還極少使用在測定組織黴菌毒素含量中。該方法檢測限可達0.02~0.025 ppb。 84%甲醇水溶液提取樣品中,正己烷脫脂,HLB固相萃取柱凈化。採用電噴霧電離,正離子掃描,選擇多反應檢測模式（MRM）監測,外標法定量，該法靈敏,結果可靠。

4. 黃麴黴毒素M1怎麼檢測

病情分析：檢測黃麴黴M1的方法一般就是免疫親和層析凈化高效液相色譜法和酶聯免疫吸附法（試劑盒）這兩種方法。
指導意見：前一種方法主要使用到高效液相，後一種使用的是酶標儀。由於高效液相色譜法費用高試用繁瑣，所以現在市場上檢測黃麴黴M1主要還是用的後一種方法。

5. 高效液相色譜儀測定茶葉中黃麴黴毒素B1的方法是什麼

樓主你好：
高效液相色譜儀測定茶葉中黃麴黴毒素B1的方法
1.適用范圍本方法適用於出口茶葉中黃麴黴毒素B1含量的檢驗。
2.原理概要樣品用三氯甲烷提取，提取液經硅膠柱凈化，凈化後的提取液用三氟乙酸衍生，用配有熒光檢測器的高效液相色譜儀測定，外標法定量。
3.主要試劑和儀器3.1.主要試劑三氯甲烷；正己烷；苯；甲醇：紫外光譜級；乙腈：紫外光譜級；三氟乙酸；乙腈-水溶液（1＋1）；三氯甲烷-甲醇溶液（95＋5）；苯-乙腈溶液（98＋2）；黃麴黴毒素B1標准品：純度≥99%；黃麴黴毒素B1標准溶液：准確稱取適量的黃麴黴毒素B1標准品，以苯-乙腈溶液於棕色容量瓶中，配成濃度為10μg/mL標准貯備液。根據需要，再配成適當濃度的標准工作溶液。3.2.儀器高效液相色譜儀，配有熒光檢測器；天津恆奧硅膠小柱；天津恆奧振盪器：HMS系列；天津恆奧超聲波：HU、HS系列；
天津恆奧氮吹儀；天津恆奧濾膜：有機系用，0.45μm；天津恆奧微孔濾膜過濾器
旋轉蒸發器；微量注射器；離心管：5mL具塞磨口；粉碎機。
4.試樣的抽取與制備4.1.抽樣方法從整批產品堆垛的上下不同部位隨機抽取2.2規定的件數，逐件開啟。分別倒出全部茶葉於塑料布上，用取樣鏟從每件中各取出有代表性的樣品約500g。將所取樣品充分混勻，用四分法或分樣器逐步縮分出500g，裝入潔凈密封的樣品筒內，加封後，標明標記，及時送實驗室。4.2.試樣制備將所取回樣品全部磨碎，通過20目篩，混勻，均分成兩份試樣，裝入潔凈容器內，密封，標明標記。4.3.試樣保存將試樣於室溫下保存。註：在抽樣和制樣的操作過程中，必須防止樣品受到污染或發生殘留物含量的變化。更多質量檢測、分析測試、化學計量、標准物質相關技術資料請參考國家標准物質葯檢所標准品目錄，葯品對照品請參考 http://www.rmhot.com/plist_3/plist_3_0_0_1.html
5.過程簡述5.1.提取稱取試樣5.0g（精確到0.1g）置於100mL具塞錐形燒瓶中，加入15mL三氯甲烷，於振盪器上提取30min，然後經墊有玻璃纖維的漏斗過濾。收集濾液於旋轉蒸發器的具尾管圓底燒瓶內，並用三氯甲烷洗滌濾渣，收集濾液至約20mL。5.2.凈化用旋轉蒸發器將上述濾液在50℃水浴中濃縮至約1mL，經0.45μm濾膜過濾後，注入硅膠小柱中。用2～4mL正己烷洗滌燒瓶後淋洗小柱，棄去流出液。然後用3～4mL三氯甲烷-甲醇溶液以每秒鍾2滴的流速洗脫，收集洗脫液於離心管中。用氮氣儀緩緩吹乾，供衍生用。5.3.衍生5.3.1.試樣加200μL正己烷和50μL三氟乙酸於上述離心管中，蓋緊磨口塞，超聲振盪1min，靜置10min，用氮吹儀緩緩至干。用乙腈-水溶液（1＋1）定容至1.0mL，超聲1min，用0.5μm濾膜過濾，濾液供液相色譜用。5.3.2.標准工作溶液取1.0mL標准工作溶液，用氮吹儀緩緩吹乾，按5.3.1步驟操作。5.4.測定5.4.1.色譜條件色譜柱：NOVA PAKc18，300mm×3.9mm（內徑）；流動相：甲醇-水溶液（42＋58）；流速：0.8mL/min；熒光檢測器：激發波長375 nm，發射波長425 nm；色譜柱溫度：室溫。5.4.2.測定根據樣液中黃麴黴毒素B1的含量情況，選定峰高相近的標准工作溶液。標准工作溶液和樣液中黃麴黴毒素B1衍生物的響應值均應在儀器檢測線性范圍內。對標准工作溶液和樣液的衍生物溶液等體積參插進樣測定。在上述色譜條件下，黃麴黴毒素B1衍生物保留時間約為8min。5.4.3.空白試驗除不加試樣外，按上述測定步驟進行。
6.結果計算用色譜數據處理機進行數據處理
7.低限和回收率測定7.1.低限本方法的測定低限為0.001mg/kg。7.2.回收率回收率的實驗數據：黃麴黴毒素B1的添加濃度在0.001～0.5mg/kg范圍內，回收率為89.1%～104.9%。