檢測目的基因的方法

Ⅰ 檢測目的基因是否導入受體細胞的方法有哪幾種

檢測目的基因是否導入受體細胞的方法有以下兩種：

1、農桿菌轉化法（植物常用）

農桿菌是普遍存在於土壤中的一種革蘭氏陰性細菌，它能在自然條件下趨化性地感染大多數雙子葉植物和裸子植物的受傷部位（受傷處的細胞會分泌大量酚類化合物，從而使農桿菌移向這些細胞），並誘導產生冠癭瘤或發狀根。

2、利用顯微注射，或者滅活的病毒轉導（動物常用）

轉導由噬菌體將一個細胞的基因傳遞給另一細胞的過程。它是細菌之間傳遞遺傳物質的方式之一。其具體含義是指一個細胞的DNA或RNA通過病毒載體的感染轉移到另一個細胞中。細菌可以轉化、轉導。轉化是利用細菌的某些特別菌株；轉導是利用噬菌體。

(1)檢測目的基因的方法擴展閱讀：

轉導的類別：

（1）低頻轉導（LFT）

誘導溶源性細菌而產生的細胞裂解產物中，除含有正常的噬菌體外，還有極少數（約為10^(-6)）部分缺陷噬菌體。用誘導溶源性菌株得來的噬菌體進行轉導時的轉導頻率不過10^(-6) ，稱為低頻轉導。

（2）高頻轉導（HFT）

雙重溶原菌在紫外輻射等因子的誘導下,原噬菌體容易被切割下來，產生等量的缺陷噬菌體和正常噬菌體，該裂解物稱為高頻率轉導裂解物，用這樣的裂解物去感染細菌，將比低頻率轉導裂解物產生多得多的轉導子。

Ⅱ 檢測目的基因是否表達的方法是

基因工程第四步中包括導入檢測，轉錄檢測和翻譯檢測，方法分別是DNA分子雜交技術、分子雜交技術、抗原-抗體雜交技術。有的還可在個體水平是進行檢測，如抗性檢測等

Ⅲ 如何對目的基因進行檢測與鑒定

可以從三方面對目的基因進行鑒定：

1、直接測定：按照目的基因組成製作DNA分子探針進行配對。

2、mRNA測定：根據目的基因組得出其轉錄的mRNA組成，利用探針檢測。

3、蛋白測定：可應用PCR相應技術測定目的基因翻譯的相關蛋白，也可採用免疫化學法導入蛋白抗體檢測蛋白。

(3)檢測目的基因的方法擴展閱讀：

對目的基因進行鑒定和檢測的多種方法：

基因鑒定技術是一項生物學檢測技術，人體細胞有總數約為30億個鹼基對的DNA，每個人的DNA都不完全相同，人與人之間不同的鹼基對數目達幾百萬之多，因此通過分子生物學方法顯示的DNA圖譜也因人而異，由此可以識別不同的人。

所謂「DNA指紋」，就是把DNA作為像指紋那樣的獨特特徵來識別不同的人。由於DNA是遺傳物質，因此通過對DNA鑒定還可以判斷兩個人之間的親緣關系。

基因鑒定的原理其實是DNA分子雜交，這種分子雜交是在緩沖液中進行的，由於DNA分子雜交時，兩個分子相遇的機會不是很大，所以就需要眾多的帶有目的基因的DNA與待測的DNA分子。

而PCR技術就是將目的基因進行擴增的一種技術手段，所以在進行基因鑒定時並不是直接進行鑒定的，而是先進行PCR技術將目的基因擴增再進行鑒定。

網路-對目的基因進行檢測與鑒定

Ⅳ 目的基因是否表達的檢測方法

最直接的就是檢測目的蛋白，一般都是用western blot；如果是分泌蛋白，可以做ELISA；如果蛋白有特殊的功能（比如GFP，綠色熒光蛋白），也可以直接檢測其功能（比如看有無綠色熒光）。間接的話，可以檢測目的mRNA是否存在，用的是northern blot或者RT-PCR。要注意的是，因為翻譯階段有可能存在調控，所以有些情況下mRNA存在不代表蛋白存在，即基因轉錄了未必翻譯。所以間接的手段一般作為旁證。

Ⅳ 關於目的基因的檢測

如果說只是要檢測目的基因是否被成功導入，用這個方法就有點浪費了，一般都直接用標記基因就好了（比如熒光啊、抗葯啊）。但如果是要檢測目的基因是否在受體細胞成功表達，那麼這是個很好的方法。首先，目的基因對於受體細胞來說，是個異物。目的基因指揮合成的蛋白質，在受體細胞中原來是沒有的，當然會被受體細胞當成抗原來處理，然後受體細胞就會產生相應的抗體蛋白。如果你用目的基因指揮合成的蛋白質去侵染受體細胞的話，若目的基因已成功表達，那麼之前產生的抗體必然就會與這個所謂的「抗原」發生特異性結合。

Ⅵ 目的基因的鑒定方法有哪些

基因的鑒定方法：
間接識別法
在基因的間接識別法（Extrinsic Approach）中，人們利用已知的mRNA或蛋白質序列為線索在DNA序列中搜尋所對應的片段。由給定的mRNA序列確定唯一的作為轉錄源的DNA序列；而由給定的蛋白質序列，也可以由密碼子反轉確定一族可能的DNA序列。因此，在線索的提示下搜尋工作相對較為容易，搜尋演算法的關鍵在於提高效率，並能夠容忍由於測序不完整或者不精確所帶來的誤差。BLAST是目前以此為目的最廣泛使用的軟體之一。
若DNA序列的某一片段與mRNA或蛋白質序列具有高度相似性，這說明該DNA片段極有可能是蛋白編碼基因。但是，測定mRNA或蛋白質序列的成本高昂，而且在復雜的生物體中，任意確定的時刻往往只有一部分基因得到了表達。這意味著從任何單個細胞的mRNA和蛋白質上都只能獲得一小部分基因的信息；要想得到更為完整的信息，不得不對成百上千個不同狀態的細胞中的mRNA和蛋白質測序。這是相當困難的。比如，某些人類基因只在胚胎或胎兒時期才得到表達，對它們的研究就會受到道德因素的制約。
盡管有以上困難，對人類自身和一些常見的實驗生物如老鼠和酵母菌，人們已經建立了大量轉錄和蛋白質序列的資料庫。如RefSeq資料庫，Ensembl資料庫等等。但這些資料庫既不完整，也含有相當數量的錯誤。
從頭計演算法
鑒於間接識別法的種種缺陷，僅僅由DNA序列信息預測蛋白質編碼基因的從頭計演算法（Ab Initio Approach）就顯得十分重要了。一般意義上基因具有兩種類型的特徵，一類特徵是「信號」，由一些特殊的序列構成，通常預示著其周圍存在著一個基因；另一類特徵是「內容」，即蛋白質編碼基因所具有的某些統計學特徵。使用Ab Initio方法識別基因又稱為基因預測。通常我們仍需藉助實驗證實預測的DNA片段是否具有生物學功能。
在原核生物中，基因往往具有特定且容易識別的啟動子序列（信號），如Pribnow盒和轉錄因子。與此同時，構成蛋白質編碼的序列構成一個連續的開放閱讀框（內容），其長度約為數百個到數千個鹼基對（依據該長度區間可以篩選合適的密碼子）。除此之外，原核生物的蛋白質編碼還具有其他一些容易判別的統計學的特徵。這使得對原核生物的基因預測能達到相對較高的精度。
對真核生物（尤其是復雜的生物如人類）的基因預測則相當有挑戰性。一方面，真核生物中的啟動子和其他控制信號更為復雜，還未被很好的了解。兩個被真核生物基因搜尋器識別到的訊號例子有CpG islands及poly(A) tail的結合點。
另一方面，由於真核生物所具有的splicing機制，基因中一個蛋白質編碼序列被分為了若干段（外顯子），中間由非編碼序列連接（基因內區）。人類的一個普通蛋白質編碼基因可能被分為了十幾個外顯子，其中每個外顯子的長度少於200個鹼基對，而某些外顯子更可能只有二三十個鹼基對長。因而蛋白質編碼的一些統計學特徵變得難於判別。
高級的基因識別演算法常使用更加復雜的概率論模型，如隱馬爾可夫模型。Glimmer是一個廣泛應用的高級基因識別程序，它對原核生物基因的預測已非常精確，相比之下，對真核生物的預測則效果有限。GENSCAN計劃是一個著名的例子。
比較基因組學
由於多個物種的基因組序列已完全測出，使得比較基因組學得以發展，並產生了新的基因識別的方法。該方法基於如下原理：自然選擇的力量使得基因和DNA序列上具有生物學功能的其他片段較其他部分有較慢的變異速率，在前者的變異更有可能對生物體的生存產生負面影響，因而難以得到保存。因此，通過比較相關的物種的DNA序列，我們能夠取得預測基因的新線索。2003年，通過對若干種酵母基因組的比較，人類對原先的基因識別結果作了較大的修改；類似的方法也正在應用於人類的基因組研究，並可能在將來的若干年內取得成果。

Ⅶ 目的基因的檢測的步驟及方法

我是高二學生，課本上說的是用標記基因的抗性進行測試（這是檢測目的基因是否導入受體細胞的方法）
用抗原抗體雜交技術的方法檢測目的基因是否在受體細胞表達.
不知道你問的是哪個？

Ⅷ 獲取目的基因的方法有哪些（詳細）

獲取目的基因的方法主要有兩種：

一是從供體細胞的DNA中直接分離基因,最常用的方法是「鳥槍法」又叫「散彈射擊法",另一種是人工合成基因,這種方法有兩條途徑,

二是以目的基因轉錄的信使RNA為模板,反轉錄成互補的單鏈DNA,再在酶的作用下合成雙鏈DNA,即目的基因,另一條途徑是蛋白質的氨基酸序列,推測出信使RNA序列,再推測出結構基因的核苷酸序列,然後用化學的方法以單核苷酸為原料合成.

Ⅸ (4)檢測該目的基因是否表達的方法是

先用realtime檢測mRNA水平是否表達，如果本身就存在這個基因，就看「是否表達」提高了很多，然後再做westernblot檢測蛋白水平是否表達，如果這個基因可以影響細胞的某些功能的話，再檢測細胞的一些指標看是否有預期的變化。基因(遺傳因子)是具有遺傳效應的DNA片段(部分病毒如煙草花葉病毒、HIV的遺傳物質是RNA)。基因支持著生命的基本構造和性能。儲存著生命的種族、血型、孕育、生長、凋亡等過程的全部信息。

Ⅹ 檢測目的基因

在含SNP位點的兩側的保守區設計引物，PCR擴增，對擴增片段（幾百bp為宜）進行測序即可。