重組c因子檢測內毒素方法

⑴ 細菌內毒素檢測步驟，詳細的

檢測方法: 1、每套器具中,注入80mL水,放置37度保溫至少1小時. 這就是A溶液了。2、這種情況下，內毒素要求(限值)就是 0.25EU/mL. 3、買靈敏度是0.25EU/mL的鱟試劑。4、內毒素制備0.5EU/mL濃度，作為陽性對照，葯典中的C溶液。5、制備B溶液，這個可能要用近似法來制備，取5EU/mL的內毒素溶液 0.2mL與1.8mL的A溶液混合，漩渦混合至少30秒，就成近似的B溶液了。6、加樣反應，取 8 支鱟試劑，全部加0.1mL的細菌內毒素檢查用水復溶。然後分別加A、B、C溶液，0.1mL， 還有加細菌內毒素檢查用水，0.1mL， 每種溶液平行兩管。7、放到37度水浴或乾式的恆溫儀中反應60分鍾，就可以看結果了。8、B、C溶液的反應管必須要陽性，就是輕輕倒轉180度過來，鱟試劑安瓿里的反應溶液形成了凝膠體，不滑落。 而D溶液，就是細菌內毒素檢查用水那2管，必須要陰性，這樣3個滿足了，就說明你的試驗成功了。最後看A溶液的反應情況，陽性就說明原套器具每套大於20EU。否則就合格，小於20EU了。 當然，1管陽性，1管陰性就要重新復查了，方法看葯典。

⑵ 細菌內毒素的檢測方法和原理是什麼

我國葯典收載的細菌內毒素檢測方法為鱟試驗法，包括2種方法，即凝膠法和光度測定法，後者又包括濁度法和顯色基質法。當各種檢測法得到的檢測結果不一致時，以凝膠法的檢測結果為准。
鱟試驗法有定性和定量之分，其按試驗方法還可進一步分為凝膠法、動態濁度法、終點濁度法、動態顯色法和終點顯色法。

原理：
凝膠法是應用鱟試劑可與內毒素發生凝集反應的原理來定性或半定量檢測內毒素的一種鱟試驗法，檢測時鱟試劑需以除熱原水（內毒素檢查用水）復溶後使用，通過觀察有無凝膠形成作為檢測終點。
濁度法是通過檢測鱟試劑與內毒素反應過程中的濁度變化來檢測內毒素含量的鱟試驗法，其中動態濁度法檢測反應混合物濁度升高至某一預先設定的吸光度時所需的時間或濁度升高的速率。
動態顯色法和終點顯色法都屬顯色基質法。顯色基質法是通過檢測鱟試劑與內毒素反應過程中產生的凝固酶使特定底物游離出生色團的多少來檢測內毒素含量的鱟試驗法，根據產物色度計算內毒素水平，又被稱為比色法。

⑶ 細菌內毒素檢測

熱原系指由微生物產生的能引起恆溫動物體溫異常升高的致熱物質。它包括細菌性熱原、內源性高分子熱原、內源性低分子熱原及化學熱原等。所以熱原有外生致熱原和內生致熱原之分。
細菌內毒素是革蘭氏陰性菌細胞壁上的一種脂多糖（Lipoply Saccharide）和微量蛋白（Protein）的復合物，它的特殊性不是細菌或細菌的代謝產物，而是細菌死亡或解體後才釋放出來的一種具有內毒素生物活性的物質。
一般來說內毒素是熱原,但熱原不全是內毒素。歐洲葯典委員會副主席J.Van Noordwijk提出：「嚴格地講，不是每一種熱原都具有脂多糖的結構，但所有已知的細菌內毒素脂多糖都有熱原活性」。在葯品生產質量管理規范（GMP）條件下，葯品生產的質量控制一般可以接受的觀點是：不存在細菌內毒素意味著不存在熱原。
熱原檢查法系將一定劑量的供試品，靜脈注入家兔體內，在規定時間內，觀察家兔體溫升高的情況，以判定供試品中所含熱原的限度是否符合規定的一種方法。
細菌內毒素檢查法系利用鱟試劑來檢測或量化由革蘭陰性菌產生的細菌內毒素，以判斷供試品中細菌內毒素的限量是否符合規定的一種方法。
細菌內毒素檢查法，現已在《中國葯典》2010年版二部、三部內廣泛應用，但在《中國葯典》2010年版一部內一個葯品都未運用，這主要是由細菌內毒素檢查法的持點所決定的：細菌內毒素檢查法具有較家兔熱原檢查法靈敏、快速、簡便易行、重現性好、結果准確等優點，目前細菌內毒素檢查法已廣泛應用於西葯、生物製品。但同時也應該指出，細菌內毒素檢查是一復雜的酶促反應過程，生產工藝的細微變化都可能引起其干擾的增加，然而根據中葯制劑，成分復雜，影響因素多的特點，因此，中葯注射劑一般還是採用傳統的家兔熱原檢查法。但是對一些具有解毒降溫作用的葯物，因會干擾家兔的生理活性，引起體溫下降，用家兔法檢測不準，還是應考慮用細菌內毒素檢查法。
由此可見，熱原與細菌內毒素兩者之間既有許多相同之處，但還是有區別的。同時，還要請各位同仁注意，不要將「熱原」誤寫成「熱源」。

⑷ 細菌內毒素的檢驗方式有什麼

細菌內毒素檢查法是判斷供試品中細菌內毒素是否符合規定。 內毒素(Endotoxin)即革蘭氏陰性菌細胞壁的脂多糖，其毒性成分為類脂A。菌體死亡崩解後釋放出來。細菌內毒素檢查包括兩種方法，即凝膠法和光度測定法，後者包括濁度法和顯色基質法。供試品檢測時，可使用其中任何一種方法進行試驗。當測定結果有爭議時，除另有規定外，以凝膠法結果為准。

⑸ 內毒素測定的測定方法

1,凝膠法
2,動態濁度法
3,終點顯色法
4,動態顯色法
凝膠法系通過鱟試劑與內毒素產生凝集反應的原理來定性檢測或半定量內毒素的方法。凝膠法鱟試劑常見規格為0.1ml/支或0.5ml/支或者更大裝量，使用時應加除熱原水（細菌內毒素檢查用水）復溶後使用。凝膠法是通過觀察有無凝膠形成作為反應的終點。此法操作比較簡單，經濟，不需要專用測定設備，可以進行定性或半定量測定。
動態濁度法、終點濁度法、動態顯色法、終點顯色法，這四種方法都是定量檢測內毒素的。

⑹ 細菌內毒素的試驗要求應該怎麼做急急急提前感謝啦

細菌內毒素檢查包括兩種方法，即凝膠法和光度測定法，後者包括濁度法和顯色基質法。
凝膠法系通過鱟試劑與內毒素產生凝集反應的原理來檢測或半定量內毒素的方法。我公司提供多種規格的靈敏度為0.03, 0.06, 0.125, 0.25, 0.5, 1.0, 2.0 EU/ml的凝膠法鱟試劑。操作簡便，經濟，反應只需在37℃恆溫水浴內進行。
濁度法系利用檢測鱟試劑與內毒素反應過程過程中濁度變化而定量測定內毒素含量的方法。目前，我公司有提供動態濁度法鱟試劑盒，配套微板鱟試儀ELU808使用，其檢測范圍寬，檢測限可達到0.005EU/ml – 10 EU/ml，同時其樣本檢測量小，快速測定，多孔同時檢測，可提高工作效率。
同時，有顯色基質法鱟試劑盒定量測定內毒素含量，其檢測時間短，抗干擾能力強，檢測限為0.01EU/ml-1 EU/ml 。可配套使用微板鱟試儀ELU808 ， 通過96孔微板檢測，最適宜的測定波長為405nm。也可使用分光光度計，通過試管檢測，最適宜的測定波長為545nm。
凝膠法只能對樣品中內毒素含量進行定性判斷，也就是樣品中的內毒素大於或小於某一個值，不能准確測定中樣品的內毒素含量。而濁度法和顯色基質法是定量測定內毒素含量的方法。

廈門市鱟試劑實驗廠有限公司

⑺ 在檢測內毒素中，哪些樣品需要預處理方法是什麼和檢測方法

1、對於過酸、過鹼或本身有緩沖能力的供試品，需調節被測溶液（或其稀釋液）的PH值，可使用酸、鹼溶液或適宜的緩沖液調節PH值。
2、酸或鹼溶液須用細菌內毒素檢查用水在已去除內毒素的容器中配製。
3、內毒素凝膠法或定量法。