❶ 糖化血紅蛋白分析儀的檢測方法
臨床實驗室中應用的GHB測定方法主要分為兩類:
一是基於GHB與非GHB的電荷不同,如離子交換層析、電泳和等電聚集方法
二是基於血紅蛋白上糖化基團的結構特點,如親和層析和免疫實驗
(1)親和層析法:該方法特異性強,不受異常血畿蛋白的干擾。適合於臨床科室使用,尤其對小兒患者而言更有優勢。其檢測結果也完全達到並超過臨床要求,CV值5%以內。以中興科儀(北京)貿易公司的挪威小旋風糖化血紅蛋白儀NycoCard READER II為代表。
(2)高壓液相方法(HPLC),可全自動分離測定糖化血紅蛋白及血蛋白的變異體和亞型,但儀器的操作保養要求較高,CV值1%以內。以北京執信醫療公司的HLC-723 G7為代表。
(3)免疫凝集法:原理是糖化血紅蛋白與相應的單抗結合進而發生凝集反應,通過測定吸光度來表示凝集量,可用於全自動生化分析儀上進行測定。每次試驗均應使用一個新試劑盒,操作前應注意混勻試劑。指出的是免疫凝集法測定糖化血紅蛋白,精密度較差,CV值一般不大小5%。以中儀康輝(北京)貿易有限公司的DCA Vantage為代表。
(4)離子捕獲法,其原理是糖化血紅蛋白與相應抗體結合後,聯以熒游標記物,而在IMX反應孔中的玻璃纖維預先包被了高分子的四胺合物,使纖維表面帶正電,使前述的反應復合物吸附在纖維表面,經過一系列的清洗後測定其熒光強度,從而得到糖化血紅蛋白的濃度,該方法適用於成批糖化血紅蛋白標本的檢測。以北京東南化學的IMX為代表
(5)電泳方法:毛細管電泳也能分離檢測糖化血紅蛋白和血紅蛋白質的變異體,但目前尚無商品化,具有批量樣本通過能力的儀器面世,相當程度地限制了該方法的臨床應用。
❷ 糖化血紅蛋白儀的檢測方法
糖化血紅蛋白檢測方法很多,常用的有微柱法離子交換層析、親和層析、高壓液相、免疫凝集、離子捕獲法、電泳法等。 如毛細管電泳也能分離檢測糖化血紅蛋白和血紅蛋白質的變異體,但目前尚無商品化,具有批量樣本通過能力的儀器面世,相當程度地限制了該方法的臨床應用。
金標法的糖化血紅蛋白儀,CV值小於5%。
綜上所述,糖化血紅蛋白是糖尿病患者疾病控製程度一項良好的指標,糖尿病患者應定期檢測糖化血紅蛋白,並據此制定,修正相關治療方案。各醫院可根據自身標本的多少,選擇使用有關糖化血紅蛋白的檢測儀器,開展該項目的檢測。
❸ 糖化血紅蛋白的檢測方法
1、陽離子交換色譜法
原理:糖化導致血紅蛋白分子表面陽離子丟失。在弱的陽離子交換劑中,例如Biorex70,伴有增加的離子濃度和(或)pH下降,糖化血紅蛋白在非糖化血紅蛋白前先洗脫。這現象產生了糖化血紅蛋白最初的術語「快速血紅蛋白」。陽離子交換色譜法可用於小型、微型或大型柱層析方法或部分或全自動的PHLC/FPLC方法。因為,其他翻譯後修飾血紅蛋白,例如醛亞胺型、甲醯化、乙醯化、乙醛加合物、降解物、老化人工物品和異常血紅蛋白電荷交換也不同於正常的HbA0,所以已經列出了許多陽離子交換層析法的干擾因素。使用常規HPLC的方法。分離糖化血紅蛋白亞組分是能達到滿足需求的臨床精密度。然而,已知HbA1c的峰不是均一的而是包含一重要的非糖化血紅蛋白部分。少數糖化血紅蛋白也整合到HbA0主峰中。通過使用特殊的柱原料(poly-CATA)和30~40 min分離時間可以改善分離效果。這些方法可以作為參考步驟但不適合常規使用。所有的陽離子交換色譜法對pH和溫度的變化敏感,因此要控制pH和溫度。
說明:根據紅細胞代謝動力學推測初始HbA1c值大約每日破壞1/120(≈0.83%)。因為糖化在合適的治療下甚至健康人也產生,故這個理論值在體外不能達到。控制不理想的糖尿病患者通過加強治療而達到血糖量正常,可以發現HbA1c值最大下降率以大約每10 d下降正常血糖的1%(絕對的)。由於測定糖化血紅蛋白方法的精確性,兩次測定值HbA1c的差異大約1%就可認為具有臨床相關性。因為這些原因,在HbA1c兩次測定間至少有2周的時間,推薦4~6周的間隔。
因為升高的糖化血紅蛋白值是長期高糖血症的糖尿病患者相當可靠的指示劑,因而是可能診斷糖尿病的。在未治療的個體,正常的糖化血紅蛋白值臨床上可以排除明顯的糖尿病。但由於它不能檢測糖耐量受損,所以作為診斷和(或)篩選目的唯一的參數,使用糖化血紅蛋白是存在問題的。
2、電泳法
原理:相比於非糖化血紅蛋白,因糖化而變化的總電荷和糖化血紅蛋白的等電點變化是瓊脂糖凝膠或者pH梯度5.0~6.5的凝膠等電聚焦電泳分離的基礎。瓊脂糖凝膠電泳的血紅蛋白亞組分解析度很小,而等電聚焦可以更好地使亞組分分離。可能由於試驗的自動化程度不足,重要性已經下降。
3、親和層析法
原理:硼酸結合順式-羥基。商品化的m-氨基苯硼酸瓊脂糖共價結合的親和柱已可用於微柱分析檢測。將血樣本中的血紅蛋白加到層析柱後,所有的糖化血紅蛋白(HbA1和旁鏈糖化的血紅蛋白;總糖化血紅蛋白)與硼酸結合而非糖化血紅蛋白通過層析柱可被測量。在加入高濃度也包含順式-羥基的多羥基復合物,例如山梨醇後,糖化血紅蛋白與硼酸的結合被替換而從柱子上洗脫下來。親和層析法對經翻譯以後修飾的血紅蛋白和病理血紅蛋白的影響相對不敏感。利用親和層析法,僅能測定總糖化血紅蛋白。廣泛使用的親和層析方法,允許用經驗演算法從總糖化血紅蛋白值計算出「標準的HbA1c」。
4、免疫分析法
在纈氨酸β-N-末端糖化的血紅蛋白提供了一個容易被抗體識別的抗原表位。可以用單克隆抗體或多克隆抗體進行放射免疫分析和免疫酶學分析測定,抗體特異識別β鏈N-末端糖化的血紅蛋白最後4~8個氨基酸組成的抗原表位。異常的血紅蛋白或翻譯後經修飾的血紅蛋白無干擾。
目前的免疫化學試驗不僅檢測HbA1c,通常也同時檢測HbA2c,因為血紅蛋白A2糖化δ鏈的表位是相同的。抗體直接抗β-鏈的最後四個氨基酸的糖化表位的免疫化學試驗也可用進行檢測,例如HbS1c。在大多數情況下HbA2c意義不大,雖然鐮刀細胞病時可以准確地測定纈氨酸β-N-氨基末端糖化程度,但它仍不能100%代表HbA1c。
5、離子層析法
離子層析法精密度高、重復性好且操作簡單, 被臨床廣泛採用。檢測原理由於血紅蛋白β-鏈N 末端纈氨酸糖化後所帶電荷不同, 在偏酸溶液中總糖化血紅蛋白( GH b) 及H bA 均具有陽離子的特性, 因此經過陽離子交換層析柱時可被偏酸的緩沖液平衡過的樹脂來吸附, 但二者吸附率不同, GH b正電荷較少吸附率較低, H bA 正電荷較多吸附率較高。用不同pH 的磷酸鹽緩沖液可以分次洗脫出GH b 和H bA, 用KCN 可將H b轉化為高鐵氰化血紅蛋白, 用分光光度計測定。或者得到相應的H b層析譜, 其橫坐標是時間, 縱坐標是百分比。HbA1c值以百分率來表示。現在大部分都用全自動測定儀測定。
6、等電點聚集法
是測定GH b的新技術, 它是在聚丙烯酞凝膠中加人載體兩性介質的薄板上形成一個由陽極到陰極逐漸增加的pH 梯度, 溶血液中各個組份將移動到各自的等電點的pH 位置上, 這樣就得到比一般電泳法更好的分劃效果和比較集中的色帶, 通過解析度高的微量光密度儀掃描, 可以准確地測定出各自組份的含量。由於它能夠分辨出一級結構不同的HbA、HbAc、HbF、HbS 及HbC等, 可完全避開各種物質的干擾。
7、化學發光法
採用離子捕捉免疫分析法, 應用抗原抗體反應原理, 聯以熒游標記物, 通過連接帶負電的多陰離子復合物, 吸附到帶正電的纖維表面, 經過一系列徹底清洗等步驟後, 測定熒光強度變化率, 計算濃度。採用專用試劑包和免疫發光分析儀,其檢測系統易於規范和重復, 可減少操作技術誤差, 檢測的靈敏度和特異性高, 批內、批間變異系數小, 回收率高, 准確度高, 交叉污染率小, 影響因素少。
8、酶法
原理為用特殊蛋白酶分解Hb, 3~ 5 min內果糖基氨基酸從H b分離, 果糖基氨基酸氧化酶( FAOD )從果糖基氨基酸產生H2O2, H2O2經POD與DA- 64反應, 選擇751 nm 測吸光度改變求得GHb濃度。
❹ 糖化血紅蛋白用什麼檢測的
糖化血紅蛋白是人體血液中紅細胞內的血紅蛋白與血糖結合的產物。人體血液中紅細胞內的血紅蛋白與血糖結合的產物是糖化血紅蛋白,血糖和血紅蛋白的結合生成糖化血紅蛋白是不可逆反應,並與血糖濃度成正比,且保持120天左右,所以可以觀測到120天之前的血糖濃度。糖化血紅蛋白的英文代號為HbA1c。糖化血紅蛋白測試通常可以反映患者近8~12周的血糖控制情況。糖化血紅蛋白是糖尿病診斷新標准和治療監測的「金標准」隨著人們對糖尿病知識的逐步了解,多數人已意識到空腹和餐後2小時血糖監測的重要性,並常常把二者的測定值作為控制血糖的標准。其實不然,空腹和餐後2小時血糖是診斷糖尿病的標准,而衡量糖尿病控制水平的標準是糖化血紅蛋白。
❺ 糖化血紅蛋白(快速法)哪位測過,請教!
3個前我去測糖化,醫生只抽了指尖一點血,不知是否快速,但是結果還是下午才拿到。醫生說,如果同時測血糖就抽靜脈,順便測糖化。如果單測糖化,指尖就可以了。
❻ 糖化血紅蛋白 如何檢查
去醫院做個糖化血紅蛋白檢測,一般收費在40~75左右,各地不一樣的,這個的檢測結果代表的是3個月內你的糖化血紅蛋白的情況,比較准確,不會受到幾天內飲食的影響。
❼ 糖化血紅蛋白(HbAlc)是檢測什麼的
怎麼這么多人問這東西啊,自己網路,別指望別人告訴你,那都是斷章取義,由於缺乏專業知識,你很難判斷哪些是你需要的,給你點資料吧
HbAlc就是糖化血紅蛋白的主要成分,由於血糖受飲食、活動、葯物的影響而波動,因此,測定一次血糖只能反映取血瞬間的血糖水平,而不能反映采血前一段時間血糖情況的全貌。而糖化血紅蛋白是血紅蛋白在紅細胞整個生命期間緩慢地、持續地與葡萄糖結合的產物,可以反映采血前1~2月的平均血糖水平,這有利於對患者病情的評估和制定治療方案。糖化血紅蛋白包括HbAla、HbAlb、HBAlc,統稱HbAl。HbAlc是糖化血紅蛋白(HbAl)的主要成分,是目前常用的測定指標,也是反映血糖的最佳指標。HbAlc的正常值是<6.2%。一般認為糖化血紅蛋白升高1%,大致反映過去1~2月平均血糖值升高30mg/dl。
以上是我拷貝的,是否合適你自己判斷!
❽ 糖化血紅蛋白的測定方法
三個月左右測定一次,到正規醫院內科找醫生開個單抽個血就可以了,隨時都可以,幾十塊錢搞定,反映前3各月血糖控制平均水平,結合平時的峰谷血糖,可知道自己的血糖控制綜合水平。
❾ 糖化血紅蛋白如何檢測
醫院抽血,寫明化驗的種類,就可以了,糖化血紅蛋白是檢驗糖尿病很重要的一個指標。
❿ 糖化血紅蛋白是如何測定的
意見建議:你好,糖尿病人來說是比較理想的指標了。說明血糖控制的還可以,正常的標準是6.5以下