非洲豬瘟探針法的檢測方法

㈠ 非洲豬瘟最簡單的辨認方法，是如何傳播的

1、病豬的體溫上升到40-42℃，皮膚發紅，結膜潮紅充血，體表出血，精神萎靡，尤其是下腹、四肢等部位的症狀較嚴重。2、病豬開始喘氣咳嗽，呼吸困難，淋巴結、胃腸粘膜出血，同時伴有嘔吐、食慾下降甚至廢絕的現象，排出的糞便較干硬。3、母豬染病後會出現不孕、流產、死胎等情況，剖檢死亡的病豬時可發現肺臟、肝臟、脾臟等臟器和淋巴結嚴重腫大。

一、非洲豬瘟最簡單的辨認方法

1、病豬開始發熱，體溫達到40-42℃，皮膚發紅，結膜潮紅、充血，體表出血、瘀血，精神萎靡。病豬的下腹、四肢、臀部等部位的症狀尤其嚴重。

2、病豬開始喘氣、咳嗽、呼吸困難，淋巴結、胃腸粘膜、腎出血。病豬出現嘔吐情況，食慾下降甚至廢絕，糞便干硬，或出現便秘、排膿性血糞便的情況。病豬的眼睛、鼻子會有漿液性、粘液性物質流出。

3、母豬染病時，會出現不孕、流產甚至死胎等情況。病豬死亡後，剖檢時可發現肺臟、肝臟、脾臟等臟器和淋巴結嚴重腫大，且一般有出血、瘀血等情況。

4、急性發病時，此疾病的死亡率比較高，尤其是母豬、大豬會快速死亡。

二、非洲豬瘟是如何傳播的

1、傳播方法

（1）體液傳播

非洲豬瘟病毒可通過豬肉製品、豬的血液與精液進行傳播，而且可以在這些物質中長時間保持活性。

（2）蟲媒傳播

非洲豬瘟病毒可以通過螯蠅、蜱蟲、蚊子、牤等昆蟲進行傳播，並長時間保持活性。

（3）其他方式

非洲豬瘟病毒污染飼料、水源以及器具後，可通過這些媒介進行傳播，污染農場附近的空氣、豬場的工作人員及其服裝也是潛在的傳染源。

2、防控方法

（1）消滅養殖場裡面的昆蟲，防止傳播病毒。

（2）投喂健康、安全的飼料，不可飼喂泔水。

（3）按時給豬群打疫苗，如果豬場內有部分豬只因不明原因而死亡，需報告有關部門。

（4）避免讓外來人員、車輛進入養殖場，養殖場裡面的飼料及用具需及時消毒。一旦爆發病情，應及時封閉養殖場。

㈡ DG55155Tl設置方法

團體標准T/CVMA 5—2018
非洲豬瘟病毒實時熒光PCR檢測方法
Real-time PCR assay for detection ofAfrican swine fever virus
中國獸醫協會發布
前言
本標准按 GB/T 1.1-2009給出的規則起草。
本標准由中國獸醫協會提出並歸口。
本標准起草單位： 中國動物疫病預防控制中心、中國獸醫葯品監察所、中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所、中國農業科學院蘭州獸醫研究所、北京海關。
本標准主要起草人： 倪建強、王傳彬、王琴、仇華吉、殷宏、楊林、辛盛鵬、劉艷華、劉洋、宋曉暉、趙啟祖、羅玉子、劉志傑、張乾義、喬彩霞、夏應菊、楊吉飛、徐璐、顧小雪、亢文華、李碩、畢一鳴。
1、范圍
本標准規定了非洲豬瘟病毒實時熒光PCR檢測方法的試劑、儀器和耗材、操作步驟、結果判定、實驗室生物安全等技術要求。
本標准適用於豬脾臟、淋巴結、血液等組織和血粉中非洲豬瘟病毒核酸的檢測。
2、規范性引用文件
下列文件對於本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用於本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用於本文件。
GB 19489 實驗室 生物安全通用要求
NY/T 541 獸醫診斷樣品採集、保存與運輸技術規范
3、試劑
3.1 DNA提取試劑
DNA提取試劑的配製見附錄A，或選取商品化的病毒DNA提取試劑盒並參照說明書進行DNA提取。
3.2 2 × PCR緩沖液
2 × PCR緩沖液的配製見附錄A。
3.3 引物探針
3.3.1 採用針對非洲豬瘟病毒VP72基因（核苷酸序列見附錄B）的引物及探針：
上游引物ASF-CADC-rPCRF：5'-1528-ATAGAGATACAGCTCTTCCAG-1548-3'
下游引物ASF-CADC-rPCRR：5'-1660-GTATGTAAGAGCTGCAGAAC-1679-3'
熒光探針ASF-CADC-Probe：5'-1638-FAM-TATCGATAAGATTGAT-MGB--3'
3.3.2 可以使用世界動物衛生組織（OIE）在陸生動物診斷技術和疫苗手冊（Manual of Diagnostic Tests andVaccines for Terrestrial Animals）第2.8.1章African Swine Fever中提供的引物和探針，並按照手冊中規定的檢測程序和判定標准操作：
上游引物ASF-OIE-rPCRF：5'-1627-CTGCTCATGGTATCAATCTTATCGA-1651-3'
下游引物ASF-OIE-rPCRR：
5'-1857-GATACCACAAGATCRGCCGT-1876-3'
熒光探針ASF-OIE-Probe：
5'-1761-FAM-CCACGGGAGGAATACCAACCCAGTG-TAMRA-1785-3'
3.3.3 使用國家農業行政主管部門批準的其他引物、探針，應對檢測程序和判定標准作相應調整。
3.4 陰性及陽性對照
陰性及陽性對照的制備方法見附錄C。
3.5 其他試劑
消毒液、5U/μLTaq DNA聚合酶、無菌無核酸酶水、0.01mol/L PBS（pH7.2）。
消毒液配製見附錄A， 0.01mol/L PBS配製見附錄A。
4、儀器和耗材
分析天平（感量0.1mg）、高速台式冷凍離心機（最高離心速度不低於12 000r/min）、冰盒、實時熒光PCR儀及配套反應管（板）、組織研磨器、-20℃冰箱、可調移液器（2 μL，20 μL，200μL，1 000 μL）、1.5mL離心管（無核酸酶）。
5、操作步驟
5.1 樣品採集及運輸
樣品採集及運輸按照NY/T541的規定執行，採集豬的脾臟、淋巴結、血液等組織材料或血粉用於檢測，樣品應在冷藏條件下盡快運輸至實驗室，避免反復凍融。采樣時應穿戴個人生物安全防護裝備，實施現場消毒和廢棄物處理。
5.2 樣品處理
檢測前樣品應在二級生物安全櫃中處理。取0.1g～0.2g組織或血粉，經研磨破碎後加1mL的0.01mol/L PBS（pH7.2）製成勻漿，經12 000 r/min離心2Min取上清；全血、血清樣品直接取1mL，置於1.5 mL離心管內蓋緊管帽。將上述處理的樣品置於60℃條件下滅活30min。
5.3 樣品保存
採集或處理好的樣品在2℃～8℃條件下保存應不超過24 h；如需長期保存，應放置-70℃冰箱，但應避免反復凍融（凍融不超過3次）。
5.4 病毒DNA提取
5.4.1 DNA提取應在樣本制備區內採用以下方法進行，若使用其他等效的病毒DNA提取試劑，則按照試劑說明書操作。
5.4.2 待檢樣品、陽性對照和陰性對照的份數總和用n表示，取n個滅菌1.5 mL離心管，逐管編號。
5.4.3 每管加入200μL DNA提取液1，然後分別加入待測樣品、陰性對照和陽性對照各200μL，1份樣品換用1個吸頭，混勻器上震盪混勻5s。於4℃～25℃條件下，13 000 r/min離心10 min。DNA提取液1見附錄A。
5.4.4 盡可能吸取上清、棄去，吸頭不要碰到沉澱，再加入10 μL DNA提取液2，混勻器上震盪混勻5 s。於4℃～25℃條件下，2 000 r/min離心10s。DNA提取液2見附錄A。
5.4.5 100℃干浴或沸水浴10 min。
5.4.6 加入90μL無DNA酶的滅菌去離子水，13 000 r/min離心10 min，上清即為提取的DNA，-20℃保存備用。無DNA酶的滅菌去離子水見附錄A。
5.5 實時熒光PCR操作
5.5.1 在反應混合物配製區、樣品制備區和檢測區分別進行5.5.2～5.5.4。
5.5.2 每個檢測反應體系需使用20μL實時熒光PCR反應液。根據5.4.2中設定的n值，按附錄D配製反應液，充分混勻後分裝，每個PCR反應管20μL。轉移PCR反應管至 樣品制備區 。
5.5.3 在上述5.5.2的反應管中分別加入5.4中提取的DNA溶液5μL，使每管總體積達到25 μL，記錄反應管對應的樣品編號。蓋緊管蓋後，瞬時離心。
5.5.4 將5.5.3加樣後的反應管放入實時熒光PCR檢測儀內，記錄反應管擺放順序。選定5-羧基熒光素（FAM）作為報告基團，小溝結合物（MGB）為淬滅基團，反應參數設置如下： 預變性95℃/3 min；95℃/15 s，52℃/10 s，60℃/35 s，45個循環； 在每次循環的60℃退火延伸時收集熒光。試驗結束後，根據收集的Ct值和熒光曲線判定結果。
6、結果判定
6.1 結果分析條件設定
實時熒光PCR檢測閾值設定原則：閾值線超過陰性對照擴增曲線的最高點，且相交於陽性對照擴增曲線進入指數增長期的拐點，或根據儀器雜訊情況進行調整。每個樣品反應管內的熒光信號到達設定的域值時所經歷的循環數即為Ct值。
6.2 結果描述及判定
當陽性對照Ct值≤28.0且出現典型擴增曲線，陰性對照無Ct值無擴增曲線時，實驗成立，實例參考附錄E。 當被檢樣品出現典型的擴增曲線且Ct值≤38.0時，判為非洲豬瘟病毒核酸陽性 ； 被檢樣品無Ct值，判為非洲豬瘟病毒核酸陰性；對於Ct值＞38.0的樣品且出現典型的擴增曲線，應重檢，重檢仍出現上述結果的判為陽性，否則判為陰性。
7、實驗室生物安全要求
7.1 本方法涉及非洲豬瘟感染性樣品的實驗操作應在（動物）生物安全三級試驗室中進行，實驗室生物安全管理要求見GB 19489。國家農業行政主管部門另有規定的，按其規定執行。
7.2 使用過的實驗器材和液體廢棄物應先經過消毒液浸泡處理，再經高溫高壓處理後廢棄。剩餘樣品等固體廢棄物應在生物安全櫃中密封包裝，經表面消毒後移出，再經高溫高壓處理後廢棄。
一
附錄 A (規范性附錄) 試劑的配製
A.1 DNA提取液1
PEG8000晶體20.74g，NaCL17.53g，加去離子水定容到100 mL。
A.2 DNA提取液2
1mol/LTris.Hcl 2 mL，2 mol/L KCL5 mL，0.5 mol/L EDTA 0.5 mL，NP-40 1 mL，加去離子水定容到100 mL。
即KCL14.912g，Tris鹼12.114g，1.2068 mL濃HCl，EDTA14.612g，NaOH 6g, 加去離子水定容到100 mL。
A.3 2×PCR緩沖液
滅菌去離子水 70 mL
三羥甲基氨基甲烷（Tri s） 0.79 g
氯化鉀 1.865 g
曲拉通X-100 0.5 mL
dATP (100mmol/L) 2.5 mL
dTTP (100mmol/L) 2.5 mL
dGTP (100mmol/L) 2.5 mL
dCTP (100mmol/L) 2.5 mL
六水氯化鎂 0.61 g
鹽酸 調pH至9.0
滅菌去離子水 加至100 mL
A.4 消毒液
8‰氫氧化鈉或3‰福爾馬林或3%鄰苯基苯酚或碘化合物等其他消毒試劑均可。
A.5 磷酸鹽緩沖液（PBS）的配方
A.5.1 A液
0.2mol/L磷酸二氫鈉水溶液：NaH2PO4·H2O 27.6 g，溶於蒸餾水中，最後定容至1 000 mL。
A.5.2 B液
0.2mol/L磷酸氫二鈉水溶液：Na2HPO4·7H2O 53.6 g（或Na2HPO4·12H2O 71.6 g或Na2HPO4·2H2O 35.6 g），加蒸餾水溶解，最後定容至1 000 mL。
A.5.3 0.01 mol/L、pH 7.2 磷酸鹽緩沖液（PBS）的配製
取A液14 mL、B液36 mL，加NaCl 8.5 g，用蒸餾水定容至1 000 mL。經過濾除菌後，無菌條件下分裝。
A.6 無DNA酶的滅菌去離子水
無DNA酶的滅菌去離子水是用1 %DEPC處理後的去離子水，電阻應該大於18.2mΩ。
二
附錄B （資料性附錄）非洲豬瘟病毒VP72基因參考序列
1ATGGCATCAG GAGGAGCTTT TTGTCTTATT GCTAACGATG GGAAGGCCGA CAAGATTATA
61TTGGCCCAAG ACTTGCTGAA TAGCAGGATC TCTAACATTA AAAATGTGAA CAAAAGTTAT
121GGGAAACCCG ATCCCGAACC CACTTTGAGT CAAATCGAAG AAACACATTT GGTGCATTTT
181AATGCGCATT TTAAGCCTTA TGTTCCAGTA GGGTTTGAAT ACAATAAAGT ACGCCCGCAT
241ACGGGTACCC CCACCTTGGG AAACAAGCTT ACCTTTGGTA TTCCCCAGTA CGGAGACTTT
301TTCCATGATA TGGTGGGCCA TCATATATTG GGTGCATGTC ATTCATCCTG GCAGGATGCT
361CCGATTCAGG GCACGTCCCA GATGGGGGCC CATGGGCAGC TTCAAACGTT TCCTCGCAAC
421GGATATGACT GGGACAACCA AACACCCTTA GAGGGCGCCG TTTACACGCT TGTAGATCCT
481TTTGGAAGAC CCATTGTACC CGGCACAAAG AATGCGTACC GAAACTTGGT TTACTACTGC
541GAATACCCCG GAGAACGACT TTATGAAAAC GTAAGATTCG ATGTAAATGG AAATTCCCTA
601GACGAATATA GTTCGGATGT CACAACGCTT GTGCGCAAAT TTTGCATCCC AGGGGATAAA
661ATGACTGGAT ATAAGCACTT GGTTGGCCAG GAGGTATCGG TGGAGGGAAC CAGTGGCCCT
721CTCCTATGCA ACATTCATGA TTTGCACAAG CCGCACCAAA GCAAACCTAT TCTTACCGAT
781GAAAATGATA CGCAGCGAAC GTGTAGCCAT ACCAACCCGA AATTTCTTTC ACAGCATTTT
841CCCGAGAACT CTCACAATAT CCAAACAGCA GGTAAACAAG ATATTACTCC TATCACGGAC
901GCAACGTATC TGGACATAAG ACGTAATGTT CATTACAGCT GTAATGGACC TCAAACCCCT
961AAATACTATC AGCCCCCTCT TGCGCTCTGG ATTAAGTTGC GCTTTTGGTT TAATGAGAAC
1021GTGAACCTTG CTATTCCCTC AGTATCCATT CCCTTCGGCG AGCGCTTTAT CACCATAAAG
1081CTTGCATCGC AAAAGGATTT GGTGAATGAA TTTCCTGGAC TTTTTGTACG CCAGTCACGT
1141TTTATAGCTG GACGCCCCAG TAGACGCAAT ATACGCTTTA AACCATGGTT TATCCCAGGA
1201GTCATTAATG AAATCTCGCT CACGAATAAT GAACTTTACA TCAATAACCT GTTTGTAACC
1261CCTGAAATAC ACAACCTTTT TGTAAAACGC GTTCGCTTTT CGCTGATACG TGTCCATAAA
1321ACGCAGGTGA CCCACACCAA CAATAACCAC CACGATGAAA AACTAATGTC TGCTCTTAAA
1381TGGCCCATTG AATATATGTT TATAGGATTA AAACCTACCT GGAACATCTC CGATCAAAAT
1441CCTCATCAAC ACCGAGATTG GCACAAGTTC GGACATGTTG TTAACGCCAT TATGCAGCCC
1501ACTCACCACG CAGAGATAAG CTTTCAGGAT AGAGATACAG CTCTTCCAGA CGCATGTTCA
1561TCTATATCTG ATATTAGCCC CGTTACGTAT CCGATCACAT TACCTATTAT TAAAAACATT
1621TCCGTAACTG CTCATGGTAT CAATCTTATC GATAAATTTC CATCAAAGTT CTGCAGCTCT
1681TACATACCCT TCCACTACGG AGGCAATGCG ATTAAAACCC CCGATGATCC GGGTGCGATG
1741ATGATTACCT TTGCTTTGAA GCCACGGGAG GAATACCAAC CCAGTGGTCA TATTAACGTA
1801TCCAGAGCAA GAGAATTTTA TATTAGTTGG GACACGGATT ACGTGGGGTC TATCACTACG
1861GCTGATCTTG TGGTATCGGC ATCTGCT
三
附錄C （規范性附錄）非洲豬瘟病毒核酸陽性及陰性對照
C.1陽性對照
陽性對照制備方法：人工合成非洲豬瘟病毒VP72基因片段，序列參見附錄B，將VP72基因連接於pMD20-T載體製成陽性質粒pMD20-T-VP72，使用非洲豬瘟病毒陰性豬的組織研磨液將質粒稀釋至濃度為10 000copies/L，保存於-20℃備用。
C.2 陰性對照
陰性對照為非洲豬瘟病毒陰性豬的組織研磨液。
四
附錄D （規范性附錄）實時熒光PCR反應液配方
實時熒光PCR反應液配方見表D.1。
表D.1 實時熒光PCR反應液配方
組 分
1個檢測體系的加入量
2×PCR 緩沖液a
12.5μL
dNTP（2.5 mmol/L）
1.0 μL
上游引物（10 μmol/L）
1.0 μL
下游引物（10 μmol/L）
1.0μL
探針（10 μmol/L）
1.0 μL
Taq 酶b（5U/μL）
0.5μL
去離子水
3μL
總體積
20μL
2×PCR 緩沖液a: 參見附錄A.1配方。
Taq 酶b：具有5』→3』外切活性。
五
附錄 E （資料性附錄）非洲豬瘟病毒實時熒光PCR擴增實例參考
圖D.1給出了非洲豬瘟病毒實時熒光PCR擴增實例。
圖E.1 非洲豬瘟病毒核酸實時熒光PCR典型擴增曲線示意圖
(資料來源：中國獸醫協會）

㈢ 非洲豬瘟的檢測方法有哪些非洲豬瘟疫情防控方法是什麼

熒光定量 PCR 方法，該方法是將光譜技術引入到PCR 反應中，通過熒光信號的強弱變化定量測定特異性擴增產物的量，解決了常規 PCR 方法敏感性低和電泳檢測中溴化乙錠對環境的污染問題。

等溫擴增法，該方法是一種新興的分子生物學檢測方法，等溫擴增方法不需要 PCR 中的變性、退火步驟，即可完成對靶序列的循環擴增，大幅縮短了時間，整個擴增反應時間一般少於 60 min，而常規PCR 方法的反應時間一般需要 2 h 以上。等溫擴增試劑盒適合現場檢測，靈敏度高，能夠大幅提高豬瘟防控的可行性。

要減少場外人員和車輛進入豬場，要對人員和車輛入場前徹底消毒，要對豬群實施全進全出飼養管理，要對新引進生豬實施隔離，要按規定申報檢疫。

非洲豬瘟防控注意事項

養殖場應該堅持全進全出，自繁自育的養殖模式，構建完善的封鎖隔離措施，避免豬和野豬直接接觸。養殖場在生豬調運過程中，盡量不要跨省引進種豬，必須引種時，一定要進行嚴格的產地檢疫、疫情檢測，嚴格執行落地報告制度和隔離觀察制度。

殖場內部如果發現非洲豬瘟可疑疫情，嚴格按照《非洲豬瘟疫情應急預案》進行處置，迅速採取應急措施，預防疫情傳播和蔓延。

㈣ 非洲豬瘟檢測曲線怎麼看

非洲豬瘟簡稱ASFV，很多人尤其是養豬專業戶提起非洲豬瘟就臉色大變，非洲豬瘟發病快、發病急、傳染快，非洲豬瘟會導致養殖戶錢財損失，非洲豬瘟是一種動物疫病，我們可以利用非洲豬瘟檢測儀來檢測，提前做好防範預防措施。非洲豬瘟檢測儀是用於運行病毒檢測實驗，並對實驗數據進行分析；儀器既可在實驗室內操作，又可用於野外科學實驗，配合相應試劑，對取自待檢測樣本的分析物或其他分析物中的目標核酸進行快速、准確的定性檢測。

非洲豬瘟檢測

免疫電泳試驗抗原於待檢血清間出現白色沉澱線者為陽性直接免疫熒光試驗：在熒光顯微鏡下觀察細胞，若細胞漿內有明亮的熒光團，則為陽性。間接酶聯免疫蝕斑試驗：直接用肉眼觀察蝕斑，若顏色為棕色，則表示為陽性酶聯免疫吸附試驗：對照成立後，若待檢樣品的吸收值大於0.3，則可以判定為陽性。

㈤ 非洲豬瘟怎麼檢測，潛伏幾天才發現

1、免疫電泳試驗：抗原於待檢血清間出現白色沉澱線者為陽性。2、直接免疫熒光試驗：在熒光顯微鏡下觀察細胞，若細胞漿內有明亮的熒光團，則為陽性。3、間接酶聯免疫蝕斑試驗：直接用肉眼觀察蝕斑，若顏色為棕色，則表示為陽性。4、酶聯免疫吸附試驗：對照成立後，若待檢樣品的吸收值大於0.3，則可以判定為陽性。

一、非洲豬瘟怎麼檢測

1、免疫電泳試驗

若抗原於待檢血清間出現白色沉澱線，則為陽性。

2、直接免疫熒光試驗

在熒光顯微鏡下觀察細胞，如果發現細胞漿內有明亮的熒光團，則表示為陽性。

3、間接酶聯免疫蝕斑試驗

直接用肉眼（或使用顯微鏡）觀察蝕斑，若顏色是棕色，則表示為陽性，沒有顏色則表示為陰性。

4、酶聯免疫吸附試驗

對照成立後（陽性血清對照吸收值＞0.3，陰性血清吸收值＜0.1），若待檢樣品的吸收值＞0.3，則可以判定為陽性。

5、紅細胞吸附試驗

將健康豬的白細胞加上病豬的血液（或組織提取物）放在37℃的環境中培養，若觀察到大量的紅細胞吸附於白細胞上面形成玫瑰花狀（或桑椹體狀），則表示為陽性。

6、間接免疫熒光試驗

在長滿Vero細胞的蓋玻片上接種非洲豬瘟病毒，並准備未接種病毒的Vero細胞對照。試驗後若對照正常，待檢樣品在細胞漿內出現明亮的熒光團和熒光細點，則可以判定為陽性。

二、非洲豬瘟潛伏幾天才發現

1、非洲豬瘟的潛伏期

（1）一般情況下，非洲豬瘟的潛伏期為4-19天左右，潛伏期的長短與病毒的毒力、被感染豬群的抗病能力等因素有關。

（2）非洲豬瘟病毒的毒力可分為3個等級，即低毒力（潛伏期最長，發病最晚，可造成慢性、亞急性或不明顯的發病）、中等毒力（潛伏期中等，臨床症狀有所減輕，會造成慢性或不明顯症狀）、強毒力（潛伏期較短，臨床會表現出急性症狀，而且病豬的皮膚上會出現出血點，並伴有厭食或嘔吐、體溫升高的情況，病死率達到100%）。

2、防控方法

（1）避免外來人員、車輛、其他動物進入養殖場，場內的用具、飼料都要嚴格消毒。

（2）按時滅殺場內的昆蟲，避免傳播病毒，每年春秋季節要定期給豬群注射疫苗，斷奶仔豬和新購買的豬要做好防疫注射，成年豬要注射1次豬瘟兔化弱毒疫苗。

（3）新購買的豬要隔離觀察30天，待確定無病後為其注射豬瘟疫苗，注射後才能混群。若豬場處於豬瘟常發疫區，則仔豬達到21-30日齡便要注射1次，達到55-60日齡後再注射1次。

㈥ 哪裡能檢測非洲豬瘟病毒，檢測要多長時間

農業農村部：在動物檢疫中對生豬及其產品開展非洲豬瘟病毒檢測，應當使用我部批准或經中國動物疫病預防控制中心比對符合要求的檢測方法及檢測試劑盒（試紙條），確保檢測結果准確。符合要求的檢測方法及檢測試劑盒（試紙條）可從中國動物疫病預防控制中心網站查詢。

中國動物疫病預防控制中心與中國動物衛生與流行病學中心、中國獸醫葯品監察所、中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所等單位共同組成了評價專家組，開展了非洲豬瘟現場快速檢測試劑評價工作

中國動物疫病預防控制中心：

非洲豬瘟病豬主要臨床表現差異較大，不易識別，但通常有以下幾種或全部典型症狀，包括高熱、嘔吐、腹瀉或便秘，有的便血，虛弱、難以站立，體表不同部位（尤其是耳、鼻、腹部、臀部）皮膚呈紅色、紫色或藍色，有的咳嗽、呼吸困難，母豬流產、產死胎或弱胎。出現上述臨床症狀後，一般2-10天內死亡。剖檢可見內臟多個器官組織出血，脾臟顯著腫大，顏色變暗，質地變脆。部分首次發生非洲豬瘟的養殖場，豬群發病非常急，最急性型不表現任何症狀而突然死亡，無特徵性剖檢病變。

資料來源：中國動物疫病預防控制中心《非洲豬瘟現場排查手冊》