飲料的微生物質檢測方法

① 怎麼檢驗飲料中的大腸桿菌

大腸桿菌檢驗（包括(一)檢驗方法；(二)培養基 ）

(一)檢驗方法
1．乳糖發酵試驗。以無菌操作採取樣品，採取量及稀釋倍數，依據國家或當地衛生標准要求及樣品污染情況而定。將待檢樣品接種於乳糖膽鹽發酵管內，接種量在l m J以上者，用雙料乳糖膽鹽發酵管，lm1及1mI以下者，用單料乳糖膽鹽發酵管。每一稀釋度接種3管，置36±l℃溫箱內，培養24±2小時，如所有乳糖膽鹽發酵管都不產氣，則可報告為大腸菌群陰性；如有產氣者，則按下列程序進行。
2．分離培養。將產氣的發酵管分別轉種在伊紅美藍瓊脂平板上，置36±l℃溫箱內，培養18～24小時，然後取出，觀察菌落形態，並作革蘭氏染色和證實試驗。
3．證實試驗。在上述平板上，挑取可疑大腸菌群菌落l～2個進行革蘭氏染色，同時接種乳糖發酵管，置36±1℃ 溫箱內培養24±2小時，觀察產氣情況。凡乳糖管產氣，革
蘭氏染色為陰性的無芽胞桿菌，即可報告為大腸菌群陽性。
4．報告。根據證實為大腸菌群陽性的管數，查MPN檢索表，報告每l 00ml(g)大腸菌群的最可能數。
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(二)培養基

①乳糖膽鹽發酵培基

成分：蛋白腖：20g
豬膽鹽(或牛，羊膽鹽)：5g
乳糖:10g
0．04％溴甲酚紫水溶液: 25m1
蒸餾水: 1 000m1
製法：將蛋白腖、膽鹽及乳糖溶於水中，校正pH，加入指示劑，分裝每管l 0ml，並放入一個小倒管，高壓滅菌115℃15分鍾。
附註：雙料乳糖膽鹽發酵培基除蒸餾水外，其他成分加倍。
用途：乳糖發酵試驗用。
原理：細菌分解糖類是依靠細菌細胞所產生的各種酶類的作用，細菌產生的分解糖類的酶，隨細菌種類不同而異，可以此來鑒別細菌。
乳糖是雙糖，細菌分解雙糖的酶大多是胞外酶。乳糖被乳糖酶水解成葡萄糖和半乳糖，葡萄糖可直接被細菌利用，而半乳糖則需在細胞內轉化為葡萄糖後再被利用。
糖發酵試驗主要是測定細菌分解糖類以後所產生的酸，以培基pH降低(指示劑變色)作為觀察結果的指標。
大腸桿菌等細菌在酸性環境中，由於甲酸脫氫酶的作用，可使甲酸分解成CO2和H2，在培基中產生大量氣體，進入倒管中，以便觀察。
註：常用於供發酵試驗的各種糖類、醇類和糖苷類(見表3-1)

②伊紅美藍瓊脂培基
成分：蛋白腖 10g
乳糖 10g
磷酸氫二鉀 2g
瓊脂 17g
2％伊紅Y溶液 20ml
0．65％美藍溶液 10ml
蒸餾水 1000ml
pH7.1
製法：將蛋l白腖、磷酸鹽和瓊脂溶解於蒸餾水中，校正pH，分裝於燒瓶內，高壓滅菌121℃15分鍾備用。臨用時加入乳糖，並加熱溶化瓊脂，冷至50一55℃，加入伊紅和美藍溶液，搖勻，傾注平板。
原理：大腸菌群細菌發酵乳糖產酸，使伊紅與美藍結合而成黑色化合物，故菌落呈黑紫色，有時還可產生金屬光澤。黑色程度與光澤產生情況與伊紅、美藍二者比倒有關。不發酵乳糖的細菌(如沙門氏菌、志賀氏菌)則為無色菌落。

③乳糖發酵培基
成分：蛋白腖 20g
乳糖 10g
O．04％溴甲酚紫水溶液 25ml
蒸餾水 1000ml
pH7．4
製法：將蛋白腖及乳糖溶於水中，校正pH，加入指示劑，按檢驗要求分裝30ml、10ml或3ml，並放入一個小倒管，高壓滅菌115℃15分鍾。
附註： 』
(1)雙料乳糖發酵管除蒸餾水外，其他成分加倍。
(2)30ml和10ml乳糖發酵管專供醬油及醬類檢驗用．3ml乳糖發酵管供大腸菌群
證實試驗用。
4．蛋白腖水
成分：蛋白腖(或胰蛋白腖) 20g
氯化鈉 5g
蒸餾水 1 000ml pH7．4

② 如何檢測飲料微生物含量是否超標

第一要查詢國家關於食品飲料中中微生物數量的相關規定
第二要通過油鏡和血細胞計數版統計培養後微生物數量。與國家規定比較。
總之，飲料往往會因為運輸保存過程中的疏漏會導致變質，一般而言正規廠家保質期內基本無公害。

③ 食品微生物檢測國家標准

食品微生物檢驗方法是食品質量管理必不可少的重要組成部分，它是貫徹"預防為主"的方針，可以有效地防止或者減少食物人畜共患病的發生，保障人民的身體健康。
食品微生物檢驗是衡量食品衛生質量的重要指標之一，也是判定被檢食品是否食用的科學依據之一。
通過食品微生物檢驗，可以判斷食品加工環境及食品衛生情況，能夠對食品被細菌污染的程度作出正確的評價，為各項衛生管理工作提供科學依據。
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①生產環境的檢驗:車間用水、空氣、地面、牆壁等。
②原輔料檢驗:包括食用動物、穀物、添加劑等一切原輔材料。
③食品加工、儲藏、銷售諸環節的檢驗:包括食品從業人員的衛生狀況檢驗、加工工具、運輸車輛、包裝材料的檢驗等。
④食品的檢驗:對出廠食品、可疑食品及食物中毒食品的檢驗。
折疊編輯本段范圍
國內外開展微生物檢驗的食品種類較多，食品分類方法也不盡相同。總的來看涉及微生物檢驗的食品種類主要有:奶製品、預烹煮食品、飲用水、蛋製品、水果、穀物、嬰幼兒食品、肉及肉製品、軟體動物、禽肉、貝類、白明膠、香草(葯)、即食食品、罐頭食品、調味品，粉類製品、豆製品、冷凍飲品、糖果、海鮮、甜點、蔬菜、藻類、食療食品、米面製品等。
我國開展微生物檢驗的重點食品種類為:奶製品、罐頭食品、調味品、蛋製品、澱粉類製品、發酵和非發酵性豆製品、冷凍飲品、糖果、飲用天然礦泉水等，其中食糖以及保健品的微生物檢驗為我國所獨有。
折疊編輯本段指標
目前，我國衛生部頒布的食品微生物指標有菌落總數、大腸菌群和致病菌3項。
菌落總數
菌落總數是指食品檢樣在嚴格規定的條件下(樣品處理、培養基及其pH值、培養溫度與時間、計數方法等)培養後，單位重量(g)、容積(mL)或表面積(cm)上，所生成的細菌菌落總數。
大腸菌群
腸桿菌科的埃希氏菌屬，檸檬酸桿菌屬，腸桿菌屬和克雷伯菌屬統稱為大腸菌群。它們均來自人或溫血動物腸道，不形成芽孢，在35-37℃條件下發酵乳糖產酸產氣的革蘭氏陰性桿菌。這些細菌是寄居於人及溫血動物腸道內的常居菌，它隨著大便排出體外。食品中如果大腸菌群數越多，說明食品受糞便污染的程度越大。故以大腸菌群作為糞便污染食品的衛生指標來評價食品的質量，具有廣泛的意義。
致病菌
致病菌即能夠引起人們發病的細菌。大腸菌群檢驗呈陽性，並懷疑食品可能受到致病菌污染時可進行致病菌檢驗。在我國現有的國家標准中，致病菌一般指"腸道致病菌和致病性球菌"，主要包括沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、致病性鏈球菌等四種，致病菌不允許在食品中檢出。
對不同的食品和不同的場合，應選擇一定的參考菌群進行檢驗。如海產品以副溶血性弧菌作為參考菌群，蛋與蛋製品以沙門氏菌菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌等作為參考菌群，米、面類食品以蠟樣芽孢桿菌、變形桿菌、黴菌等作為參考菌群，罐頭食品以耐熱性芽孢菌作為參考菌群等。

④ 食品微生物檢驗內容與檢測技術方法

食品微生物檢驗內容與檢測技術方法

近年來，世界各地出現了諸多嚴重的食品安全事故，由於食品微生物污染而造成的質量事故嚴重威脅著人們的身體健康，如何做好食品微生物檢驗，確保食品質量安全，就需要社會各界共同努力。根據國際和國內衛生組織的相關規定和要求，所有的食品生產廠商都要對食品的質量進行嚴格的檢驗，對於生產出來食品的菌落種類、細菌數量、大腸菌群、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌等進行檢測，必須達到要求的合格標准才能進入市場進行出售。下面是我為大家帶來的食品微生物檢驗內容與檢測技術方法的知識，歡迎閱讀。

需要注意的問題

一是工作人員及活動規定。必須保證參加檢測的人員具有相應的資格，並通過相關的考試後，持證上崗才能開展相關活動。同時要求工作人員不僅需要具有高超的專業技術，還應該有良好的職業道德修養，盡可能降低人為問題的制約。檢測過程需要按照相關的活動規范和流程進行，使用無菌設備認真地進行抽樣活動，採用先進技術獲取相關信息。二是存放裝置。若想檢測過程順利進行，除了確保實驗室有必要的設施外，還應該重點考慮裝置存放的條件和要求。三是裝置和葯品的配置。在各項裝置進行安裝時應該對氣溫進行調節，確保其安穩，對裝置氣溫穩定性合乎規定要用的具體時間詳細記錄。同時在規定的時間內對各種裝置進行消毒處理，並通過感應設備對其運作狀態進行監測。對於葯品的配置，培養基往往在121℃下採用高壓濕熱滅菌法滅菌15分鍾;較為敏感的'培養基一般採用膜過濾法。四是樣本的處理。在樣本收集過程中，需要確保抽樣活動是在無菌環境下展開的，有效避免了樣本被污染。在樣本輸送時，應該防止樣本受到光線的影響而出現污染現象，抽樣之後就應該及時將其送至測試場地。一般樣本輸送時間要控制在3h內，如果無法及時送到，要確保在近乎之前的氣溫時將其完整的存放。

食品微生物檢驗內容

一是檢驗食品污染程度指示菌。細菌總數即菌落總數，是食品和生活飲用水檢樣處理後，在特定培養條件下，所得1g或者1mc檢樣中所含有的細菌菌落個數，這就是判斷食品和生活飲用水污染程度的關鍵指標。大腸菌群系是在37℃下培養24h的一群發酵乳糖、產氣、產配以及需氧或者厭氧的革蘭氏染色陰性無芽胞桿菌。這種菌群主要來源於人和牲畜的糞便，因此，可以用糞便的污染指標菌對食品的衛生質量進行評價。二是檢測食品中治病菌。在食品微生物相關檢驗標准中已經明確規定某些微生物的數量，因此在對食品污染程度指示菌檢測的同時，還應該對一些治病菌進行測定，如沙門氏菌、金黃色葡萄球菌等。

食品微生物檢測技術方法

很長時間以來，開展的此項檢測活動，是按照瓊脂平板的措施來進行的，通常要兩到三天的時間才可以完成。最近，許多的專家和組織都不斷地對工藝以及措施進行深化分析，獲取了非常高的成就，對許多措施進行了改進，切實提升了檢測的精準性以及安穩性特徵，而且獲取了許多全新的工藝，具體有如下的措施：

1.採用電阻抗法。具體的講，它是指細菌繁衍的時候，將會使培養基中的火分電惰性物質如碳水化合物、蛋白質和脂類等，代謝為具有電活性的小分子物質，其能增加培養基的導電性，進而導致阻抗出現改變，因此，可以通過檢測培養基的電阻抗變化情況來判定細菌在培養基中的生長繁殖特性，即可檢測出相應的細菌。

2.採用快速酶觸反應及代謝產物的檢測。細菌在生長繁殖過程中可合成和釋放某些特異性的酶，所以根據其特性來選用相對應的底物和指示劑，而且合理的記載信息。

3.採用分子生物學技術。它涵蓋兩項內容：1)核酸探針技術。結合鹼基互補相關的概念，使用獨特的措施來對物體進行標注。2)聚合酶鏈式反應(PCR)技術。其原理為通過加熱使雙鏈DNA經裂解成兩條單鏈，成為引物和DNA聚合酶的模板;接下來把氣溫變低，使寡聚核苷酸引物與DNA分子上的互補序列退火。通常狀態中，當退火的氣溫非常高的話，它的擴增特性就十分的優秀。

4.採用免疫學方法檢測細菌抗原和抗體的技術。具體有三項措施：1)熒光抗體檢測技術(IFA)，它又有兩種，分別是直接的以及間接地。其中第一種是直接在樣本上滴加已知特異性熒游標記的抗血清，然後對其清洗，進而獲取信息。而後一種措施是在檢樣上滴加已知細菌特異性抗血清，等到發生反映之後再仔細地清洗，再加入熒游標記的抗體後在熒光顯微鏡下觀察結果。2)免疫酶技術(EIA)，其是將抗原、抗體特異性反應和酶的高效催化作用原理結合，此法非常的獨特，而且功效非常好。通過共價結合將酶與抗原或抗體結合，形成酶標抗原或抗體，或通過免疫方法使酶與抗酶抗體結合，形成酶抗體復合物。3)免疫磁珠分離法(IMS)，即應用抗體包被的免疫磁珠，用一個磁場裝置收集鐵珠。

5.採用儀器法。1)微型全自動熒光酶標分析儀(Mini-VIDAS)，其主要採用具有優異的敏感性和特異性的酶聯熒光技術(ELFA)，得到的熒光和抗原的比例是一種順向的關系。2)全自動微生物分析系統(Vietk-AMS)。它能夠一次對非常多的樣本開展分析，而且檢測的時間不需要非常久，通常在兩到三個小時即可，此法的效率非常好，同時也將成為檢測行業全行的發展趨勢。

⑤ 純凈水微生物檢測方法

電導率越低，水越純。電導率很低是不是說明水中的微生物也不存在了呢？微生物檢測等很長時間才出結果,要是能夠通過這樣的方法檢測純凈水的話,那就可以省了很多微生物檢測步驟.

在現代食品安全速測技術中確實有利用電導變化原理來測量微生物含量的方法，叫做：Bactometer系統,是一種用於估計微生物數量的新方法
比較快速的方法是有的，設備也比較先進，可能用的並不多
例如：直接外熒光濾過技術（DEFT）
即用膠系統(SimPlate)
Bactometer系統
Malthus微生物快速測試儀
ATP生物發光技術（BL）
微量量熱法
接觸酶測定儀
放射測量法

奧地利Sy-Lab公司的BacTrac4300和BioTrac4200自動微生物快速檢測系統可以根據微生物在生長過程中利用低電導率的大分子物質（如蛋白質，多肽及碳水化合物等）進行新陳代謝，生成低分子帶電荷的分解物，使電導率發生變化，電信號經放大後顯示並記錄，檢測系統每10分鍾檢測一次電導率的變化，由計算機實時監控並自動給出結果。因此，只要先用標准方法對比做出標准曲線，就可以達到快速定量檢測菌數的目的。對於致病菌或某些特殊應用場合，則不需要做標准曲線，如有電導率顯著突變，則可以判斷為初篩陽性，用標准方法進一步確認。

其特點是：
1。採用獨創的測量培養基電導(M值)和電極電導(E值)結合的方法，測量相對電導率變化，使靈敏度大大提高，E值測量法尤其適用於一些高鹽分(高電導率)的選擇性增菌培養基，使電導率法用於致病菌快速初篩成為可能。
2。對於難以測量電導變化的微生物，如酵母和黴菌，直接電導測量經常會出現假陰性。Sylab公司採用測間接電導率的方法，通過測量KOH吸收微生物代謝產生CO2後電導率的變化反映微生物的生長情況，檢測靈敏度大大提高，杜絕假陰性可能。
3。靈敏度高。最低可檢測出0.2-1個/mL(克)樣品。
4。可檢測樣品種類廣。可檢測常見的各種食品、化妝品、葯品、環境拭子等，還可用於微生物代謝、防腐及消毒效果研究等。
5。檢測的微生物項目多。可檢測常規微生物項目(菌落總數、大腸菌群、酵母和黴菌總數)及致病微生物(沙門氏菌、李斯特菌、金黃色葡萄球菌等)。
6。檢測速度快。樣品含菌量越高，出結果越快，只需4-24小時即給出結果。大腸菌群最長12小時出結果。
7。檢測步驟簡單。廠家提供特殊配方的培養基，您只需制備好培養基，將樣品加入培養基中，放入儀器，然後啟動程序即可自動出結果。對於液體樣品無需復雜前處理，固體樣品只需進行必要的均質和稀釋即可。不需要將樣品進行梯度稀釋，不需要人工計數，輕松完成每天繁瑣的微生物檢測工作，省時省力。
8。針對中國市場，廠家可以只提供乾燥培養基，單次檢測成本低廉，特別適合中國國情。
9。基於Windows系統的智能化軟體，可對單個檢測瓶進行控制，特別適合HACCP企業進行風險評估分析。
10。與標准方法相比，符合率達到90-97%，完全能滿足檢測機構和企業對快速檢測的需要。
11。該方法通過歐洲各國的認證。