基因檢測方法armd

『壹』 檢測基因表達的方法有哪些

基因工程第四步中包括導入檢測，轉錄檢測和翻譯檢測，方法分別是dna分子雜交技術、分子雜交技術、抗原-抗體雜交技術。有的還可在個體水平是進行檢測，如抗性檢測等

『貳』 6，dna點突變常用的檢測方法有哪些

基因突變檢測方法：
（1）
pcr-sscp法是在非這性聚丙烯醯胺凝膠上，短的單鏈dna和rna分子依其大街基序列不同而形成不同構象，一個鹼基的改變將影響其構象而導致其在凝膠上的移動速度改變。其基本原理為單鏈dna在中性條件下會形成二級結構，這種二級結構依賴於其鹼基組成，即使一個鹼基的不同，也會形成不同的二級結構而出刺同的遷移率。由於該法簡單快速，因而被廣泛用於未知基因突變的檢測。
（2）異源雙鏈分析法（ha）
ha法直接在變性凝膠上分離雜交的突變型一野生型dna雙鏈。由於突變和野生型dna形成的異源雜合雙鏈dna在其錯配處會形成一突起，在非變性凝膠中電泳時，會產生與相應的同源雙dna不同的遷移率。該法與sscp相似，所不同的是sscp分離的是單鏈dna，ha法分離的是雙鏈dna，也只適合於小片段的分析。
（3）突變體富集pcr法（mutant-enriched
pcr）本法的基本原理是利用ras基因家族某個密碼子部位存在已知的限制性內切酶位點，如k-ras基因第12密碼子的bstni位點，第13密古巴子有bgⅰⅱ位點。用鏈續二次的巢式pcr來擴增包括k-ras第12、13密碼子的dna片段，在兩次擴增反應之間用相應的內切酶消化擴增的dna片段，野生型因被酶切而不能進入第二次pcr擴增，而突變型則能完整進入第二次pcr擴增並得到產物的富集。

『叄』 DNA甲基化和突變的相同點和不同點

檢測對象不同：基因檢測的對象是DNA序列，包括SNP、CNV、InDel、Gene fusion等；而基因甲基化檢測的對象主要是基因調控序列中CpG島上胞嘧啶C是否連接有甲基化基團。
2.檢測方法不同：基因檢測的方法有很多，包括測序、PCR、晶元、質譜等；基因甲基化檢測的方法有鑒定全基因組甲基化與非甲基化水平的液相色譜法、甲基化特異性限制性內切酶法、基於重亞硫酸鹽預處理的基因檢測方法。
3. 檢測目標不同：基因檢測的目標主要是檢測基因很可能有許多突變，每個突變的意義不一樣，如EGFR有葯物敏感突變，也有耐葯突變，並且突變位點分散，但這是一個概率性問題，有參考意義；而基因甲基化檢測的目標是基因的啟動子區域，甲基化位點集中在CpG島，便於用MSP檢測多個位點。

『肆』 基因檢測有哪些方法

基因檢測的方法不勝枚舉，基本的步驟是樣本的獲取（包括血液、唾液、組織樣本等）——處理（如DNA的提取與純化、文庫構建等）——序列測定——序列分析——結果解讀——報告撰寫。廣泛應用的核酸序列測定方法是直接測序法，目前最先進而且被廣泛使用的方法和儀器有第一代的Sanger測序法，第二代的高通量測序法（如美國Illumina公司的Hiseq測序儀和華大基因子公司CompleteGenomics開發的測序方法）等。目前也已出現被稱為第三代測序技術的方法，如單分子實時DNA測序法。

第一代：sanger測序
第一代的Sanger測序技術的優點是，測序讀長長，能達到800-1K bp，且測序用時短，只需要幾十分鍾即可完成一次測序，測序准確度高，目前仍是測序的金標准；缺點是通量低、成本高。

第二代：高通量測序（NGS）
第二代測序技術的優點是測序通量和效率高，成本低廉；缺點是測序讀長普遍較短，且用時較長。以目前應用最為廣泛的測序儀之一的illumina公司Hiseq2000測序儀為例，其一次測序的數據產出量可達500
Gb，但讀長為100 bp，且需要耗時14天左右。而Life technology公司的IonProton測序儀是邊合成邊通過反應體系電位的微小差別來測定鹼基序列。

第三代：單分子/納米孔測序
由於第二代技術存在短讀長和耗時長的缺陷，人們希望第三代測序技術能解決這些缺陷，所以第三代測序技術在長讀長和短耗時出發，目前尚未完全成熟，市場應用面還不算廣，而且各種測序儀之間差異較大，測序原理也是各出奇招。如Pacific Bioscience公司則是通過在PCR合成DNA的過程中，用顯微鏡檢測由熒光基團標記的dNTP反應後釋放出的熒光來測序。而一直未投產的牛津大學研發的測序儀，則是通過檢測由核酸外切酶剪切DNA時，「掉落」到檢測微孔的核苷酸來測序。

『伍』 dna點突變常用的檢測方法有哪些

基因突變檢測方法：
（1） PCR-SSCP法是在非這性聚丙烯醯胺凝膠上，短的單鏈DNA和RNA分子依其大街基序列不同而形成不同構象，一個鹼基的改變將影響其構象而導致其在凝膠上的移動速度改變。其基本原理為單鏈DNA在中性條件下會形成二級結構，這種二級結構依賴於其鹼基組成，即使一個鹼基的不同，也會形成不同的二級結構而出刺同的遷移率。由於該法簡單快速，因而被廣泛用於未知基因突變的檢測。
（2）異源雙鏈分析法（HA） HA法直接在變性凝膠上分離雜交的突變型一野生型DNA雙鏈。由於突變和野生型DNA形成的異源雜合雙鏈DNA在其錯配處會形成一突起，在非變性凝膠中電泳時，會產生與相應的同源雙DNA不同的遷移率。該法與SSCP相似，所不同的是SSCP分離的是單鏈DNA，HA法分離的是雙鏈DNA，也只適合於小片段的分析。
（3）突變體富集PCR法（mutant-enriched PCR）本法的基本原理是利用ras基因家族某個密碼子部位存在已知的限制性內切酶位點，如K-ras基因第12密碼子的BstNI位點，第13密古巴子有BgⅠⅡ位點。用鏈續二次的巢式PCR來擴增包括K-ras第12、13密碼子的DNA片段，在兩次擴增反應之間用相應的內切酶消化擴增的DNA片段，野生型因被酶切而不能進入第二次PCR擴增，而突變型則能完整進入第二次PCR擴增並得到產物的富集。

『陸』 無創DNA產前檢測和唐氏篩查相比，具有哪些優勢

唐篩是唐氏綜合征的產前篩查。最佳測試時間是懷孕期間的16-18周。主要通過孕婦的血液取樣來檢測母體血清中甲胎蛋白、絨毛膜促性腺激素和游離雌三醇的濃度。醫生將根據測試結果獲得嬰兒患先天性缺陷的概率。

2.檢測更多的染色體。非侵入性的脫氧核糖核酸可以篩查出21三體、18三體和13三體，同時還可以使其他染色體異常，而唐氏篩查只檢測到21三體和18三體染色體非整倍性。

3、篩查的孕周范圍更廣。前三個月和後三個月的適宜孕周分別為11-13周和15-20周，而無創產前基因診斷適用於妊娠前的孕周(22周和6天)。

篩查的孕周范圍更廣。前三個月和後三個月的適宜孕周分別為11-13周和15-20周，而無創產前基因診斷適用於妊娠前的孕周(22周和6天)。無創DNA產前檢測如今已經成為越來越多的孕媽做產檢的首選，特別是香港無創DNA檢測更是熱度不斷上漲，大批的內地孕媽湧向香港做無創DNA檢測項目，畢竟香港無創DNA檢測相比於技術較為落後的內地無創DNA檢測有著給常多的優勢，為了寶寶和自己的健康也應該選擇更好的服務。

『柒』 基因檢測的金標準是什麼呢

sanger測序是目前所有基因檢測的國際金標准！

sanger測序是目前所有基因檢測的國際金標准，是包括熒光定量PCR Taqman探針法、普通PCR法、晶元法、二代測序法、質譜法等方法的金標准。科研領域發表基因檢測相關文章，必須要有sanger測序驗證數據予以支持。
sanger測序之所以是目前基因檢測的國際金標准，是因為sanger測序原理非常科學，過程非常縝密，結果真實可視，准確率非常高，達到99.999%。不需要建庫，屬於直接測序，直接讀取結果，連續讀取數據（不是一個點），不需要推導結論，過程明朗數據支撐充分。這項技術是雖然經過了38年，但應用仍然廣泛，還是測序的主力軍，好多檢測其他方法不能替代，她金標準的地位幾十年內很難替代。

『捌』 基因測序是什麼

基因檢測的基本原理是運用現代分子生物學和分子遺傳學檢查基因的結構及其表達功能是否正常。基因檢測的途徑主要有基因突變的檢測、基因連鎖分析和mRNA檢測。最常用的技術有PCR擴增技術，DNA測序技術，生物晶元技術。基因檢測主要是在傳染性疾病，遺傳性疾病，腫瘤中有重要的應用。基因檢測對於腫瘤的早期診斷，腫瘤的臨床分類，預後，對腫瘤高危人群的篩選指導，個體化治療和預防都有重要的作用。

『玖』 常用的基因診斷技術方法有哪些

基因直接診斷
直接檢查致病基因本身的異常。它通常使用基因本身或緊鄰的DNA序列作為探針，或通過PCR擴增產物，以探查基因無突變、缺失、退化等異常及其性質，這稱為直接基因診斷，它適用已知基因異常的疾病；
基因間接診斷
SSCP、AMP－FLP等技術均可用於連鎖分析。

『拾』 什麼是ARMS技術，與其他檢測基因的方法有什麼優勢

基因檢測方法之一（放大受阻突變系統）。以EGFR基因檢測為例，對比其他方法的優勢如下：