(1)產腸毒素大腸埃希菌(ETEC)引起霍亂樣腸毒素腹瀉(水瀉)。能產生兩種腸毒素。一種為不耐熱腸毒素(LT)、另一種為耐熱腸毒素(sT)。檢測LT-般使用改良Elek法;檢測ST-般使用乳鼠胃內灌注法。
(2)腸侵襲性大腸埃希菌(ELEC)引起志賀樣腹瀉(粘液膿血便)。一般使用豚鼠角膜侵襲力試驗。
(3)腸致病性大腸埃希菌(EPEC)主要引起嬰兒腹瀉。用EPEC多價診斷血清作凝集試驗。
(4)腸出血性大腸埃希菌(EHEC)此菌中最具代表性的是0157:H7血清型,可引起出血性大腸炎和溶血性尿毒綜合征。一般檢測是直接篩選不發酵山梨醇的菌落(無色菌落),生化反應證實為大腸埃希菌,再經乳膠凝集試驗測0157抗原。
(5)腸凝聚型大腸埃希菌(EAggEC)可引起腹瀉,用液體培養加凝集試驗檢測細菌對細胞的粘附性或用:DNA探針技術。
㈡ SIGA有哪些成分
有IgA(d)、J鏈和SC。
分子結構:
人體內的免疫球蛋白A(IgA)有兩個彼此獨立的體系,黏膜免疫球蛋白A和血清免疫球蛋白A。血清免疫球蛋白A可分為3類:單體IgA、多聚IgA以及SIgA,而sIgA只佔血清免疫球蛋白A的1%。sIgA是一種復合體,主要由IgA(d)、J鏈和SC組成。
而J鏈分子中存在由二硫鍵構成的2個半胱氨酸的殘基以及IgA(d)特定的分子殘基。而SC則是多聚IgA的受體,它可以同IgA的亞甲基之間以二硫鍵的形式結合,二硫鍵被破壞後,SC便可以游離出來。黏膜IgA大多數都是sIgA。
(2)人腸道分泌型siga檢測方法擴展閱讀:
作用研究:
分泌型免疫球蛋白A(SIgA)是含有分泌片和J-鏈的二聚體,存在於初乳及黏膜分泌物如淚液、唾液、胃腸道及呼吸道分泌物中,由黏膜中漿細胞分泌產生,提供機體抵抗微生物入侵的第1道防線,與溶菌酶和乳鐵蛋白一起,在眼組織的局部體液免疫中發揮作用。
sIgA與SC能優先活化人的嗜酸性粒細胞,並誘導其降解和產生過氧化物,從而調節體內與粘膜嗜酸性粒細胞有關的疾病和一些過敏性疾病。在激活巨噬細胞方面,sIgA與IgA 在功能上有差異。
Marjolein等用炎症介質誘導一種轉基因小鼠的Kupffer細胞表達FcaR1,發現sIgA不能通過這個受體啟動巨噬細胞的活動,而血液中的與細菌結合的IgA則可調節巨噬細胞的吞噬活動。
㈢ SIgA是什麼
SIgA是分泌型免疫球蛋白A。
由J鏈連接並含分泌片的同源二聚體IgA。可分泌至外分泌液中,主要存在於乳汁、唾液、淚液和呼吸道、消化道、泌尿生殖道等黏膜表面,參與局部黏膜免疫。
免疫球蛋白A簡介:
免疫球蛋白A(簡稱為IgA)。IgA分兩種類型:即血清型IgA和分泌型IgA。血清型IgA存在於血清中,血清IgA具有某些IgG和IgM的免疫功能,特異性IgA能中和血液中的抗原,同時也出現替代性補體免疫系統。
分泌型IgA存在於分泌液中,例如:唾液、淚液以及乳汁當中,均含有IgA抗體。分泌型IgA是機體局部黏膜抗感染免疫的主要抗體。故又稱黏膜免疫抗體。IgA不能通過胎盤。新生畜血清中無IgA抗體,但可從母乳中獲得分泌型IgA。
㈣ 壁細胞如何分泌鹽酸
子,病毒顆粒和細菌表面都帶有不同的抗原,所以都能引起體液免疫。抗原和BCR的種類都非常多,在體液免疫中B淋巴細胞的BCR直接與抗原結合。一種B淋巴細胞表面只有一種BCR。一種抗原侵入體內,只有帶有與這種抗原互補的BCR的B淋巴細胞才能與之結合,只有得到選擇刺激的B淋巴細胞克隆才能得到擴增(克隆選擇學說)。 (一)B細胞產生漿細胞和記憶細胞 第一步:B細胞表面的受體分子與互補的抗原分子結合後,活化、長大,並迅速分裂產生一個有同樣免疫能力的細胞群——克隆(CLONE)、無性繁殖系。其中一部分成為漿細胞,產生抗體;一部分發展為記憶細胞(MEMORY CELL)。 第二步:需要巨噬細胞和TH細胞的參與。Mφ表面帶有MHCⅱ分子,它們吞噬入侵的病原體,抗原分子經Mφ處理後表達在細胞膜上,夾在MHCⅱ分子的溝中。TH細胞表面帶有不同的受體,能識別Mφ表面MHC+特異的抗原分子結合物。B細胞表面帶有MHC分子,可和特異的抗原分子結合,TH細胞可刺激結合AG的B細胞分化。這一步比第一步作用更強大。 (二)漿細胞產生抗體 漿細胞一般停留在各種淋巴結。每一個漿細胞每秒鍾能產生2000個抗體,它們壽命很短,經幾天大量產生抗體之後就死去,而抗體則進入血液循環發揮生理作用。 漿細胞產生的抗體Y兩短臂末端高變區與抗原結合,抗體的柄端(FC)可與吞噬細胞(如巨噬細)上的受體結合而使抗原—抗體復合物被吞噬。 (三)記憶細胞與二次免疫反應 記憶細胞也分泌抗體,它們壽命長、對抗原十分敏感,能「記住」入侵的抗原。 當同樣抗原第二次入侵時,能更快的做出反應,很快分裂產生新的漿細胞和新的記憶細胞,漿細胞再次產生抗體消滅抗原。這就是二次免疫反應。它比初次反應更快,也更強烈。 體液免疫的兩個關鍵: (1)產生高效而短命的漿細胞,由漿細胞分泌抗體清除抗原; (2)產生壽命長的記憶細胞,發生二次反應立即消滅再次入侵的同樣抗原。 體液免疫功能的檢測 臨床上一個反復發作的化膿感染,常使醫生想到患者是否有免疫缺陷病,一般原發免疫缺陷發病年齡很小,而繼發免疫缺陷病人多在30歲以上。絕大多數免疫缺陷病人多表現為體液和細胞免疫同時受損,所以應全面檢查這兩方面的功能。遺憾的是,目前應用的檢測方法的局限性,其結果常難以得出明確結論。 一、免疫球蛋白的定量檢測 1.血清免疫球蛋白的測定 血清免疫球蛋白(IG)的測定是檢查體液免疫功能最常用的方法。由於目前還沒有發現由IGD和IGE缺陷所致疾病,所以通常檢測IGG、IGM、IGA,這三類IG就可以代表血清IG的水平(表20-2)。檢測發現三類IG水平均明顯低下,就可考慮體液免疫缺陷。但在分析兒童IG水平時,應注意IG的水平隨年齡而變化。體液免疫功能缺陷首先考慮患者血清IG 水平,如果所有類別IG水平均降低,即稱為一般性聯低丙種球蛋白血症。如果免疫球蛋白水平極度低下,或IGG、IGM、IGA,三類IG總量低於2MG/ML則稱為嚴重低丙種球蛋白血症或無丙種球蛋白血症(AGAMMAGLOBULINEMIA)。如果只一種或兩種IG水平降低,則稱為異常丙種球蛋白血症(DYSGAMMAGLOBULINEMIA)。一般性低丙種球蛋白血症多見於繼發性免疫缺陷病。無丙種球蛋白血症常見於原發免疫缺陷病。但是常有約50%IGA缺陷病人無臨床症狀,伴有反復感染的IGA缺陷病人常同時有IGG的缺陷。常規的定量檢測血中IG的方法是單向免疫擴散和免疫比濁法。 2.分泌型IGA(SIGA)的測定 SIGA是粘膜抗感染的重要因素,但是粘膜抗感染還包括少量滲出的IGM和IGG,還有細胞免疫的作用。由SIGA缺陷病人常可檢測出針對牛奶或其他食物蛋白的沉澱抗體和自身抗體,說明機體對抗原蛋白質吸收異常,同時也存在免疫調節系統的功能紊亂。一般來說血清IGA缺陷病人常伴有SIGA缺陷,反之亦然。說明在機體中血清IGA和SIGA之間有某種生物相關性。最近也有報導少數SIGA缺陷病人的血清IGA水平正常,因而分別檢查血清中和分泌液中IGA水平還是有必要的。目前用免疫比濁法可較精確地測定分泌液中IGA時和IGM和IGC水平。在用單向免疫擴散和免疫比濁法定量IGA時,因抗血清是針對這兩型共有的α鏈的,故不能區分SIGA和血清來源的IGA。而應用抗分泌小體的抗體用酶免疫分析法,可區分血清IGA和分泌型IGA,並可對SIGA進行定量。 二、常見抗體的測定 檢測體液免疫功能的另一種方法是定量測定正常人體內的幾種常見的抗體水平。常見的抗體通常是指嗜異性凝集素、抗溶血素O抗體以及麻疹病毒、脊髓灰質炎病毒的抗體。 在嚴重免疫缺陷病人缺乏上述抗體,常見抗體的缺損可驗證或支持免疫蛋白測定的結果。然而對於比較復雜的免疫缺陷,由於這類抗體主要反映過去的免疫應答能力,此外這種初次應答能力持續期短,易於消退,所以對新近發生的繼發性免疫缺陷的診斷幫助不大。
㈤ 腸道致病菌的分類及常用檢測方法
根據可培養細菌的數量分類在腸道菌群中,可以培養到的細菌有400餘種,依據其數量多少可以分為主要(優勢)菌群(predominantmicroflora)和次要菌群(sub—dominantmicroflora)。
①主要(優勢)菌群:指腸道菌群中數量大或種群密集度大的細菌,一般在10~10cfu/g以上,包括類桿菌屬、優桿菌屬、雙歧桿菌屬、瘤胃球菌屬和梭菌屬等專性厭氧菌,通常屬於原籍菌群。優勢菌群是對宿主發揮生理功能的菌群,在很大程度上影響著整個菌群的功能,決定著菌群對宿主的生理病理意義。
②次要菌群:數量在10~10cfu/g以下,主要為需氧菌或兼性厭氧菌,如大腸桿菌和鏈球菌等,流動性大,有潛在致病性,大部分屬於外籍菌群或過路菌群。
檢測方法:
1、采樣及稀釋
(1)按無菌操作法將檢樣25g(或25mL)放於含有225mL無菌水的三角瓶中(瓶內預置適當數量的玻璃珠)或滅菌乳缽內,經充分振搖或研磨做成1:10的均勻稀釋液。固體檢樣最好用無菌均質器,以8000~10000r/min的速度離心1min,做成1:10的稀釋液。
(2)用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1Ml,注入含有9mL無菌水的試管內,振搖混勻,做成1:100的稀釋液,換用1支lmL滅菌吸管,按上述操作依次作l0倍系列稀釋液。
(3)根據食品的衛生要求或對檢驗樣品污染情況的估計,選擇三個稀釋度,每個稀釋度接種3管。也可直接用樣品接種。
2、乳糖初發酵試驗
即通常所說的假定試驗。其目的在於檢查樣品中有無發酵乳糖產生氣體的細菌。將待檢樣品接種於乳糖膽鹽發酵管內,接種量在1mL以上者,用雙倍乳糖膽鹽發酵管。
lmL及1mL以下者,用單倍乳糖膽鹽發酵管。每一個稀釋度接種3管,置36±1℃溫箱內,培養24±2h,如所有乳糖膽鹽發酵管都不產氣,則可報告為大腸菌群陰性,如有產氣者,則按下列程序進行。
3、分離培養
將產氣的發酵管分別劃線接種於伊紅美藍瓊脂平板,置36±1℃溫箱內培養18~24h,然後觀察菌落形態並作革蘭氏染色、鏡檢並作復發酵試驗。
4、乳糖復發酵試驗
即通常所說的證實試驗,其目的在於證明經乳糖初發酵試驗呈陽性反應的試管內分離到的革蘭陰性無芽胞桿菌,確能發酵乳糖產生氣體。
在上述選擇性EMB培養基上,挑取可疑的大腸菌群菌落1~2個進行革蘭染色,同時接種乳糖發酵管,置36±l℃溫箱內培養24±2小時,觀察產氣情況。
凡乳搪發酵管產氣,革蘭染色為陰性反應的無芽胞桿菌,即報告為大腸菌群陽性;凡乳糖發酵管不產氣或革蘭染色為陽性,則報告為大腸菌群陰性。
(5)人腸道分泌型siga檢測方法擴展閱讀:
有益菌菌群的生理功能:
如果腸內有益菌菌群占優,腸內黏膜呈現粉紅色,表示腸內環境相當良好。
1、吸收水分,糞便較軟,較易排泄
在胃部分解消化的食物,經由小腸吸收營養後,成為粘稠狀物體送至大腸。然後再經過18小時將水分及礦物質吸收,就變成容易排泄的糞便。腸道內環境良好時,糞便的軟硬適中,排便會較為順利。
2、緩和的蠕動,能順利將糞便排出
藉由腸的蠕動,將糞便緩慢的推送至肛門。如果蠕動過快或太慢,都將影響糞便的構成,導致便秘或者腹瀉。而如果腸內干凈,則蠕動的速度就相當的有規律,糞便可順利排出。
3、有助維他命的合成
比菲德氏菌等好菌能維護肌膚的健康,並具有合成有助熱量產生的維他命B1、B2及B6等,以及與止血、骨骼形成有關的維他命K等之功用。健康的腸道,好菌會不斷繁殖,維他命的合成也可順利進行。
4、迅速排出有害物質
健康的腸道並非完全沒有壞菌的存在,有害物質多少會產生。當然還包括,吃進體內的食品化學添加物或是無法成為營養成分的物質。只要腸內環境良好,這些物質在開始危害身體前就被排出體外。
5、避免病原菌的侵害
比菲德氏菌等好菌可以刺激並提高身體的免疫機能,而且易引起食物中毒等病原菌因具怕酸特質,所以像是含有好菌的乳酸飲料或健康食品等,都可抑制病原菌在腸內繁殖。
腸道有益菌菌群除了以上功能之外,對人體還有營養作用,如糖尿病、高血壓、高血脂等。B族維生素和非必需氨基酸對人類的毛發具有重要的作用,當缺少這些營養元素,會導致頭發脫落或毛發發黃、發叉,容易折斷等現象。
㈥ 大腸桿菌的檢測方法有哪些
大腸桿菌的檢測方法有以下幾種:一、大便常規化驗加大便潛血化驗,如果化驗結果提示有細菌感染,那麼就需要完善大便培養加葯敏試驗,進一步明確感染細菌的類型和敏感抗生素類型,從而可以作為大腸桿菌的一種監測方法。二、肛門或者直腸內分泌物化驗,也可以作為大腸桿菌這種細菌的一種監測手段。三、大腸桿菌還可以在其他部位出現,比如口腔、胃部、呼吸道等,如果在口腔,進行口腔內分泌物化驗可以化驗出大腸桿菌感染,如果在胃部,進行胃鏡檢查後病例組織活檢可能檢出大腸桿菌。如果是呼吸道,進行痰培養加葯敏試驗,可以化驗出大腸桿菌。總之大腸桿菌的檢測通常都是標本化驗發現的。
㈦ 分泌型免疫球蛋白A(sIgA)
分泌型免疫球蛋白A(sIgA)是一種非常重要的抗體分子,在人體抵抗疾病的第一道防線起決定性作用。
英文全稱:secretory immunoglobulin A,簡稱sIgA。
人體抵抗疾病的第一道防線是人體黏膜。人體黏膜的表面積約為400平方米,為人體皮膚面積的200倍,是病原微生物等抗原性異物入侵機體的主要門戶,sIgA作為黏膜免疫的主要抗體,擔負著重要的免疫功能。
黏膜免疫系統(Mucosal immune system,MIS)是指廣泛分布於呼吸道、胃腸道、泌尿生殖道黏膜下及一些外分泌腺體處的淋巴組織。近年來發現該系統不僅具有一般性的屏障作用,而且還參與機體的體液免疫和細胞免疫過程,是執行局部特異性免疫功能的主要場所,在機體內環境的調節中起重要作用。
在人體黏膜中,呼吸道黏膜又特別重要。
呼吸道黏膜免疫系統(respiratory passage mucosa immune system,RMIS)是黏膜免疫系統的一個重要組成部分,是機體最先接觸大量病毒、細菌等吸入性抗原的部位。分泌型免疫球蛋白A(slgA)是呼吸道黏膜表面主要的抗體,它在防禦病毒、細菌、抗原黏附於呼吸道黏膜表面起重要作用。
呼吸道黏膜表面是機體與外環境之間的一道有效的防禦屏障,其最主要的特徵是產生分泌型免疫球蛋白A(secretory immunoglobulin A,sIgA)。sIgA被認為是黏膜表面的免疫屏障,它能有效的抑制病原體粘附、定植或侵入黏膜表面,這種免疫排除作用能保護黏膜屏障的完整性和阻斷病原體對機體的感染。
與普通的抗體分子相比,slgA具有許多優良特性:slgA分子中的J鏈將2個IgA單體接起來,由於每個IgA單體具有2個抗原結合部位,因此每個sIgA抗體即有4個抗原結合位點(四價),從而比普通抗體分子具有更高的親和力;slgA也具有很高的穩定性,其在黏膜表面的半衰期為IgG的3倍,其在人體外分泌道中的保護作用可以持續4個月以上。隨著近年來人們對黏膜免疫在感染疾病過程中所扮演的角色進一步認識,slgA的作用被凸現出來,已成為黏膜免疫領域的一個焦點。
sIgA是免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)的一種。
免疫球蛋白A在正常人血清中的含量僅次於IgG,占血清免疫球蛋白含量的10~20%。
從結構來看,IgA有單體、雙體、三體及多聚體之分。
按其免疫功能又分為血清型及分泌型兩種,sIgA即分泌型IgA。
血清型IgA存在於血清中,其含量占總IgA的85%左右。血清型IgA雖有IgG和IgM的某些功能,但在血清中並不顯示重要的免疫功能。
分泌型IgA存在於分泌液中,如唾液、淚液、初乳、鼻和支氣管分泌液、胃腸液、尿液、汗液等。分泌型IgA是機體粘膜局部抗感染免疫的主要抗體。故又稱粘膜局部抗體。
IgA不能通過胎盤。新生兒血清中無IgA抗體,但可從母乳中獲得分泌型IgA。新生兒出生4~6個月後,血中可出現IgA,以後逐漸升高,到青少年期達到高峰。
目前有關slgA的研究主要包括:slgA的基本結構(IgA、J鏈、SC)和功能關系,以及slgA與黏膜免疫有關疾病的研究進展。而與之相關的給葯載體也有陸續的報道和發現,相信隨著人們對sIgA結構、生物學功能及其臨床研究應用,對口服疫苗、黏膜疫苗等新型給葯載體的深入研究,必將給新葯、疫苗的研發以及臨床防治黏膜免疫疾病帶來廣闊的前景。
RMIS由有結構的黏膜濾泡和廣泛分布在黏膜固有層中的彌散淋巴組織構成。黏膜濾泡主要指鼻相關淋巴組織(NALT)和支氣管相關淋巴組織(BALT)。NALT和BALT是免疫應答的傳入淋巴區,抗原由此進入MIS(黏膜免疫系統),這些外來抗原被呼吸道黏膜上皮細胞攝取,通過抗原提呈細胞及膜細胞將抗原運送給T、B細胞,引發免疫應答,進而發揮免疫清除效應。彌散淋巴組織是免疫應答的傳出淋巴區,漿細胞和致敏淋巴細胞通過歸巢機制遷移至彌散淋巴組織,抗體和致敏淋巴細胞在此發揮生物學功能
黏膜免疫的一個重要特徵就是產生分泌型抗體IgA(secretory immunoglobulin A,slgA),slgA是黏膜表而分泌量最多的免疫球蛋白,且不易被一般的蛋白酶破壞,為黏膜免疫系統的主要效應分子。
1 slgA的結構
slgA最早是20世紀60年代由Tomasi等首先發現存在於外分泌液中的一種抗體,主要存在於乳汁、胃腸液、呼吸道分泌液等外分泌液中。其分子結構由2個IgA單體,l條J鏈和1條分泌片(secretory piece,SC)組成。
1.1 IgA的類型
人類IgA分為兩種,即血清型IgA和分泌型IgA。血清型IgA主要存在於血清中,約占血清總Ig的12%一20%,大多數為單聚體,主要由腸系膜淋巴組織中的漿細胞產生。與血清型IgA不同,分泌型IgA(sIgA)大多為二聚體結構(也有三聚體或四聚體結構),主要位於乳汁(初乳中含量最高)、唾液、淚液中。人體外分泌液中的slgA主要以二聚體和高分子量的形式存在,正是sIgA的這種特異性多價結構,能夠使病原體聚集、固定並最終在黏膜表面被中和,這也解釋了為什麼slgA對抗原的親和力遠遠大於單體IgA。
1.2 分泌片SC的結構與功能
分泌成分(secretory component,SC)又稱分泌片(secretory piece)是多聚免疫球蛋白受體(plgR)的胞外段部分,由黏膜上皮細胞及外分泌腺上皮細胞合成。分泌片(sC)的分子量為79.6 kDa,包含5個免疫球蛋白可變區(D1一D5),每個可變區都含有100到110個殘基,共連有42個非結構化的氨基酸。
SC分子中包含有各種多聚糖鏈,有七個N一糖基化位點,這些糖基化位點約佔SC總分子量的22%。多聚糖鏈具有細菌復合物潛在的結合位點,研究發現SC能夠結合致病性大腸桿菌,抑制其在HEp一2細胞中的傳染性,此作用與SC含有的糖鏈呈劑量依賴性。SC在分泌液中也存在一種游離態的形式,與固定SC相似,游離態的SC可以直接參與機體的非特異性免疫防禦,抑制病源微生物對黏膜表面的黏附。
SC主要的功能是保護slgA和介導細胞內多聚免疫球蛋白的轉運。SC能守衛上皮細胞免遭微生物的入侵,保護slgA,使之不受環境中酶的破壞。其作用機制可能為:slgA的分泌片高度穩定,其多糖側鏈具有防止蛋白酶降解的作用,分泌片對抗體分子的包裹使整個抗體分子變得十分穩定。此外,由於每分子slgA的轉運都需要消耗一分子的SC,要使slgA分泌至黏膜表面並形成隔離保護層,調節SC的表達在黏膜免疫保護作用方面有重要意義。
1.3 J一鏈的結構
J一鏈是一個相對保守,15—16Kd的多肽鏈(含137個氨基酸),在抗體生成、細胞分泌抗體過程中結合到多聚體IgA或多聚體IgM的半胱氨酸殘基上。J一鏈是由B細胞產生,但並非所有B細胞都產生J鏈。J鏈的表達局限於黏膜固有層,游離的J鏈並未在細胞外發現,僅僅作為多聚體免疫球蛋白復合物的一部分,這就表明J鏈對IgA的分泌以及聚合有很重要的作用。Johansen等發現,J鏈對於保持與SC的親和力有著重要的作用。因此說J鏈是SC結合IgA的重要媒介。
2 slgA的合成與分泌
接觸到黏膜表面的病原微生物和抗原,首先被專門的抗原識別細胞(M細胞)識別, M細胞內陷形成一個口袋形狀,將識別過的病原微生物和抗原攝入到M細胞的」口袋」內,傳遞給抗原提呈細胞(APCs)。APCs將這些抗原分解成抗原碎片,同時激活T輔助細胞產生細胞因子IL-4,IL-5,IL-6,IL-l0和轉化生長因子β(TGF-β)。在這些細胞因子的協助下,B細胞增生並發育為成熟的漿細胞,分泌多聚體免疫球蛋白A(polymeric immunoglobulin,plgA)。plgAs必須經過跨膜轉運穿過上皮細胞到達黏膜表面,才能發揮特異性保護作用。這一過程需要多聚體免疫球蛋白受體(polymeric immunoglobulin receptor,plgR)的參與。該受體位於黏膜上皮細胞的底外側,由上皮細胞產生。pIgA與plgR結合,形成pIgR-plgA復合物,上皮細胞胞吞該復合物,在跨膜轉運過程中,plgR發生裂解反應,plgR的細胞外部分裂解形成SC。pIgR—plgA復合物與SC結合,穿過黏膜上皮細胞到達黏膜表面,最終形成slgA。
3 介導sIgA分泌的主要細胞因子
調節sIgA的合成、分泌以及slgA介導的免疫應答都依賴於T細胞的輔助,主要是黏膜相關淋巴組織的T細胞和其分泌的細胞因子。根據產生細胞因子譜的不同,Th細胞分為Thl和Th2兩種類型,Thl細胞主要分泌IL-2、IFN-Y、TNF、TGF-B等細胞因子;Th2細胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10等細胞因子。目前多數文獻報道較為一致的是,IL-4和TGF-13促進B細胞發生IgA類型轉換,從而增強sIgA的產生,Th2細胞因子IL-5、IL-6和IL—10也可以增強IgA分泌,促進IgA定向性B細胞的分裂。比較有意思的是IFN-Y對slgA的影啊,Austin等人認為IFN-Y通過拮抗IL-4抑制IgA抗體的分泌。Amin等則在HT-29單層細胞的體外實驗中發現,Thl型細胞因子IFN-y和Th2型細胞因子IL-4可促進IgA穿過腸道上皮增加IgA的跨膜轉運。究竟IFN-Y對sI酣的調節是正性作用,還是負性作用,有待於實驗進一步驗證。
4 slgA的生物學功能
呼吸道是機體與外界環境接觸最為密切的部位,而呼吸道黏膜覆蓋在整個呼吸道表面,成為機體抗病原微生物侵襲的第一道防線。sIgA作為黏膜免疫系統的效應分子在呼吸道黏膜抗感染中發揮關鍵作用,sIgA的主要功能包括:(1)阻止病原微生物的黏附:病原微生物引起感染的首要條件是其黏附在組織細胞上,進而生長繁殖,形成集落並在局部定居,而sIgA能夠阻止病原微生物黏附於黏膜表面,保護黏膜不受損害。其機制可能是sIgA可通過空間構象凝集、捕獲黏膜層的病原體,並與之表面特異性結合位點結合,抑制他們的運動,使其喪失黏附能力。(2)中和細胞內病毒:通常情況下,抗體對細胞內的抗原幾乎不起作用,但是sIgA能抑制細胞內病毒的復制、轉錄及組裝。形成的slgA-病毒免疫復合物被plgR轉運到粘液腔內,經呼吸道纖毛運動或腸蠕動排除體外。(3)溶解細菌:血清型IgA及slgA均無直接殺菌作用, 但可激活補體的C3旁路途徑,與溶菌酶、補體共同引起細菌溶解。(4)調理吞噬作用:sIgA一旦分泌到腸腔就會與黏液混合,形成一層保護膜包被在上皮表面, 它能直接與病原微生物或食物抗原形成抗原一抗體復合物,以便於巨噬細胞的吞噬和清除。國內外有關的報道很多,但是最近報道在體內多形核細胞和體外kupffer細胞實驗中清晰的證明,啟動吞噬作用的是血清型IgA而非SIgA。
5.sIgA在臨床中的應用
5.1 慢性結膜炎
劉鈞等檢測慢性眼結膜炎患者淚液SIgA和溶菌酶含量的變化,結果顯示,慢性眼結膜炎患者淚液SIgA水平在治療前非常顯著地高於正常人組,經抗生素和中醫中葯治療後2周,淚液水平已明顯下降,但與正常人組比較,差異仍有顯著性。提示慢性眼結膜炎患者淚液sIgA和溶菌酶含量的變化對臨床觀察預後有重要的價值。
5.2 口腔疾病研究
王統伍研究牙周病患者治療前後血清IL-6、ha-CRP和唾液sIgA水平的變化的關系,結果顯示,牙周病患者治療前血清IL-6、ha-CRP和唾液sIgA水平均高於正常人。此外,還證實了血清IL-6、ha-CRP水平和唾液sIgA水平呈正相關關系。血清IL-6、ha-CRP和唾液sIgA水平的測定,可以做為了解牙周病病情、觀察療效的重要的指標。與此研究結果相反,Akopian研究發現唾液sIgA水平低下將引起口腔慢性炎症及感染。
5.3 呼吸道感染疾病的研究
唾液中含有的抗感染物質主要是分泌型IgA(sIgA)。在多種呼吸道感染性疾病過程中,唾液slgA含量可有顯著的變化。顧濤研究表明,慢性支氣管炎患者唾液sIgA在治療前非常顯著地高於正常人組。可能是由於慢性支氣管炎患者在呼吸道受到病毒或細菌感染時,黏膜局部產生免疫應答,sIgA的合成和分泌增加,從而發揮局部免疫作用。陸婉秋研究兒童支氣管哮喘與唾液中slgA相關性,發現健康兒童唾液中sIgA含量水平明顯高於哮喘初診及治療組,提示健康兒童黏膜免疫功能強於哮喘初診及治療組,哮喘兒童存在黏膜免疫功能低下。因此,通過測定唾液slgA的含量不僅可以了解患者黏膜局部的免疫狀態,在某種程度上還有助於疾病的早期診斷。
5.4 泌尿生殖系統疾病研究
孫彬彬等探討測定陰道分泌物中slgA含量的對細菌性陰道病、滴蟲性陰道炎、混合感染的診斷價值。認為陰道分泌物中sIgA含量的測定,可作為細菌性陰道病、滴蟲性陰道炎、混合感染的輔助診斷措施或療效觀察手段之一。該研究結果與黃曉敏等實驗結果相同。比較符合國內外一些學者的報道,從而說明局部黏膜免疫在病原菌感染中的作用和地位。
初次尿路感染患者的尿液中,其sIgA濃度較正常人尿液中的濃度高,在離體和在體的實驗研究都證明sIgA對預防反復尿路感染的發生有較大的作用。劉傑等研究發現下尿路感染時尿液中slgA水平與非感染時尿液sIgA水平無明顯變化,而腎盂腎炎病人尿液中slgA水平明顯升高。該結果與David Greenwell報道一致,此研究提示slgA在上尿道和下尿道分泌有明顯不同,這種差異是由於上尿路感染時分泌slgA能力增強,抑制細菌的粘附,而下尿路不產生slgA所致。因而測定尿中slgA在上尿道感染和下尿道感染的臨床定位診斷有很重要的意義。
5.5 slgA與疫苗
迄今為止,大多數疫苗都是通過注射來刺激全身免疫系統產生血清型抗體對抗引起疾病的病原體。與注射疫苗相比,口服疫苗使用比較方便,也避免了注射器可能帶來的疾病傳染。隨著基因工程的飛速發展和植物轉化技術的完善,利用植物生物反應器可生產方便、廉價、有效、不需要純化就可直介面服的疫苗口引,即通過抗原蛋白基因在植物可食部位的表達,直接食用後激發人體黏膜免疫系統產生抗體,預防疾病。
霍亂弧菌是人類霍亂的病原體,而霍亂毒素(cholera toxin,CT)是霍亂弧菌的重要致病因子,是已知致腹瀉腸毒素中毒性最強的腸毒素。霍亂的保護性免疫作用研究表明,免疫後全身或局部產生的抗體IgG和IgM雖有作用,但不是主要的,通過腸道黏膜局部產生並分泌到腸道黏膜表面的抗體sIgA在對抗CT方面,發揮最重要的保護作用。霍亂毒素B亞基(CT-B)不具備毒性,不能導致腹瀉,同時保留強免疫原性及佐劑活性,因此,CT—B被認為是研製霍亂疫苗的重要候選抗原。Arakawa等進行了轉基因以植物口服疫苗的小鼠實驗,他們用表達了霍亂弧菌B亞基的生馬鈴薯喂小鼠,結果刺激小鼠產生血清型抗體IgG和slgA,保護小鼠不受霍亂毒素的影響。
【根據網路信息整理】
㈧ 分泌型IgA的介紹
分泌型IgA,是在腸道黏膜免疫當中起到關鍵作用的是分泌型免疫球蛋白A(Secretory Immunoglobulin A, SIgA)。
㈨ 設計一個實驗檢測某人體液免疫功能
常有兩種方法,
1.血清免疫球蛋白的測定
血清免疫球蛋白(Ig)的測定是檢查體液免疫功能最常用的方法。由於目前還沒有發現由IgD和IgE缺陷所致疾病,所以通常檢測IgG、IgM、IgA,這三類Ig就可以代表血清Ig的水平(表20-2)。檢測發現三類Ig水平均明顯低下,就可考慮體液免疫缺陷。但在分析兒童Ig水平時,應注意Ig的水平隨年齡而變化。體液免疫功能缺陷首先考慮患者血清Ig水平,如果所有類別Ig水平均降低,即稱為一般性聯低丙種球蛋白血症。如果免疫球蛋白水平極度低下,或IgG、IgM、IgA,三類Ig總量低於2mg/ml則稱為嚴重低丙種球蛋白血症或無丙種球蛋白血症(agammaglobulinemia)。如果只一種或兩種Ig水平降低,則稱為異常丙種球蛋白血症(dysgammaglobulinemia)。一般性低丙種球蛋白血症多見於繼發性免疫缺陷病。無丙種球蛋白血症常見於原發免疫缺陷病。但是常有約50%IgA缺陷病人無臨床症狀,伴有反復感染的IgA缺陷病人常同時有IgG的缺陷。常規的定量檢測血中Ig的方法是單向免疫擴散和免疫比濁法。
2.分泌型IgA(SIgA)的測定
SIgA是粘膜抗感染的重要因素,但是粘膜抗感染還包括少量滲出的IgM和IgG,還有細胞免疫的作用。由SIgA缺陷病人常可檢測出針對牛奶或其他食物蛋白的沉澱抗體和自身抗體,說明機體對抗原蛋白質吸收異常,同時也存在免疫調節系統的功能紊亂。一般來說血清IgA缺陷病人常伴有SIgA缺陷,反之亦然。說明在機體中血清IgA和SIgA之間有某種生物相關性。最近也有報導少數SIgA缺陷病人的血清IgA水平正常,因而分別檢查血清中和分泌液中IgA水平還是有必要的。目前用免疫比濁法可較精確地測定分泌液中IgA時和IgM和IgC水平。在用單向免疫擴散和免疫比濁法定量IgA時,因抗血清是針對這兩型共有的α鏈的,故不能區分SIgA和血清來源的IgA。而應用抗分泌小體的抗體用酶免疫分析法,可區分血清IgA和分泌型IgA,並可對SIgA進行定量。