病毒微生物學檢測方法

㈠ 病原微生物中細菌常見檢測方法有哪些

1、快速測試片技術法

快速測試片是指以紙片、紙膜、膠片等作為培養基載體，將特定的培養基和顯色物質附著在上面，通過微生物在上面的生長、顯色來測定食品中微生物的方法。

細菌總數檢測紙片的研製始於 20 世紀 80 年代，其主要優點是簡便、實用、經濟、操作性強。近年來以濾紙和美國某公司的 Petrifilm 為載體的測試片已開始被廣泛應用。

2、生物電化學方法

生物電化學方法是指通過電極測定微生物產生或消耗的電荷，從而提供分析信號的方法。微生物在滋生代謝過程中，培養基的電化學性質如電流、電位、電阻和電導等會發生變化，所以可以通過檢測分析這些電化學參量的變化來實現對微生物的快速測定。

常見的有：阻抗分析法、電位分析法、電流分析法等。生物電化學方法具有測量快速、直觀、操作簡單、測量設備成本低和信號的可控性等特點。

3、微菌落技術

微菌落是指細菌生長繁殖早期在固相載體上所形成的只能藉助於顯微鏡觀察的微小菌落。微菌落技術具有快速、經濟、實用的特點，其研究始於 20 世紀50年代，定量測定技術從 20 世紀 70 年代開始，國外已有報道將該法應用於水、食品中細菌總數的快速檢測。

4、氣相色譜法

氣相色譜應用到微生物的檢測中，主要是依據不同微生物的化學組成或其產生的代謝產物各異，利用上述色譜檢測可直接分析各種體液中的細菌代謝產物、細胞中的脂肪酸、蛋白質、氨基酸、多肽、多糖等，以確定病原微生物的特異性化學標志成分，協助病原診斷和檢測。

5、高效液相色譜法

利用高效液相色譜檢測可分析各種體液中的細菌代謝產物、病原微生物等，以確定病原微生物的特異性化學標志成分，協助病原診斷和檢測。

㈡ HTLV病毒的微生物學檢查

病毒分離採用PHA處理的患者淋巴細胞，加入含IL-2的營養液培養3~6周，電鏡觀察病毒顆粒，並檢測上清液逆轉錄酶活性，最後用免疫血清或單克隆抗體鑒定。抗體檢測可用ELISA法、間接IFA和膠乳凝集法，也可用免疫印跡法和PCR法等檢測抗原或病原體。血液中HTLV-Ⅰ抗體的存在即可診斷為該病毒感染；而血液中異常淋巴細胞數量的大量增生，同時證實這些淋巴細胞中有HTLV-ⅠDNA，則可支持成人T淋巴細胞白血病的診斷。

㈢ 脊髓灰質炎病毒微生物學檢查法

脊髓灰質炎病毒引起脊髓灰質炎。該疾病傳播廣泛，是一種急性傳染病。病毒常侵犯中樞神經系統，損害脊髓前角運動神經細胞，導致肢體鬆弛性麻痹，多見於兒童，故又名小兒麻痹症。

一、病毒型別與抗原性

已知脊髓灰質炎病毒有三個血清型，這三型病毒的核苷酸序列已經清楚，總的核苷酸數目為7500個左右。雖然有71%左右的核苷酸為三型脊髓灰質炎病毒所共有，但不相同的核苷酸序列卻都位於編碼區內，因此三型病毒間和試驗無交叉反應。

用補體結合試驗可查出病毒有兩種抗原，一種稱為D（緻密)抗原，另一種稱為C（無核心)抗原。前者存在於成熟的、有感染性的病毒顆粒中，是該病毒的中和抗原，具有型特異性。C抗原存在於經過56℃滅活，或者未成熟的空心病毒顆粒中，是一種耐熱的抗原成份，與三型病毒的抗血清均呈補體結合陽性反應。

二、流行病學特點

本病一年四季均可發生，但流行都在夏、秋季。一般以散發為多，帶毒糞便污染水源可引起暴發流行。引起流行的病毒型別以Ⅰ型居多。潛伏期通常為7～14天，最短2天，最長35天。在臨床症狀出現前後病人均具有傳染性。

㈣ 微生物的傳統檢測方法有哪些

微生物的傳統檢測方法有哪些通過顯微鏡直接觀察。一般來說，在一定的培養條件下（相同的培養基、溫度以及培養時間），同種微生物表現出穩定的菌落特徵。這些特徵包括菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等方面。因此可以通過顯微鏡觀察菌落特徵對微生物種類進行判斷。使用選擇培養基培養微生物或人為提供有利於目的菌株生長的條件。

㈤ 檢測hav，hbv，hcv，hdv，病毒的微生物學檢查可用什麼方法

就目前來說，使用得最多的肯定還是免疫學的方法。比如酶聯免疫法，化學發光法，金標法等等，免疫學的方法就是利用抗原抗體反應的特性來進行檢測的。此外，現在還常見有分子生物學的方法。

㈥ 微生物的傳統檢測方法有哪些

傳統檢測有三種方法

1、直接顯微鏡觀察，正常情況，在一定的培養條件下（相同的培養基、溫度以及培養時間），同種微生物表現出穩定的菌落特徵。可以通過顯微鏡觀察菌落特徵對微生物種類進行判斷。

2、選擇培養基培養微生物或人為提供有利於目的菌株生長的條件，選擇培養基，其作用是允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他微生物生長。選擇培養一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特徵進行間接判斷，得到的微生物往往並不只有一種，但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特徵從而對其分類。

3、鑒別培養基，根據微生物的代謝特點，在培養基中加入某種指示劑或化學葯品。與選擇培養相比，鑒別培養基的鑒別所得結果的范圍比較小，一般可直接測定某微生物的種類。

㈦ 簡述病毒病的微生物學診斷程序

簡述病毒病的微生物學診斷程序
微生物學檢查
（1）病料採集：取病畜禽的組織，肝，肺，脾等體液、分泌物及局部病灶的滲出液。 （2）鏡檢：對原始病料塗片進行革蘭氏染色，鏡檢，應為革蘭氏陰性。用印度墨汁等染料染色，可見清晰的莢膜。 （3）培養：同時接種鮮血瓊脂和麥康凱瓊脂培養基，37℃培養24h，觀察細菌的生長情況，菌落特徵、溶血性，並染色鏡檢。 （4）生化試驗：多殺性巴氏桿菌在48h內可分解葡萄糖、果糖、單奶糖、蔗糖和甘露糖，產酸不產氣。一般不發酵乳糖、鼠李糖、菊糖、水楊苷和肌醇。可產生硫化氫，能形成靛基質，MR和V-P試驗均為陰性。接觸酶和氧化酶試驗均為陽性。溶血性巴氏桿菌不產生靛基質，能發酵乳糖產酸。能發酵葡萄糖、糖元、肌醇、麥芽糖、澱粉；不發酵側金盞花醇、菊糖和赤蘚醇。
動物試驗
常用的試驗動物有小鼠和家兔。實驗動物死亡後立即剖檢，並取心血和實質臟器分離和塗片染色鏡檢，見大量兩極濃染的細菌即可確診。
血清型或生物型鑒定
可用被動血凝試驗、凝集試驗鑒定多殺性巴氏桿菌莢膜血清群和血清型。用間接血凝試驗測溶血性巴氏桿菌的血清型，根據生化反應鑒定該菌的生物型。（以上內容是我查到的資料，希望對你有所幫助！）

㈧ 微生物學的檢查方法是有哪些

微生物學檢查法

標本

因鼠疫傳染性極強，採集標本時必須嚴格無菌操作。根據病型採取淋巴結穿刺液、腫脹部位組織液、膿汁，血液和痰等。人和動物屍體可取肝、脾、肺、病變淋巴結以及心血等。陳舊屍體取骨髓。將採集標本送至有嚴密防護措施的專門實驗室進行檢查，禁止在一般實驗室進行操作。

直接塗片鏡檢

除血液標本外，一般均需塗片或印片，乾燥後用甲醇固定，革蘭染色或呂氏美蘭染色，鏡檢。在不同材料中，菌體大小、形態有很大差異，除典型形態外，往往可見菌體呈多形態性，需加以注意。

分離培養與鑒定

血液標本需先置肉湯中進行增菌培養。分離培養一般選用血瓊脂平板，28攝氏度24小時後，可見較小的露滴狀菌落，繼續培養則菌落增大至1～2毫米，中央厚而緻密，周邊逐漸變薄。取可疑菌落進行塗片染色鏡檢，噬菌體裂解試驗，血清凝集試驗，特異熒光抗體染色等作出鑒訂。

血清學試驗

可用於檢查鼠疫耶爾森菌抗原或特異性抗體。敏感而特異的試驗方法有ELISA、固相放射免疫分析，SPA協同凝集試驗等。

檢測核酸

用DNA探針雜交方法或PCR技術檢測鼠疫耶爾森菌核酸，有助於鼠疫的診斷。PCR敏感性極高，蚤體內有10個鼠疫耶爾森菌感染即可用PCR技術檢出。

診斷檢查

診斷：取決於病人有接觸史及肺部受累表現，病因診斷取決於痰、血或淋巴結吸出物革蘭染色、培養，有條件的單位可作直接熒光素標記抗體染色，可提供快速的病因診斷。

㈨ 逆轉錄病毒微生物學檢查

臨**常用的實驗室檢測HIV感染指標，主要用於AIDS或HIV感染者的診斷並指導用葯，監測高危人群以便及時發現傳染源，控制其繼續傳播。
1.HIV-1抗體檢測包括篩查試驗（含初篩和復檢）和確證試驗。機體被HIV感染4～8周後，血清抗-HIV開始出現，6個月後均轉為陽性。目前HIV-1/2抗體篩查方法包括酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、化學發光或免疫熒光試驗、快速檢測（斑點ELISA和斑點免疫膠體金等。確證試驗常用的方法是免疫印跡法（WB）。如HIV-1抗體篩查兩次均為陽性，則需蛋白印跡試驗（Westernblot，WB）進行確證，方可報告HIV感染。
2.病毒載量測定病毒載量一般用血漿中每毫升HIVRNA的拷貝數（copies/ml）或每毫升國際單位（IU/ml）來表示。應用RT-PCR等方法檢測病毒核酸，是檢出早期HIV感染或無症狀攜帶者急性發作，以及預測疾病進展和治療效果的參考指標。
3.外周血CD4+T細胞數量測定應用流式細胞儀測定外周血中CD4+T細胞數量，用以判斷HIV復制狀態，了解機體的免狀態和病程進展，確定疾病分期和治療時機。
4.HIV基因型耐葯檢測耐葯測定方法有基因型和表型，目前國內外多用基因型。HIV基因型檢測出現HIV耐葯，表示該感染者體內病毒可能耐葯。HIV耐葯檢測結果可為艾滋病治療方案的制定和調整提供重要參考依據。

㈩ 簡述hiv的微生物學檢測方法有哪些

主要有酶聯免疫吸附試驗（ELlSA）和免疫熒光試驗（lFA）ELISA用去污劑裂解HIV或感染細胞液提取物作抗原IFA用感染細胞塗片作抗原進行抗體檢測 如果發現陽性標本應重復一次 為防止假陽性 可做Western blot（WB 蛋白印跡法）進一步確證
WB法是用聚丙烯醯胺凝膠電泳將HIV蛋白進行分離 再經傳移電泳將不同蛋白條帶轉移於硝酸纖維膜上 加入病人血清孵育後 用抗人球蛋白酶標抗體染色 就能測出針對不同結構蛋白抗體 如抗gp120、gp41、p24抗體 特異性較高
用ELISA檢測p24抗原 在HIV感染早期尚未出現抗體時 血中就有該抗原存在 由於p24量太少 陽性率通常較低 現有用解離免疫復合物法或濃縮p24抗原 來提高敏感性
用PCR法檢測HIV基因 具有快速 高效 敏感和特異等優點醫學教育網搜集l整理 目前該法已被應用於HIV感染早期診斷及艾滋病的研究中
常用方法為共培養法 即用正常人外周血液分離單個核細胞 加PHA刺激並培養後 加人單個核細胞診斷及艾滋病的研究中