沙門氏菌檢測鑒定方法

① 沙門氏菌檢測中如何鑒定氰化鉀是否生長

這個需要做一個對照試驗，一般的判定方法是對照管和試驗管都生長的話判斷為陽性，對照管生長，試驗管不生長判斷為陰性。
沙門氏菌的氰化鉀生化試驗結果是陰性的。

② 怎麼看烏龜是否攜帶沙門氏菌

查看烏龜是否攜帶沙門氏菌可以取烏龜的糞便、烏龜所在池內的泥土以及烏龜身上的覆蓋物送去寵物醫院檢查。
沙門氏菌是一種微生物，有一定的致病性，但微生物很難通過肉眼觀察到。
想要檢查烏龜是否攜帶沙門氏菌可以取烏龜的糞便、烏龜所在池內的泥土以及烏龜身上的覆蓋物送去寵物醫院檢查。
目前寵物醫院採用的沙門氏菌鑒定方法主要是根據形態學特徵進行鑒定，即對樣本進行染色、固定，然後用光學顯微鏡觀察形態特徵，以確定是否是沙門氏菌。

③ 怎樣快速准確檢測出食品中生長微生物的是否是沙門氏菌

沙門氏菌屬腸道細菌科，包括那些引起食物中毒、導致腸胃炎、傷寒和副傷寒的細菌。能引起食物傳播性疾病，近年來，已經成為最常見的食物中毒原因。腸炎沙門氏菌感染通常源於奶製品、禽產品和肉產品；雞肉和雞蛋尤其是高風險食品。沙門氏菌感染的症狀通常是腸胃出現問題，包括惡心、腹部絞痛、嘔吐和腹瀉，一般最多持續7天。在免疫力低下的人群中，如果不及時服用抗生素類葯品，沙門氏菌感染將導致生命危險。三方圓沙門氏菌測試片（FilmplateTM Salmonella BS205）含有選擇性培養基、沙門氏菌特有辛酯酶的顯色指示劑和高分子吸水凝膠，運用微生物測試片專有技術，做成一次性快速檢驗產品，一步培養15～24h就可確認是否帶有沙門氏菌，非常適合各級檢驗部門和食品企業使用。本產品適用於肉和肉產品、蛋及蛋製品、冷飲等的快速檢測。

操作方法:
1、樣品處理：取樣品25mL（g）放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液（或生理鹽水）的取樣罐或均質杯內，製成1:10的樣品勻液。
2、接種：將沙門氏菌測試片（BS205）置於平坦實驗檯面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然後再將上層膜緩慢蓋下，靜置10s左右，使培養基凝固，每個樣品接種兩片。同時做一片空白陰性對照。
3、培養： 將測試片疊在一起放回原自封袋中並封口。透明面朝上水平置於恆溫培養箱內，堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃，培養15～24h。

結果判讀:
對測試片進行觀察，呈紫紅色的菌落為沙門氏菌；呈藍色的菌落為其他菌群。出現陽性菌落的樣本，最好用其他更為可靠的方法進行驗證，沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。

④ 怎麼看烏龜是否攜帶沙門氏菌

從外觀上無法判斷烏龜是否攜帶有沙門桿菌，可提取烏龜的糞便，帶往寵物醫院進行檢查。寵物醫院會對標本進行染色與固定，使用光學顯微鏡去觀察是否攜帶有沙門桿菌。沙門桿菌一般只出現在野生的烏龜上，進行人工飼養的烏龜很少會攜帶。

判斷烏龜攜帶沙門氏菌的方法

沙門桿菌一般只存在於野生的烏龜身上，一般進行人工飼養的烏龜與外界進行隔絕，很少會有被感染的機會。但為了保險起見，在接觸完烏龜後需要勤洗手，才能降低感染的風險。

⑤ 美正生物的沙門氏菌血清型分子鑒定試劑盒的檢測步驟

美正生物的沙門氏菌血清型分子鑒定試劑盒的檢測步驟：
1、核酸提取
加熱法：刮取至少10個菌落，懸浮於100μL的無菌水中，漩渦震盪10s（如果菌落未能均勻分散，可適當延長震盪時間），95℃或沸水浴5min，冷卻至室溫，12000rpm離心5min，吸取上清。
試劑盒法：可使用商品化的試劑盒提取沙門氏菌的基因組DNA。
2、反應體系配置
從試劑盒中取出預混液，充分融化，渦旋後短暫離心，取22.5μL置於PCR管或PCR板中，然後各取模板2.5μL分別加入PCR管或PCR板中（每種模板要使用十二種預混液），蓋好管蓋或板膜，短暫離心，立即進行PCR擴增反應。
3、PCR擴增
PCR管或PCR板置於PCR儀上，推薦反應程序設定如下：反應體系為25μL，在第二步每個循環60℃時檢測熒光信號，檢測通道選擇FAM、HEX（VIC）、CY5。

⑥ 怎樣分離鑒定金黃色葡萄球菌，沙門氏菌，志賀氏菌

金葡耐鹽，先用306增菌，然後劃線BP平板，典型菌落為黑色中心、混濁帶和透明環，挑取典型菌落進行凝血實驗。
沙門想要前增菌，選擇性增菌TTB、SC，然後分離堅定BS、XLD，BS典型菌落為黑色、有金屬光澤、是培養基變黑，XLD典型菌落為黑色菌落。挑取典型菌落進行生化鑒定，TSI為上紅下黃、有或無硫化氫，賴氨酸陽性，氰化鉀陰性，尿素酶陰性，色氨酸陰性。
志賀氏菌：志賀增菌肉湯增菌，XLD和MAC分離堅定，挑取粉紅色菌落，生化鑒定。

⑦ 沙門氏菌檢驗中的生化試驗和血清學分型鑒定

（一）標本：腸熱症隨病情的進展，細菌出現的主要部位不同，因而應根據不同的病程採取不同的標本。第一周取外周血，第二周起取糞便，第三周起還可取尿液，從第一周到第三周均可去骨髓液
（二）分離培養和鑒定
血液和骨髓液需要增菌，然後再劃種於腸道選擇培養基；糞便和經離心的尿沉澱物等直接接種於SS選擇培養基或其他腸道鑒別培養基。37°C孵育24小時後，挑取無色半透明的乳糖不發酵菌落接種於雙糖或三糖鐵培養基。若疑為沙門菌，再繼續做生化反應，並用沙門菌多價抗血清做玻片凝集試驗予以確定。
近有學者採用SPA協同凝集試驗，對流免疫電泳，膠乳凝集試驗和ELISA法等，來快速早起診斷糞便，血清或尿中的沙門菌等可溶性抗原。

（三）血清學診斷：肥達試驗室是用已知傷寒沙門菌菌體O抗原和鞭毛H抗原，以及引起副傷寒的甲型副傷寒沙門菌,肖氏沙門菌和希氏沙門菌鞭毛H抗原的診斷菌液與受檢血清做試管或為空板定量凝集試驗，測定受檢血清忠告有無相應抗體及其效價的試驗。
正常值。。。（先省略，有需要我可以加上去哦）

（哎，我打的手酸啊）

⑧ 沙門氏菌快速檢測

用沙門氏菌顯色培養基，檢測原理：蛋白腖和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑;膽鹽抑製革蘭氏陽性菌;選擇性添加劑增強培養基的抑制雜菌的能力;混合色素分別與沙門氏菌和大腸菌群所對應的酶發生特異性反應，水解底物，釋放出顯色基團，在淡黃色平板上沙門氏菌產生品紅色的菌落。資料來自環凱官網，可以上去具體了解一下。

⑨ 沙門氏菌

沙門氏菌屬腸桿菌科，可引起胃腸炎、傷寒、敗血症及腸外灶性感染等多種癥候群，統稱為沙門氏菌感染。臨床表現：進食不潔飲食後1～2天內，突然出現發熱、腹痛、腹瀉、惡心、嘔吐等急性胃腸炎表現；持續發熱1周以上，無明顯系統症狀，或有胃腸道表現，肝脾腫大；有局部病灶形成。血常規白細胞明顯升高，行大便常規加培養，治療上抗感染，止瀉止吐，補液，糾正電解質紊亂，保護重要臟器等。

名稱由來：1885年沙門氏等在霍亂流行時分離到豬霍亂沙門氏菌，故定名為沙門氏菌屬。沙門氏菌屬有的專對人類致病，有的只對動物致病，也有對人和動物都致病。沙門氏菌病是指由各種類型沙門氏菌所引起的對人類、家畜以及野生禽獸不同形式的總稱。感染沙門氏菌的人或帶菌者的糞便污染食品，可使人發生食物中毒。據統計在世界各國的種類細菌性食物中毒中，沙門氏菌引起的食物中毒常列榜首。我國內陸地區也以沙門氏菌為首位。

沙門氏菌病的病原體。屬腸桿菌科，革蘭氏陰性腸道桿菌。已發現的近一千種（或菌株）。按其抗原成分，可分為甲、乙、丙、丁、戊等基本菌組。其中與人體疾病有關的主要有甲組的副傷寒甲桿菌，乙組的副傷寒乙桿菌和鼠傷寒桿菌，丙組的副傷寒丙桿菌和豬霍亂桿菌，丁組的傷寒桿菌和腸炎桿菌等。除傷寒桿菌、副傷寒甲桿菌和副傷寒乙桿菌引起人類的疾病外，大多數僅能目引起家畜、鼠類和禽類等動物的疾病，但有時也可污染人類的食物而引起食物中毒。

沙門氏菌在水中不易繁殖，但可生存2-3周，冰箱中可生存3-4個月，在自然環境的糞便中可存活1-2個月。沙門氏菌最適繁殖溫度為37℃，在20℃以上即能大量繁殖，因此，低溫儲存食品是一項重要預防措施。

沙門氏菌是一種常見的食源性致病菌。沙門氏菌鑒定的傳統方法主要是根據形態學特徵、培養特徵、生理生化特徵、抗原特徵、噬菌體特徵等。

沙門氏菌病是公共衛生學上具有重要意義的人畜共患病之一，其病原沙門氏菌屬腸道細菌科，包括那些引起食物中毒，導致胃腸炎、傷寒和副傷寒的細菌。它們除可感染人外，還可感染很多動物包括哺乳類、鳥、爬行類、魚、兩棲類及昆蟲。人畜感染後可呈無症狀帶菌狀態，也可表現為有臨床症狀的致死疾，它可能加重病態或死亡率，或者降低動物的繁殖生產力。

菌體大小（0.6～0.9)×（1～3)微米無芽胞，一般無莢膜，除雞白痢沙門氏菌和雞傷寒沙門氏菌外，大多有周身鞭毛。營養要求不高，分離培養常採用腸道選擇鑒別培養基。生化反應對本屬菌的鑒別具有重要參考意義（見表）。不液化明膠，不分解尿素，不產生吲哚，不發酵乳糖和蔗糖，能發酵葡萄糖、甘露醇、麥芽糖和衛芽糖，大多產酸產氣，少數只產酸不產氣。VP試驗陰性，有賴氨酸脫羧酶。DNA的G+C含量為50～53%。對熱抵抗力不強，在60℃15分鍾可被殺死。在水中存活2～3周。在5%的石炭酸中，5分鍾死亡。

本屬菌按生化反應分為4個亞屬。亞屬Ⅰ是生化反應典型的和最常見的沙門氏菌；亞屬Ⅱ和Ⅳ是生化反應不典型的沙門氏菌；亞屬Ⅲ是亞利桑那沙門氏菌。

傳播媒介：蛋、家禽和肉類產品是沙門氏菌病的主要傳播媒介，感染主要取決於沙門氏菌的血清型和食用者的身體狀況，受威脅最大的是小孩、老年人及免疫缺陷個體。根據國際慣例，要求對易受沙門氏菌污染的食品進行分類管理，以使大多數食物不含沙門氏菌，從而有效預防沙門氏菌病。

⑩ 如何實現快速檢測及有效控制沙門氏菌

沙門氏菌(Salmonella)是一種革蘭氏陰性腸桿菌, 也是腸桿菌科中最主要的食源性致病菌。據有關資料統計由沙門氏菌引起的疾病病例在病原菌食源性疾病病例中所佔比例已超過三分之二，2007年發生的「 花生醬事件」以及 2008 年發生的「 西紅柿 事件」等[1]沙門氏菌中毒事件的發生也使得食品中沙門氏菌的檢測受到人們的普遍關注。本文主要是對食品中沙門氏菌的傳統檢測方法以及後續建立的以分子生物學、免疫學、生物感測器和電化學為基礎的快速檢測方法進行了系統的綜述，旨在為該致病菌的檢測方法的研究應用提供一定的參考。
1、 傳統的檢測方法（國標法）
目前, 我國對食品中沙門氏菌的檢測大多採用GB 4789.4-2010《食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗》對食品樣品進行檢測，這種傳統的培養方法可分為前增菌、增菌、分離培養、生化試驗和血清學鑒定等步驟進行。雖然傳統培養法可靠性高，但是其操作繁瑣且耗時費力，並不能滿足食品快速檢測的要求。
2、分子生物學檢測方法
2.1聚合酶鏈反應技術
PCR技術是一項敏感性高、特異性強且快速准確的微生物檢測技術，也被許多學者用於對食品中沙門氏菌進行檢測和研究。汪琦等[2]就採用傳統培養方法 、BAX(r)方法和PCR 方法 3 種方法對沙門氏菌進行檢測。在常規PCR的基礎上宋東曉[3]建立了檢測食品中沙門氏菌的新的PCR方法——多重PCR。此外其他新的PCR技術也運用於食品中沙門氏菌的檢測，鍾偉軍[4]通過對熒光定量PCR反應體系和反應條件的摸索,建立了檢測沙門氏菌的核酸熒光定量PCR方法，此研究為食品中沙門氏菌快速檢測試劑盒的研製打下了良好的基礎。
2.2核酸探針技術
核酸探針技術是根據核苷酸鹼基互補的原理,在已變異的DNA樣品中加入用同位素等標記的DNA特異片段，在一定條件下兩片段進行雜交從而達到檢測DNA的目的。此技術不僅簡便、快速而且敏感性高、特異性強，已用於食品中沙門氏菌的檢測。Almeida等[5]通過建立一種新穎的肽核酸探針結合熒光原位雜交方法對血液、糞便、水以及嬰兒奶粉樣品中沙門氏菌進行了檢測，准確度高達 100%。
2.3基因晶元技術
基因晶元技術是利用已知核酸序列的探針與靶核苷酸序列雜交，然後通過信號檢測對其進行定性與定量分析，在沙門氏菌等各種致病菌的分析檢測中有很好的應用前景。饒寶等[6]通過建立檢測致病菌的基因晶元檢測方法，設計了通用引物和特異性探針: 沙門氏菌探針、大腸桿菌探針和金黃色葡萄球菌探針,實現了同時檢測並區分沙門氏菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的目的。祝儒剛等[7]運用多重 PCR 結合基因晶元技術建立了檢測肉及肉製品中的大腸埃希氏菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、志賀氏菌和單核細胞增生李斯特菌等5種食源性致病菌的快速檢驗方法。
2.4噬菌體裂解技術
噬菌體有特異性裂解細菌的作用。張碧波等學者利用此技術進行沙門氏菌
快速檢測，結果和其他學者相同，據此得出特異性噬菌體可以檢測出沙門氏菌，此法方便可行。姜琴等[8]利用噬菌體裂解對150份食品樣品進行快速檢測，結果說明腸桿菌科噬菌體組合對培養10h的沙門氏菌敏感性和特異性較高，這對實現沙門氏菌實時、快速而准確的檢測有重要意義。
2.5環介導等溫擴增技術（LAMP）
環介導等溫擴增技術是2000年Notomi等開發的一種新的恆溫核酸擴增方法,此方法的特點是特異性強、靈敏度高且簡單、快速,適合對大規模樣品的快速檢測[9]。李佳桐[10]通過實驗建立了沙門氏菌的LAMP檢測方法,並將此方法與常規PCR進行比較,結果顯示：LAMP方法對沙門氏菌的檢測恆溫65℃下只需要40min,只擴增沙門氏菌,不會擴增其他革蘭氏陰性菌,最低可檢出濃度10cfu/mL,比常規PCR的最低檢出濃度高1個數量級,通過添加熒光染料SYBR Green Ⅰ,能夠快速簡便的觀察檢測出綠色的陽性結果十分明顯的區別於橙色的陰性結果。
3、免疫學方法
3.1酶聯免疫吸附技術
酶聯免疫吸附法簡稱 ELISA， ,此技術敏感性高 ,不需特殊設備 ,結果觀察簡便，早在1977年就有報道將酶聯免疫吸附法用於食品中沙門氏菌的檢測。伍燕華等[11]設計捕獲抗體和檢測抗體，建立快速檢測沙門氏菌雙抗夾心ELISA方法對食品中的沙門氏菌進行檢測。張帥等[12]建立雙抗夾心ELISA體系，檢測模擬污染肉樣中沙門氏菌,其檢測限為800CFU/g，等均並與其他血清型沙門氏菌、單增李斯特菌等菌均無交叉反應,特異性良好。
3.2免疫熒游標記技術
免疫熒游標記技術是根據抗原抗體的特異性反應，將熒光素標記在已知抗原(或抗體)上,與特異抗體(或抗原)結合後產生熒光，可用來定位抗原或抗體、並通過定量分析，確定測定含量。葉明強[13]基於納米免疫磁珠富集,免疫量子點標記,建立了一種食品中沙門氏菌的含量進行快速檢測的方法，研究出了一種新型的免疫熒光食源性致病菌檢測技術。
3.3斑點免疫金滲濾法
免疫膠體金技術是以膠體金作為標記物結合免疫原理的一種應用於抗原抗體的新型技術，該技術運用最廣泛的就是斑點免疫金滲濾法（DIGFA）。孔繁德等及曹春梅等都利用此技術對沙門氏菌的快速檢測進行了研究，曹春梅等[14]是利用斑點免疫金滲濾法對沙門氏菌O9抗原進行了研究，結果表明此法簡單、快速，適合推廣運用；孔繁德等[15]是通過建立直接檢測沙門氏菌的斑點免疫金滲濾法檢測試紙盒對該菌進行了研究。
3.4免疫磁性分離技術
免疫磁珠分離技術是將特定病原體的單抗或多抗與磁珠微球偶聯，並通過抗原抗體反應形成磁珠，在外加磁場作用下磁珠會發生定向移動，從而達到分離目標病原體的作用。食品樣品中致病菌含量很少，常規的方法是很難從中分離出來的，藉助免疫磁性分離技術可以達到快速分離的目的。王海明等[16]應用磁免疫技術建立快速檢測食源性沙門氏菌的方法，結果表明此方法能對食品基質中的目標菌進行快速有效的富集,其檢測限<10cfu/25g,檢測周期約為40小時。胡霏[17]也通過實驗針對鼠傷寒沙門氏菌建立免疫磁分離技術結合熒光層析技術的快速檢測方法。
4、生物感測器技術
生物感測器是利用一些生物活性物質如酶 、多酶體系 、抗體等做為敏感器件，然後配以適當的信號傳導器所構成的分析檢測的工具。我國學者已採用此法對沙門氏菌的抗原、抗體的免疫吸附進行檢測，並已用於快速檢測食品中致病的沙門氏菌，而僅需 1h 完成，達到了快速的檢測目的。寧毅[18]在對碳納米管性質研究的基礎上,結合分子探針構建了碳納米管生物感測器，並將其用於沙門氏菌的檢測，結果顯示所構建的感測器靈敏度高、特異性強、穩定性好。
5、電阻抗技術
電阻抗法是近年發展起來的一項生物學技術，因為具有檢測速度快、靈敏度高、准確性好等優點，目前此法已用於食品中沙門氏菌檢測檢驗並已通過美國公職分析化學協會(AOAC)認可。陳廣全等[19]建立了電阻抗法快速檢測食品中沙門氏菌的方法，並將其與常規培養法進行比較，對食品中的沙門氏菌屬進行檢測,結果表明電阻抗法比傳統培養法更加快速、可靠。
6、總結
綜上所述，沙門氏菌檢驗技術正從傳統的培養方法向分子檢測方法改進，並向儀器化、標准化、自動化方向發展，並且食品安全、致病菌等問題對人類健康以及生活環境都造成了嚴重威脅，加強沙門氏菌檢測勢在必行。目前沙門氏菌快速檢測技術大多具有檢測迅速、靈敏度高、特異性強等特點，此外這些方法還具有各自的優點和局限性，在未來發展過程中需要我們不斷改進和創新，建立更成熟可靠、方便快捷的沙門氏菌快速檢測技術。