乳糖的純度檢測方法

A. 如何判斷自己的乳糖耐受程度

在我們的周圍，有這樣的一群人，不能夠喝奶，如果喝奶就會出現拉肚子的情況，這種情況在醫學上面也被人們叫做「乳糖不耐受」，可能很多人對這個詞聽得少，而且也不了解，就算自己有乳糖不耐受也不清楚，那麼乳糖不耐受怎麼檢查？針對這個問題，下面看看文章的介紹。

首先，如果想要檢查乳糖耐受情況可以進行尿半乳糖檢測，在喝完牛奶之後，檢測尿液可以檢測出人體對乳糖的分解情況，從而判斷出乳糖是否耐受。當然腸道真菌病檢測也是可以判斷乳糖的耐受情況。

其次，還可以做腸道疾病的超聲檢查，可以檢查出腸道方面的疾病，而且通過做這個檢查能夠清晰的看出腸道內的層次結構，看出病變侵害胃腸壁的程度。並且為疾病的臨床治療提高可靠的依據。

最後，一般來說0-6個月大的寶寶比較容易出現乳糖不耐受，主要是寶寶腸道發育不夠成熟，無法完全分解母乳或者牛乳裡面的乳糖，所以寶寶有這種情況是比較容易出現非感染性腹瀉，因此有乳糖不耐受需要選擇低乳糖的奶製品，如酸奶、乳酪等。

B. 食品中還原糖的測定都是有哪些方法

還原糖的測定方法
食物中還原糖的測定方法：高錳酸鉀滴定法和直接滴定法。
一、高錳酸鉀滴定法
1.原理
樣品經除去蛋白質後，其中還原糖在鹼性環境下將銅鹽還原為氧化亞銅，加硫酸鐵後，氧化亞銅被氧化為銅鹽，以高錳酸鉀溶液滴定氧化作用後生成的亞鐵鹽，根據高錳酸鉀消耗量計算氧化亞同含量，再查表得還原糖量。
2.適用范圍
GB5009.7-85，本法適用於所有食品中還原糖的測定以及通過酸水解或酶水解轉化成還原糖的非還原性糖類物質的測定。
3.儀器
（1） 滴定管
（2） 25ml古氏坩堝或G4垂融坩堝
（3） 真空泵
（4） 水浴鍋
4.試劑
除特殊說明外，實驗用水為蒸餾水，試劑為分析純。
4.1 6 mol/L鹽酸：量取50ml鹽酸加水稀釋至100 ml。
4.2 甲基紅指示劑：稱取10mg甲基紅，用100ml乙醇溶解。
4.3 5 mol/L氫氧化鈉溶液：稱取20g氫氧化鈉加水溶解並稀釋至100ml。
4.4 鹼性酒石酸銅甲液：稱取34.639g硫酸銅（CuSO4·5H2O），加適量水溶解，加0.5ml硫酸，再加水稀釋至500ml，用精製石棉過濾。
4.5鹼性酒石酸銅乙液：稱取173g酒石酸鉀鈉與50g氫氧化鈉，加適量水溶解，並稀釋至500ml，用精製石棉過濾，貯存於橡膠塞玻璃瓶中。
4.6精製石棉：取石棉先用3mol/L鹽酸浸泡2～3天，用水洗凈，再加2.5mol/L氫氧化鈉溶液浸泡2～3天，傾去溶液，再用熱鹼性酒石酸銅已液浸泡數小時，用水洗凈。再以3mol/L鹽酸浸泡數小時，以水洗至不呈酸性。然後加水振搖，使成微細的漿狀軟縣委，用水浸泡並貯存於玻璃瓶中，即可用做填充古氏坩堝用。
4.7 0.1000mol/L高錳酸鉀標准溶液。
4.8 1mol/L氫氧化鈉溶液：稱取4g 氫氧化鈉，加水溶解並稀釋至100ml。
4.9 硫酸鐵溶液：稱取50g硫酸鐵，加入200ml水溶解後，慢慢加入100ml硫酸，冷卻後加水稀釋至1L。
4.10 3mol/L鹽酸：量取30ml鹽酸，加水稀釋至120ml。
5. 操作方法
5.1 樣品處理：
5.1.1 乳類、乳製品及含蛋白質的食品：稱取約0.5～2 g固體樣品（吸取2～10 ml液體樣品），置於250 ml容量瓶中，加50ml水，搖勻。加入10 ml鹼性酒石酸銅甲液及4ml1mol/L氫氧化鈉溶液，加水至刻度，混勻。靜置30min，用乾燥濾紙過濾，棄去初濾液，濾液備用。（註：此步驟目的是沉澱蛋白）
5.1.2 酒精性飲料：吸取100 ml樣品，置於蒸發皿中，用1mol/L氫氧化鈉溶液中和至中性，在水浴上蒸發至原體積1/4後（註：如果蒸發時間過長，應注意保持溶液pH為中性），移入250ml容量瓶中。加50 ml水，混勻。以下按5.1.1自"加10ml鹼性酒石酸銅甲液"起依法操作。
5.1.3 含多量澱粉的食品：稱取2～10 g樣品，置於250 ml容量瓶中，加200 ml水，在45℃水浴中加熱1h，並時時振搖。（注意：此步驟是使還原糖溶於水中，切忌溫度過高，因為澱粉在高溫條件下可糊化、水解，影響檢測結果。）冷卻後加水至刻度，混勻，靜置。吸取200ml上清液於另一250 ml容量瓶中，以下按5.1.1自"加10ml鹼性酒石酸銅甲液"起依法操作。
5.1.4 含有脂肪的食品：稱取2～10g樣品，先用乙醚或石油醚淋洗3次，去除醚層。加入50ml水混勻，以下按5.1.1自"加10ml鹼性酒石酸銅甲液"起依法操作。
5.1.5 汽水等含有二氧化碳的飲料：吸取100 ml樣品置於蒸發皿中，在水浴上除去二氧化碳後，移入250ml容量瓶中，並用水洗滌蒸發皿，洗液並入容量瓶中，再加水至刻度，混勻後，備用。
5.2 樣品測定：
吸取50ml處理後的樣品溶液，於400ml燒杯中，加入25ml鹼性酒石酸銅甲液及25ml乙液，於燒杯上蓋一表面皿，加熱，控制在4min內沸騰，再准確煮沸2min，乘熱用鋪好石棉的古氏坩堝或G4垂融坩堝抽濾，並用60℃熱水洗滌燒杯及沉澱，至洗液不成鹼性為止。（註：還原糖與鹼性酒石酸銅試劑的反應一定要在沸騰狀態下進行，沸騰時間需嚴格控制。煮沸的溶液應保持藍色，如果藍色消失，說明還原糖含量過高，應將樣品溶液稀釋後重做。）將古氏坩堝或垂融坩堝放回原400ml燒杯中，加25ml硫酸鐵溶液及25ml水，用玻棒攪拌使氧化亞銅完全溶解，以0.1mol/L高錳酸鉀標准液滴定至微紅色為終點。
同時吸取50ml水，加與測樣品時相同量的鹼性酒石酸銅甲、乙液，硫酸鐵溶液及水，按同一方法做試劑空白實驗。
6. 計算：
X1=（V-V0）×N×71.54 （1）
式中： X1--樣品中還原糖質量相當於氧化亞銅的質量，mg；
V--測定用樣品液消耗高錳酸鉀標准液的體積，ml；
V0--試劑空白消耗高錳酸鉀標准液的體積，ml；
N--高錳酸鉀標准溶液的濃度；
71.54--1ml 1mol/L高錳酸鉀溶液相當於氧化亞銅的質量，mg。
根據（1）式中計算所得氧化亞銅質量，查附表"氧化亞銅質量相當於葡萄糖、果糖、乳糖、轉化糖的質量表"，再計算樣品中還原糖含量。
X2=（m1×V2）∕（m2×V1）×（100∕1000） (2)
式中： X2--樣品中還原糖的含量，g/100g（g/100ml）；
m1--查表得還原糖質量，mg；
m2--樣品質量（或體積）， g（ml）；
V1--測定用樣品處理液的體積，ml；
V2--樣品處理後的總體積，ml。
7.舉例：
稱取某食物樣品3.00g，經過處理後用水定容至250ml。取50ml進行測定，消耗0.1003mol/L高錳酸鉀標准液5.20ml，同時測試劑空白為0.36ml，則 樣品中還原糖質量相當於氧化亞銅的質量為：
X1（mg） =（5.20-0.36）×0.1003×71.54 = 34.73
查表得還原糖質量為相當於葡萄糖16.22 mg，
樣品中還原糖含量（以葡萄糖計）為：
X2（g/100g）=（16.22×250）∕（3.00×50）×（100∕1000）= 2.70
8.注釋：
本法用鹼性酒石酸銅溶液作為氧化劑。由於硫酸銅與氫氧化鈉反應可生成氫氧化銅沉澱，氫氧化銅沉澱可被酒石酸鉀鈉緩慢還原，析出少量氧化亞銅沉澱，使氧化亞銅計量發生誤差，所以甲、乙試劑要分別配製及貯藏，用時等量混合。
二、直接滴定法
1.原理
樣品經除去蛋白質後，在加熱條件下，直接滴定已標定過的費林氏液，費林氏液被還原析出氧化亞銅後，過量的還原糖立即將次甲基藍還原，使藍色褪色。根據樣品消耗體積，計算還原糖量。
2.適用范圍
GB5009.7-85，本方法適用於所有食品中還原糖的檢測。檢出限0.1mg。
3.主要儀器
滴定管
4.試劑
除特殊說明外，實驗用水為蒸餾水，試劑為分析純。
（1） 費林甲液：稱取15 g硫酸銅（CuSO4·5H2O），及0.05 g次甲基藍，溶於水中並稀釋至1 L。
（2） 費林乙液：稱取50 g酒石酸鉀鈉與75 g氫氧化鈉，溶於水中，再加入4 g亞鐵氰化鉀，完全溶解後，用水稀釋至500ml，貯存於橡膠塞玻璃瓶內。
（3） 乙酸鋅溶液：稱取21.9 g乙酸鋅，加3 ml冰乙酸，加水溶解並稀釋至100 ml。
（4）亞鐵氰化鉀溶液。稱取10.6g亞鐵氰化鉀，用水溶解並稀釋至100ml。
（5） 鹽酸。
（6） 葡萄糖標准溶液：精密稱取1.000 g經過80 ℃乾燥至恆量的葡萄糖（純度在99%以上），加水溶解後加入5ml鹽酸，並以水稀釋至1 L。此溶液相當於1 mg/ml葡萄糖。（註：加鹽酸的目的是防腐，標准溶液也可用飽和苯甲酸溶液配製）
5.操作方法
5.1樣品處理：
5.1.1乳類、乳製品及含蛋白質的食品：稱取約0.5～2 g固體樣品（吸取2～10 ml液體樣品），置於100 ml容量瓶中，加50ml水，搖勻。邊搖邊慢慢加入5 ml乙酸鋅溶液及5 ml亞鐵氫化鉀溶液，加水至刻度，混勻。靜置30min，用乾燥濾紙過濾，棄去初濾液，濾液備用。（注意：乙酸鋅可去除蛋白質、鞣質、樹脂等，使它們形成沉澱，經過濾除去。如果鈣離子過多時，易與葡萄糖、果糖生成絡合物，使滴定速度緩慢；從而結果偏低，可向樣品中加入草酸粉，與鈣結合，形成沉澱並過濾。）
5.1.2酒精性飲料：吸取50 ml樣品，置於蒸發皿中，用1mol/L氫氧化鈉溶液中和至中性，在水浴上蒸發至原體積1/4後，移入100 ml容量瓶中。加25ml水，混勻。以下按4.1.1自"加5 ml乙酸鋅溶液"起依法操作。
5.1.3含多量澱粉的食品：稱取2～5 g樣品，置於100 ml容量瓶中，加50 ml水，在45℃水浴中加熱1h，並時時振搖（注意：此步驟是使還原糖溶於水中，切忌溫度過高，因為澱粉在高溫條件下可糊化、水解，影響檢測結果。）。冷後加水至刻度，混勻，靜置。吸取50ml上清液於另一100 ml容量瓶中，以下按4.1.1自"5 ml乙酸鋅溶液"起依法操作。
5.1.4汽水等含有二氧化碳的飲料：吸取50 ml樣品置於蒸發皿中，在水浴上除去二氧化碳後，移入100ml容量瓶中，並用水洗滌蒸發皿，洗液並入容量瓶中，再加水至刻度，混勻後，備用。
（注意：樣品中稀釋的還原糖最終濃度應接近於葡萄糖標准液的濃度。）
5. 2標定費林氏液溶液：吸取5.0 ml費林氏甲液及5.0 ml乙液，置於150ml錐形瓶中（注意：甲液與乙液混合可生成氧化亞銅沉澱，應將甲液加入乙液，使開始生成的氧化亞銅沉澱重溶），加水10ml，加入玻璃珠2粒，從滴定管滴加約9 ml葡萄糖標准溶液，控制在2min內加熱至沸，趁沸以每兩秒1滴的速度繼續滴加葡萄糖標准溶液，直至溶液蘭色剛好褪去並出現淡黃色為終點，記錄消耗的葡萄糖標准溶液總體積，平行操作三份，取其平均值，計算每10ml（甲、乙液各5ml）鹼性酒石酸銅溶液相當於葡萄糖的質量（mg）。（注意：還原的次甲基藍易被空氣中的氧氧化，恢復成原來的藍色，所以滴定過程中必須保持溶液成沸騰狀態，並且避免滴定時間過長。）
5.3樣品溶液預測：吸取5.0 ml費林氏甲液及5.0 ml乙液，置於150 ml錐形瓶中，加水10 ml，加入玻璃珠2粒，控制在2min內加熱至沸，趁沸以先快後慢的速度，從滴定管中滴加樣品溶液，並保持溶液沸騰狀態，待溶液顏色變淺時，以每秒1滴的速度滴定，直至溶液蘭色褪去，出現亮黃色為終點。如果樣品液顏色較深，滴定終點則為蘭色褪去出現明亮顏色（如亮紅），記錄消耗樣液的總體積。（注意：如果滴定液的顏色變淺後復又變深，說明滴定過量，需重新滴定。）
5.4樣品溶液測定：吸取5.0 ml鹼性酒石酸銅甲液及5.0 ml乙液，置於150 ml錐形瓶中，加水10 ml，加入玻璃珠2粒，在2min內加熱至沸，快速從滴定管中滴加比預測體積少1ml的樣品溶液，然後趁沸繼續以每兩秒1滴的速度滴定直至終點。記錄消耗樣液的總體積，同法平行操作兩至三份，得出平均消耗體積。
6.計算
X3 =（C×v1 × V）∕（m× v2 ×1000）×100
式中： X--樣品中還原糖的含量(以葡萄糖計)，%；
C--葡萄糖標准溶液的濃度，mg/ml；
v1-- 滴定10 ml費林氏溶液（甲、乙液各5 ml）消耗葡萄糖標准溶液的體積，ml；
v2--測定時平均消耗樣品溶液的體積，ml；
V--樣品定容體積，ml；
m--樣品質量，g；
7.注意事項
（1）本方法測定的是一類具有還原性質的糖，包括葡萄糖、果糖、乳糖、麥芽糖等，只是結果用葡萄糖或其他轉化糖的方式表示，所以不能誤解為還原糖=葡萄糖或其他糖。但如果已知樣品中只含有某一種糖，如乳製品中的乳糖，則可以認為還原糖=某糖。
（2）分別用葡萄糖、果糖、乳糖、麥芽糖標准品配製標准溶液分別滴定等量已標定的費林氏液，所消耗標准溶液的體積有所不同。證明即便同是還原糖，在物化性質上仍有所差別，所以還原糖的結果只是反映樣品整體情況，並不完全等於各還原糖含量之和。如果已知樣品只含有某種還原糖，則應以該還原糖做標准品，結果為該還原糖的含量。如果樣品中還原糖的成分未知，或為多種還原糖的混合物，則以某種還原糖做標准品，結果以該還原糖計，但不代表該糖的真實含量。參考資料：http://www.foodtechs.com/foodtechs_Article_6195.html

C. 乳糖醇的質量標准

質量指標
衛生部公告2011年第8號（2011-3-18）規定乳糖醇如下表所示。 項目 指標乳糖醇（以干基計），w/% 95.0～102.0水分，w/% ≤10.5（結晶產品）
31（溶液） 氯化物（以干基計）/（mg/kg） ≤ 100硫酸鹽（以干基計）/（mg/kg） ≤ 200其他多元醇（以干基計）/ w% ≤ 2.5還原糖，w% ≤ 0.1鎳（Ni）/（mg/kg） ≤ 2鉛（Pb）/（mg/kg) ≤ 1限量標准
GB 2760-2011《食品安全國家標准食品添加劑使用標准》規定，乳糖醇在各類食品中按生產需要適量使用，及下表所示。 食品分類號 食品名稱 最大使用量/（g/kg） 01.02.01 發酵乳 30.0 01.05.01 稀奶油 按生產需要適量使用 12.09 香辛料類 按生產需要適量使用 鑒別實驗
1、溶解度：易溶於水。
2、比旋光度：樣品溶液（100g/L）的比旋光度am（25℃,D）為+13～+15(°)·dm2/kg。
3、高效液相色譜中的主峰：在高效液相色譜分析中，樣品主峰的保留時間和乳糖醇標准樣品主峰的保留時間一致。
含量分析
乳糖醇含量和其他多元醇含量的測定。
1、用高效液相色譜法，在選定的工作條件下，通過色譜柱使樣品溶液中各組分分離，用示差檢測器檢測。進樣器為自動進樣器或微量進樣器，50uL或100uL。
2、色譜分析條件：推薦的色譜柱及典型操作條件見下表，各組分的近似保留時間見下表，其他能達到同等分離程度的色譜柱和色譜操作條件均可使用。 色譜柱和典型色譜操作條件色譜柱 多孔性離子交換樹脂Aminex HPX 87（鈣型） 柱溫/℃ 85±1 流動相 水（脫氣） 流動速度/（mL/min） 0.6 進樣量/uL 10 各組分的近似保留時間組分名稱 近似保留時間/min 乳糖醇 12 核糖醇 15 赤藻糖醇 16 甘露糖醇 18 半乳糖醇（衛矛醇） 20 山梨糖醇 21 3、分析步驟：稱取4g以干基計的乳糖醇樣品，加10mL蒸餾水溶解，為試驗溶液。取10mL試驗溶液進樣分析。記錄乳糖醇及其保留時間之後的色譜峰，同時測定標准樣品的峰面積。試樣主峰的保留時間和乳糖醇標准樣品主峰的保留時間一致。
4、結果計算
（1）乳糖醇含量：比較試樣的響應和已知純度的乳糖醇標准樣品的響應，即可得出。
（2）其他多元醇含量：測量在乳糖醇峰和山梨糖醇之間出現的所有峰的面積。這些峰面積的質量不得大於乾燥樣品質量的2.5%。

D. 乳粉中乳糖測定的注意事項

1、首先流動相手動混合在一個瓶子中，使用一個通道，過濾後超聲脫氣10分鍾，盡量使用在線脫氣機。
2、其次溫度和流動相比例的微小改變都會導致基線變差，故柱溫盡量保證柱頭端和柱尾端一致。建議進樣前用手觸摸一下柱身（小心不要燙傷），如果差異大，使用干毛巾或者脫脂棉進行色譜柱的包裹，以保證良好的柱溫。色譜柱管傳遞過來的溫度明顯沒有45℃的話，可以將流動相用水浴或者加熱套預加熱，儀器的任何部件不要被風直吹。RID檢測器的溫度比柱溫小5℃比較好，避免溫差太大導致基線噪音增加
3、然後進樣體積對柱效影響較大，嚴格按照葯典進樣10微升，如果峰面積太小，可以增加樣品濃度，並且手動進樣器的死體積小於自動進樣器。
4、最後如果噪音一直很大，建議使用流動相沖洗色譜柱30分鍾後，將廢液端的出口將流出液返回到流動相瓶子中，沖洗參比池，循環12小時，整個過程儀器的設置和做樣條件設置一致，實驗室空調正常開啟

E. 如何測定牛奶中乳糖含量

牛奶中乳糖含量的測定方法有兩種，一是利用其還原性，另一種是利用其穩定性。日本推行的方法是Lane Eynon法，這種方法是還原銅鹽法。具體測定方法是：先配製斐林試劑A液（CuSO₄34.369克定容至500毫升水中）和斐林試劑B液（173克酒石酸鈉，50克NaOH定容至500毫升水中），然後取A、B液各5毫升混合，加水10毫升，另取5毫升牛奶溶於水定容至100毫升，再用斐林混合液在加熱條件下滴定，用甲藍GF作指示劑，根據終點，換算成乳糖含量。

F. 怎樣用化學方法鑒別「葡萄糖 麥芽糖 果糖 蔗糖 乳糖 澱粉」

第一步,首先我來說明一下這幾種糖的性質.還原性糖種類：還原性糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麥芽糖等.非還原性糖有蔗糖、澱粉、纖維素等.還原性糖概念：還原糖是指具有還原性的糖類.在糖類中,分子中含有游離醛基或酮基的單糖和含有游離醛基的二糖都具有還原性.
葡萄糖分子中含有游離醛基,果糖分子中含有游離酮基,乳糖和麥芽糖分子中含有游離的醛基,故它們都是還原糖.
第二步,由於 葡萄糖、麥芽糖、果糖、乳糖這四種都是還原性糖,而蔗糖、澱粉是非還原性糖,所以用斐林試劑、班氏試劑、銀氨溶液就能鑒別分類出其中有特徵反應的四種還原性糖,另兩種沒有特徵反應的為蔗糖、澱粉,而澱粉與蔗糖用碘水就能鑒別了,遇碘變藍的為澱粉.另一種就為蔗糖.
第三步,對葡萄糖、麥芽糖、果糖、乳糖這四種物質的鑒別,兩種方法：（1）將這四種物質的水溶液分別加入到澄清石灰水中,產生白色沉澱的為果糖,因為果糖會與Ca(OH)2結合形成難溶性物質,而其他三種糖沒有這種現象發生.（2）用溴水鑒別,葡萄糖、麥芽糖和乳糖（都含有醛基）能使溴水褪色,與溴水反應生成相應的糖酸,而果糖是酮糖（只有在鹼性條件下才能發生異構化反應生成醛糖）,在酸性條件下不能被溴水氧化,所以不能使溴水褪色.
第四步 ,將一定量葡萄糖、麥芽糖、乳糖分別與水混合,由於乳糖在冷水（常溫下）溶解度很小,加水攪拌後不能完全溶解,所以混合後渾濁的就是乳糖,能完全溶解形成透明溶液的為另兩種.
第五步,兩種方法：（1）將相同質量的葡萄糖和麥芽糖分別與H2在鎳的催化下加熱反應,消耗的H2多的為葡萄糖,少的為麥芽糖.（2）葡萄糖、麥芽糖二者與苯肼反應,形成糖脎,成脎較快的為葡萄糖,成脎較慢的為麥芽糖.
最後補充說明一下：澱粉和乳糖在冷水（常溫即可）中溶解度都較小,一開始就可以將他們與另外四種易溶的糖區分開.

G. 乳糖蛋白陳發酵管純度

乳糖蛋白陳發酵管純度是5％。
乳糖發酵管成分pH7.4製法：將蛋白腖及乳糖溶於水中，校正pH，加入指示劑，按檢驗要求分裝30mL、10mL或3mL，並放入一個小倒管，115℃高壓滅菌15min。
註：①雙料乳糖發酵管除蒸餾水外，其他成分加倍。②30mL和10mL乳糖發酵管專供醬油及醬類檢驗用，3mL乳糖發酵管供大腸菌群證實試驗用。