核酸檢測技術的方法原理

① 核酸檢測原理

除病毒之外的所有生物均由細胞所組成，病毒的生命活動也必須在細胞中才能體現，細胞是生物體基本的結構和功能單位。細胞主要由細胞核和細胞質構成，表面有細胞膜包裹，高等植物細胞膜外還有細胞壁保護。

核酸是在細胞核裡面的一類生物聚合物，是所有已知生命均有的生物化學成份，參與遺傳物質保存、繁殖等生化合成和細胞代謝，決定著細胞或機體的性狀表現。病毒作為最簡單的一種生物，是由核酸和蛋白質構成。

核酸由核苷酸組成，而核苷酸單體由5-碳糖、磷酸基和含氮鹼基組成。如果聚合物中核苷酸的5-碳糖是核糖，則形成的聚合物是核糖核酸（簡稱RNA）；如果5-碳糖是脫氧核糖，則形成的聚合物是核糖核酸（簡稱DNA）。

每一個生物的核酸是不一樣的，通過核酸檢測就是要確定人身上是否帶有病毒，也就是為了檢出病毒的攜帶者。病毒攜帶者如果有症狀的話就是病人，如果沒有症狀就是無症狀感染者。

(1)核酸檢測技術的方法原理擴展閱讀

核酸檢測需要經過取樣、留樣、保存、核酸提取、上機檢測五個步驟。其中，需要採集人體的分泌物，用鼻拭子或咽拭子擦拭鼻腔或咽後壁及雙側咽扁桃體處；需要醫務人員進行留樣，將拭子頭浸入細胞保存液中，折斷尾部後立即旋緊管蓋。

將樣本管放入密封袋中保存好並及時送檢；接下來便將需樣本送進實驗室進行核酸提取，最後一步便進行熒光PCR核酸檢測，將提取物進行熒光PCR擴增反應。

② 核酸檢測的原理是什麼DNA和RNA怎麼區分什麼是假陰性

如今，疾病越來越復雜多樣，而疾病的檢測以及甄別對於治療來說就顯得至關重要了，就拿這次新冠肺炎的爆發來說，其中“核酸檢測”這種醫學檢測手段就進入了大眾的視野。那麼，核酸檢測技術的原理是什麼？為什麼核酸檢測會有的一定幾率出錯？什麼是假陰性？

實際上，從技術角度上來說，核酸檢測過程中出現的“假陰性”是不可避免的，比如有項研究就發現，新冠患者在感染期間至少會有20%的漏診概率，即會出現假陰性結果。雖然核酸檢測技術會有假陰性的問題出現，但我們對於核酸假陰性也不能掉以輕心。

③ 核酸含量的測定方法及原理都有哪些

核酸檢測的主要原理其實是反轉錄和聚合酶鏈式擴增反應。也叫做RT-PCR。目前對新型冠狀病毒進行的核酸檢測也主要採用此種方式。簡單來說就是採取患者鼻咽拭子、痰和其他下呼吸道分泌物、血液、糞便，檢測人員通過。核酸提取試劑盒提取患者標本里邊兒的核酸，然後把提取到的核酸放進檢測試劑中進行復制擴增。然後再根據檢測結果進行判斷如果是陰性代表沒有感染，如果是陽性代表有感染。目前對新型冠狀病毒核酸檢測會存在假陰性的可能，所以可以選擇多次測量。如果連續兩次核酸檢測為陰性，同時沒有臨床症狀可以排除感染，並且對已經感染了新型冠狀病毒肺炎的患者，如果連續兩次檢測核酸為陰性，注意間隔時間必須大於一天，同時臨床症狀緩解，影像學好轉也可以解除隔離。

④ 核酸檢測的道理是什麼

核酸檢測主要是通過對人體的痰液，鼻咽拭子，肺泡灌洗液，血液，糞便等樣本進行化驗，觀察是否存在致病微生物病毒核酸。比較大的資料庫可以檢測上萬種致病微生物。核酸檢測的原理主要是利用熒光定量PCR技術，將致病微生物病毒的基因序列進行擴增，觀察熒光信號的強弱。

每個致病微生物生物的核酸都有自身特定的核酸序列或是DNA序列，核酸檢測是根據核酸雙鏈互補配對原則的核酸雜交技術，合成一段單鏈核酸序列，與病原體DNA或是RNA形成互補，將其作為探針，再採用熒光定量PCR的方法進行標記，再將合成的單鏈核酸序列與待測病原體的核酸進行結合，若探針與待測核酸有結合跡象，儀器會檢測到熒光，且將基因序列擴增後，熒光信號會增強，則檢測結果呈現陽性，患者體內存在致病微生物病毒。

主要是通過放大致病微生物病毒基因片段，進行熒光信號識別，判斷人體是否有致病微生物病毒存在。

⑤ 核酸檢測的原理是什麼

核酸檢測原理：每一個生物的核酸是不一樣的，通過核酸檢測就是要確定人身上是否帶有病毒，也就是為了檢出病毒的攜帶者。病毒攜帶者如果有症狀的話就是病人，如果沒有症狀就是無症狀感染者。核酸檢測也是檢測病毒的方法，它可以更早發現感染。現在臨床中對乙肝、丙肝、艾滋病都開展了核酸檢測，可以在抗體產生前檢測到血液中是否存在病毒。而一些呼吸道疾病可以通過咽拭子或者呼吸道分泌物的核酸檢測來判斷是否感染，以及推測是否具有傳染性。季節性流感、禽流感、冠狀病毒感染等通過咽拭子檢測可以方便地判斷出上呼吸道是否存在病毒成分，從而判斷被檢測者是否屬於感染者。(5)核酸檢測技術的方法原理擴展閱讀：新冠病毒的核酸檢測已經是比較成熟的檢測方法了，只要在咽喉部位擦拭幾秒鍾就可以採集到標本。通過分析判斷是否有新冠病毒的核酸成分，可以盡早發現感染者，甚至在感染者出現症狀前就可以檢測到陽性。感染者經過隔離治療後咽拭子檢測陰性說明病毒已經清除，不具有傳染性了。目前兩次咽拭子核酸檢測陰性是確診病例和無症狀感染者解除隔離的標准之一。參考資料：人民網-關於核酸檢測的幾個熱門問題，專家解答來了參考資料：人民健康網-核酸檢測究竟是怎麼回事

⑥ 核酸檢測是怎樣檢測的新冠病毒核酸檢測的原理是什麼

除朊病毒外的所有生物都含有核酸，核酸包括脫氧核糖核酸（DNA)和核糖核酸（RNA)。新型冠狀病毒是一種只含有核糖核酸的病毒。在新冠病毒出現後，我國科學家在短時間內完成了對新冠病毒的全基因組序列的分析。在核酸檢測過程中，如果在患者樣本中發現新型冠狀病毒特殊的核酸序列，則說明該患者可能感染新型冠狀病毒。

在臨床核酸檢測中，首先需要根據試劑盒的樣本要求進行樣本的收集。樣本類型主要包括咽拭子，鼻拭子，痰液，支氣管灌洗液，肺泡灌洗液等。考慮到利於操作等多種因素，核酸檢測樣本多為鼻拭子。鼻拭子和口咽拭子的提取方法如下：

用一根較長的棉簽插入鼻孔，通過鼻腔取鼻咽後部的分泌物；口咽拭子則是從口腔進入，擦拭扁桃體和咽隱窩附近的分泌物。

核酸檢測全程時間比較短，無創口，高效快速。檢測完就可以離開，回去等待結果就好。考慮到新型冠狀病毒 感染症狀的特殊性，有條件以及所處地區有要求的人要積極配合完成核酸檢測。

⑦ 新冠肺炎核酸檢測原理是什麼

新冠肺炎核酸檢測的原理，主要是依據每一個生物的核酸都是不一樣的，都有特定的核酸序列以及DNA序列。病毒的特點就是形態非常之小，在普通的光學顯微鏡下是看不到的。但是可以根據每種病毒都有獨特的基因序列來檢測，只要檢測出人體內有新冠病毒基因序列，並且採用熒光定量PCR的方法，把這個基因序列擴增後。如果是帶有病毒的患者會檢測出熒光信號增強，這樣就可以顯示陽性的結果。如果是核酸檢測沒有病毒的患者樣本，因為沒有靶基因的擴增，就檢測不到熒光信號增強，這樣的結果就屬於新冠肺炎核酸檢測陰性。

⑧ 核酸檢測的原理是什麼

核酸檢測其實是檢測受測者體內是否有新冠病毒的核酸（RNA）。每種病毒的核酸內部都含有核糖核苷酸，不同的病毒所含的核糖核苷酸數量和排列順序不同，使得每種病毒都具有特異性。

新冠病毒的核酸也是獨特的，核酸檢測就是對新冠病毒的核酸進行特異性檢測。在進行核酸檢測之前，需要採集受測者的痰液、咽拭子、肺泡灌洗液、血液等樣本，對這些樣本進行檢測，就可以發現受測者的呼吸道感染了什麼病菌。新冠病毒核酸檢測常用的是咽拭子樣本檢測，將樣本裂解提純，從中提取出可能存在的新冠病毒核酸，檢測的准備工作就做好了。

新冠病毒核酸檢測主要用熒光定量RT-PCR技術，這種技術是熒光定量PCR技術與RT-PCR技術的結合。在檢測過程中，先採用RT-PCR技術將新冠病毒的核酸（RNA）逆轉錄為對應的脫氧核糖核酸（DNA）；再採用熒光定量PCR技術，將得到的DNA進行大量復制，同時，使用特異性探針對復製得到的DNA進行檢測，打上標記。

如果存在新冠病毒核酸，儀器就可以檢測到熒光信號，而且，隨著DNA的不斷復制，熒光信號不斷增強，這樣就間接檢測到了新冠病毒的存在。

核酸檢測為陽性不一定是確診

核酸檢測結果呈陽性，就可以確認受測者上呼吸道存在病毒核酸，但並不能直接確診為新冠肺炎患者。在核酸檢測為陽性的情況下，還要綜合流行病學史對受測者進行進一步的診斷，如果受測者還有發熱、咽痛、咳嗽、乏力等症狀，以及與已確診的感染者有接觸史等，就可以診斷為確診病例。

如果受測者沒有任何相關症狀，一般診斷為無症狀感染者。無症狀感染者也有傳染性，而且一些無症狀感染者後來也開始出現症狀，變成了確診患者。

以上內容參考 瀟湘晨報—核酸檢測的原理到底是什麼？為什麼會出現假陰性？

⑨ 核酸檢測是怎樣檢測的

眾所周知，新型冠狀病毒肺炎（COVID-19）是一種烈性呼吸道傳染病，其病原體為新型冠狀病毒。若想證實已出現的感染症狀是由本病毒所引起，最准確的方法是從患者體內分離出活病毒，並進行病毒培養。

然而，此方法並不適合大面積應用，在此次疑似病例的確診工作中，也並不適用。這是因為病毒培養所需時間較長，需要的場所條件也很高（P3級實驗室），時效性遠遠跟不上臨床需要。

而核酸檢測作為病原學的檢測手段之一，效率很高，一般情況下幾個小時就可以知道結果。因此，在此次疫情中，臨床上取得病原學證據的主要方式並不是病毒培養，而是核酸檢測。

核酸是遺傳信息載體，是對DNA（脫氧核糖核酸）和RNA（核糖核酸）的統稱。病毒則主要由遺傳物質和蛋白質組成。而新型冠狀病毒正是一種RNA病毒，其遺傳物質是單鏈RNA。核酸檢測的原理，正是檢測在被測者的咽拭子等樣本中，是否存在病毒的RNA。如果存在，說明被病毒感染。那麼，我們是否已經獲悉了病毒的RNA呢？

△RNA與DNA（圖片來源網路）

在武漢疫情初期，中國疾病預防控制中心應用宏基因組學技術，在短時間內完成該病毒的鑒定，並獲取了全基因組序列。在病毒全基因組序列公布後，實時熒光逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）試劑被快速研發。

隨後，核酸檢測試劑盒被應用於臨床，並為確診新冠肺炎提供病原學證據。那麼，應用試劑盒進行核酸檢測，究竟是怎樣的一個過程呢？

首先，檢測人員需要在試劑的幫助下，將樣本中的核酸提取出來。再把已經分離出來的核酸加到核酸擴增試劑中，然後將其放到核酸擴增儀內，一般兩個小時內就會有結果。

事實上，在操作步驟中，擴增是很重要的一環。擴增的意義在於能讓微量的遺傳信息成指數增加。只要樣本中有核酸基因片段，就能用PCR法加以放大，從而更清晰地與病毒全基因組序列實現比對。

實時熒光逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）法已在臨床實驗室應用多年，檢測體系成熟，具有特異性強、靈敏度高、檢測周期短和可定量檢測的優點，而且還能對病毒感染程度和治療效果進行動態監測。

中日友好醫院呼吸與危重症醫學科主任醫師陳欣在記者采訪中介紹道：核酸檢測十分敏感，只要在被檢者的分泌物樣本中找到一部分病毒的核酸，就可以通過RT-PCR擴增的方式，整合成序列。

"雖然不確定核酸是否來自於活病毒，但對於有呼吸道感染症狀的患者或疑似患者來說，如果其咽拭子有這種核酸，一般認為來源於活病毒的一部分，間接證實其體內存在著病毒的繁殖和感染。" 陳欣告訴記者。

核酸檢測容易出現"假陰性"

雖然核酸檢測有靈敏度高、檢測周期短等優點，但也存在著一定的弊端。不同於從人體內直接分離出活病毒的方式，核酸檢測採用的是一種間接的方式，有可能造成假陰性。

因為試劑盒存在最低檢測限的問題，所以只有當採到的樣本中，病毒的含量達到一定程度時才能檢測出來。少數情況下，可能康復者並未康復，但由於樣本中病毒載量低，故康復者核酸檢測的結果呈陰性，也就是我們常說的"假陰性"。

因此，在《新型冠狀病毒肺炎診療標准（試行第七版）》中，出院標准之一為連續兩次痰、鼻咽拭子等呼吸道標本核酸檢測陰性（釆樣時間至少間隔24小時）。
而之所以選取呼吸道標本進行核酸檢測，是因為新冠肺炎屬於呼吸道傳染病，故而優先考慮從呼吸道的分泌物中取得標本。呼吸道又分為上呼吸道和下呼吸道，前者主要包括鼻、咽、喉；後者主要包括氣管、主支氣管及肺內各級支氣管。

相應地，現在對疑似患者檢測病毒核酸，標本的採集一般有兩大類，上呼吸道標本和下呼吸道標本。

上呼吸道標本主要包括口咽拭子、鼻咽拭子（NPS）、鼻咽吸取物（NPA）；下呼吸道標本主要包括痰液、氣管吸取物、支氣管肺泡灌洗液（BALF）等。