細胞檢測方法

㈠ 關於細胞膜通透性的檢測方法，有哪些

當細胞膜的通透性發生改變時，一些正常情況下不能透過細胞膜的外部物質進入細胞的量增多，正常細胞內的有些物質也易於釋放到細胞外，檢測細胞通透性變化的方法也就是基於這樣的原理而設計的。常用的細胞膜通透性的檢測方法有：
（1）死/活細胞染色法 ： 使用選擇性死/活細胞染色的特殊染料如不易穿透活細胞膜的台盼蘭、苯胺黑及用於活細胞著色的中性紅、健那綠、亞甲藍、甲苯胺藍等，通過染色區分死活細胞並計數來間接判斷細胞膜通透性的改變情況。該方法簡單，方便，價廉；但靈敏度和精確性差。
（2）熒游標記法 ： 使用二乙酸熒光素（FDP）、碘化丙啶（PI）或異硫氰酸熒光素鈉標記的熒光染料與細胞共孵育，用流式細胞儀檢測熒光染色陽性細胞的比率。此法其實是（1）法的「熒光」版，但其在靈敏性和准確性方面明顯要優於後者。

（3）硝酸鑭(La)示蹤法： 在正常的生物組織中鑭微粒可沉積於細胞間隙，但不能穿過具有1~ 2nm 微小間隙的細胞膜性結構(包括細胞膜和細胞器膜)，也不能穿過細胞間的緊密連接。在膜性結構通透性增高時， 鑭微粒則可進入細胞、細胞器和緊密連接內， 並在電鏡下顯示， 鑭鹽標記技術被認為是一種有效的監測細胞膜通透性變化的標記技術。
（4）LDH釋放法： 在正常情況下，細胞內大分子物質LDH 是不能通過細胞膜的， 但在細胞膜受損傷而通透性增加時，可通過受損的細胞膜釋放出來。LDH 能較好地反映細胞膜損傷程度。類似的還有檢測細胞外K+的漏出率等。
還有一些檢測指標是針對不同細胞的一些特殊成分變化而設計。原則都是檢測正常細胞內、外某類些物質的比例變化情況。

㈡ 常見免疫細胞檢測方法

可以去生物公司去買和你做試驗的細胞相對應的試劑盒
因為你說的是常見的
所以一半的生物公司應該都可以買到

㈢ 細胞活性檢測的方法有多少種

細胞活性測定方法有台盼藍染色法、克隆（集落）形成法、 3H 放射性同位素摻入法、 MTT 法等。其中 MTT 法以其快速簡便，不需要特殊檢測儀器、無放射性同位素、適合大批量檢測的特點而得到廣泛的應用。但 MTT 法形成的 Formazan 為水不溶性的，需要加有機溶劑溶解，由於在去上清操作時會有可能帶走小部分的 Formazan ，故有時重復性略差。為了解決這個問題，研究人員又開發了很多種水溶性的四氮唑鹽類：如 XTT 、 CCK-8 （ WST-8 ）等。

㈣ 細胞免疫功能檢測常用有哪幾種方法

細胞免疫（CMⅠ）是由多種細胞相互作用的結果。免疫細胞間相互作用導致多種細胞因子的釋放。因此細胞功能測定不僅涉及T細胞的數量和功能與包括各類因子活性測定，因此評價機體的細胞免疫功能不僅程序復雜，且很難標准化。
一、遲發型過敏反應的體外檢測方法
皮膚試驗和接觸性過敏的誘發是檢測遲發型過敏反應（DTH）的兩種常用方法。皮膚試驗中誘發對曾經使病人致敏的抗原的再次應答，而接觸性過敏是測試受者對從未接觸過的物質發生致敏的能力。
1．皮膚試驗 用皮膚試驗診斷DTH，常用的抗原有結核菌純蛋白衍生物（PPD）、腮腺炎病毒、念珠菌素等，在人類試驗時在前臂皮內注射少量可溶性抗原，24～48小後，測量紅腫硬結的大小，硬結直徑大於10mm即被看作為陽性。表明受試者對該病原菌有了一定的細胞免疫能力，若皮試無反應，可用更高濃度的抗原重復試驗，若仍無反應即為陰性，需排除皮試技術誤差，也可能受試者從未接觸過此抗原，也可能由於細胞免疫功能缺損，或由於細胞免疫功能缺損，或由於嚴重感染（麻疹、慢性播散性結核）造成的無反應性。
2．接觸性過敏常應用低分子量化合物如二硝基氯苯（DNCB）誘生接觸性過敏。化合物與皮膚蛋白質結合而導至DTH反應。在動物試驗時，初次皮膚上塗抹DNCB後間隔7～10天再激發刺激，則皮膚出現即為陽性。此試驗人類已不使用。
二、細胞免疫的體外檢測方法
體外檢測淋巴細胞的數量和功能，最易採集的是血標本，首先需分離或純化淋巴細胞，一般使用萄聚糖-泛影葡胺配成比重為1.077的淋巴細胞分層液，當將血液重疊於淋巴細胞分層液之上離心時，由於紅細胞（1.092）、多形核白細胞（1.090）、淋巴細胞（1.070）的比重不同而相互分開。淋巴細胞和單核細胞在血漿和分層液交界處形成一薄層。仔細分出這一薄層的細胞，其中淋巴細胞佔80%，單核細胞佔20%，淋巴細胞中T細胞佔80%，B細胞佔4%～10%，其作為非DT、非B細胞。
1．T細胞計數
（1）E花環法：人類T細胞表面有SRBC受體（CD2）能與SRBC結合形成玫瑰花環樣結構，將經分層液分離現的RBM懸液與SRBC在含有血清的平衡鹽水中混合，經37℃培養5～10分鍾放4℃過夜，取細胞懸計數，外周血淋巴細胞中約70%～80%淋巴細胞結成花環即為T細胞。目前此方法已用來分離T細胞，而不用做T細胞計數。
（2）用單克隆抗體計數T細胞：將人的PBM分成三等份，分別用小鼠抗人CD3、CD4和CD8的單克隆抗體作第一抗體與細胞結合，再用FITC標記的兔抗小鼠IgG抗體作第二抗體進行間接免疫熒光染色，在熒光顯微鏡下或流式細胞儀檢測結果，在PBM中被CD3抗體染上熒光的細胞稱為CD3 細胞即總T細胞。正常人在PBM中T細胞佔70%～80%。正常人的CD4 細胞和CD8 細胞之和應與CD3 細胞數一致。CD4 細胞與CD8 細胞的比值正常人約為2/1而艾滋病患者則比值小於1.7。
2．T細胞活化試驗 T細胞能被非特異的物質稱為有絲分裂原所激活而向淋巴母細胞轉化。T細胞轉化過程可伴隨有DNA、RNA、蛋白質的合成增加，最圖導致細胞分裂。在光學顯微鏡下可計數轉化後的淋巴細胞數，也可用氚標記的胸腺嘧啶核苷（3HTdR）摻入正在分裂的淋巴細胞，用液閃測定儀檢查摻入正在分裂的淋巴細胞，用液測量儀檢查摻入的3H-TdR的多少確定淋巴細胞轉化率。最近有一種不用同位素，又可用儀器測量的淋巴細胞增殖反應的檢查法，稱為MTT檢測法，MTT是一種甲氮唑鹽，它是細胞線粒體脫氫酶的底物，細胞內的酶可將MTT分解產生藍黑色甲（fromazan）產物。該產物的多少與活性細胞數正相關。結果可用酶標檢測儀（595mm）測量匯豐銀行密度，做為MTT法的檢查指標。此法的結果與3H-TdR摻入法平行，並能反應試驗中的活細胞數。
3．細胞毒試驗 TC細胞、NK細胞、LAK細胞、TIL細胞對其靶細胞有直接的細胞毒（殺傷）作用。常用的栓測細胞毒效應的方法是51Cr-Na2Cro4鹽水溶液與靶細胞胞混合，於37℃培養1小時左右，51Cr即可進入靶細胞，與胞漿蛋白結合，洗去游離的51Cr後，即可得到51Cr標記的靶細胞，將待檢細胞毒性的細胞與51Cr標記的靶細胞混合（比例約為50：1或100：1）靶細胞被殺傷越多，釋放到上清液中的液游離的51Cr越多，且不能被其他細胞吸收。用γ射線測量儀檢測上清液中的cpm值，即可計算出待檢細胞殺傷活性的高低。
細胞毒試驗檢測Tc細胞效應功能是否健全，及經IgG介導的ADCC效應，或NK細胞在抗腫瘤免疫中的作用是有意義的。
4．混合淋巴細胞的反應（MIR） 是體外研究T細胞的較好的方法，雙向MLR常被用來篩選骨髓移植的供體。來自不同供體的淋巴細胞分別與病人的淋巴細胞混合培養4～5天，在最後8小時摻入51TdR摻入法測T細胞的反應性。或用細胞毒法觀察受刺激的T細胞與活的靶細胞混合（靶細胞來自與刺激細胞相同的個體）如果T細胞受刺激後產生了細胞毒T細胞，可殺死活的細胞，根據靶細胞釋放51Cr的多少算出T細胞移動抑制因子）和LIF（白細胞移動抑制因子）來評估細胞免疫功能。近年來應用測定IL-2的免疫酶技術，操作簡單，並能定量以取代了MIF和LIF的測定。單個核細胞與分裂原一起培養24小時，然後測定清液中的IL-2活性。在細胞免疫功能缺損時，特別是AIDS病人，IL-2分泌明顯降低。而有些疾病，如多發性硬化、類風濕關節炎、移植排斥反應等病人體內血清中IL-2水平升高，表明病人T細胞活性增高。發生移植排斥反應的病人尿中IL-2也可升高。
也可用酶聯免疫吸附試驗測定各種體液中活化的T細胞脫落的IL-2受體（CD25），一般來說IL-2的水平和IL-2受體水平是平行的，IL-2和IL-2受體的檢測可用於對某些疾病的監測，如移桿排斥、自身免疫病以及接受免疫抑制治療的病人。
對體外培養的細胞進行細胞因子產生能力檢測是檢查細胞培養上清液中細胞因子的生物活性或抗原性。現已可用核酸雜交技術，即從組織中或細胞中提取RNA，與同位素或酶標記的該種細胞因子的cDNA探針作分子雜交試驗，即印跡（dot blotting）或Northern印跡，若查出有某種因子的mRNA存在，即說明該細胞在所處培養條件下有產生某種細胞因子的能力。

㈤ CD4細胞的檢測方法

檢側CD4細胞數的標准方法是使用流式細胞儀。季節、晝夜差、某些並發症和皮質醇類葯物等可能會影響CD4細胞數，但性別、成人年齡、緊張、生理性應激和妊娠則對CD4的細胞數影響不大。此外，由於CD4百分率受各種變異因素的影響較絕對數受影響程度小，因此對於臨床來說，6歲以上兒童的測定採用CD4細胞百分率比絕對數表示更有意義。
艾滋病患者的CD4細胞檢測
CD4細胞是HIV/AIDS診斷、判斷療效及預後的主要免疫學檢測指標，檢測分絕對計數和相對計數兩類，5歲以下兒童使用相對計數。現把正常范圍和計數結果的臨床意義簡介如下：
在5歲以下兒童CD4細胞百分比>35%(<11月齡），或>30%(12月齡～35月齡），或>25%(36
月齡～59月齡），提示無免疫抑制；30%～35%(<11月齡），或25%～30%(12月齡～35月齡），或20%～25%(36月齡～59月齡），提示輕度免疫抑制；25%～29%(<11月齡），或20%～24%(12月齡～35月齡），或l5%～l9%(36月齡～59月齡），提示中度免疫抑制；<25%(<11月齡），或<20%(12月齡～35月齡）或<15%(36月齡～59月齡），提示重度免疫抑制。

㈥ 檢測細胞生物學活性有哪些方法

根據每細胞定重量設計用於單細胞、細胞及絲狀體微物測定定體積品通離或濾菌體離經洗滌再離直接稱重求濕重絲狀體微物濾用濾紙吸菌絲間自由水再稱重求濕重論細菌品絲狀菌品放已知重量平皿或燒杯內於一05℃烘乾至恆重取放入乾燥器內冷卻再稱量求微物乾重 要測定固體培養基放線菌或絲狀真菌先加熱至50℃使瓊脂熔化濾菌絲體再用50℃理鹽水洗滌菌絲按述求菌絲體濕重或乾重 除乾重、濕重反映細胞物質重量外通測定細胞蛋白質或DNA含量反映細胞物質量蛋白質細胞主要含量比較穩定其氮蛋白質重要組元素定體積品離細胞洗滌按凱氏定氮測總氮量蛋白質含氮量一陸％細菌蛋白質含量占細菌固形物50％吧0％般陸5％代表些細菌則佔一三％一四％種變化由菌齡培養條件同所產總含氮量與蛋白質總量間關系按列公式計算： 蛋白質總量＝含氮量×陸.二5 核酸DNA微物重要遺傳物質每細菌DNA含量相恆定平均吧.四×`一0^(-5)`NG定體積細菌懸液所含細菌提取DNA求DNA含量再計算定體積細菌懸液所含細菌總

㈦ 血常規檢查方法包括哪些項目

血常規檢查即傳統的血常規檢查，現在統稱為血液分析，血液分析有兩種方法，即手工法和儀器分析法。手工法為傳統方法，用顯微鏡檢測，包括血紅蛋白、紅細胞計數、白細胞計數和白細胞分類等四項。儀器分析法則除上述四項外，根據儀器的性能不同，並因白細胞分類不同而分為二分類機、三分類機和五分類機，通常以三分類為多。三分類機檢查的各項參數見例表。 血液分析參考值(包括儀器分析法和手工法) 檢查項目 英文縮寫 正常參考值 血紅蛋白 HGB或Hb 男(120-160)g/L 女(110-150)g/L 紅細胞計數 RBC 男(4.0-5.5)×1012/L 女(3.5-5.0)×1012/L 紅細胞壓積 HCT 男(0.40-0.54)L/L 女(0.37-0.48)L/L 平均紅細胞體積 MCV (80-92)fk 平均紅細胞血紅蛋白含量 MCH (27-31)pg 平均紅細胞血紅蛋白濃度 MCHC (320-360)g/L 紅細胞分布寬度 RDW 11.6-14.8% 血小板計數 PLT或BPC (100-300)×109/L 血小板壓積 PCT 男0.108%-0.272% 女0.114%-0.282% 平均血小板體積 MPV (6.8-13.5)fk 血小板分布寬度 PDW 15.5%-18.1% 白細胞計數 WBC 成人(4-10)×109/L 兒童(5-12)×109/L 新生兒(15-20)×109/L 分類 DC ＾ 嗜中性粒細胞百分數 N或GRAN 50%-70% 嗜中性粒細胞絕對值 N或GRAN (2-7)×109/L 嗜酸性粒細胞百分比 E或EOS 0.5%-5.0% 嗜酸性粒細胞絕對值 E或EOS (0.02-0.5)×109/L 嗜鹼性粒細胞百分比 B或BASO 0-1% 嗜鹼性粒細胞絕對值 B或BASO (0-0.1)×109/L 單核細胞百分比 M或MONO 3-8% 單核細胞絕對值 M或MONO (0.12-0.8)×109/L 淋巴細胞百分數 L或LYM 20%-40% 淋巴細胞絕對值 L或LYM (0.8-4.0)×109/L 中間值細胞百分數 MID 3-10% 中間值細胞絕對值 MID (0.3-1.0)×109/L (文章出處：家庭醫生報 2001年第28期)

㈧ 什麼是細胞學檢查有什麼優缺點

細胞學（cytology）檢查是指通過對患者病變部位脫落、刮取和穿刺抽取的細胞，進行病理形態學的觀察並做出定性診斷，細胞學檢查目前主要應用於腫瘤的診斷，也可用於某些疾病的檢查和診斷，如內部器官炎症性疾病的診斷和激素水平的判定等。

一、細胞學檢查的優點：

1、取材范圍廣，損傷很小或無損傷，經濟、快速、安全。

2、常有較高的陽性率（主要用於區別良、惡性，如對許多癌的陽性率可達70-90%）。

3、尤其適用；於大規模的腫瘤普查，可對人體多種惡性腫瘤（尤為各器官的癌）起到初篩作用。

二、細胞學檢查的缺點：

1、假陰性和假陽性比較高。

2、主要用於對腫瘤病變的定性（良、惡），而進一步判定腫瘤類型、亞型、浸潤、轉移等一般均有困難。因而僅是一種初步的定性診斷。

因此，對細胞學陽性（惡性）的患者，在做損害較大的治療之前，要盡可能地做活檢來印證細胞學診斷，並進行分類和分型等；而對細胞學陰性者，臨床高度疑為惡性腫瘤，或者再多做幾次細胞學檢查或做活檢等其它檢查，以防漏診。

(8)細胞檢測方法擴展閱讀

細胞學的標本可以是來自生殖道、呼吸道、消化道、泌尿道等分泌、排泄物中的脫落細胞。

也可以是經穿刺抽取的胸、腹、心包腔、關節腔、腦脊髓膜腔液體中的脫落細胞，還可以是經各種內窺鏡刷塗片、印片採集的細胞，或經細針吸取（FNA）技術（針外徑0.6-0.9mm）直接或在B超、X線引導下穿刺吸取出的全身各組織器官病變處的細胞等。

將這些細胞直接或經離心沉降等方法處理後塗片、固定、染色，在光鏡下觀察、診斷。一般幾小時內即可出結果。主要目的是判定有無腫瘤細胞，是良性還是惡性。

㈨ 細胞內NADH的檢測方法

暈 應該是 NADPH 還原性的輔酶2

具有還原性 咱們檢測 看<高等生化大試驗>和<普通生物學>