黃麴黴毒素b1檢測方法

Ⅰ 黃麴黴毒素B1的檢測方法

GB2761-2014《食品安全國家標准 食品中真菌黴素的限量》中對於黃麴黴毒素B1的限量以及檢測方法做了修改，嬰幼兒配方食品及嬰幼兒輔助食品按照GB5009.24規定的方法測試，其他食品按照GB/T18979規定的方法測定。 TLC法是測定黃麴黴毒素的經典方法，是中國測定食品及飼料中AFT黃麴黴素B1(AFB1)的標准方法之一（GB/T5009.23-2006）。其原理是針對不同的樣品，用適宜的提取溶劑將AFB1從樣品中提取出來，經溶劑萃取純化，再在薄層板上層析展開，分離，利用AFB1的熒光特性，根據熒光斑點的大小和強弱，比較測定黃麴黴毒素含量。
TLC有單項展開法和雙向展開法，TLC法由於設備簡單，易於普及，所以國內外仍在使用，但由於該法樣品前處理繁瑣，且提取和凈化效果不夠理想，提取液中雜質較多因而在展開時影響斑點的熒光強度，而雙向展開雖避免了雜質干擾，增加了靈敏度，但增加了操作步驟和時間。 酶聯免疫法檢測AFB1的理論基礎是抗原抗體反應，其採用單克隆或多克隆抗體技術，具有特異性強、分析時間短等優點。其原理是抗原（或抗體）吸附於載體上的免疫吸附劑和用酶標抗體（或抗原）與標本中的待測物（抗原或抗體）起特異的免疫學反應，最後用測定酶活力的方法來增加測定的敏感度。大體分為2類：一是用雙抗體夾心法檢測樣本中的AFTB1， 二是用競爭法檢測樣本中的AFTB1,。為了使用方便，目前國內外已研製了酶標記免疫吸附測定試劑盒及配套儀器,方法也被列入國家標准(GB/T5009.22 1996第二法)。
但由於ELISA法中酶的活性易受反應條件影響，因此ELISA法測定結果穩定性較差，分析結果的准確性不高，容易出現假陽性結果。 一般來說，組織中黃麴黴毒素含量很低，而液相色譜串聯質譜法具有比高效色譜法更高的靈敏度和准確性，如今這種方法還極少使用在測定組織黴菌毒素含量中。該方法檢測限可達0.02~0.025 ppb。 84%甲醇水溶液提取樣品中,正己烷脫脂,HLB固相萃取柱凈化。採用電噴霧電離,正離子掃描,選擇多反應檢測模式（MRM）監測,外標法定量，該法靈敏,結果可靠。

Ⅱ elisa 檢測黃麴黴毒素B1要如何做好個人防護

黃麴黴素毒性比較大，除了注意常規的生物、化學實驗室安全防護（如手套、口罩等是一定要戴的，接觸安全區的時候更換手套注意不要交叉污染環境等）之外，可以用次氯酸鈉溶液浸泡實驗所用的器皿和工具，目前常用5%次氯酸鈉浸泡可有效地破壞黃麴黴素。黃麴黴素B1的分解溫度為268℃所以高壓滅菌鍋不能去除，但污染的玻璃儀器用1%次氯酸鈉溶液浸泡半天或用5%次氯酸鈉溶液浸泡片刻後，即可達到去毒效果。
另外，稱量固體標樣的時候要小心避免空氣流動、靜電等因素造成的樣品飛濺，最好是購買溶液標樣而避免自己稱量。
預祝你的實驗順利完成，以後就不要再做這個啦。

Ⅲ 黃麴黴毒素的特徵及其檢測方法有哪些主要檢測方法是什麼

目前
主要檢測方法是
常見的膠體金試紙條，ELISA酶聯免疫試劑盒，TLC薄層色譜，免疫親和凈化熒光光度法和高效液相法，液質聯用法

Ⅳ 黃麴黴毒素B1用哪=哪種方法檢測比較准確

目前主流的方法有熒光定量檢測法、酶免、膠體金、液相色譜。我們工廠一直在用飛測的黃麴黴毒素熒光定量檢測試紙條。望採納建議。

Ⅳ 這個可以檢測黃麴黴毒素B1對嗎

你看到的這個是使用的膠體金方法，屬定性。還有一種是酶聯免疫法，屬於定量的檢測，黃麴黴毒素是迄今發現的污染農產品毒性最強的一類生物毒素。其中，毒性最強、危害最大的為黃麴黴毒素B1，其毒性為氰化鉀的10倍、砒霜的68倍，被列入嚴管的特劇毒物質。0.294毫克/公斤劑量的黃麴黴毒素B1，就能引起敏感動物的急性中毒死亡。黃麴黴毒素也是一種強致癌物。黃麴黴毒素B1的致癌能力，是二甲基硝胺的70倍。據在我國肝癌高發區的調查發現，肝癌的高發與吃了被黃麴黴毒素污染的糧食有關。農產品黃麴黴毒素污染，成為影響食品安全，危害人們身體健康的巨型殺手！但長期以來，由於檢測技術落後，制約著對農產品黃麴黴毒素污染的控制，也限制著我國農產品的出口，該快速檢測卡具有方便、快速、准確、靈敏等特點，適用於現場大批量樣品篩選檢測以及基層單位執法監督的使用。

Ⅵ 你們黃麴黴毒素B1是怎麼檢測的用什麼方法學檢測的

通用方法

薄膜層析法和液相色譜法是目前國內絕大多數檢測機構都在使用的方法。由於其檢測周期長，程序復雜所需試劑繁多等缺點已遠遠不能滿足現代檢測要求.隨著現代科學技術的不斷發展，特別是免疫學生物化學，分子生物學的不斷發展人們已創建了不少快速，簡便特異，敏感低耗且適用的黃麴黴毒素檢測方法.而且以金標試紙為代表的這些方法已經被先進國家所廣泛使用，引進和消化這些先進的方法是我們檢測領域的當務之急.免疫親和柱法優點很多但由於檢測費用過高，而無法普及.而一步式黃麴黴毒素檢測金標試紙法似乎更適用於中國值得推廣。薄層層析（Thin-Layer Chromatography,TLC）是在黃麴黴毒素研究方面應用最廣的分離技術.自1990年它被列為AOAC （Association of Official Agricultural Chemists）標准方法，該方法同時具有定性和定量分析黃麴黴毒素的功能.2、液相色譜法液相色譜（Liquid Chromatography,LC）與薄層層析在許多方面具有相似性二者互相補充.通常用TLC進行前期的條件設定，選擇適宜的分離條件後再用LC進行黃麴黴毒素的定量測定。3、免疫化學分析方法利用具有高度專一性的單克隆抗體或多克隆抗體設計的黃麴黴毒素的免疫分析方法也是最常用的黃麴黴毒素檢測方法.這類方法通常包括放射免疫分析方法（Radioimmunoassay,RIA），酶聯免疫法（Enzyme-linked of Immunosorbent Assay,ELISA）和免疫層析法（Immunoaflinity Column Assay,ICA）.它們均可以對黃麴黴毒素進行定量測定。

Ⅶ 高效液相色譜儀測定茶葉中黃麴黴毒素B1的方法是什麼

樓主你好：
高效液相色譜儀測定茶葉中黃麴黴毒素B1的方法
1.適用范圍本方法適用於出口茶葉中黃麴黴毒素B1含量的檢驗。
2.原理概要樣品用三氯甲烷提取，提取液經硅膠柱凈化，凈化後的提取液用三氟乙酸衍生，用配有熒光檢測器的高效液相色譜儀測定，外標法定量。
3.主要試劑和儀器3.1.主要試劑三氯甲烷；正己烷；苯；甲醇：紫外光譜級；乙腈：紫外光譜級；三氟乙酸；乙腈-水溶液（1＋1）；三氯甲烷-甲醇溶液（95＋5）；苯-乙腈溶液（98＋2）；黃麴黴毒素B1標准品：純度≥99%；黃麴黴毒素B1標准溶液：准確稱取適量的黃麴黴毒素B1標准品，以苯-乙腈溶液於棕色容量瓶中，配成濃度為10μg/mL標准貯備液。根據需要，再配成適當濃度的標准工作溶液。3.2.儀器高效液相色譜儀，配有熒光檢測器；天津恆奧硅膠小柱；天津恆奧振盪器：HMS系列；天津恆奧超聲波：HU、HS系列；
天津恆奧氮吹儀；天津恆奧濾膜：有機系用，0.45μm；天津恆奧微孔濾膜過濾器
旋轉蒸發器；微量注射器；離心管：5mL具塞磨口；粉碎機。
4.試樣的抽取與制備4.1.抽樣方法從整批產品堆垛的上下不同部位隨機抽取2.2規定的件數，逐件開啟。分別倒出全部茶葉於塑料布上，用取樣鏟從每件中各取出有代表性的樣品約500g。將所取樣品充分混勻，用四分法或分樣器逐步縮分出500g，裝入潔凈密封的樣品筒內，加封後，標明標記，及時送實驗室。4.2.試樣制備將所取回樣品全部磨碎，通過20目篩，混勻，均分成兩份試樣，裝入潔凈容器內，密封，標明標記。4.3.試樣保存將試樣於室溫下保存。註：在抽樣和制樣的操作過程中，必須防止樣品受到污染或發生殘留物含量的變化。更多質量檢測、分析測試、化學計量、標准物質相關技術資料請參考國家標准物質葯檢所標准品目錄，葯品對照品請參考 http://www.rmhot.com/plist_3/plist_3_0_0_1.html
5.過程簡述5.1.提取稱取試樣5.0g（精確到0.1g）置於100mL具塞錐形燒瓶中，加入15mL三氯甲烷，於振盪器上提取30min，然後經墊有玻璃纖維的漏斗過濾。收集濾液於旋轉蒸發器的具尾管圓底燒瓶內，並用三氯甲烷洗滌濾渣，收集濾液至約20mL。5.2.凈化用旋轉蒸發器將上述濾液在50℃水浴中濃縮至約1mL，經0.45μm濾膜過濾後，注入硅膠小柱中。用2～4mL正己烷洗滌燒瓶後淋洗小柱，棄去流出液。然後用3～4mL三氯甲烷-甲醇溶液以每秒鍾2滴的流速洗脫，收集洗脫液於離心管中。用氮氣儀緩緩吹乾，供衍生用。5.3.衍生5.3.1.試樣加200μL正己烷和50μL三氟乙酸於上述離心管中，蓋緊磨口塞，超聲振盪1min，靜置10min，用氮吹儀緩緩至干。用乙腈-水溶液（1＋1）定容至1.0mL，超聲1min，用0.5μm濾膜過濾，濾液供液相色譜用。5.3.2.標准工作溶液取1.0mL標准工作溶液，用氮吹儀緩緩吹乾，按5.3.1步驟操作。5.4.測定5.4.1.色譜條件色譜柱：NOVA PAKc18，300mm×3.9mm（內徑）；流動相：甲醇-水溶液（42＋58）；流速：0.8mL/min；熒光檢測器：激發波長375 nm，發射波長425 nm；色譜柱溫度：室溫。5.4.2.測定根據樣液中黃麴黴毒素B1的含量情況，選定峰高相近的標准工作溶液。標准工作溶液和樣液中黃麴黴毒素B1衍生物的響應值均應在儀器檢測線性范圍內。對標准工作溶液和樣液的衍生物溶液等體積參插進樣測定。在上述色譜條件下，黃麴黴毒素B1衍生物保留時間約為8min。5.4.3.空白試驗除不加試樣外，按上述測定步驟進行。
6.結果計算用色譜數據處理機進行數據處理
7.低限和回收率測定7.1.低限本方法的測定低限為0.001mg/kg。7.2.回收率回收率的實驗數據：黃麴黴毒素B1的添加濃度在0.001～0.5mg/kg范圍內，回收率為89.1%～104.9%。

Ⅷ 熟制禽肉中黃麴黴毒素B1能檢測嗎用哪個檢驗方法標準是多少

熟制禽肉中一般不會含有黃麴黴毒素B1.
是這樣的，黃麴黴毒素B1是穀物糧食等植物性原料，在陰暗潮濕的環境中，發霉產生的一種黴菌代謝物。土壤中也存在黃麴黴B1。尤其以發霉的花生、大豆、玉米等穀物中最為常見。肉禽中不會有黃麴黴毒素B1.
另外，奶牛食用了霉變的含有黃麴黴B1的飼料後，會代謝出黃麴黴M1毒素。這就是年初那會兒，蒙牛眉山公司和福建長富牛奶爆出的黃麴黴事件。黃麴黴M1是黃麴黴B1的代謝產物。

Ⅸ 黃麴黴毒素b1和黃麴黴毒素m1的區別

是一樣的吧
黃麴黴毒素是一類真菌（如黃麴黴和寄生麴黴）的有毒的代謝產物，它們具有很強的致癌性，主要存在於穀物、堅果、棉籽以及一些和人類血液，動物飼料相關的產品中。其中黃麴黴毒素B1（AFB1）的毒性、致癌性、污染頻率均居於首位。薄層色譜一直是檢測黃麴黴毒素常用的方法，但此方法制備樣品及分析樣品時費時又費力。而使用黃麴黴毒素B1 ELISA試劑盒則能夠快速而准確的分析樣品中黃麴黴毒素B1殘留。本試劑盒是應用ELISA技術研發的新一代真菌毒素檢測產品，操作時間短 於60min，能最大限度地減少操作誤差和工作強度。
AFB13方元方圓 試劑盒是利用競爭ELISA方法，在酶標板微孔上預包被羊抗鼠抗體。檢測時，加入黃麴黴毒素Bl抗體孵育，它與包被的羊抗鼠抗體結合，洗板後加入標准品或樣品溶液及黃麴黴毒素Bl酶結合物，他們競爭性地與黃麴黴毒素Bl抗體結合，形成抗原抗體復合物；用TMB底物顯色；加入反應終止液後在450nm波長酶標儀下進行檢測，樣品中的黃麴黴毒素Bl濃度與吸光度成反比。
詳細技術指標：
樣品檢測限：
飼料------------------------------2.5μg/kg
麩皮、玉米皮------------------5μg/kg
回收率----------------------------85%±10%
精密度-----------試劑盒的變異系數均小於10%

Ⅹ 黃麴黴毒素怎麼檢測

檢測方法

1、薄層分析法(TLC)

TLC法是檢測黃麴黴素最為經典的方法，也是以前最為常用的方法，至今仍為一些檢測機構所用，也是一種國標方法。其原理是針對不同的試樣，用適宜的萃取溶劑將黃麴黴素從試樣中萃取出來，經柱層析凈化後，再在薄板上展開後分離。

利用黃麴黴素的熒光特性，根據熒光斑點的強弱與標准比較確定其含量，對於一些組分很復雜的試樣要雙向展開，才能獲得較高的靈敏度。

TLC法設備簡單，檢測費用低，但操作繁瑣、費時，萃取和凈化效果不理想，靈敏度差，對操作人員的身體健康存在較大程度的危害。

2、液相色譜法(HPLC)

HPLC法是近年來發展起來的一種檢測方法。其原理是在高效液相色譜儀上添加柱後衍生系統分離，再用熒光檢測器測定。與其配套的柱後衍生系統有碘衍生化法、溴衍生化法及較為先進的電化學衍生化法和光化學衍生化法。當前，該方法大多用免疫親和柱來凈化、分離，其凈化效果優異。

該法能准確地分離不同種類的黃麴黴素(例如：AFB1、AFB2、AFG1和AFM1等)，檢測速度快且定性與定量准確，檢測限低，可作為仲裁法使用，但儀器設備價格昂貴，前處理方法相對繁瑣，若用到免疫親和柱則會使試樣檢測費用增加，對操作人員的身體健康仍存在一定的危害。

3、酶聯免疫法(ELISA)

ELISA法也是近年來研究開發出來的一種較為新穎的方法。其原理是根據抗體和抗原之間特異性的免疫學反應，最後用測定酶活力的方法來增加測定的靈敏度。

該方法檢測速度快、對人體危害小、但重復性差、試劑壽命短、需低溫保存、假陽性概率較高、需要配置專門的酶標儀，且對一些富含鹽和脂肪的試樣需進行額外的處理。

4、毛細管電泳法(CE)

毛細管電泳(CE)也是一種新發展起來的分析黃麴黴素的方法。該方法與激光減弱熒光檢測器(LIF)連用可很好地提高靈敏度。

Wei等用毛細管電泳一激光減弱熒光檢測器測定AFB1、AFB2、AFG1和AFG1，取得了較為理想的分離效果，其中對AFB2的測定最為靈敏。但CE法的成本較高，操作復雜，不適宜在試樣檢測中廣泛應用。

5、熒光光度法(IA C/S FB)

IA C/SFB法也是一種常用的國標方法。該方法的原理是利用各種黃麴黴素的熒光特性差異用熒光光度計測定試樣中黃麴黴素的含量。

該方法對檢測人員身體健康無危害，檢測速度迅速，靈敏度高，適用於大量試樣檢測，且定量准確，但檢測費用較高，需要配置專用設備，且不能對單一的毒素進行檢測。

6、金標試紙法

金標試紙法，實際就是一種固相免疫分析法。其原理是利用抗體與抗原的特異性結合反應，可一步檢測黃麴黴素。

該法可在5～10 min內完成對試樣中黃麴黴素的定性測定，具有簡單、快速的特點，且無須其他儀器設備的配合，既可在實驗室中進行檢測，也可在現場進行實地測定，但是其檢測的准確度、精度有待進一步的研究。

7、生物感測器法

生物感測器是使用固定化技術將具有分子識別能力的生物活性物質與物理化學換能器結合，可以用來探測生物體內外的環境化學物質或與之起特異性交互作用後產生響應的一種裝置。其中利用分子間特異親和性制備的親和型生物感測器為免疫感測器口。

根據能量轉換器所傳導的物理或化學信號的不同，免疫感測器可分為電化學免疫感測器、光學免疫感測器、壓電晶體免疫感測器等。由於生物感測器具有選擇性高、響應快、操作簡單、攜帶方便和適合於現場檢測等優點，因此各國科研工作者正積極探索研製新型生物感測器用於檢測黃麴黴素。

(10)黃麴黴毒素b1檢測方法擴展閱讀：

黃麴黴毒的危害

1993年黃麴黴毒素被世界衛生組織（WHO）的癌症研究機構劃定為1類致癌物，是一種毒性極強的劇毒物質，足以說明黃麴黴毒素對身體的危害是極大的。黃麴黴毒素毒性遠遠高於氰化物、砷化物和有機農葯的毒性，其中黃麴黴毒素B1毒性最大。

黃麴黴毒素進入體內後，主要在肝細胞內質網微粒體混合功能氧化酶系的作用下進行代謝。因此，黃麴黴毒素的危害性在於對人的肝臟組織有破壞作用，嚴重時可導致肝癌甚至死亡。 當然，黃麴黴毒素沒有經過代謝活化是無致癌性的。

參考資料來源：網路-黃麴黴毒素檢測方法