口蹄疫檢測方法

A. 牛口蹄疫滅活疫苗的安全檢測

（1）用體重350~450g豚鼠2隻，各皮下注射疫苗2.0ml；用體重18~22g小鼠5隻，各皮下注射疫苗0.5ml，觀察7日，應不出現由疫苗引起的死亡或明顯的局部和全身不良反應。 （2）用6月齡以上牛3頭，各舌背麵皮內注射疫苗20個點，每點0.1ml逐日觀察，4日後，按推薦的接種途徑各接種疫苗3頭份，繼續觀察6日。均應不出現口蹄疫症狀或由接種疫苗引起的明顯毒性反應。

B. 豬病常用的血清學診斷方法有哪些

抗原和相應的抗體在動物體內或體外都能發生特異性結合反應，這種反應稱為抗原抗體反應，習慣上把體內的抗原抗體反應稱為免疫反應，體外的抗原抗體反應稱為血清學反應，因為抗體主要存在於血清中。

血清學反應可以用已知的抗體檢查未知的抗原，也可用已知抗原測定未知的抗體。人們根據抗體能與相應抗原發生反應並出現可見的抗原—抗體復合物的原理，設計了許多血清學診斷方法，不僅可以檢測動物體內乃至體外的病原微生物，或其抗原性成分，而且還可以測定動物機體對病原微生物的侵襲或對其抗原成分的免疫反應。在抗原—抗體復合物成不可見狀態時，可以通過瓊脂擴散、凝集實驗以及酶標記等指示系統，使其變為可見或可測狀態。

目前已知的血清學診斷方法很多，現僅介紹幾種在目前條件下規模化豬場通過學習都能做到的診斷方法：

（1）凝集試驗豬病診斷過程中常用的操作方法有以下幾種：

①全血平板凝集試驗實踐中主要用於細菌性疾病的抗體檢測和抗原（經分離培養後）的鑒定。現舉例用已知豬丹毒抗原（丹毒桿菌的純培養液）測定被檢豬血清中的抗體。其操作步驟如下：

a.材料豬丹毒凝集抗原，玻片，9號針頭，酒精棉球，酒精燈，鉑耳（取血環）等。b.操作用鉑耳取已知抗原1滴，置於玻片上。用酒精棉球擦拭針頭，鉑耳在酒精燈上灼燒消毒。用針頭刺破被檢豬的耳靜脈，以鉑耳取血與玻片上的抗原等量混合，在2～3分鍾內觀察結果。c.結果判定出現顆粒狀的凝集，為陽性反應。否則為陰性。

②試管凝集試驗是一種定量法，用於測定被檢血清或其他體液中有否某種抗體及其效價，可做臨床的輔助診斷，或用於流行病學監測。在豬場中，本法常用於豬布氏桿菌病的診斷。

A.材料布氏桿菌病試管凝集抗原（1∶20倍稀釋），布氏桿菌病陽性血清、陰性血清（1∶25倍稀釋），稀釋液（0.5 %石炭酸生理鹽水），滅菌小試管，1毫升吸管，試管架，待檢血清等。B.操作取試管7支置於試管架上，設陽性和陰性血清及抗原對照各1支，測定管4支，以後每增加1個樣品，只需增加4支測定管。

按表10示意稀釋血清，加抗原，完成後每支試管內應含1毫升液體。

C. 口蹄疫抗原如何檢測

免疫檢測法，如果有抗體的話，可以用ELISA檢測，或者蘭州獸醫所有檢測口蹄疫抗原的3ABC抗原ELISA檢測試劑盒

D. 口蹄疫實驗室檢查方法有哪些

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口蹄疫病毒具有多型性，而其流行特點和臨床症狀一樣，其病毒屬於哪一型，需經實驗室檢查才能確定。另外，豬口蹄疫與豬水皰病的臨床症狀幾乎無差別，也有賴於實驗室檢查予以鑒別。首先將病豬蹄部用清水洗凈，用干凈剪子剪取水皰皮，裝人青黴素（或鏈黴素）空瓶，最好採取3-5頭病豬的水皰皮，冷藏保管，一並迅速送到有關檢驗部門檢查。

傳統的方法是補體結合試驗和乳鼠血清保護試驗。以後又採用反向間接血凝試驗和瓊脂擴散試驗，近來常用酶聯免疫吸附試驗。據報道，酶聯免疫吸附試驗比反向間接血凝試驗更靈敏可靠，阻斷夾心酶聯免疫吸附試驗已用於進出口動物血清的檢測。

E. 口蹄疫檢測3abc試劑盒哪個好

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F. 口蹄疫疫苗顆粒度怎麼測試

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G. 常用的診斷口蹄疫的方法有哪些

（1）根據流行特點：本病呈急性經過，流行性傳播，主要侵害偶蹄獸，一般為良性轉歸。
（2）根據臨床症狀：一般表現在口腔黏膜、蹄部皮膚、乳房、乳頭、鼻端、鼻孔形成水皰和潰瘍。
（3）實驗室診斷：由於口蹄疫的臨診特徵與水皰性口炎、水皰病、水皰疹極為相似，為此不能作為確診的依據，必須採取水皰液或水皰皮進行以下幾方面的實驗室診斷。
小鼠接種試驗：將病料用青、鏈黴素處理後分別接種成年、2日齡和7～9日齡小鼠，如2日齡和7～9日齡乳鼠都發病死亡，可診斷為口蹄疫，如僅2日齡乳鼠發病死亡則為豬水皰病。
血清保護試驗：通常採用乳鼠作血清保護試驗。可用已知血清鑒定未知病毒，也可用已知病毒鑒定未知血清。
血清中和試驗：可用於鑒定康復豬的抗體和病毒。採用乳鼠中和試驗或細胞中和試驗均可。此外，也可應用對流免疫電泳、反向間接血凝抵制試驗、補體結合試驗檢測病毒或抗體，從而作出診斷。
抗酸性（pH5.0）試驗：依據口蹄疫病毒對pH5.0敏感，而豬水皰病病能抗pH5.0的特性，可以鑒別這兩種病毒。

H. 可做口蹄疫病毒殺滅試驗檢測機構有哪些

做口蹄疫病毒殺滅試驗，病毒滅活效果試驗檢測，找專業可靠的第三方檢測機構-中科院中科檢測，具備CMA資質認證，能夠嚴格按照相關病毒殺滅試驗檢測標准要求，檢測出具CMA報告。
口蹄疫病毒殺滅試驗檢測標准：《消毒技術規范》（2002年版）2.1.10和《消毒劑滅活手足口病病毒效果的測試方法》團體標准

I. 口蹄疫的檢測

1.蹄疫反轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR），用於檢測疑似感染動物水皰皮或水皰液中所有血清型口蹄疫病毒，適用於口蹄疫病毒的檢測、診斷和流行病學調查。
原理：利用異硫氰酸胍方法提取RNA，在反轉錄酶的作用下，以RNA為模板，以引物為起點合成與RNA模板互補的cDNA鏈。利用西安天隆科技有限公司生產的DTC型基因擴增儀，在TaqDNA聚合酶的作用下，經高溫變性、低溫退火、中溫延伸的循環，使特異性DNA片段的基因拷貝數放大一倍。經過35個循環，最終使基因放大數百萬倍。將擴增產物進行電泳，經溴化乙錠染色後，在紫外燈照射下，肉眼可見DNA片段的擴增帶。該方法可以檢測所有亞型的口蹄疫病毒，檢測結果為陽性，需進一步採用分型診斷試劑盒進行進一步檢測。
2.血清學試驗 ，ELISA是目前檢測FMDV感染較為常用的診斷方法，其與補結試驗、中和試驗及間接血凝抑制、免疫擴散沉澱試驗相比較、具有靈敏、快速、價廉等優點。

J. 如何診斷與預防牛口蹄疫

口蹄疫俗稱「口瘡」、「蹄癀」，是由口蹄疫病毒引起的一種人和偶蹄動物的急性、發熱性、高度接觸性傳染病。主要臨床症狀表現為口腔黏膜、唇、蹄部和乳房皮膚發生水皰和潰爛。

【病因】

該病由口蹄疫病毒引起。口蹄疫病毒是動物RNA病毒，呈圓形，直徑20～25納米，該病毒具有多型性、變異性等特點，目前全世界有7個主型：A、O、C、南非1、南非2、南非3和亞洲Ⅰ型。各型之間不能互相免疫，即感染了此型病毒的動物，仍可感染其他型病毒。各型的臨床表現相同。該病毒對動物致病力特強，1克新鮮的牛舌皮毒，搗碎成糊狀，稀釋10⁷～10⁸倍後，取1毫升舌面接種牛，還能使牛發病。病毒存在於病牛的水皰、唾液、血液、糞、尿及乳汁中。病毒對外界抵抗力很強，不怕乾燥，但對日光、熱、酸、鹼則均敏感。

【流行病學】

不同地區可表現為不同的季節性，牧區一般從秋末開始，冬季加劇，春季減輕，夏季平息，在農區，這種季節性不明顯。病牛是傳染源，傳播途徑是通過直接接觸和間接接觸，經消化道、損傷的黏膜、皮膚和呼吸道傳染。口蹄疫病毒傳染性很強，一旦發生，呈流行性，且每隔1～2年或3～5年就流行1次。有一定的周期性。

【症狀】

潛伏期平均為2～4天，長者可達1周左右。病牛體溫升高至40～41℃，精神不振，食慾減退，流涎。1～2天後，唇內面、齒齦、舌面和頰部黏膜出現1～3厘米見方的白色水皰，大量流涎，水皰破裂形成糜爛，病牛因口腔疼痛採食困難，進食減少或不進食。水皰破裂後，體溫下降至正常，糜爛部位逐漸癒合。與水皰出現的同時或稍後，蹄部的趾間、蹄冠的皮膚也出現水皰，並很快破裂，病畜不願意行走，嚴重者蹄匣脫落。在牛的鼻部和乳頭上也出現水皰，之後破裂，形成粗糙的、有出血的顆粒狀糜爛面。感染的懷孕母牛經常出現流產。病程為1周左右，病變部位恢復很快，全身症狀也逐漸好轉，如果發生在蹄部，病程較長，一般為2～3周，死亡率低，不超過1%～3%。但是如果病毒侵害心肌時，可使病情惡化，導致心臟出現麻痹而突然死亡。

【病理變化】

主要在口腔黏膜、蹄部、乳房皮膚出現水皰及糜爛面。病毒毒素侵害心肌而死亡的牛心肌變性和出血，而且在心肌上可看到許多大小不等、形態不整齊的灰白色或灰黃色混濁、無光澤的條紋樣病灶，稱為「虎斑心」。

【實驗室檢查】

作病毒分離，採用雞胚和細胞，培養分離病毒。血清學檢查主要應用反向間接血凝試驗、酶聯免疫吸附試驗等檢測病毒抗原。

【預防】

口蹄疫由於發病率高、傳播快和易造成大流行等特點，因此在防治上應本著「早、快、嚴、小」的原則，充分發動群眾，嚴格執行各項獸醫衛生防疫制度，採用綜合性防疫措施。

（1）發生疫情時的措施

①發生疫情時應立即向上級和有關部門報告，並迅速採取病料（水皰和水皰液）送有關單位確診、定型。

②劃定疫區，嚴格封鎖。疫點要求封死，人、畜、畜產品及用具等都不能出入，查明傳染來源。

③對疫區內所有易感家畜進行普查，將病畜和可疑病畜立即隔離。同時對被病畜的分泌物、排泄物污染的場所、用具等用2%燒鹼或2%甲醛溶液進行認真消毒。

④建成免疫帶。為防止疫情繼續蔓延擴大，對疫區和疫區外的受威脅區的易感家畜，立即用與當地流行的相同病毒型的、亞型的減毒活苗和滅活苗進行接種。以建立免疫帶，這是綜合性防疫措施中的一個重要環節。

⑤撲殺病畜，死畜應焚燒或深埋。

⑥疫區解除封鎖的時間，經過全面消毒，報有關部門同意後，才可解除封鎖。實踐證明，凡疫情報告及時、隔離早、封鎖嚴、消毒徹底的畜牧場，都能取得迅速控制和撲滅疫情的效果。

（2）平時的措施

①平時對家畜要嚴格檢疫，每年夏秋季節用口蹄疫疫苗對牛、羊進行預防注射。

②加強飼養管理，搞好環境衛生和消毒工作。

此外，本病發生和流行時，人可因與病畜接觸或飲乳偶爾感染。應注意人身防護。