『壹』 細菌分子鑒定的方法有哪些
一般從DNA、RNA和蛋白質這三個方面鑒定。將三種物質分別提取出來,各自進行鑒定。鑒定的方法可以用你提到的這些。
1.核酸雜交:簡單的說,就是將需檢測的核酸與標記的分子結合使得未知核酸可以被檢測到。
2.脈沖場凝膠電泳:利用電場讓不同大小的帶電DNA分子以不同的速度移動,從而將不同大小的分子分開。可分離10kb--10mb的DNA分子。
3.16S rRNA :16S rRNA所對應的 16S rDNA基因在微生物基因組中具有高度保守性;對16S rDNA而言,如果出現3個鹼基以上的差異就可以斷定細菌不屬於同一種屬。它具有高度的靈敏性,而且不需要培養,檢測指標也很單一。可以快速檢測未知微生物或致病微生物。
4.RAPD:對整個未知序列的基因組進行多態性分析的分子技術。先進行PCR擴增,然後電泳分離染色,在紫外透視儀上檢測多態性。
5.質粒質譜分析法:我只了解過蛋白質的質譜分析技術,質粒的沒有了解過。
蛋白質:將蛋白質酶解成小肽段並混合基質,用激光將呈離子化氣體狀態的待測物噴射,經電場到達檢測器,根據到達的時間分析肽段的分子質量。
『貳』 化學分析法中較常用的檢測方法是
(1) 化學分析法:目前常規的糖類檢測方法如斐林氏法、高錳酸鉀法等化學分析方法只能測定總還原糖,不能測定其他糖含量。
(2) 氣相色譜法:氣相色譜法也可用於糖類測定,但由於糖類本身不具揮發性,須進行衍生化處理後才能用氣相色譜檢測。
(3) 高效液相色譜法。高效液相色譜法(HPLC)更適用於糖類檢測,樣品無需衍生化,解析度高,重現性好,特別適用於某些熱敏性糖類和多糖分子量的檢測。迪信泰檢測平台提供HPLC、LC-MS檢測多種糖類服務。
檢測器
(1) 示差折光檢測器:可直接測定,操作簡便,但靈敏度較低;
(2) 紫外檢測器或光檢測器:靈敏度較高,但由於糖類本身在紫外區沒有吸收或不產生熒光,因此樣品需提前進行衍生化,操作較復雜。
(3) 蒸發光散射檢測器:對於沒有紫外吸收、不產生熒光或電活性的物質均能檢測,通用性好,靈敏度高,可用於梯度洗脫。
流動相
一般為水、乙腈和甲醇的混合溶液,影響流動相的因素主要有以下幾種:
(1) 配比:由糖類的組分含量、分子量范圍、結構組成等決定,且有研究表明水的比例越高,分離速度越快,但若出現果糖和葡萄糖色譜峰重疊,分離效果則會下降。
(2) 流速:也是影響分離效果的主要因素之一,若流速增大,保留時間縮短但分離效果下降,若流速過快,則會縮短色譜柱的使用壽命,不同的色譜柱,其配合柱效的最佳流速也不同。
(3) 檢測溫度:會影響色譜的檢測結果,有研究發現提高溫度,可以縮短保留時間,但分離效果下降,降低溫度更有利於峰分離。
(4) pH:一般使用中性的有機溶劑或水進行提取。為了避免離子化,檢測物質呈鹼性時,可以增大流動相pH,檢測物質呈弱酸性時,可以降低流動相pH。
『叄』 化學檢測的方法有哪些
化學檢測的方法有哪些
一般分有機顏料,如酞青綠等;無機顏料如氧化鐵紅、鈦白;染料如還原桃紅、分散橙等.聚烯烴、PVC色母粒採用的是顏料,一般說染料不可用於聚烯烴著色,否則會引起嚴重遷移.
二、分散劑主要對顏料表面進行潤濕,有利於顏料進一步分散,並穩定在樹脂中,同時必須與樹脂相容性好,不影響著色產品品質.聚烯烴色母粒分散劑一般採用低分子量聚乙烯蠟或硬酯酸鋅等.工程塑料色母粒分散劑一般採用有極性低分子量聚乙烯蠟、硬酯酸鎂、硬酯酸鈣等.三、載體樹脂
使顏料均勻分布並使色母粒呈顆粒狀.選擇載體需考慮與被著色樹脂的相容性,還要考慮母粒應有良好分散性,因此載體的流動性應大於被著色樹脂,同時被著色後不影響產品質量.如選用熔體指數較大的同類高聚物,使母粒的熔體指數較高於被著高聚物,以保證最終製品的色澤一致.
『肆』 DNA檢測的方法都有哪些
DNA檢測
技術有很多,主要分為定性和定量方法。給你舉幾個:1,分子雜交技術,(包括southern雜交,northern雜交,基因晶元等)分子雜交分析的基本原理是基於DNA探針檢測變性而且固定在硝酸纖維素膜上的宿主細胞DNA。這些探針可以不依賴宿主細胞DNA來制備,例如用隨機引物制備探針。探針上標記酶﹑生物素﹑放射性同位素﹑地高辛(Dig)等。由於地高辛標記核酸探針,操作方便、靈敏度高,已標記的探針在4℃貯存可達兩年之久,方便隨時應用,所以現在常採用地高辛標記核酸探針,用游標記法將光敏Dig標記到探針上,製成光敏-Dig-核酸探針,再與固定在硝酸膜上的靶核酸進行靶DNA分子雜交,使之與抗Dig-鹼性磷酸酶結合,最後可用不同的檢測方式進行檢測,
發光檢測
和顯色檢測均可,靈敏度可達10pg以下2,基於DNA結合蛋白的方法Threshold®
Immunoassay分析系統是基於兩種DNA序列非特異性蛋白,單鏈DNA(ssDNA)結合蛋白(SSB)和抗ssDNA
的單抗。檢測的基本過程是當生物素—DNA單鏈結合蛋白和尿素酶—抗ssDNA
的單抗與變性的宿主細胞DNA結合最終形成復合物,通過親合素將此復合物連接到生物素—硝酸纖維素膜,在通過洗滌所有非特異性的被洗脫掉,最後放於有
尿素溶液
的讀數儀,尿素酶催化尿素分解成NH3和CO2
導致PH值發生變化,讀數儀根據PH值的變化換算成DNA的量,從而達到檢測殘余DNA含量的目的。3,PCR法,其中以實時定量PCR法最為突出熒光定量
PCR是基於PCR擴增時,在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,產物的增加可以通過熒光信號指示,通過實時監控PCR體系中的熒光信號,對樣本中初始模板進行定量分析。定量PCR可實時檢測產物量,通過加入已知濃度的
標准樣品
繪制標准曲線,然後根據待測樣品在標准曲線中的位置推算初始模板的濃度,從而達到檢測殘余DNA含量的目的。此外,對DNA的定量技術也有很多,可以看下這篇文章《核酸定量技術及其在生物檢測中的應用》
『伍』 分子檢測的方法有哪些,怎麼檢測癌症,謝謝。
使用光普分析可以知道蛋白質的種類而知其作用。癌症的發現通常是照光發現腫瘤後作腫瘤切片培養,如果發現其細胞可無限繁殖則是癌症,反之則是良性腫瘤
『陸』 什麼是分子診斷,通俗易懂,能舉個例子最好。
分子診斷:應用分子生物學方法檢測患者體內遺傳物質的結構或表達水平的變化而做出診斷的技術,稱為分子診斷。分子診斷是預測診斷的主要方法,既可以進行個體遺傳病的診斷,也可以進行產前診斷。分子診斷的材料包括DNA、RNA和蛋白質。
分子診斷主要是指編碼與疾病相關的各種結構蛋白、酶、抗原抗體、免疫活性分子基因的檢測。
技術種類分子診斷是當代醫學發展的重要前沿領域之一,其核心技術是基因診斷,常規技術包括:
(1)聚合酶鏈式反應(PCR);
(2)DNA測序(DNA sequencing);
(3)熒光原位雜交技術(FISH);
(4)DNA印跡技術( DNA blotting );
(5)單核苷酸多態性(SNP);
(6)連接酶鏈反應(LCR);
(7)基因晶元技術(gene chip)。
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『柒』 簡述分子診斷常用方法
分子成像檢驗
分子成像檢驗是指活體內生物過程在細胞和分子水平上特徵的顯示,在分子水平上藉助化學和生物制劑的作用以無創的方式成像的檢測方式。為深入揭示疾病生理病理過程有關機制,以及對疾病和治療進行實時、動態、細致、無創、靶向性的探測和跟蹤提供了有效手段。
檢查前准備
根據所採取方法的不同採取相應的准備措施,如放射性放射性核素分子成像、光學分子成像前需排除葯物過敏;磁共振分子成像應詳細了解病史,確保無任何金屬或磁性物質植入體內等。
操作方法
常用的方法有放射性核素分子成像、磁共振分子成像、光學分子成像、超聲分子成像、CT分子成像、多模式分子成像等。可以通過分子探針與靶點直接反應成像;也可以通過報告基因間接轉錄某種蛋白質基因後,其表達產物被報告探針檢測,報告探針與報告基因的表達產物特異性結合之後被成像設備檢測到而進行的成像;還可利用替代標志物探針來反映內源性分子或基因生物過程的下游結果等。
臨床意義
分子探針與體內特定研究目標結合,可以定量地反映生物過程中分子水平上的變化。
1.腫瘤的應用
在腫瘤血管成像、基因成像、腫瘤細胞凋亡成像,腫瘤間質成像、受體成像和腫瘤代謝成像等腫瘤血管成像在腫瘤研究中占重要位置。
2.心血管應用
可幫助探討動脈粥樣硬化、心肌缺血、心肌無力、心力衰竭等心血管病的發病機制。如在動脈硬化研究中,針對硬化斑塊成分、尖性細胞、增殖的平滑肌細胞,纖維蛋白及纖維蛋白原等設計不同探針,對斑塊進行分析和診斷。
3.神經系統應用
利用放射性核素分子成像和磁共振腦功能定位成像方法對腦神經病變、腫瘤性疾病進行研究,如腦退行病變中的阿爾茨海默症、帕金森病等。
4.其他
分子成像從核酸-蛋白質、蛋白質-蛋白質分子間相互關系及生物特徵表達反映發病機制,也為其他系統疾病的早期預警診斷和治療提供基因水平評估方法。
『捌』 請問核磁檢測分子結構的方法和質譜有什麼區別
這兩個東西都玩過,應該是兩種不同的儀器。雖然都可以用作結構鑒定。首先核磁共振無法測定分子量,這個是先要糾正的。核磁共振主要分為兩種,核磁共振氫譜和碳譜,都是通過氫原子和碳原子的化學環境不同進行分辨的。不同的氫在核磁譜裡面出不同的峰,比如甲基的峰一般出在化學位移在2ppm左右的地方,羥基出在低場。根據出峰的位置和峰強和耦合常數進行解析,可以得到完整分子結構,當然前提是知道分子量,核磁共振是目前結構解析中最權威的工具。
質譜通過其他分子碰撞得到碎片檢測母離子和子離子的碎片進行解析。
一般要得到確定的分子結構,要同時給出氫譜和質譜圖,同時附上解析過程。
『玖』 分子病理檢測包括哪些
分子病理檢測主要包括費氏檢測以及熒光定量PCR檢測、一代基因測序、二代基因測序檢測。病理檢測由原先的形態學為基礎的檢測,現在逐步進入到細胞和分子水平,即分子病理檢測。分子病理檢測主要包括費氏檢測以及熒光定量PCR檢測、一代基因測序、二代基因測序檢測。熒光定量PCR檢測主要為AM式方法,主要用於肺癌的EGFR和KRAS檢測,用於指導肺癌病人的靶向治療。
『拾』 什麼是分子水平的檢測
生物上高中部分知識上共包括 三個水平的檢測 分別是細胞水平 細胞器水平 分子水平 。 一般來說 細胞培養 細胞融合 核移植 屬於細胞水平的操作 核移植也可以歸為細胞器水平的操作 高中課本沒有提到 所以不用探究 分子水平的高中也只學了三個 dna分子雜交技術 dna—rna分子雜交技術 抗原—抗體雜交技術
以上為自己總結 希望能報道您