細胞毒性檢測方法

1. 國外檢測體外細胞毒性的方法有哪些

國外檢測體外細胞毒性比較常用的方法有
MTT比色法，XTT比色法，利用線粒體內部酶的活性，將特定的四唑鹽類進行轉化，然後通過酶標儀進行檢測
LDH法，通過檢測細胞培養上清中LDH的酶活性，來檢測細胞毒性
其他還有細胞增殖度法，檢測鹼性磷酸酶活性等

2. 求助各位朋友，測試細胞毒性的方法

測試細胞毒性的方法，目前還是蠻多的，檢測細胞存活與增殖的方法主要包括觀察DNA合成含量和檢測細胞代謝活性兩種，前者主要是DNA前體物質（胸腺嘧啶核苷類似物）摻入法，比如BRDU、EDU法；後者主要為MTT、XTT、MTS、CCK-8、WST-1及WST-8法等，在後者中現在最主流的就是CTG法。

3. 測細胞毒性有什麼實驗

MTT法或者結晶紫染色法都可用於體外實驗檢測葯物或者病毒對細胞的毒性

4. 細胞毒性等級如何確定

根據RGR值,參照《美國葯典》毒性分級法[8]評價細胞毒性,評價標准為:① RGR值≥75%,細胞毒性等級為0或1級,合格;② RGR值為50%～74%,細胞毒性等級為2級,應結合細胞形態綜合評價; RGR值≤49%,細胞毒性等級為3～5級,不合格.
USP XXII,NF XVII [S].United States Pharmacopeial Convention,Inc,1990:2069.

5. 醫用血管材料細胞毒性檢測一般用什麼細胞

國外檢測體外細胞毒性比較常用的方法有MTT比色法，XTT比色法，利用線粒體內部酶的活性，將特定的四唑鹽類進行轉化，然後通過酶標儀進行檢測 LDH法，通過檢測細胞培養上清中LDH的酶活性，來檢測細胞毒性 其他還有細胞增殖度法，檢測鹼性磷酸酶活性等。

6. 細胞毒試驗基本原理

T淋巴細胞轉化實驗的基本原理
T細胞在體外培養時,受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺激後,可出現細胞體積增大,代謝旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化.淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平,因此可作為測定機體免疫功能的指標之一.
T 細胞在體外培養時,受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺激後,可出現細胞體積增大,代謝旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化.淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平,因此可作為測定機體免疫功能的指標之一.
淋巴細胞轉化試驗有形態計數法、MTT 法和同位素法三種.MTT 法即四甲基偶氮唑鹽微量酶反應比色法.MTT 是一種噻唑鹽,化學名3-（4,5-二甲基-2-噻唑）-2,5-二苯基溴化四唑,水溶液為黃橙色.小鼠脾細胞受到ConA 作用後發生增殖活化,其胞內線粒體琥珀酸[工業電器網-cnelc]脫氫酶活性相應升高,MTT 作為其底物參與反應,形成藍色的甲臢（Formazan）顆粒沉積於細胞內或細胞周圍,經鹽酸─異丙醇溶解後為藍色溶液,可用酶標測定儀測定細胞培養物的OD 值,測定波長570nm.根據OD 值的大小計算反應體系中細胞增殖程度.
3H-TdR 摻入法：細胞增殖的基本條件或前提為細胞質和細胞核的復制,這是正常細胞增殖過程缺一不可的前提.一般來說,一個細胞周期可大致分為四期,即G1 期、S期、G2 期和M期.其中S期為DNA合成期,主要功能活動為DNA合成.3H-TdR即（甲基-3H）胸腺嘧啶核苷（[3H-methyl]thymidine）,是DNA合成的前體.加入細胞培養液中後被細胞攝取作為DNA合成的原料.細胞合成的DNA越多,則所摻入的3H-TdR就越多,因此,檢測所摻入的3H-TdR就可反映細胞增殖的程度.因該方法有同位素污染問題,故我們實習中仍用MTT法

7. NK細胞毒性檢驗的方法

方法首先將外周血單個核細胞（PBMCs）與K562細胞以3：1比例混合，2h後加入莫能菌素，1．5h後加入CD107a和CD56標記抗體，流式細胞儀分析CD107a陽性細胞的頻率。其次觀察CD107a抗體孵育時間、不同效靶比例對CD107a陽性細胞檢測的影響。最後觀察該方法與傳統LDH釋放法檢測NK細胞毒活性的一致性。結果NK細胞活化後可在其表面檢測到高水平表達的CD107a分子，效靶細胞孵育結束後加入CD107a抗體可降低檢測背景，低效靶比例同樣具有檢測敏感性。該方法與LDH釋放法的檢測結果一致。結論利用CD107a抗體標記檢測NK細胞毒活性的方法具有快速、敏感、所需效應細胞少的優點。

8. 病菌毒性測定方法有哪些

Wolfe等提出了田間直接測定法和室內測定法，後者又可分菌落計數法和孢子計數法

(1)田間直接測定:在田間暴露一組單基因鑒別品種幼苗，經一定時間後取回，保濕，使降落在葉片上的孢子萌發和侵入，在發病後測定每一個品種產生的病斑數，據此計算毒性頻率以標准感病品種上的病斑數為計算的基數

(2)室內間接測定:有兩種方法，第一種為病斑計數法，將所採集的混合病葉樣本用沉降塔接種一套鑒別品種葉段，離體培養，發病後以各品種葉段上的病斑數與感病品種葉段的病斑數比較，計算毒性頻率第二種方法為孢子計數法，用沉降塔接種盆栽幼苗或離體葉片，接種葉發病產孢後，洗脫孢子，配製孢子懸液，用血細胞計數板鏡檢計數孢子數目，換算單位葉面積產孢數，據以計算毒性頻率

用上述方法，都可得到單個毒性因子單獨出現的頻率(實測值)，根據這一頻率，可計算2個或多個因子組合的頻率(理論值)各個鑒別品種上所得孢子，可用來再接種整套鑒別品種，計算各毒性因子頻率，用此第二次測得的基因頻率，可計算具有2個毒性因子的表型頻率(實測值)，若再將每個品種產生的孢子，第三次接種整套鑒別品種，用所得結果，就可進一步估計具有3個毒性因子的頻率(觀測值)