目的基因的檢測的方法

㈠ 如何對目的基因進行檢測與鑒定

可以從三方面對目的基因進行鑒定：

1、直接測定：按照目的基因組成製作DNA分子探針進行配對。

2、mRNA測定：根據目的基因組得出其轉錄的mRNA組成，利用探針檢測。

3、蛋白測定：可應用PCR相應技術測定目的基因翻譯的相關蛋白，也可採用免疫化學法導入蛋白抗體檢測蛋白。

(1)目的基因的檢測的方法擴展閱讀：

對目的基因進行鑒定和檢測的多種方法：

基因鑒定技術是一項生物學檢測技術，人體細胞有總數約為30億個鹼基對的DNA，每個人的DNA都不完全相同，人與人之間不同的鹼基對數目達幾百萬之多，因此通過分子生物學方法顯示的DNA圖譜也因人而異，由此可以識別不同的人。

所謂「DNA指紋」，就是把DNA作為像指紋那樣的獨特特徵來識別不同的人。由於DNA是遺傳物質，因此通過對DNA鑒定還可以判斷兩個人之間的親緣關系。

基因鑒定的原理其實是DNA分子雜交，這種分子雜交是在緩沖液中進行的，由於DNA分子雜交時，兩個分子相遇的機會不是很大，所以就需要眾多的帶有目的基因的DNA與待測的DNA分子。

而PCR技術就是將目的基因進行擴增的一種技術手段，所以在進行基因鑒定時並不是直接進行鑒定的，而是先進行PCR技術將目的基因擴增再進行鑒定。

網路-對目的基因進行檢測與鑒定

㈡ 獲取目的基因的常用方法是哪種

..剛好學到
基因工程流程的第一步就是獲得目的DNA片段,如何獲得目的DNA片段就成為基因工程的關鍵問題。所需目的基因的來源,不外乎是分離自然存在的基因或人工合成基因。常用的方法有PCR法、化學合成法、cDNA法及建立基因文庫的方法來篩選

直接獲取
1.從基因文庫中獲取 這個沒什麼就是現成的基因儲存在受體菌上你用的時候提取出來就好了（基因組文庫法 就是原教材中的用限制性內切酶直接獲取。利用λ噬菌體載體構建基因組文庫的一般操作程序如下：① 選用特定限制性內切酶， DNA進行部分酶解，得到DNA限制性片段② 選用適當的限制性內切酶酶解λ噬菌體載體DNA。③ 經適當處理，將基因組DNA限制性片段與λ噬菌體載體進行體外重組。④ 利用體外包裝系統將重組體包裝成完整的顆粒。⑤ 以重組噬菌體顆粒侵染大腸桿菌，形成大量噬菌斑，從而形成含有整個DNA的重組DNA群體，即文庫。）經典解釋
2.cDNA文庫法（即原教材中提到的逆轉錄法）。cDNA文庫，是指匯集以某生物成熟mRNA為模板逆轉錄而成的cDNA序列的重組DNA群體。雖然可用基因組文庫法來獲取真核生物的目的基因，但是由於高等真核生物基因組DNA文庫比其cDNA文庫大得多，相關工作量同樣大得多。更為重要的是，在真核生物基因組中合有大量的間隔序列或內含子，但在大腸桿菌等原核生物中沒有類似序列的存在，所以大腸桿菌不能從真核生物基因的初級轉錄本中去除間隔序列，即不能表達真核生物DNA。而在真核生物成熟mRNA中已不存在間隔序列（已在拼接過程中被去除），所以可以以真核生物成熟mRNA為模板，逆轉錄而成的cDNA可被大腸桿菌表達。因此，在基因工程中，cDNA文庫法是從真核生物細胞中分離目的基因的常用方法。
3.直接分離基因最常用的方法是「鳥槍法」，又叫「散彈射擊法」。這種方法有如用獵槍發射的散彈打鳥，無論哪一顆彈粒擊中目標，都能把鳥打下來。鳥槍法的具體做法是：用限制酶（即限制性內切酶）將供體細胞中的DNA切成許多片段，將這些片段分別載入運載體，然後通過運載體分別轉入不同的受體細胞，讓供體細胞所提供的DNA（外源DNA）的所有片段分別在受體細胞中大量復制（在遺傳學中叫做擴增），從中找出含有目的基因的細胞，再用一定的方法吧帶有目的基因的DNA片段分離出來。如許多抗蟲，抗病毒的基因都可以用上述方法獲得。

用「鳥槍法」獲取目的基因的優點是操作簡便，缺點是工作量大，具有一定的盲目性。

人工合成
1.(主要是序列已知的基因)。主要是通過DNA自動合成儀，通過固相亞磷酸醯胺法合成，具體過程可以網上查詢，反正是可以按照已知序列將核苷酸一個一個連接上去成為核苷酸序列，一般適於分子較小而不易獲得的基因。對於大的基因一般是先用化學合成法合成引物，再利用引物獲得目的基因。
2.聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點；能在一個試管內將所要研究 的目的基因或某一DNA片段於數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷；可從一根毛發、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的DNA供分析研 究和檢測鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情，用PCR幾小時便可完成。PCR技術是生物醫學領域中的一項革命性創舉和里程碑
他只是給目的基因的擴增

好累~....

㈢ 對目的基因進行鑒定和檢測，有多種方法和技術，從分子

基因鑒定時一定要先經過PCR技術，直接進行鑒定是不行的。
基因鑒定技術是一項生物學檢測技術，人體細胞有總數約為30億個鹼基對的DNA，每個人的DNA都不完全相同，人與人之間不同的鹼基對數目達幾百萬之多，因此通過分子生物學方法顯示的DNA圖譜也因人而異，由此可以識別不同的人。所謂「DNA指紋」，就是把DNA作為像指紋那樣的獨特特徵來識別不同的人。由於DNA是遺傳物質，因此通過對DNA鑒定還可以判斷兩個人之間的親緣關系。
基因鑒定的原理其實是DNA分子雜交，這種分子雜交是在緩沖液中進行的，由於DNA分子雜交時，兩個分子相遇的機會不是很大，所以就需要眾多的帶有目的基因的DNA與待測的DNA分子，而PCR技術就是將目的基因進行擴增的一種技術手段，所以在進行基因鑒定時並不是直接進行鑒定的，而是先進行PCR技術將目的基因擴增再進行鑒定。

㈣ 關於目的基因的檢測

如果說只是要檢測目的基因是否被成功導入，用這個方法就有點浪費了，一般都直接用標記基因就好了（比如熒光啊、抗葯啊）。但如果是要檢測目的基因是否在受體細胞成功表達，那麼這是個很好的方法。首先，目的基因對於受體細胞來說，是個異物。目的基因指揮合成的蛋白質，在受體細胞中原來是沒有的，當然會被受體細胞當成抗原來處理，然後受體細胞就會產生相應的抗體蛋白。如果你用目的基因指揮合成的蛋白質去侵染受體細胞的話，若目的基因已成功表達，那麼之前產生的抗體必然就會與這個所謂的「抗原」發生特異性結合。

㈤ 目的基因怎麼檢測

可以利用抗生素
例如：大腸桿菌的某種質粒具有青黴素抗性基因,當這種質粒與外源DNA組合在一起形成重組質粒,並被轉入受體細胞後,就可以根據受體細胞是否具有青黴素抗性來判斷受體細胞是否獲得了目的基因.

㈥ 目的基因的檢測

可以有很多種方法的~
可以像樓上所說的DNA雜交技術~
還可以用蛋白質檢驗~例如大腸桿菌的某種質粒具有青黴素抗性基因，當這種質粒成為重組質粒並被轉入受體細胞後，可根據受體細胞是否具有青黴素抗性來判斷受體細胞是否獲得目的基因
還可以運用RNA雜交技術檢驗~具體過程像DNA雜交技術~不過是換成RNA~
還可以用抗原-抗體技術檢驗~例如轉基因抗蟲稻米~想知道目的基因是否起作用~捉些蟲子進去~看看蟲子會不會吃~不會吃就說明目的基因成功導入了~

方法應該還有很多~我所學的就是這些~希望對你有用~

㈦ 檢測目的基因是否導入受體細胞的方法有哪幾種

檢測目的基因是否導入受體細胞的方法有以下兩種：

1、農桿菌轉化法（植物常用）

農桿菌是普遍存在於土壤中的一種革蘭氏陰性細菌，它能在自然條件下趨化性地感染大多數雙子葉植物和裸子植物的受傷部位（受傷處的細胞會分泌大量酚類化合物，從而使農桿菌移向這些細胞），並誘導產生冠癭瘤或發狀根。

2、利用顯微注射，或者滅活的病毒轉導（動物常用）

轉導由噬菌體將一個細胞的基因傳遞給另一細胞的過程。它是細菌之間傳遞遺傳物質的方式之一。其具體含義是指一個細胞的DNA或RNA通過病毒載體的感染轉移到另一個細胞中。細菌可以轉化、轉導。轉化是利用細菌的某些特別菌株；轉導是利用噬菌體。

(7)目的基因的檢測的方法擴展閱讀：

轉導的類別：

（1）低頻轉導（LFT）

誘導溶源性細菌而產生的細胞裂解產物中，除含有正常的噬菌體外，還有極少數（約為10^(-6)）部分缺陷噬菌體。用誘導溶源性菌株得來的噬菌體進行轉導時的轉導頻率不過10^(-6) ，稱為低頻轉導。

（2）高頻轉導（HFT）

雙重溶原菌在紫外輻射等因子的誘導下,原噬菌體容易被切割下來，產生等量的缺陷噬菌體和正常噬菌體，該裂解物稱為高頻率轉導裂解物，用這樣的裂解物去感染細菌，將比低頻率轉導裂解物產生多得多的轉導子。

㈧ 目的基因的檢測的步驟及方法

我是高二學生，課本上說的是用標記基因的抗性進行測試（這是檢測目的基因是否導入受體細胞的方法）
用抗原抗體雜交技術的方法檢測目的基因是否在受體細胞表達.
不知道你問的是哪個？

㈨ (4)檢測該目的基因是否表達的方法是

先用realtime檢測mRNA水平是否表達，如果本身就存在這個基因，就看「是否表達」提高了很多，然後再做westernblot檢測蛋白水平是否表達，如果這個基因可以影響細胞的某些功能的話，再檢測細胞的一些指標看是否有預期的變化。基因(遺傳因子)是具有遺傳效應的DNA片段(部分病毒如煙草花葉病毒、HIV的遺傳物質是RNA)。基因支持著生命的基本構造和性能。儲存著生命的種族、血型、孕育、生長、凋亡等過程的全部信息。

㈩ 目的基因是否表達的檢測方法

最直接的就是檢測目的蛋白，一般都是用western blot；如果是分泌蛋白，可以做ELISA；如果蛋白有特殊的功能（比如GFP，綠色熒光蛋白），也可以直接檢測其功能（比如看有無綠色熒光）。間接的話，可以檢測目的mRNA是否存在，用的是northern blot或者RT-PCR。要注意的是，因為翻譯階段有可能存在調控，所以有些情況下mRNA存在不代表蛋白存在，即基因轉錄了未必翻譯。所以間接的手段一般作為旁證。