A. 測定氨基酸含量的方法有幾種
1)稱乾重法.可用離心法或過濾法測定.優點:可適用於一切微生物,缺點:無法區別死菌和活菌.
2)比濁法.原理:由於微生物在液體培養時,原生質的增加導致混濁度的增加,可用分光光度計測定.優點:比較准確.
3)測含氮量,大多數微生物的含氮量占乾重的比例較一致,根據含氮量再乘以6.25即可測得其粗蛋白的含量.
4)血球計數板法.優點:簡便、快速、直觀.缺點:結果包括死菌和活菌.
5)液體稀釋法.對未知菌樣作連續的10倍系列稀釋,經培養後,記錄每個稀釋度出現生長的試管數,然後查MPN表,再根據樣品的稀釋倍數就可計算其中的活菌含量.優點:可計算活菌數,較准確.缺點:比較繁瑣.
6)平板菌落計數法.取一定體積的稀釋菌液塗布在合適的固體培養基,經培養後計算原菌液的含菌數.優點,可以獲得活菌的信息.缺點:操作繁瑣,需要培養一定時間才能獲得,測定結果受多種因素的影響.
B. 如何檢測氨基酸的純度
一般是測透光率
分光光度計測定:每個公司有自己的測定標准
一般來說
工業級:透光率達到92%---95%
食品級要達到:95%---98%
有的通過超濾膜的氨基酸的透光率甚至測定時99%或1
C. 蛋白質及氨基酸的測定有哪些方法求大神幫助
樓主你好: 測定蛋白質最基本的方法是定氮法,即先測定樣品中的總氮量,再由總氮量計算出樣品中蛋白質的含量。蛋白質含量測定最常用的方法是凱氏定氮法,它是測定總有機氮的最准確和操作較簡便的方法之一,在國內外應用普遍。此外,雙縮脈法、染料結合法、酚試劑法等也常用於蛋白質含量測定,由於方法簡便快速,故多用於生產單位質量控制分析。 蛋白質及氨基酸的測定 蛋白質是生命的物質基礎,是構成生物體細胞組織的重要成分,一切有生命的活體都含有不同類型的蛋白質。人體內的酸鹼平衡、水平衡的維持;遺傳信息的傳遞;物質的代謝及轉運都與蛋白質有關。人及動物只能從食品得到蛋白質及其分解產物,來構成自身的蛋白質,故蛋白質是人體重要的營養物質,也是食品中重要的營養指標。 蛋白質是復雜的含氮有機化合物,分子量很大,它們由20種氨基酸通過醯胺鍵以一定的方式結合起來,並具有一定的空間結構。不同的蛋白質其氨基酸構成比例及方式不同,故各種不同的蛋白質其含氮量也不同。蛋白質可以被酶、酸或鹼水解,最終產物為氨基酸。氨基酸是構成蛋白質的最基本物質,在構成蛋白質的氨基酸中,亮氨酸、異亮氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、色氨酸和纈氨酸等8種氨基酸在人體中不能合成,必須依靠食品供給,故被稱為必需氨基酸,它們對人體有著極其重要的生理功能,常會因其在體內缺乏而導致患病,或通過補充而增強了新陳代謝作用。所以食品及其原料中蛋白質和氨基酸的分離、鑒定和定量具有極其重要的意義。 蛋白質的測定 測定蛋白質最基本的方法是定氮法,即先測定樣品中的總氮量,再由總氮量計算出樣品中蛋白質的含量。蛋白質含量測定最常用的方法是凱氏定氮法,它是測定總有機氮的最准確和操作較簡便的方法之一,在國內外應用普遍。此外,雙縮脈法、染料結合法、酚試劑法等也常用於蛋白質含量測定,由於方法簡便快速,故多用於生產單位質量控制分析。 微量凱氏定氮法 本法適用於各類食品中蛋白質的測定。 1.原理 食品與硫酸和催化劑一同加熱消化,使蛋白質分解,分解的氨與硫酸結合生成硫酸胺。然後鹼化蒸餾使氨游離,用過量硼酸吸收後再以硫酸或鹽酸標准溶液滴定,根據酸的消耗量乘以換算系數,即為蛋白質含量。反應過程分為三個階段,用反應式表示如下。 ①消化 2NH2(CH2)2COOH 4-13H2S04一(NH。)2S04+6C02+12S0=+16H20 (NH4)2S04+2Na()H一2NH3十+2H20+。Na2S04 2NH3+4H3803—,(NH4)2 B207+5H20 ③滴定 (NH4)2 B2 07+2HCl+5H20—NH4C1+4H3803 2.儀器 ①消化爐。 ②凱氏定氮蒸餾裝置。 3.試劑 所用試劑均用不含氨的蒸餾水配製。試劑均為分析純。 ①CuS04。 ②K2SO。 ③濃H2SO。 ④2%H。BO。溶液。 ⑤混合指示劑:1份O.1%甲基紅乙醇溶液與5份O.1%溴甲酚綠乙醇溶液臨用時混合。也可用2份O.1%甲基紅乙醇溶液與1份0.1%次甲基藍乙醇溶液臨用時混合。 ⑥飽和氫氧化鈉:500 g氫氧化鈉加入500 mL水中,攪拌溶解,冷卻後放置數日,澄清後使用。 ⑦0.01 toolI.一』或0.05 toolL叫HCl標准溶液(需用無水碳酸鈉標定後使用)。 4.操作步驟 ①樣品消化:精密稱取O.2~2.0 g固體樣品或2~5 g半固體樣品或吸取液體樣品5~20mI。,放人500 mI。乾燥凱氏燒瓶中,加人O.2 g硫酸銅、3 g硫酸鉀及20 mL濃HzSOa,於凱氏瓶口放一小漏斗,並將其以45。角斜支於有小孔的石棉網上。(更多詳細咨詢請參考國家標准物質網 www.rmhot.com )用電爐以小火加熱,待內容物全部碳化,泡沫停止產生後,加大火力,保持瓶內液體微沸,至液體變藍綠色透明後再繼續加熱微沸30 min。冷卻,小心加入20 mL水,再放冷至室溫,移人100 mL容量瓶中,並用少量水洗燒瓶洗液並人容量瓶,在加水至刻度,混勻備用。除不加樣品外,取與處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、硫酸,按同一方法做試劑空白消化。 ②水蒸氣發生瓶內裝水至約2/3處,加甲基紅指示液數滴及數毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入數粒玻璃珠以防暴沸,加熱煮沸水蒸氣發生瓶內的水。 ③向接收瓶內加入10 mL 2%硼酸溶液及混合指示液l滴,並使冷凝管的下端插入液面下,吸取lO mI。樣品消化稀釋液由小玻璃杯流人反應室,並以10 mL水洗滌小燒杯使之流人反應室內,塞緊小玻璃杯的棒狀玻璃塞。將3~10 mL飽和氫氧化鈉溶液倒人小玻璃杯中,提起玻璃塞使其緩緩流入反應室,立即將玻璃塞蓋緊,並加水於小玻璃杯中以防漏氣。加緊螺旋夾,開始蒸餾。蒸汽通人反應室使氨通過冷凝管而進入接收瓶內,蒸餾2~5 min,移動接收瓶,使冷凝管下端離開液面,然後用少量中性水沖洗冷疑管下端外部,再蒸餾1 min取下接收瓶,以0.01 molI.叫或O.05 molL1HCl標准溶液滴定至灰色或藍紫色為終點。同時吸取10 mI_,試劑空白消化液按③操作。 5.計算 6。說明 ①干樣用稱量紙稱重連紙一同消化,空白管同樣放稱量紙消化。 ②含糖量高和油脂高的樣品消化時容易溢出,加熱要緩慢。 ③氨是否蒸餾完全,可用pH試紙測試餾出液是否為鹼性來判斷。 ④實驗前必須仔細檢查蒸餾裝置的各個連接處,保證不漏氣。所用橡皮管、塞子須浸在氫氧化鈉(10%)中,煮沸10 min,然後水洗、水煮,再用水洗。 ⑤小心加樣,切勿使樣品沾污凱氏燒瓶口部和頸部。
D. 列舉三種氨基酸的定量分析方法,說明其工作原理。
就給你找到兩種,將就著看吧..你找到了另一種,再告訴我一下
1、化學分析法——甲醛滴定法
甲醛滴定法用於氨基氮的測定, 可以測出樣品中總氨基酸的含量,其原理是在中性或弱鹼性水溶液中,氨基酸的α—氨基與醛類反應生Schiff鹼:α—氨基酸與甲醛反應生成亞甲基亞氨基衍生物
2、分光光度法——茚三酮法
茚三酮是一種能使氨基酸生成在可見光區有吸收的衍生試劑。該方法的基本原理是經陽離子交換柱分離出的氨基酸與茚三酮混合,經加熱反應後,一級胺與之生成藍紫色化合物,二級胺與之生成黃色化合物。兩種衍生物使用雙通道紫外檢測器同步檢測,檢測波長分別為570nm 和436nm。
E. 國標 氨基酸的檢測方法
國家標准檢測食品中的氨基酸是採用先將食品中蛋白質經鹽酸水解成為游離氛基酸,經氨基酸分析儀的離子交換柱分離後,與印三酮溶液產生顏色反應,再通過分光光度計比色瀏定氨基酸含量。
F. 請教:氨基酸序列的測定方法
有兩種方法,一是直接測序列法,常用Edman降解法,在弱鹼性條件下多肽連N端氨基酸(阿爾發)與PITC反應,標記為苯氨基硫代甲醯蛋白質。肽鏈中的第一個肽鍵變弱,在無水酸的存在下發發生降解,第一個氨基酸(AA1)經過分子重排成為PTH-AA1結合層析技術即可確定氨基酸的性質。C端氨基酸殘基分析,可用;羧基肽酶,肼解法;二是串聯質譜測定多肽鏈氨基酸測序。
氨基酸(amino acid):含有氨基和羧基的一類有機化合物的通稱。生物功能大分子蛋白質的基本組成單位,是構成動物營養所需蛋白質的基本物質。是含有鹼性氨基和酸性羧基的有機化合物。氨基連在α-碳上的為α-氨基酸。組成蛋白質的氨基酸均為α-氨基酸。
G. 氨基酸的檢測方法有哪些
1. 分光光度法氨基酸檢測:主要是利用氨基酸與衍生劑發生化學反應,產生藍紫色化合物,該化合物在某一波長處有最大吸收峰,根據吸收值大小得到氨基酸含量。常用的衍生劑為茚三酮。
2. 毛細管電泳法氨基酸檢測:根據分離原理的不同,可分為毛細管區帶電泳、毛細管凝膠電泳、毛細管等電電泳、毛細管等速電泳以及膠束電動力學毛細管電泳。其中,毛細管區帶電泳和膠束電動力學毛細管電泳可用於氨基酸檢測。
3. 近紅外光譜法氨基酸檢測:利用有機化合物的含氫基團在特定波長區域躍遷,產生光譜的變化,結合統計學方法間接地實現氨基酸的定量檢測。
4. 氣相色譜法氨基酸檢測:將氨基酸衍生化處理變為容易氣化的物質,根據氣態樣品中各組分在流動相和固定相中的分配系數的不同,實現對氨基酸的定量分析。
5. 高效液相色譜法氨基酸檢測:是最常用的一種氨基酸檢測方法。由於大多數氨基酸本身沒有紫外吸收和熒光反應,因此需要對樣品進行衍生化處理將其轉化為有紫外吸收和發射熒光的物質,衍生可分為柱前衍生和柱後衍生。
H. 食品中還有哪些方法測定游離氨基酸含量思考題
茚三酮顯色法。
游離氨基酸總量測定常用方法為茚三酮顯色法,氨基酸為水溶性物質,在pH為8.0的緩沖溶液中與茚三酮同時加熱,可形成紫色絡合物,在吸收波長570納米處可檢出光密度值,從而計算出遊離氨基酸總量。
天然產的氨基酸的結構上都具有共同特點在羧基鄰位α—碳原子上有一個氨基,因此稱α—氨基酸。天然蛋白質由不同的α—氨基酸,通過肽鍵結合而成的復雜高分子化合物,結構和組成十分復雜。
(8)功能飲料氨基酸檢測方法擴展閱讀:
游離氨基酸測量要求規定:
1、近紅外光波長介於可見區與中紅外區之的電磁波,波數范圍為12500~4000cm。近紅外光譜(NIR)分析技術為一種間接的分析技術,通過建立校正模型對樣品進行定性或者定量分析。
2、利用酶標記的抗原或酶標記的抗體作為主要試劑,通過復合物中的酶催化底物呈色反應來對待測物質進行定性或定量。
3、將生物識別元素與目標物質結合的物理感測器,具有高特異性和靈敏度、反應速度快、成本低等優點。
I. 檢驗氨基酸用什麼方法
1.茚三酮反應,氨基酸與其發生反應縮合成藍色物質。除開脯氨酸和羥脯氨酸,他們與其反應生成黃色衍生物。
2.桑格反應,氨基酸與其反應會生成黃色的2,4-二硝基氨基酸,可以用於鑒定多肽或蛋白質的N端氨基酸。
3.艾德曼反應(DNFB反應),即氨基酸與苯異硫氰酸反應生成相應的苯氨基硫甲醯氨基酸。
J. 測定氨基酸
用高相液相質譜儀可以測氨基酸含量,取標准氨基酸作標准曲線,用質譜作檢測器。看有沒有質譜信號,應該是沒有問題,如果沒有信號,則進行衍生,例如苯肼等。不同濃度標准氨基酸提取離子流圖的峰面積作標准曲線。最後檢測樣品,計算含量。