抗生素檢測方法固相萃取法

『壹』 抗生素檢測的主要方法

由於抗生素在廢水中的濃度相對較低，所以抗生素的檢測一般都是微量或是痕量分析，常採用具有高靈敏度的儀器進行檢測。各研究機構對畜禽廢水中抗生素的檢測技術主要有色譜法和其聯用技術、酶免疫分析法、毛細管電泳法等。 液相色譜法（LC）在廢水抗生素的檢測中是最常見的，LC具有分離效能好，檢測速度快且重現性好的特點。LC法所用的檢測器有紫外檢測器(UV)，熒光檢測器，以及二級管陣列檢測器。
高效液相色譜-紫外檢測器
高效液相色譜-紫外檢測器聯用檢測技術是最早用於環境中抗生素的分離檢測，由於其操作簡便以及成本低，被用於畜禽廢水中抗生素的檢測。
液相色譜-熒光檢測器
液相色譜-熒光檢測器因為其檢測限低所以也被用於畜禽廢水中抗生素的檢測，通常對本身具有熒光性的抗生素液相色譜-熒光檢測器可以直接檢測出，但是對於本身不具有熒光性或熒光性差的抗生素，需要對其衍生化來提高目標物的熒光特性以便檢測。
液相色譜串聯質譜技術
色譜可以用於多組分混合物的分離和分析，可以對有機化合物進行定量分析，但是定性較困難，質譜儀能夠對單一組分提供高靈敏度和特徵的質譜圖，但對復雜化合物無分析能力。所以將色譜與質譜進行聯用（或是串聯質譜），對復雜化合物中微量和痕量組分的定性和定量分析具有重要的意義。
由於畜禽廢水中有多種類的抗生素同時存在，利用色譜和質譜的聯用技術可以提高抗生素的定性、定量分析的可靠性、准確性、靈敏度。 酶免疫分析方法具有操作簡單，前處理簡化，分析成本低、靈敏、特異性強、檢測快速，不需要昂貴的儀器等，而且可以同時測定幾個樣品，但是酶免疫分析方法對試劑的選擇性高，很難同時分析多種成分，對結構類似的化合物有一定程度的交叉，分析分子量很小的化合物和不穩定的化合物有一定的困難。
用酶免疫分析方法試劑盒檢測地表水、地下水中的四環素和泰勒菌素，檢測分別為0.05μg/L,0.1μg/L。其結果表明，該方法成本低、檢測快，可用於水中的四環素、氯四環素、泰勒菌素的初篩檢測。 經典的放射免疫測定基本原理和酶免疫分析是相同的，但所不同的是反應的放大指示系統不是酶和底物，而是放射性同位素。用於抗原或抗體標記的同位素通常是放射性較小的β放射原，最常用的是同位素是3H和14C，放射性不強、用量也極微小，比較安全。

『貳』 如何檢測牛奶中的抗生素

如果飲用含有抗生素的牛奶，可能會引起飲奶者出現過敏反應，長期飲用，還可能引起細菌的耐葯性，造成人體腸道內菌群失調，抑制一些有益菌的生長。此外，含有抗生素殘留的牛奶，可以抑制乳酸菌的生長繁殖，這樣的牛奶就不能加工發酵乳製品。測定奶中殘留抗生素常用TTC法，其原理和方法如下。
（1）原理 指示劑2，3，5-氯化三苯基四氯唑加入接種菌群的奶中進行培養，有抗生素，則奶不顯色，因為細菌不繁殖，TTC指示劑不被還原；反之，則TTC還原顯紅色，說明奶中無抗生素存在。
（2）方法 取奶樣9毫升注入試管內，於80℃水浴5分鍾，冷卻至37℃以下，加菌液1毫升，於37℃水浴中保溫培養2小時。加TTC 0.3毫升（濃度為4%左右），於37℃水浴中繼續培養30分鍾，觀察其顏色變化，如奶變紅色，則為陰性；若奶仍為原色，則繼續培養30分鍾，進行第二次觀察，仍為原色者，則為陽性；由淡紅色→桃紅色→紅色為陰性。用此法檢測各種抗生素的敏感度（指最低檢測量）如下：青黴素0.004國際單位/毫升奶；鏈黴素0.5國際單位/毫升奶；慶大黴素0.4國際單位/毫升奶。
現在，已經開發出了抗生素快速測定儀，檢測牛奶中的抗生素。

『叄』 肉類抗生素檢測方法有哪些

一種基於冰箱的肉類抗生素檢測方法,將紫外激發光源和光譜相機安置於冰箱內部上壁,將肉類放置在冰箱內,開啟光譜相機,連續採集n幀數據,每幀數據為八通道光譜圖像,將每個通道取平均來降低紫外激發光源波動及光譜相機偏置雜訊,獲得八通道背景光譜數.

『肆』 求用高效液相色譜法測河流中抗生素的步驟

就是首先用現成葯品確定一個合適的分離條件，如溶劑，進樣量等等，測好保留值用於定性。測好工作曲線用於定量。
然後取水樣，用上面的條件測定，如果感覺濃度不夠可以用固相萃取法富集一下。
測出大致濃度後，用標准樣配製與自然水樣濃度相近的溶液，進行測回收率的實驗。
測出回收率之後才能計算真正的天然水樣抗生素濃度。
至於具體步驟很復雜，沒有3個月做不完，沒有10頁紙恐怕也沒辦法寫詳細。樓主自己找一本色譜方面的教材來看吧，或者上網找安捷倫的培訓ppt也可以。

『伍』 抗生素效價測定的方法有哪兩類它們各有什麼特點

抗生素的效價常採用微生物學方法測定，它是利用抗生素對特定的微生物具有抗菌活性的原理來測定抗生素效價的方法，如管碟法（cylinder
plate
method）。管碟法是根據抗生素在瓊脂平板培養基中的擴散滲透作用，比較標准品和檢品兩者對試驗菌的抑菌圈大小來測定供試品的效價。管碟法的基本原理是在含有高度敏感性試驗菌的瓊脂平板上放置小鋼管（內徑6.0±0.lmm，外徑8.0±0.lmm，高10±0.lmm），管內放入標准品和檢品的溶液，經16~18小時恆溫培養，抗生素擴散的有效范圍內則產生透明的無菌生長的區域，常呈圓形，稱為抑菌圈（圖實驗-18）。抑菌圈直徑大小與抗生素濃度相關，比較抗生素標准品與檢品的抑菌圈大小，可計算出抗生素的效價。抗生素效價常採用二劑量法。將抗生素標准品和供試品各稀釋成一定濃度比例（2:1或4:1）的兩種溶液，在同一平板上比較其抗葯活性，再根據抗生素濃度對數和抑菌圈直徑成直線關系的原理來計算供試品效價。取含菌層的雙層平板培養基，每個平板表面放置4個小鋼管，管內分別放入檢品高、低劑量和標准品高、低劑量溶液。先測量出四點的抑菌圈直徑，按下列公式計算出檢品的效價。
(1)
求出w和v：
(2)
w=（sh+uh）-（sl+ul）
(3)
v=（uh+ul）-（sh+sl）
式中：
uh：供試品高劑量之抑菌圈直徑
ul：供試品低劑量之抑菌圈直徑
sh：標准品高劑量之抑菌圈直徑
sl：標准品低劑量之抑菌圈直徑
求出θ：（2）
θ=d·antilog（iv/w）式中：
θ：供試品和標准品的效價比
d：標准品高劑量與供試品高劑量之比，一般為1
i：高低劑量之比的對數，即log2或log4。
求出pr
：
(5)
pr
=
ar×θ
式中：
pr：供試品實際單位數
ar：供試品標示量或估計單位
（1）細菌：短小芽胞桿菌[cmcc（b）63202]的芽胞懸液。
（2）培養基：效價檢定用培養基（上層、底層）。
（3）抗生素：抗生素檢品及標准品（高劑量、低劑量，高劑量與低劑量之比為2:1）。
（4）試劑與器材：滅菌生理鹽水，無菌平皿，牛津杯，無菌吸管，鑷子，滴管，直尺。
（1）取無菌平皿，加入20ml底層培養基，凝固後作為底層。
（2）用滅菌生理鹽水將短小芽胞桿菌的芽胞懸液稀釋至一定濃度以能得到清晰的抑菌圈，且標准品高濃度所得抑菌圈直徑在18~22mm為基準。用無菌吸管吸取1ml芽胞懸液，加入到200ml恆溫於50℃的上層培養基中搖勻，迅速以無菌吸管吸取5ml，注入到底層培養基上，鋪平待凝。
（3）在平板底部四邊，分別對角註明「sh」、「sl」
和「uh」、「ul」標記。
（4）鑷子火焰滅菌3次，然後夾取4個牛津杯垂直放置在平板中標志附近（註：勿使鋼管陷入培養基內，各小杯之間盡量等距）。
（5）以無菌滴管分別在每個牛津杯內加入相應的抗生素溶液至滿但不溢出管外，且四杯內液面高度相同，蓋上平皿蓋，靜置30分鍾。
（6）將平皿置於37℃恆溫培養箱培養16~18
h，量取各抑菌圈直徑（sh、sl、uh、ul），以毫米為單位，誤差不超過0.1mm。
（7）計算抗生素效價
（8）查放線圖計算抗生素效價

『陸』 固相萃取-高效液相色譜測定土壤中抗生素含量，怎麼確定土壤中是否含有這類抗生素，

首先得有標樣，標樣就是指樣品中含有一定已知含量的某種抗生素，先用高效液相色譜分析這個標樣得出相應色譜圖，然後土壤樣品經固相萃取後用高效液相色譜分析得出來的譜圖跟標樣色譜圖比較，就可以知道是否有這種抗生素以及這種抗生素的含量

『柒』 根據檢測原理不同,食品中抗生素殘留的檢測方法可分為哪幾種

分為四種：酶抑制率法 分光光度法 膠體金法 滴定分析法

酶抑制率法

在一定條件下，有機磷和氨基甲酸酯類農葯對膽鹼酯酶正常功能有抑製作用，其抑制率與農葯的濃度呈正相關。正常情況下，酶催化神經傳導代謝產物（乙醯膽鹼）水解，其水解產物與顯色劑反應，產生黃色物質，在412nm處測定吸光度隨時間的變化值，計算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量的有機磷或氨基甲酸酯類農葯的存在。

分光光度法

不同的物質由於其分子結構不同，對不同波長光的吸收能力也不同，因此具有其特有的吸收光譜。即使是相同的物質由於其含量不同，對光的吸收程度也不同。標准曲線法就是利用這一特性來測定物質含量，先配製一系列濃度由小到大的標准溶液，分別測定出它們的A值，以A值為橫坐標，濃度為縱坐標，作標准曲線。在測定待測溶液時，操作條件應與製作標准曲線時相同，以待測液的A值從標准曲線上查出該樣品的相應濃度。

膠體金法

將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在膜上，膠體金標記試劑（抗體或單克隆抗體）吸附在結合墊上，當待檢樣本加到試紙條一端的樣本墊上後，通過毛細作用向前移動，溶解結合墊上的膠體金標記試劑後相互反應，再移動至固定的抗原或抗體的區域時，待檢物與金標試劑的結合物又與之發生特異性結合而被截留，聚集在檢測帶上，產生顯色反應。當光源照射到檢測帶，反射光被收集並轉化為電信號，根據信號的強弱即可判斷被測物質的陰陽性。

滴定分析法

滴定分析法是將一種已知准確濃度的試劑溶液，滴加到被測物質的溶液中，直到所加的試劑與被測物質按化學計量定量反應為止，根據試劑溶液的濃度和消耗的體積，計算被測物質的含量。

『捌』 測定抗生素效價的生物學定量方法是什麼

瓊脂擴散法又稱圓筒平板法。用於測定抗生素效價的生物學定量方法之一。標準的方法是以20毫升的瓊膠培養基放入陪替氏培養皿內做成平面，上面加上預先培養的試驗標准菌種，例如摻入了葡萄球菌的瓊膠4毫升，而使之凝固，上面再放上一個外徑8毫米的不銹鋼圓筒，筒內倒滿青黴素稀釋液之後，在35～37℃培養12～16小時。由於圓筒周圍產生濃度梯度，葡萄球菌的繁殖被阻止於有效濃度范圍之內而形成圓形的透明帶。其直徑d與青黴素濃度c之間的關系如下式所示：

d=klog10c+a（k、a為常數）

與標准青黴素液相比較，可求得青黴素濃度。測定鏈黴素時用枯草菌，氯黴素用大腸菌，四環素用八連球菌作繁殖試驗。此外還有用圓形濾紙代替圓筒，使被檢液滲入的濾紙法。

『玖』 固相萃取高效液相色譜測定土壤中四環素類抗生素的方法

1）將適量的土壤碾成粉末，溶於適量水。充分攪拌，靜置一段時間，再攪拌。過濾除去不溶雜質。
2）水相用二氯甲烷萃取三次以上。合並後的萃取液用無水硫酸鎂乾燥。過濾，濃縮。
3）濃縮液用HPLC檢測。

『拾』 6.抗生素微生物檢定包括哪兩種方法並分別介紹概念、分類以及其作用原理。

醫學微生物，有細菌，真菌，病毒，衣原體，支原體，螺旋體，立克次體，放線菌。

最重要的就是按照這幾個條目來學，最重要的是細菌病毒四體和真菌

然後記住每一條目的分類以及分類的依據，然後記住相應分類下的微生物，就可以記住相應的微生物了。

一些特殊的微生物的特點單獨記憶學習，比如溶血鏈球菌導致蜂窩織炎，葡萄球菌導致化膿性炎。
就是微觀的世界。我們醫生，大多是檢驗科醫生以後都會用到，用顯微鏡觀察常人看不到的細菌。

學習微生物，一定要根據書本來，學好書本知識，然後自己歸納總結。比如說，某個標本裡面常見的致病菌有哪些，比如大腸桿菌，你就要記住，菌落形態、革蘭陽性還是陰性，革蘭染色鏡下會是什麼樣，還有有哪些生化反應。什麼條件下它會治病:如大腸桿菌大便中最常見，如果在尿液或者痰液中培養出來那就屬於致病菌。這些都是需要熟記的