❶ 高中生物常用檢測試劑有哪些
1、斐林試劑
作用：鑒定還原性糖：C6H12O6、果糖、麥芽糖、乳糖等。
還原性糖與斐林試劑發生作用，生成磚紅色沉澱。如用於鑒定組織液中有否還原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶專一性探索等。
2、班氏尿糖定性試劑
使用方法同斐林試劑，所不同的是班氏試劑可長期使用。
3、雙縮脲試劑
作用：鑒定蛋白質，蛋白質與雙縮脲試劑發生作用，可產生紫色反應。也可用於鑒定多肽。
4、蘇丹Ⅲ
作用：鑒定脂肪，脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色（或被蘇丹Ⅳ染成紅色）。
5、質量分數為15%的鹽酸和體積分數為95%的酒精溶液的混合液
作用：用於洋蔥根尖的解離，即使組織中的細胞相互分離開來。能殺死細胞固定。
6、質量濃度為0.01g/mL的或0.02g/mL龍膽紫溶液（或醋酸洋紅溶液）
作用：使細胞核內的染色體著色，便於觀察。
7、質量濃度為0.3g/ml的蔗糖溶液
作用：觀察成熟植物細胞質分離時用。經此處理細胞仍具活性。
8、質量濃度為0.1mg/ml的亞甲基藍溶液
作用：（1）用於觀察根對礦質元素離子的交換吸附觀察；
（2）用於檢測水中細菌情況，根據亞甲基藍褪色情況，判斷水質被細菌污染情況。
是活體染色劑。
9、丙酮
是有機溶劑，在葉綠體中色素提取時，用於溶解葉綠體中的色素。可用酒精替代，不過提取色素時將綠葉放入酒精中隔水加熱
10、層析液
是一種脂溶性很強的有機溶劑，葉綠體中的色素在層析液中的溶解度不同：溶解度高的隨層析液在濾紙上擴散很快；溶解度低的隨層析液在濾紙上擴散得慢。
代用品：93號汽油、四氯化碳
11、SiO2、CaCO3
作用：加入少許SiO2是為了研磨得充分；加入少許CaCO3是為了防止在研磨時葉綠體中的色素受到破壞。
12、碘液
作用：用來測定澱粉，澱粉遇碘後，形成紫色的復合物。
13、二苯胺
作用：DNA遇二苯胺（沸水浴）會染成藍色。
14、NaOH
作用：用於吸收CO2（驗證光合作用需要CO2）或改變溶液的pH,
15、Ca(OH)2
作用：鑒定CO2（驗證呼吸作用產生CO2）。
16、NaHCO3
作用：提供CO2等。
❷ 生物的實驗方法有哪些
實驗方法是整個實驗設計的精髓,是做好實驗設計的關鍵所在.現將與中學實驗有關的一些最常見的經典的實驗方法匯總如下：
(1)化學物質的檢測方法：
①澱粉——碘液
②還原糖——斐林試劑、班氏試劑
③CO2——Ca(OH)2溶液或酸鹼指示劑
④乳酸——pH試紙
⑤O2——余燼復燃
⑥無O2——火焰熄滅
⑦蛋白質——雙縮脲試劑
⑧染色體——龍膽紫、醋酸洋紅溶液
⑨DNA——二苯胺試劑
⑩脂肪——蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液
(2)實驗結果的顯示方法：
①光合速率——O2釋放量或CO2吸收量或澱粉產生量
②呼吸速率——O2吸收量或CO2釋放量或澱粉減少量
③原子途徑——放射性同位素示蹤法
④細胞液濃度大小——質壁分離
⑤細胞是否死亡——質壁分離
⑥甲狀腺激素作用——動物耗氧量,發育速度等
⑦生長激素作用——生長速度(體重變化,身高變化)
⑧胰島素作用——動物活動狀態
⑨菌量——菌落數或亞甲基藍溶液褪色程度
⑩大腸桿菌——伊紅—美藍瓊脂培養基
(3)實驗條件的控制方法：
①增加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物
②減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開水
③除去容器中CO2——NaOH溶液
④除去葉片中原有澱粉——置於黑暗環境
⑤除去葉片中葉綠素——酒精隔水加熱
⑥除去光合作用對呼吸作用的干擾——給植株遮光
⑦如何得到單色光——棱鏡色散或彩色薄膜濾光
⑧血液抗凝——加入檸檬酸鈉
⑨線粒體提取——細胞勻漿離心
⑩骨的脫鈣——鹽酸溶液
⑾滅菌方法——微生物培養的關鍵在於滅菌,對不同材料,滅菌方法不同：培養基用高壓蒸氣滅菌；接種環用火焰灼燒滅菌；雙手用肥皂洗凈,擦乾後用75％酒精消毒；整個接種過程都在實驗室無菌區進行.
(4)實驗中控制溫度的方法：
①還原糖鑒定：水浴煮沸加熱
②酶促反應：水浴保溫
③用酒精溶解葉中的葉綠素：酒精要隔水加熱
④DNA的鑒定：水浴煮沸加熱
⑤細胞和組織培養以及微生物培養：恆溫培養
❸ 微生物的傳統檢測方法有哪些
傳統檢測有三種方法
1、直接顯微鏡觀察，正常情況，在一定的培養條件下（相同的培養基、溫度以及培養時間），同種微生物表現出穩定的菌落特徵。可以通過顯微鏡觀察菌落特徵對微生物種類進行判斷。
2、選擇培養基培養微生物或人為提供有利於目的菌株生長的條件，選擇培養基，其作用是允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他微生物生長。選擇培養一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特徵進行間接判斷，得到的微生物往往並不只有一種，但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特徵從而對其分類。
3、鑒別培養基，根據微生物的代謝特點，在培養基中加入某種指示劑或化學葯品。與選擇培養相比，鑒別培養基的鑒別所得結果的范圍比較小，一般可直接測定某微生物的種類。
❹ 高中生物常用檢測試劑有哪些
一、與顏色反應有關的試劑1、斐林試劑：成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.05g/ml CuSO4（乙液）.用法：將斐林試劑甲液和乙液等體積混合,再將混合後的斐林試劑倒入待測液,水浴加熱或直接加熱,如待測液中存在還原糖,則呈磚紅色.2、班氏糖定性試劑：為藍色溶液.和葡萄糖混合後沸水浴會出現磚紅色沉澱.用於尿糖的測定.3、雙縮脲試劑：成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.01g/ml CuSO4（乙液）.用法：向待測液中先加入2ml甲液,搖勻,再向其中加入3~4滴乙液,搖勻.如待測中存在蛋白質,則呈現紫色.4、蘇丹Ⅲ：用法：取蘇丹Ⅲ顆粒溶於95%的酒精中,搖勻.用於檢測脂肪.可將脂肪染成橘黃色（被蘇丹Ⅳ染成紅色）.5、二苯胺：用於鑒定DNA.DNA遇二苯胺（沸水浴）會被染成藍色.6、甲基綠：用於鑒定DNA.DNA遇甲基綠（常溫）會被染成藍綠色.7、碘液：用於鑒定澱粉的存在.遇澱粉變藍.8、龍膽紫溶液：(濃度為0.01g/ml或0.02g/ml)用於染色體著色,可將染色體染成紫色,通常染色3~5分鍾.（也可以用醋酸洋紅染色,可將染色體染成紅色）9、伊紅—美藍試劑：大腸桿菌鑒定,與其中有機酸反應產生深紫色,有金屬光澤.10、結晶紫染液：用於自生固氮微生物的鑒定,染色,利於觀察.11、重鉻酸鉀：酸性條件下與酒精反應,由橙紅變為灰綠.12、溴麝香草酚藍：與二氧化碳反應由藍變綠,在變黃.13、健那綠：與線粒體反應,將線粒體染成藍綠色.14、甲基綠：與DNA反應,將DNA染成綠色.15、吡羅紅：與RNA反應,將RNA染成綠色.二、作為溶劑的試劑1、酒精在不同實驗中的作用（1）50%的酒精溶液：在脂肪鑒定中,用蘇丹Ⅲ染液染色,再用50%的酒精溶液洗去浮色.（2）75%的酒精溶液：用於殺菌消毒,75%的酒精能滲入細胞內,使蛋白質凝固變性.低於這個濃度,酒精的滲透脫水作用減弱,殺菌力不強；而高於這個濃度,則會使細菌表面蛋白質迅速脫水,凝固成膜,妨礙酒精透入,削弱殺菌能力.75％的酒精溶液常用於手術前、打針、換葯、針灸前皮膚脫碘消毒以及機械消毒等.（3）95%的酒精溶液：冷卻的體積分數為95%的酒精可用於凝集DNA.用於DNA的粗提取實驗.（4）95%的酒精溶液和15%的鹽酸等體積混合可用於解離根尖.用於植物根尖分生區有絲分裂的實驗觀察,作為解離液可以將植物細胞分離開.2、丙酮(酒精）：用於提取葉綠體中的色素.使色素在有機溶劑丙酮中溶解,便於溶解.3、層析液：（成分：20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93號汽油）可用於色素的層析,即將色素在濾紙上分離開.4、0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液：與雞血混合,防凝血.用於DNA的粗提取實驗.5、氯化鈉溶液：（1）可用於溶解DNA.當氯化鈉濃度為2mol/L、 0.015mol/L時DNA的溶解度最高,在氯化鈉濃度為0.14 mol/L時,DNA溶解度最高.（2）濃度為0.9%時可作為生理鹽水.（3）高濃度食鹽：選擇培養基,金黃色葡萄球菌可以生存.三、作為培養基的成分1、青黴素：選擇培養基,使黴菌,酵母菌可以生存,殺死細菌和放線菌.2、牛肉膏,蛋白腖：微生物培養基中的C源、N源和生長因子,作為培養異養型微生物的原料.3、瓊脂：固體培養基成分；生長素生理功能（溫特實驗） 四、育種中使用的試劑1、胰蛋白酶：可用來分解蛋白質,可用於動物細胞培養時分解組織使組織細胞分散.2、纖維素酶、果膠酶：可用於植物細胞培養時分解組織使組織細胞分散.3、秋水仙素：人工誘導多倍體試劑.用於萌發的種子或幼苗,可使染色體組加倍,原理是可抑制正在分裂的細胞紡錘體的形成.4、氯化鈣：增加細菌細胞壁的通透性（用於基因工程的轉化,使細胞處於感受態）5、細胞工程促溶劑：（1）PEG（聚乙二醇）：動物細胞及植物細胞工程中,用於細胞的融合.（2）滅活（仙台）病毒：動物細胞工程中,用於細胞的融合.6、硫酸二乙酯：生物人工誘變劑,可以導致生物基因突變.7、亞硝酸（鹽）：（1）化學致癌因子,導致細胞癌變.（2）生物人工誘變劑,可以導致生物基因突變.五、其他1、20%的肝臟、3%的過氧化氫、3.5%的氯化鐵：用於比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率.（新鮮的肝臟中含有過氧化氫酶）2、蔗糖（1）3%的蔗糖溶液、3%的可溶性澱粉溶液、2%的新鮮澱粉酶溶液：用於探索澱粉酶對澱粉和蔗糖的作用實驗.(2)植物組織培養的人工合成培養基的原料之一.（3）0.3g/mL的蔗糖溶液：相當於30%的蔗糖溶液,比植物細胞液的濃度大,可用於質壁分離實驗.3、色素提取：（1）二氧化硅：在色素的提取的分離實驗中研磨綠色葉片時加入,可使研磨充分.（2）碳酸鈣：研磨綠色葉片時加入,可中和有機酸,防止在研磨時葉綠體中的色素受破壞.4、過氧化氫溶液：（1）用來作為驗證酶的高效性實驗（2）一定濃度的該溶液可以作為消毒劑,有一定的腐蝕性.
❺ 高中生物中常見的生物組織物質，它們的檢測、鑒定方法，及反應現象
生物實驗總結 實驗一 觀察DNA和RNA在細胞中的分布 實驗原理：DNA 綠色，RNA 紅色 分布：真核生物DNA主要分布在細胞核中，線粒體和葉綠體內也含有少量的DNA；RNA主要分布在細胞質中。 實驗結果: 細胞核呈綠色,細胞質呈紅色. 實驗二 物質鑒定 還原糖 + 斐林試劑 磚紅色沉澱 脂肪 + 蘇丹III 橘黃色 脂 肪 + 蘇丹IV 紅色 蛋白質 + 雙縮脲試劑 紫色反應 1、還原糖的檢測 （1）材料的選取：還原糖含量高，白色或近於白色，如蘋果，梨，白蘿卜。 （2）試劑：斐林試劑（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），現配現用。 （3）步驟：取樣液2mL於試管中→加入剛配的斐林試劑1mL（斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻後再加入）→水浴加熱2min左右→觀察顏色變化（白色→淺藍色→磚紅色） ★模擬尿糖的檢測 1、取樣：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 2、檢測方法：斐林試劑（水浴加熱）或班氏試劑或尿糖試紙 3、結果：（用斐林試劑檢測）試管內發生出現磚紅色沉澱的是糖尿病患者的尿液，未出現磚紅色沉澱的是正常人的尿液。 4、分析：因為糖尿病患者的尿液中含有還原糖，與斐林試劑發生反應產生磚紅色沉澱，而正常人尿液中無還原糖，所以沒有發生反應。 2、脂肪的檢測 （1）材料的選取：含脂肪量越高的組織越好，如花生的子葉。 （2）步驟： 製作切片（切片越薄越好）將最薄的花生切片放在載玻片中央 ↓ 染色（滴蘇丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min後吸去染液→滴體積分數50%的酒精洗去浮色→吸去多餘的酒精） ↓ 製作裝片（滴1～2滴清水於材料切片上→蓋上蓋玻片） ↓ 鏡檢鑒定（顯微鏡對光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒） 3、蛋白質的檢測 （1）試劑：雙縮脲試劑（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液） （2）步驟：試管中加樣液2mL→加雙縮脲試劑A液1mL，搖勻→加雙縮尿試劑B液4滴，搖勻→觀察顏色變化(紫色) 考點提示： （1）常見還原性糖與非還原性糖有哪些？ 葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖；澱粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。 （2 )還原性糖植物組織取材條件？ 含糖量較高、顏色為白色或近於白色，如：蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜等。 （3)研磨中為何要加石英砂？不加石英砂對實驗有何影響？ 加石英砂是為了使研磨更充分。不加石英砂會使組織樣液中還原性糖減少，使鑒定時溶液顏色變化不明顯。 （4）斐林試劑甲、乙兩液的使用方法？混合的目的？為何要現混現用？ 混合後使用；產生氫氧化銅；氫氧化銅不穩定。 （5)還原性糖中加入斐林試劑後，溶液顏色變化的順序為？ 淺藍色 棕色 磚紅色 （6）花生種子切片為何要薄？ 只有很薄的切片，才能透光，而用於顯微鏡的觀察。 （7）轉動細准焦螺旋時，若花生切片的細胞總有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什麼？ 切片的厚薄不均勻。 （8）脂肪鑒定中乙醇作用？ 洗去浮色。 （9）雙縮脲試劑A、B兩液是否混合後用？先加A液的目的怎樣通過對比看顏色變化？ 不能混合；先加A液的目的是使溶液呈鹼性；先留出一些大豆組織樣液做對比。 實驗三 觀察葉綠體和細胞質流動 1、材料：新鮮蘚類葉、黑藻葉或菠菜葉，口腔上皮細胞臨時裝片 2、原理：葉綠體在顯微鏡下觀察，綠色,球形或橢球形。 用健那綠染液染色後的口腔上皮細胞中線粒體成藍綠色,細胞質接近無色。 知識概要： 低倍觀察 高倍觀察 考點提示： （1)為什麼可直接取用蘚類的小葉，而不能直接取用菠菜葉？ 因為蘚類的小葉很薄，只有一層細胞組成，而菠菜葉由很多層細胞構成。 （2）取用菠菜葉的下表皮時，為何要稍帶些葉肉？ 表皮細胞除保衛細胞外，一般不含葉綠體，而葉肉細胞含較多的葉綠體。 （3)怎樣加快黑藻細胞質的流動速度？最適溫度是多少？ 進行光照、提高水溫、切傷部分葉片；25℃左右。 （4）對黑藻什麼部位的細胞觀察，所觀察到的細胞質流動的現象最明顯？ 葉脈附近的細胞。 （5）若視野中某細胞中細胞質的流動方向為順時針，則在裝片中該細胞的細胞質的實際流動方向是怎樣的？ 仍為順時針。 （6）是否一般細胞的細胞質不流動，只有黑藻等少數植物的細胞質才流動？ 否，活細胞的細胞質都是流動的。 （7）若觀察植物根毛細胞細胞質的流動，則對顯微鏡的視野亮度應如何調節？ 視野應適當調暗一些，可用反光鏡的平面鏡來採光或縮小光圈。 （8）在強光照射下，葉綠體的向光面有何變化？葉綠體的受光面積較小有一面面向光源。 實驗四 觀察有絲分裂 1、材料：洋蔥根尖（蔥，蒜） 2、步驟：（一）洋蔥根尖的培養 （二）裝片的製作 製作流程：解離→漂洗→染色→製片 1. 解離: 葯液: 質量分數為15%的鹽酸,體積分數為95%的酒精(1 : 1混合液). 時間: 3~5min .目的: 使組織中的細胞相互分離開來. 2. 漂洗: 用清水漂洗約3min. 目的: 洗去葯液,防止解離過度,並有利於染色. 3. 染色: 用質量濃度為0.01g / mL或0.02g / mL的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)染色3~ 5min 目的: 使染色體著色,利於觀察. 4. 製片: 將根尖放在載玻片上,加一滴清水,並用鑷子把根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片. 然後用拇指輕輕地按壓載玻片. 目的: 使細胞分散開來,有利於觀察. （三）觀察 1、先在低倍鏡下找到根尖分生區細胞：細胞呈正方形，排列緊密,有的細胞正在分裂。 2、換高倍鏡下觀察：分裂中期→分裂前、後、末期→分裂間期。（注意各時期細胞內染色體形態和分布的特點）。其中，處於分裂間期的細胞數目最多。 考點提示： （1)培養根尖時，為何要經常換水？ 增加水中的氧氣，防止根進行無氧呼吸造成根的腐爛。 （2）培養根尖時，應選用老洋蔥還是新洋蔥？為什麼？ 應選用舊洋蔥，因為新洋蔥尚在休眠，不易生根。 （3）為何每條根只能用根尖？取根尖的最佳時間是何時？為何？ 因為根尖分生區的細胞能進行有絲分裂；上午10時到下午2時；因為此時細胞分裂活躍。 （4）解離和壓片的目的分別是什麼？壓片時為何要再加一塊載玻片？ 解離是為了使細胞相互分離開來，壓片是為了使細胞相互分散開來；再加一塊載玻片是為了受力均勻，防止蓋玻片被壓破。 （5）若所觀察的組織細胞大多是破碎而不完整的，其原因是什麼？ 壓片時用力過大。 （6)解離過程中鹽酸的作用是什麼？丙酮可代替嗎？ 分解和溶解細胞間質；不能，而硝酸可代替。 （7)為何要漂洗？ 洗去鹽酸便於染色。 （8)細胞中染色最深的結構是什麼？ 染色最深的結構是染色質或染色體。 （9）若所觀察的細胞各部分全是紫色，其原因是什麼？ 因為在根尖只有分生區的細胞能夠進行細胞分裂；分生區的特點是：細胞呈正方形，排列緊密，有的細胞處於分裂狀態；不能用高倍鏡找分生區，因為高倍鏡所觀察的實際范圍很小，難以發現分生區。 （10）為何要找分生區？分生區的特點是什麼？用高倍物鏡找分生區嗎？為什麼？ 染液濃度過大或染色時間過長。 （11）分生區細胞中，什麼時期的細胞最多？為什麼？ 間期；因為在細胞周期中，間期時間最長。 （12）所觀察的細胞能從中期變化到後期嗎？為什麼？ 不能，因為所觀察的細胞都是停留在某一時期的死細胞。 （13）觀察洋蔥表皮細胞能否看到染色體？為什麼？ 不能，因為洋蔥表皮細胞一般不分裂。 （14）若觀察時不能看到染色體，其原因是什麼？ 沒有找到分生區細胞；沒有找到處於分裂期的細胞；染液過稀；染色時間過短。 實驗五 比較酶和Fe3+的催化效率 考點提示： （1）為何要選新鮮的肝臟？因為在不新鮮的肝臟中，過氧化氫酶的活性會由於細菌的破壞而降低。 （2）該實驗中所用試管應選較粗的還是較細的？為什麼？應選用較粗的，因為在較細的試管中容易形成大量的氣泡，而影響衛生香的復燃。 （3）為何要選動物的肝臟組織來做實驗，其他動植物的組織的研磨液能替代嗎？因為肝臟組織中過氧化氫酶含量較豐富；其它動植物組織也含有少量的過氧化氫酶，所以能夠替代。 （4）相同質量的塊狀肝臟和肝臟研磨液，哪一個催化效果好？為什麼？研磨液效果好；因為它增加過氧化氫酶與過氧化氫的接觸面積。 （5）滴入肝臟研磨液和氯化鐵溶液時，可否共用下個吸管？為什麼？不可共用，防止過氧化氫酶與氯化鐵混合，而影響實驗效果。 實驗六 色素的提取和分離 1、原理：葉綠體中的色素能溶解在有機溶劑丙酮或無水乙醇——提取色素 各色素在層析液中的溶解度不同,隨層析液在濾紙上擴散速度不同——分離色素 2、步驟： （1）提取色素 研磨 （2）制備濾紙條 （3）畫濾液細線：均勻，直，細，重復若干次 （4）分離色素：不能讓濾液細線觸及層析液 （5）觀察和記錄: 結果濾紙條上從上到下依次為:橙黃色(胡蘿卜素)、黃色(葉黃素)、藍綠色(葉綠素a)、黃綠色(葉綠素b). 考點提示： （1）對葉片的要求？為何要去掉葉柄和粗的時脈？綠色、最好是深綠色。因為葉柄和葉脈中所含色素很少。 （2）二氧化硅的作用？不加二氧化硅對實驗有何影響？ 為了使研磨充分。不加二氧化硅，會使濾液和色素帶的顏色變淺。 （3）丙酮的作用？它可用什麼來替代？用水能替代嗎？ 溶解色素。它可用酒精等有機溶劑來代替，但不能用水來代替，因為色素不溶於水。 （4）碳酸鈣的作用？不加碳酸鈣對實驗有何影響？ 保護色素，防止在研磨時葉綠體中的色素受到破壞。不加碳酸鈣，濾液會變成黃綠色或褐色。 （5）研磨為何要迅速？要充分？過濾時為何用布不用濾紙？ 研磨迅速，是為了防止丙酮大量揮發；只有充分研磨，才能使大量色素溶解到丙酮中來。色素不能通過濾紙，但能通過尼龍布。 （6）濾紙條為何要剪去兩角？ 防止兩側層析液擴散過快。 （7）為何不能用鋼筆或圓珠筆畫線？ 因為鋼筆水或圓珠筆油中含有其它色素，會影響色素的分離結果。 （8） 濾液細線為何要直？為何要重畫幾次？ 防止色素帶的重疊；增加色素量，使色素帶的顏色更深一些。 （9） 濾液細線為何不能觸到層析液？ 防止色素溶解到層析液中。 （10）濾紙條上色素為何會分離？ 由於不同的色素在層析液中的溶解度不同，因而它們隨層析液在濾紙條上的擴散速度就不同。 （11）色素帶最寬的是什麼色素？它在層析液中的溶解度比什麼色素大一些？ 最寬的色素帶是葉綠素a，它的溶解度比葉綠素b大一些。 （12）濾紙條上相互間距最大的是哪兩種色素？ 胡蘿卜素和葉黃素。 （13)色素帶最窄的是第幾條色素帶？為何？ 第一條色素帶，因為胡蘿卜素在葉綠體的四種色素中含量最少。 實驗七 觀察質壁分離和復原 1、條件：細胞內外溶液濃度差，活細胞，大液泡 2、材料：紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞（具紫色大液泡），質量濃度0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。 3、步驟：製作洋蔥鱗片葉外表皮細胞臨時裝片→觀察→蓋玻片一側滴蔗糖溶液,另一側用吸水紙吸引→觀察(液泡由大到小,顏色由淺變深,原生質層與細胞壁分離)→蓋玻片一側滴清水, 另一側用吸水紙吸引→觀察(質壁分離復原) 4、結論: 細胞外溶液濃度 ＞ 細胞內溶液濃度，細胞失水 質壁分離 細胞外溶液濃度 ＜ 細胞內溶液濃度，細胞吸水 質壁分離復原 知識概要：製片 觀察 加液 觀察 加水 觀察 考點提示： （1）洋蔥為何要選紫色的？若紫色過淡怎麼辦？ 紫色的洋蔥有紫色的大液泡，便於觀察液泡的大小變化；讓陽光照射。 （2）洋蔥表皮應撕還是削？為何？ 表皮應撕不能削，因為削的表皮往往太厚。 （3）植物細胞為何會出現質壁分離？ 動物細胞會嗎？ 當細胞失去水分時，其原生質層的伸縮性大於細胞壁的伸縮性；動物細胞不會發生質壁分離，因為動物細胞沒有細胞壁。 （4）質壁分離時，液泡大小和顏色的變化？復原時呢？ 細胞發生質壁分離時，液泡變小，紫色加深；當細胞質壁分離復原時，液泡變大，紫色變淺。 （5）若發生質壁分離後的細胞，不能發生質壁分離復原，其原因是什麼？ 細胞已經死亡（可能是外界溶液濃度過大，細胞失水過多或質壁分離時間過長） （6）高倍鏡使用前，裝片如何移動？ 若要把視野中上方的物像移到視野的正中心，則要將裝片繼續向上移動。若要把視野中左方的物像移到視野的正中心，則要將裝片繼續向左方移動，因為顯微鏡視野 中看到的是倒像。 （7）換高倍物鏡後，怎樣使物像清晰？視野明暗度會怎樣變化？如何調亮？換高倍物鏡後，應調節細准焦螺旋使物像變得清晰；視野會變暗，可調大光圈或改用反光鏡的凹面鏡來使視野變亮。 （8）所用目鏡、物鏡的長度與放大倍數的關系？ 目鏡越長，放大倍數越小；物鏡越長，放大倍數越大。 （9）物像清晰後，物鏡與載玻片之間的距離和放大倍數的關系？ 物鏡與載玻片之間的距離越小，放大倍數越大。 （10)總放大倍數的計算方法？放大倍數具體指面積的放大倍數還是長度的放大倍數？ 總放大倍數等於目鏡放大倍數與物鏡放大倍數的乘積；放大倍數是指細小物體長度或寬度的放大倍數。 （11）放大倍數與視野中細胞大小、多少、視野明暗的關系？ 放大倍數越大，視野中細胞越大、數目越少、視野越暗。 （12） 更換目鏡，若異物消失，則異物在目鏡上；更換物鏡，若異物消失，則異物在物鏡上、移動載玻片，若異物移動，則異物在載玻片上。 （13）怎樣利用質壁分離現象來測定植物細胞液的濃度？ ①配製一系列濃度從小到大的蔗糖溶液 ②分別用以上不同濃度的溶液製成某植物細胞的臨時裝片 ③用顯微鏡觀察某植物細胞是否發生質壁分離。某植物細胞液的濃度就介於不能引起質壁分離的濃度和能引起質壁分離的濃度之間。 實驗八 DNA的粗提取與鑒定 考點提示： （1)雞血能用豬血代替嗎？為什麼？ 不能，因為哺乳動物的紅細胞中沒有細胞核，不能提取DNA。 （2）雞血中為何要加檸檬酸鈉？為何要棄去雞血細胞的上清液？ 防止血液凝固；因為上清液是血漿，不含細胞和DNA。 （3）脹破細胞的方法？能用生理鹽水嗎？ 向血細胞中加入蒸餾水，使細胞大量吸水而脹破；不能用生理鹽水，因為血細胞在蒸餾水中不能吸收水分。 （4）該實驗中最好應用玻璃燒杯還是塑料燒杯？為什麼？ 最好用塑料燒杯，因為玻璃燒杯容易吸附DNA。 （5）前後三次過濾時，所用紗布的層數分別是多少？為什麼？ 第一次用一層紗布，有利於核物質透過紗布進入濾液；第二次用多層紗布，能防止DNA絲狀物透過紗布進入濾液；第三次用兩層紗布，既有利於DNA透過紗布，又能防止其它雜質透過紗布。 （6）若實驗中所得黏稠物太少，其原因是什麼？ 第一次加蒸餾水過少，細胞未充分脹破；第二次加蒸餾水過多或過少；第一次過濾用了多層紗布；第二次過濾用了一層紗布；使用了玻璃燒杯。 （7）兩次加入蒸餾水的目的分別是什麼？ 第一次是為了使血細胞吸水脹破；第二次是為了降低氯化鈉的濃度，有利於DNA有析出。 （8）實驗中攪拌溶液時，為何總要沿一個方向攪拌？ 防止DNA分子受到損傷。 （9）兩次析出DNA的方法分別是什麼？原理分別是什麼？ 第一次是加蒸餾水，降低氯化鈉的濃度，促使DNA析出；第二次是加入冷酒精，因為DNA不溶於酒精溶液。 （10)三次溶解DNA的液體分別是什麼？原理分別是什麼？ 第一次、第二次都是用濃度為2mol/L的氯化鈉溶液，第三次用的是0。015mol/L的氯化鈉溶液。其原理是DNA在氯化鈉中的溶解度，是隨著氯化鈉的濃度的變化而改變的。當氯化鈉的物質的量濃度為0。14mol/L時，DNA的溶解度最低。2mol/L的氯化鈉溶液和0。015mol/L的氯化鈉溶液對DNA的溶解度都比較高。 （11)鑒定DNA時為何要用兩支試管？其現象分別是什麼？ 其中不加DNA的試管起對照作用。該試管溶液不變色，另一支加有DNA的試管溶液變藍色。 實驗九 探究酵母菌的呼吸方式 1、原理: 酵母菌在有氧條件下進行有氧呼吸,產生二氧化碳和水： C6H12O6 ＋ 6O2 ＋ 6H2O 6CO2 ＋ 12H2O ＋ 能量 在無氧條件下進行無氧呼吸,產生酒精和少量二氧化碳： C6H12O6 2C2H5OH ＋ 2CO2 ＋ 少量能量 2、裝置：（見課本） 3、檢測：（1）檢測CO2的產生：使澄清石灰水變渾濁，或使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃。 （2）檢測酒精的產生：橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與酒精發生反應，變成灰綠色。 實驗十 觀察細胞的減數分裂 1、目的要求：通過觀察蝗蟲精母細胞減數分裂固定裝片，識別減數分裂不同階段的染色體的形態、位置和數目，加深對減數分裂過程的理解。 2、材料用具：蝗蟲精母細胞減數分裂固定裝片，顯微鏡。 3、方法步驟： （1）在低倍鏡下觀察蝗蟲精母細胞減數分裂固定裝片，識別初級精母細胞、次級精母細胞和精細胞。 （2）先在低倍鏡下依次找到減數第一次分裂中期、後期和減數第二次分裂中期、後期的細胞，再在高倍鏡下仔細觀察染色體的形態、位置和數目。 4、討論：（1）如何判斷視野中的一個細胞是處於減數第一次分裂還是減數第二次分裂？ （2）減數第一次分裂與減數第二次分裂相比，中期細胞中的染色體的不同點是什麼？末期呢？ 實驗十一 低溫誘導染色體加倍 1、原理：用低溫處理植物分生組織細胞，能夠抑制紡錘體的形成，以致影響染色體被拉向兩極，細胞也不能分裂成兩個子細胞，於是，植物細胞染色體數目發生變化。 2、方法步驟： （1）洋蔥長出約1cm左右的不定根時，放入冰箱的低溫室內（4℃），誘導培養36h。 （2）剪取誘導處理的根尖約0.5~1cm，放入卡諾氏液中浸泡0.5~1 h，以固定細胞的形態，然後用體積分數為95%的酒精沖洗2次。 （3）製作裝片：解離→漂洗→染色→製片 （4）觀察，比較:視野中既有正常的二倍體細胞,也有染色體數目發生改變的細胞. 3、討論：秋水仙素與低溫都能誘導染色體數目加倍，這兩種方法在原理上有什麼相似之處？ 實驗十二 調查常見的人類遺傳病 1、 要求：調查的群體應足夠大；選取群體中發病率較高的單基因遺傳病。如紅綠色盲、白化病、高度近視(600度以上)等. 2、 方法: 分組調查,匯總數據,統一計算. 3、計算公式：某種遺傳病的發病率= *100% 4、討論: 所調查的遺傳病的遺傳方式, 發病率是否與有關資料相符, 分析原因. 實驗十三 探究植物生長調節劑對扦插枝條生根的作用 1、常用的生長素類似物:NAA(萘乙酸), 2,4-D, IPA(苯乙酸). IBA(吲哚丁酸)等 2、方法： ①浸泡法：把插條的基部浸泡在配置好的溶液中，深約3cm，處理幾小時或一天。處理完畢就可以扦插了。這種處理方法要求溶液的濃度較低，並且最好是在遮蔭和空氣濕度較高的地方進行處理。 ②沾蘸法：把插條的基部在濃度較高的葯液中蘸一下（約5s），深約1.5cm即可。 3、預實驗：先設計一組濃度梯度較大的實驗進行探索,在此基礎上設計細致的實驗. 4、實驗設計的幾項原則: ①單一變數原則(只有溶液的濃度不同)；②等量原則(控制無關變數,即除溶液的濃度不同外,其他條件都相同)；③重復原則(每一濃度處理3~5段枝條) ；④對照原則（相互對照、空白對照）；⑤科學性原則 實驗十四 探究培養液中酵母菌數量的動態變化 1、培養酵母菌（溫度、氧氣、培養液）：可用液體培養基培養 2、計數：血球計數板(2mm×2mm方格,培養液厚0.1mm) 3、推導計算 4、討論：根據7天所統計的酵母菌種群數量畫出酵母菌種群數量的增長曲線；推測影響影響酵母菌種群數量變化的因素。 實驗十五 土壤中動物類群豐富度的研究 1、豐富度的統計方法通常有兩種：記名計演算法和目測估計法 記名計演算法：指在一定面積的樣地中，直接數出各種群的個體數目，這一般用於個體較大，種群數量有限的群落。 目測估計法：按預先確定的多度等級來估計單位面積上個體數量的多少。等級的劃分和表示方法有：「非常多、多、較多、較少、少、很少」等等。 2、設計數據收集和統計表，分析所搜集的數據。 實驗十六 種群密度的取樣調查 考點提示： （1）什麼是種群密度的取樣調查法？ 在被調查種群的生存環境內，隨機選取若干個樣方，以所有樣方種群密度的平均值作為該種群的種群密度。 （2）為了便於調查工作的進行，在選擇調查對象時，一般應選單子葉植物，還是雙子葉植物？為什麼？ 一般應選雙子葉植物，因為雙子葉植物的數量便於統計。 （3）在樣方中統計植物數目時，若有植物正好長在邊線上，應如何統計？ 只計算該樣方相鄰的兩條邊上的植物的數目。 （4）在某地域中，第一次捕獲某種動物M只，標志後放回原處。第二次捕獲N只，其中含標志個體Y只，求該地域中該種動物的總數。 MN/Y （5）應用上述標志回捕法的條件有哪些？①標志個體在整個調查種群中均勻分布，標志個體和未標志個體都有同樣被捕的機會。②調查期中，沒有遷入或遷出。③沒有新的出生或死亡。 實驗十七 探究水族箱（或魚缸）中群落的演替 要求：（1）水族箱必須是密封的，且是透明的，放置於室內通風、光線良好的地方，但要避免陽光直接照射。 （2）組成成分：非生物成分、生產者、消費者和分解者 （3）各生物成分的數量不宜過多，以免破壞食物鏈 設計實驗步驟常用「四步法」。 第一步：共性處理實驗材料，均等分組並編號。選擇實驗材料時要注意應用一些表示等量的描述性語言，如：「生長一致的」，「日齡相同的，體重一致的」等等。分成多少組要視題目中所給的信息而定，（一般情況分兩組）。編號最好用A、B、C或甲、乙、丙，而不用1、2、3 避免與實驗步驟相混淆。 第二步：遵循單因子變數原則，對照處理各組材料。方法為一組為對照組（往往為處於正常生理狀態的），其餘為實驗組，對照組與實驗組只能有一個實驗條件不同（單因子變數），其他條件要注意強調出相同來，這是重要的得分點或失分點。至於變數是什麼要根據具體題目來確定。 第三步：相同條件培養（飼養、保溫）相同時間。 第四步：觀察記錄實驗結果。 實驗結果的預測（預期）；首先要根據題目判斷該題是驗證性實驗還是探究性實驗，如果是驗證性實驗，則結果只有一個，即題目中要證明的內容。如果是探究性實驗，則結果一般有三種：①實驗組等於對照組，說明研究的條件對實驗無影響。②實驗組大於對照組,說明研究的條件對實驗有影響,且影響是正相關。③實驗組小於對照組,說明研究的條件對實驗有影響,且影響是負相關。 基本全了
❻ 高中生物實驗用了哪些方法，如假說演繹法
1．實驗方法
實驗方法是整個
的精髓，是做好
的關鍵所在。現將與中學實驗有關的一些最常見的經典的實驗方法匯總如下：
(1)化學物質的檢測方法：
①澱粉——碘液
②
——
、班氏試劑
③CO2——Ca(OH)2溶液或
④乳酸——
⑤O2——余燼復燃
⑥無O2——火焰熄滅
⑦蛋白質——
⑧染色體——
、
溶液
⑨DNA——
⑩脂肪——蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液
(2)實驗結果的顯示方法：
①
——O2釋放量或CO2吸收量或澱粉產生量
②
——O2吸收量或CO2釋放量或澱粉減少量
③原子途徑——放射性
④
濃度大小——
⑤細胞是否死亡——
⑥甲狀腺激素作用——動物
，發育速度等
⑦生長激素作用——生長速度(體重變化，身高變化)
⑧胰島素作用——動物活動狀態
⑨菌量——
或
溶液褪色程度
⑩大腸桿菌——伊紅—
培養基
(3)實驗條件的控制方法：
①增加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物
②減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開水
③除去容器中CO2——NaOH溶液
④除去葉片中原有澱粉——置於黑暗環境
⑤除去葉片中葉綠素——酒精隔水加熱
⑥除去光合作用對呼吸作用的干擾——給植株遮光
⑦如何得到
——棱鏡
或彩色薄膜濾光
⑧血液抗凝——加入
⑨線粒體提取——細胞
離心
⑩骨的脫鈣——鹽酸溶液
⑾滅菌方法——
的關鍵在於滅菌，對不同材料,滅菌方法不同：培養基用高壓蒸氣滅菌；
用火焰灼燒滅菌；雙手用肥皂洗凈，擦乾後用75％酒精消毒；整個接種過程都在實驗室無菌區進行。
(4)實驗中控制溫度的方法：
①
鑒定：水浴煮沸加熱
②
：水浴保溫
③用酒精溶解葉中的葉綠素：酒精要隔水加熱
④DNA的鑒定：水浴煮沸加熱
⑤細胞和
以及
：恆溫培養
2．
、班氏試劑與
這三種物質均可用來檢驗含醛基的有機物的存在，在醫學上用來檢驗糖尿病，其原理均是利用了Cu2+的氧化性把醛基氧化，但成分略有不同：
：即硫酸銅、氫氧化鈉和
組成的藍色混合溶液。分為斐林試劑A和斐林試劑B，A為CuSO4溶液，B為氫氧化鈉和
的混合溶液，使用時將A、B等體積混合即成斐林試劑。
班氏試劑：即硫酸銅、碳酸鈉和
組成的混合液，又叫本尼迪克特(Benedict)試劑，它與醛反應的結果是與斐林試劑一致的，只是比斐林試劑更穩定，所以在臨床化驗中更常使用。
：又叫硫酸銅試紙，呈白色,帶藍色斑點，用於糖尿病患者的
測試。每片含硫酸銅20毫克,
300毫克,碳酸鈉80毫克，氫氧化鈉235毫克。
法快速、方便，試紙的正確使用方法為：將試紙條放在尿液中浸濕，一秒鍾後取出，在一分鍾內觀察試紙的顏色，並與
板對照，根據不同的顏色來確定
陽性的程度。
3．斐林試劑和
的比較
相同點：①都由NaOH溶液和CuSO4溶液構成；
②斐林試劑甲液和
A都為0．1g/mLNaOH溶液。
不同點：①CuSO4溶液濃度不一樣：斐林試劑乙液為0．05g/mLCuSO4溶液，
試劑B為0．01g/mLCuSO4溶液。
②配製比例不一樣。
③使用方法不一樣：斐林試劑是甲、乙液一起混合後再使用，
試劑則是先向待鑒定材料加入A試劑搖勻後，再加入試劑B。
④鑒定的對象不一樣：斐林試劑鑒定的是
，
試劑鑒定的是蛋白質。
⑤反應本質及
不一樣。
4．蘇丹Ⅲ染液與蘇丹Ⅳ染液的比較
都是用來鑒定脂肪。蘇丹Ⅳ染液更易溶於脂肪，所以染色更深，同時要求染色時間更短。
生物學中常用的試劑：
1、斐林試劑： 成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.05g/ml CuSO4（乙液）。用法：將斐林試劑甲液和乙液等體積混合，再將混合後的斐林試劑倒入待測液，水浴加熱或直接加熱，如待測液中存在還原糖，則呈磚紅色。
2、班氏糖定性試劑：為藍色溶液。和葡萄糖混合後沸水浴會出現磚紅色沉澱。用於
的測定。
3、雙縮脲試劑：成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.01g/ml CuSO4（乙液）。用法：向待測液中先加入2ml甲液，搖勻，再向其中加入3~4滴乙液，搖勻。如待測中存在蛋白質，則呈現紫色。
4、蘇丹Ⅲ：用法：取蘇丹Ⅲ顆粒溶於95%的酒精中，搖勻。用於檢測脂肪。可將脂肪染成橘黃色（被蘇丹Ⅳ染成紅色）。
5、
：用於鑒定DNA。DNA遇
（沸水浴）會被染成藍色。
6、
：用於鑒定DNA。DNA遇
（常溫）會被染成藍綠色。（
使DNA呈現綠色，
使RNA呈現紅色。）
7、50%的酒精溶液：在脂肪鑒定中，用蘇丹Ⅲ染液染色，再用50%的酒精溶液洗去浮色。
8、75%的酒精溶液：用於殺菌消毒，75%的酒精能滲入細胞內，使蛋白質凝固變性。低於這個濃度，酒精的滲透脫水作用減弱，殺菌力不強；而高於這個濃度，則會使細菌表面蛋白質迅速脫水，凝固成膜，妨礙酒精透入，削弱殺菌能力。75％的酒精溶液常用於手術前、打針、換葯、針灸前皮膚脫碘消毒以及機械消毒等。
9、95%的酒精溶液：冷卻的
為95%的酒精可用於凝集DNA。
10、15%的鹽酸：和95%的酒精溶液等體積混合可用於
根尖。
11、
：(濃度為0.01g/ml或0.02g/ml)用於染色體著色，可將染色體染成紫色，通常染色3~5分鍾。（也可以用
染色）
12、20%的肝臟、3%的過
、3.5%的氯化鐵：用於比較
和Fe3+的催化效率。（新鮮的肝臟中含有
）
13、3%的
溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鮮澱粉酶溶液：用於探索澱粉酶對澱粉和蔗糖的作用實驗。
14、碘液：用於鑒定澱粉的存在。遇澱粉變藍。
15、丙酮：用於提取葉綠體中的色素。
16、
液：（成分：20份
、2份丙酮、和1份苯混合而成，也可用
）可用於色素的
，即將色素在濾紙上分離開。
17、二
：在色素的提取的分離實驗中研磨綠色葉片時加入，可使研磨充分。
18、碳酸鈣：研磨綠色葉片時加入，可中和有機酸，防止在研磨時葉綠體中的色素受破壞。
19、0.3g/mL的蔗糖溶液：相當於30%的蔗糖溶液，比植物
的濃度大，可用於
實驗。
20、0.1g/mL的
溶液：與
混合，防凝血。
21、
：①可用於溶解DNA。當氯化鈉濃度為2mol/L、 0.015mol/L時DNA的溶解度最高，在氯化鈉濃度為0.14 mol/L時，DNA溶解度最低。②濃度為0.9%時可作為生理鹽水。
❼ 生物學中 鑒定各種物質的試劑和方法
1.菲林試劑：還原糖。將菲林試劑的甲液和乙液等體積混合，再將混合後的菲林試劑導入待測夜，水浴加熱，磚紅色沉澱。
2.班氏糖定試劑：和葡萄糖混合後沸水浴加熱磚紅色沉澱。
3.雙鎖脲試劑：先加A液，搖勻再加B液，紫色絡合物。
4.蘇丹三染液：脂肪被染成橘紅色。
5.蘇丹四染液：脂肪被染成紅色。
6.二苯胺試劑：DNA與其沸水浴加熱出現藍色反應。
7.碘液：澱粉。藍色。
❽ 生物常用檢測試劑有哪些
1、斐林試劑
作用：鑒定還原性糖：C6H12O6、果糖、麥芽糖、乳糖等.
還原性糖與斐林試劑發生作用,生成磚紅色沉澱.如用於鑒定組織液中有否還原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶專一性探索等.
2、班氏尿糖定性試劑
使用方法同斐林試劑,所不同的是班氏試劑可長期使用.
3、雙縮脲試劑
作用：鑒定蛋白質,蛋白質與雙縮脲試劑發生作用,可產生紫色反應.也可用於鑒定多肽.
4、蘇丹Ⅲ
作用：鑒定脂肪,脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色（或被蘇丹Ⅳ染成紅色）.
5、質量分數為15%的鹽酸和體積分數為95%的酒精溶液的混合液
作用：用於洋蔥根尖的解離,即使組織中的細胞相互分離開來.能殺死細胞固定.
6、質量濃度為0.01g/mL的或0.02g/mL龍膽紫溶液（或醋酸洋紅溶液）
作用：使細胞核內的染色體著色,便於觀察.
7、質量濃度為0.3g/ml的蔗糖溶液
作用：觀察成熟植物細胞質分離時用.經此處理細胞仍具活性.
8、質量濃度為0.1mg/ml的亞甲基藍溶液
作用：（1）用於觀察根對礦質元素離子的交換吸附觀察；
（2）用於檢測水中細菌情況,根據亞甲基藍褪色情況,判斷水質被細菌污染情況.
是活體染色劑.
9、丙酮
是有機溶劑,在葉綠體中色素提取時,用於溶解葉綠體中的色素.可用酒精替代,不過提取色素時將綠葉放入酒精中隔水加熱
10、層析液
是一種脂溶性很強的有機溶劑,葉綠體中的色素在層析液中的溶解度不同：溶解度高的隨層析液在濾紙上擴散很快；溶解度低的隨層析液在濾紙上擴散得慢.
代用品：93號汽油、四氯化碳
11、SiO2、CaCO3
作用：加入少許SiO2是為了研磨得充分；加入少許CaCO3是為了防止在研磨時葉綠體中的色素受到破壞.
12、碘液
作用：用來測定澱粉,澱粉遇碘後,形成紫色的復合物.
13、二苯胺
作用：DNA遇二苯胺（沸水浴）會染成藍色.
14、NaOH
作用：用於吸收CO2（驗證光合作用需要CO2）或改變溶液的pH,
15、Ca(OH)2
作用：鑒定CO2（驗證呼吸作用產生CO2）.
16、NaHCO3
作用：提供CO2等.
❾ 檢測生物體內糖類,脂肪,蛋白質 所有實驗步驟和注意事項,
一．實驗目的：嘗試用化學試劑檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質
二．實驗原理：某些化學試劑能使生物組織中的有關有機化合物,產生特定的顏色反應.
1．可溶性還原糖（如葡萄糖、果糖、麥芽糖）與斐林試劑發生作用,可生成磚紅色的Cu 2O沉澱.即Cu ( OH ) 2被還原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸.
2．脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色（或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色）.
3．蛋白質與雙縮脲試劑發生作用,產生紫色反應.（蛋白質分子中含有很多肽鍵,在鹼性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用,產生紫色反應.）
4.澱粉遇碘變藍色.
三．實驗材料
1．做可溶性還原性糖鑒定實驗,應選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果、梨.（因為組織的顏色較淺,易於觀察.）
2．做脂肪的鑒定實驗.應選富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實驗前一般要浸泡3-4小時（也可用蓖麻種子）.
3．做蛋白質的鑒定實驗,可用富含蛋白質的黃豆或雞蛋清.
四、實驗試劑
斐林試劑（包括甲液：質量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：質量濃度為0.05g/ mL CuSO4溶液）、蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液、雙縮脲試劑（包括A液：質量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和B液：質量濃度為0.01g/ mL CuSO4溶液）、體積分數為50%的酒精溶液,碘液、蒸餾水.
五、方法步驟：
（一） 可溶性糖的鑒定
操 作 方 法
注 意 問 題
解 釋
1.制備組織樣液.
（≠組織液、≠細胞液）
蘋果或梨組織液必須臨時制備
因蘋果多酚氧化酶含量高,組織液很易被氧化成褐色,
將產生的顏色掩蓋.
2.注入2mL組織樣液.
3.注入1mL新制的斐林試劑,振盪.
（現配現用、先混後加）
應將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配製、儲存,使用前才將甲、
乙液等量混勻成斐林試劑；切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進行檢測.
斐林試劑很不穩定,甲、乙液混合保存時,生成的Cu ( OH ) 2在70-900C下分解成黑色CuO和水；甲、乙液分別加入時可能會與組織樣液發生反應,無
Cu ( OH ) 2生成.
4.水浴加熱：試管放在盛有50-650C溫水的大燒杯中,加熱約2分鍾,觀察到溶液顏色：淺藍色 → 棕色 → 磚紅色（沉澱）
最好用試管夾夾住試管上部,使試管底部不觸及燒杯底部,試管口不朝向實驗者.
也可用酒精燈對試管直接加熱.
防止試管內的溶液沖出試管,造成燙傷；
縮短實驗時間.
（二）脂肪的鑒定
操 作 方 法
注 意 問 題
解 釋
取材、切片、製片：花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片,將薄片放在載玻片的水滴中,用吸水紙吸去裝片中的水.
干種子要浸泡3-4小時,新花生的浸泡時間可縮短.
浸泡時間短,不易切片,浸泡時間過長,組織較軟,切下的薄片不易成形.切片要盡可能薄些,便於觀察.
染色：在子葉薄片上滴2-3滴蘇丹Ⅲ（染色3分鍾）或蘇丹Ⅳ染液（染色1分鍾）.
染色時間不宜過長.
漂洗：用吸水紙吸去薄片周圍染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精.
酒精用於洗去浮色,不洗去浮色,會影響對橘黃色脂肪滴的觀察.同時,酒精是脂溶性溶劑,可將花生細胞中的脂肪顆粒溶解成油滴.
用吸水紙吸去薄片周圍酒精,滴上1-2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片.
滴上清水可防止蓋蓋玻片時產生氣泡.
鏡檢：先低後高（高倍鏡用法：移物換器時針反）,低倍鏡下找到花生子葉薄片的最薄處,可看到細胞中有染成橘黃色或紅色圓形小顆粒.
裝片不宜久放.
時間一長,油滴會溶解在乙醇中.
三、蛋白質的鑒定
操 作 方 法
注 意 問 題
解 釋
制備組織樣液.
（浸泡、去皮研磨、過濾.）
黃豆浸泡1至2天,容易研磨成漿,
也可購新鮮豆漿以節約實驗時間.
加樣液約2ml於試管中,
加入雙縮脲試劑A,搖勻；再加入雙縮脲試劑B液3-4滴,搖勻,溶液變紫色.
A液和B液也要分開配製,儲存.鑒定時先加A液後加B液.
CuSO4溶液不能多加.
先加NaOH溶液,為Cu2+與蛋白質反應提
供一個鹼性的環境.A、B液混裝或同時加入,會導致Cu2+變成Cu ( OH ) 2沉澱,而失效.
否則CuSO4藍色會遮蓋反應的真實顏色.
可用蛋清代替豆漿.
蛋清要先稀釋.
如果稀釋不夠,在實驗中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應後會粘固在試管內
壁上,使反應不容易徹底,並且試管也不易洗干凈.
附：澱粉的檢測和觀察用試管取2ml待測組織樣液,向試管內滴加2滴碘液,觀察顏色變化.
碘液不要滴太多
以免影響顏色觀察
❿ 細胞內DNA、RNA、蛋白質常用的分子生物學檢測方法shi
細胞內DNA用甲基綠檢測，而rna用吡羅紅檢測，蛋白質則用雙縮脲試劑檢測。