手消毒效果檢測采樣方法

❶ 採集樣本後如何做手部消毒

採集樣本手部消毒的方法為：將 2-3毫升的溶液噴在手上無須用水沖洗，即可達到消毒凈手的目的。

將消毒噴霧或消毒凝膠取於掌心，掌心相對手指合攏相互揉搓。一手握住另一手的大拇指旋轉揉搓，將一手五指指尖並攏在另一手的掌心處揉搓。如手腕有露出的，需要對手腕也進行揉搓消毒。

非常時期，病毒通過飛沫和接觸傳播，那麼更需謹慎和認真對待手部的清潔。即使穿著睡衣「自閉」在家，也請在每頓餐前、接觸孩子老人和其用具前都認認真真進行手部消毒或清洗。可以因為囤不到口罩不出門，但不能因為不出門就不洗手。

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手部消毒的介紹如下：

如使用含酒精的消毒製品，尤其需要注意防火安全，不可進行空氣消毒、大面積噴灑，也不能帶上公共交通工具，以防火災。噴霧型不含酒精的消毒劑，如熠潔康消毒劑噴霧型則還可以對家中、辦公場所、公共場所等地面。

病毒學國家重點實驗室聯合研製的熠潔康消毒劑，可殺滅病毒、細菌和芽孢，且可以直接接觸皮膚發揮作用。這些含消毒劑的免洗洗手液都可以讓致病菌快速地喪失活性，無法起到致病作用。

❷ 消毒測試方法

目前檢測多仍採用一些條件致病菌為間接指標。腸道傳染病以大腸桿菌為指標，呼吸道傳染病以溶血性鏈球菌為指標。肝炎病毒近年表面抗原，DNA聚合酶以及電鏡觀察，甲肝病毒分離等為指標。醫|學教育網搜集整理如消毒前後均未檢出大腸桿菌或溶血性鏈球菌，則可以消毒後自然菌總數率低的百分率評價，消毒後自然菌總數下降80%以上為效果良好，降低70%為較好。減少60%以上為一般，減少60%以下為不合格。
具體檢查方法：
1.物品表面檢查
在消毒物品相鄰部位劃出2個10cm2范圍，消毒前後別以無菌棉簽采樣，接種後培養24～48小時觀察結果。
2.排泄物檢查
消毒前後各取0.2ml排泄物的稀釋液接種肉湯管，醫學教|育網搜集整理37℃培養24小時後再取樣轉種相應的培養基，24～48小時後觀察結果。
3.空氣消毒效果檢查
一般用自然沉降法。消毒前後在消毒的空間不同平面和位置。放置4～5個平面，暴露5～30分鍾後蓋好，培育24～48小時觀察結果。

❸ 如何進行手的微生物監測采樣

用無菌棉簽在手上采樣,再塗抹到滅菌好的固體培養皿上,做好記號,生物試驗書上有呀,以前還做過這樣的試驗,具體步驟要看書了.

❹ 外科手消毒監測的細菌菌落總數是多少

外科手消毒：監測的細菌菌落總數應≤5cfu／cm2。衛生手消毒：監測的細菌菌落總數應≤10cfu／cm2。

手衛生采樣方法、采樣時間：在接觸患者、進行診療活動前采樣。采樣方法：被檢者五指並攏，用浸有含相應中和劑的無菌洗脫液浸濕的棉拭子在雙手指曲面從指根到指端往返塗擦2次，一隻手塗擦面積約30cm2，塗擦過程中同時轉動棉拭子；

將棉拭子接觸操作者的部分剪去（建議採用采樣拭子與帽蓋接合在一起的運送培養基管），投入10ml含相應中和劑的無菌洗脫液試管內，及時送檢。

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3．1手衛生handhygiene

為醫務人員洗手、衛生手消毒和外科手消毒的總稱。

3．2洗手handwashing

醫務人員用肥皂（皂液）和流動水洗手，去除手部皮膚污垢、碎屑和部分致病菌的過程。

3．3衛生手消毒antiseptichandrubbing

醫務人員用速干手消毒劑揉搓雙手，以減少手部暫居菌的過程。

3．4外科手消毒surgicalhandantisepsis

外科手術前醫務人員用肥皂（皂液）和流動水洗手，再用手消毒劑清除或者殺滅手部暫居菌和減少常居菌的過程。使用的手消毒劑可具有持續抗菌活性。

3．5常居菌residentskinflora

能從大部分人體皮膚上分離出來的微生物，是皮膚上持久的回有的寄居菌，不易被機械的摩擦清除。如凝固酶陰性葡萄球菌、棒狀桿菌類、丙酸菌屬、不動桿菌屬等。一般情況下不致病。

❺ 消毒效果如何檢測

實施有效的消毒措施以杜絕和降低環境中的病原體、切斷傳播途徑，是控制目前冠狀病毒轉播的重要措施之一。為鞏固防控成果，規范和強化各行各業做好消毒質量控制和消毒效果評價，保證消毒效果，國家衛健委發布《新冠肺炎疫情期間現場消毒評價標准》等3項推薦性衛生行業標准。

消毒效果檢測標准

GB15982-2012《醫院消毒衛生標准》

WS310.3-2009《醫院消毒供應中心第3部分:清洗消毒及滅菌效果監測標准》

GB15981-1995《消毒滅菌的方法及評價標准》

GB15979-2002《一次性使用衛生用品衛生標准》

消毒效果評價單位

中科檢測

開展現場消毒效果評價，實驗室檢測能力已涵蓋市場上所有消毒產品所涉及的國家標准和行業標准，能通過國際通行標准，為市場緊缺的低溫消毒劑和冷庫專用消毒設備提供測試和效果鑒定，具備滅活技術先進、質量數據可靠、檢測能力強等特點，是國內消毒領域綜合檢測實力強的檢測機構之一。

消毒效果評價對象

• 消毒劑消毒效果評價：鄰苯二甲醛、戊二醛、過氧乙酸、二氧化氯、酚類、胍類、季銨鹽類、醇類、含溴、含碘消毒劑等；

• 消毒機消毒效果評價：臭氧、紫外、等離子空氣消毒機。

疫情肆虐，消毒是控制感染的重要環節，消毒的成功與否直接影響公眾或患者的安全，消毒效果檢測是檢驗消毒效果的重要措施。

消毒效果檢測

❻ 歸納概括細菌檢驗方法

10種常用的細菌檢測方法

一、[3H]脫氧胸苷攝入法測定細胞數：
1、用RPMI-1640培養液洗滌對數生長期（培養3天）的CTLL-2細胞兩次，每次250×g離心10分鍾，洗去培養液中殘存的IL-2。
2、用台盼藍（1% Trypan blue）染色法計數細胞並決定細胞的活力，用10%小牛血清的RPMI-1640培養液懸浮細胞至1×105/ml。
3、在96孔細胞培養板中每孔加0.1ml倍比稀釋的標准IL-2或待測樣品，每個稀釋度三個復孔，標准IL-2從40 IU/ml稀釋到0.019 IU/ml（8～10個稀釋度），陰性對照孔不加IL-2。
4、每孔加0.1ml細胞懸液，在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養18～24小時。每孔加10μl（0.5μCi或1.85×104Bq）[3H]脫氧胸苷，繼續培養4小時。
5、用多頭細胞收集器將細胞收集到玻璃纖維濾紙上，用3%醋酸水溶液濾紙3次，洗去游離的[3H]TdR。將濾紙置液體閃爍瓶中，加入5ml閃爍液。在液體閃爍儀上計數細胞攝入的同位素活性（每分鍾放射性計數，cpm），根據儀器效率換算成dpm（每分鍾衰變數）。
6、用dpm值對樣品稀釋倍數作圖。在圖上，標准IL-2的曲線與待測樣品的曲線應當呈平行的S型，說明是同樣的分子反應。比較同樣dpm處的不同稀釋倍數，決定待測樣品的相應濃度。
二、MTT檢測法：
1、取96孔細胞培養板，每孔中加0.1ml含2×104～10×104靶細胞的培養液（含10%小牛血清的RPMI-1640培養液），在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養2～3小時讓細胞帖壁（如果是懸浮細胞可直接進行下一步）
2、用RPMI-1640培養液2～10倍遞次稀釋細胞因子標准品，根據情況2～5倍遞次稀釋待檢樣品，每孔加0.1ml稀釋的標准品和待檢樣品，每個稀釋度3個重復孔。對照孔6個：3個陽性對照孔，每孔加0.1ml含大劑量細胞因子的RPMI-1640培養液，3個陰性對照孔，每孔加0.1ml RPMI-1640培養液。在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養24～48小時或預定的時間。
3、吸去培養液，用PBS洗滌一次（如為懸浮細胞，應在吸去上清液前離心培養板）。
4、每孔加0.1ml PBS和10μl MTT染液，在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養4～6小時。
5、每孔加0.1ml酸化異丙醇，也可用含10% SDS的10mmol/L HCl代替酸化異丙醇，在振盪器上振盪混勻，讓還原產物充分溶解。置酶聯檢測儀上測定光密度（OD）值，檢測波長570nm，參考波長630nm。以OD值對樣品稀釋度作圖，比較標准曲線和待測樣品曲線即可求得待測樣品中細胞因子的含量。
三、XTT檢測法：
用XTT代替MTT可省去溶解還原產物結晶的步驟，XTT可以被活細胞中的代謝酶還原成黃色水溶性的代謝產物（formazan）。代謝產物在OD450處有吸收峰。
四、MTS檢測法：
1、培養IL-2依賴細胞株CTLL-2細胞或HT-2細胞（檢測IL-2），或者IL-3依賴細胞株FDC-P1細胞或FL5.12細胞（檢測IL-3）到對數生長期。
2、取96孔細胞培養板，每孔加0.1ml含1×104～2×104上述細胞之一的DMEM培養液（加10%小牛血清）。
3、每孔加0.1ml系列稀釋的待測細胞因子（IL-2或IL-3）樣品或細胞因子標准品，在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養24小時。
4、每孔加20μl MTS/PMS混合液，繼續培養3～4小時顯色。
5、檢測前搖晃培養板10秒鍾，混勻顏色。在酶聯檢測儀上，波長570nm（或490nm，或570nm和690nm）處檢測各孔的光吸收值（OD）。用樣品稀釋度對OD值（OD570、OD490或OD570/OD690）繪制劑量-反應曲線，根據標准品曲線計算樣品中細胞因子的量。
五、NAG檢測法：
1、按MTT檢測法培養細胞和用不同稀釋度的細胞因子處理細胞。
2、吸去培養液，用PBS洗滌兩次（如為懸浮細胞，應在吸去上清液前先離心）。
3、每孔加60μl NAG染液，在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養4小時。
4、每孔加90μl終止液，混勻後置酶聯檢測儀上測定光密度（OD）值，檢測波長402nm。以OD值對樣品稀釋度作圖，比較標准曲線和待測樣品曲線即可求得待測樣品中細胞因子的含量。
六、AlamarBlueTM攝入法：
1、按MTT檢測法培養細胞和用不同稀釋度的細胞因子處理細胞。
2、在培養結束前24小時加入Alamar Blue染料，96孔細胞培養板每孔20μl。
3、在培養結束後，直接在酶聯檢測儀上測定光吸收值。氧化型Alamar Blue的最大光吸收在570nm，用OD570減去OD600即為活細胞還原的Alamar Blue染料，顏色深淺與活細胞數成正比。
七、鹼性磷酸酶檢測法（AKP法）：
1、按MTT法用細胞因子處理靶細胞適當時間，用PBS洗去死亡細胞，洗兩次。
2、向96孔細胞培養板各孔中加0.2ml新鮮配製的底物液（0.2mol/L 硼酸，1mmol/L MgCl2，1.2mmol/L甲傘基磷酸）。在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養3小時。
3、在熒光計數儀上測定熒光的量。根據測定已知不同數目細胞的熒光量作出標准曲線，根據標准曲線可得到各孔中的活細胞數。
八、三磷酸腺苷檢測法（ATP法）：
1、ATP反應液（Bio-Orbit）是粉末狀混合物，含有熒光素、熒光素酶、0.5mmol醋酸鎂、50mg BSA和0.1μmol無機焦磷酸。在4℃可以保存1個月。用前用10ml含2mmol/L EDTA的0.1mol/L pH7.75 Tris-醋酸緩沖液稀釋。稀釋液分裝後可在－20℃長期保存。
2、在已經完成促增殖或抑生長試驗後的96孔細胞培養板中（每孔含100μL細胞培養液），每孔加0.1ml ATP釋放因子，室溫中反應5分鍾。取另一塊96孔細胞培養板，從第一塊板的各孔中吸0.1ml細胞溶解物到第二塊板的相應各孔。
3、在低於25℃中，將第二塊板置自動多孔熒光檢測儀中。用自動加樣器，每孔加入20μl ATP反應液，立即檢測10秒鍾的熒光強度。溫度升高，檢測敏感性就下降。
4、用RLU（Y軸）對細胞因子標准品的稀釋度（X軸）作標准曲線，根據標准曲線確定待測樣品中細胞因子的含量。
九、染料染色法測定細胞數：
1）結晶紫檢測法：
1、在96孔細胞培養板各孔中加0.1ml含5×104～10×4 WEHI-164細胞的培養液（含10%小牛血清的RPMI-1640培養液），37℃ 5% CO2的二氧化碳培養箱中培養2～3小時，讓細胞帖壁。
2、用RPMI-1640培養液10倍遞次稀釋TNF標准品，根據需要3～5倍遞次稀釋待檢樣品，每孔加0.1ml稀釋的標准品或待檢樣品，每個稀釋度3個重復孔。對照孔6個，3個陽性對照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培養液，3個陰性對照孔各加100μl RPMI-1640培養液。繼續培養18～24小時。
3、甩去培養液，用PBS小心洗滌一次，每孔加0.1ml 10%甲醇溶液固定細胞30秒鍾。
4、吸去甲醇溶液，每孔加0.1ml結晶紫染液，室溫中放置20分鍾。
5、輕輕甩去染色液，用蒸餾水洗滌各孔，將培養板倒置於吸水紙上吸干水分。自然乾燥或37℃烘乾。此板可以在室溫中長期保存。
6、測定前，每孔加0.1ml 33%醋酸脫色，充分振盪後在570nm處測定光吸收度。用光吸收度（OD）值對樣品稀釋度作圖，比較標准品曲線和待檢樣品曲線即可得到待測樣品中的細胞因子活性
2）NBB檢測法：
1、在用細胞因子處理靶細胞以後傾去培養液，倒置培養板於吸水紙上吸干培養液。再用100μl磷酸緩沖鹽水小心洗去死細胞，用吸水紙吸干培養液。
2、每孔加100μl NBB染液，室溫中染色30分鍾。輕輕染液。用吸水紙吸干染液。</P< p>
3、每孔加100μl福爾馬林固定液固定15分鍾。用自來水輕輕洗去固定液，倒置培養板，用吸水紙吸干染液。
4、每孔加150μl 50mmol/L氫氧化鈉。輕輕振盪培養板直到染料全部溶解並均勻分布。在分光光度計上讀取各孔在620nm處的光密度（OD）值。計算TNF的活性。
3）美藍染色檢測法：
1、用細胞因子處理靶細胞，在含100μL細胞培養液的檢測孔中，每孔加0.02ml 25%戊二醛固定活細胞15分鍾，用自來水緩緩洗去死細胞和固定液。
2、每孔加0.1ml 0.05%美藍染液，染色20分鍾，用自來水緩緩沖凈染液，晾乾。
3、每孔加0.2ml 0.33mol/L鹽酸溶解美藍，振盪混勻。在665nm波長處測定光吸收度。計算TNF的活性。
4）中性紅染色檢測法：
1、用細胞因子處理靶細胞，在含100μL細胞培養液的檢測孔中，每孔加50μl 5%中性紅染液。繼續培養2小時。
2、小心倒去培養液。用200μl Hanks液洗滌細胞1次。小心倒去培養液，減少細胞丟失。
3、每孔加100μl脫色液，在搖床中輕輕搖晃溶解30分鍾。在550nm波長處測定OD值。
十、直接計數細胞：
1、如果靶細胞是帖壁細胞，在細胞因子作用適當時間後，用生理鹽水洗去死亡細胞，用0.25%胰蛋白酶液消化細胞。加適量生理鹽水吹打，使細胞分散成單個細胞。直接在血細胞計數板上計數細胞。
2、如果靶細胞是懸浮細胞，則需要用染色劑區分死細胞和活細胞然後再計數。通常用台盼藍染色細胞，活細胞可以排除進入細胞的台盼藍而不著染，死細胞著染呈深藍色。
3、計數血細胞計數板上4個大方格中的全部活細胞，按下式計算活細胞數：活細胞數（個/ml）＝計數的全部活細胞數×10 000×2×1/4。

❼ 醫療機構消毒效果監測時,如何對物表進行采樣

摘要 手衛生效果的監測方法 1．采樣時間在接觸患者、進行診療活動前采樣。 2．采樣方法被檢者五指並攏，用浸有含相應中和劑的無菌洗脫水液浸濕的棉拭子在雙手指曲面從指跟到指端往返塗擦2次，一隻手塗擦面積約30cm2，塗擦過程中同時轉動棉拭子；將棉試子放入裝有10ml 含相應中和劑的無菌洗脫液試管內，及時送檢。 細菌菌落數總數計算方法： 細菌菌落總數（cfu/cm2）=平板上菌落數×稀釋倍數/采樣面積（cm2）3．手消毒效果應達到如下相應要求： a）衛生手清毒，監測的細菌菌落總數應≤10cfu/㎝2 b）外科手消毒，監測的細菌菌落總數應≤5cfu/㎝ 2 空氣消毒效果的監測方法 1、采(全文還有577字)

❽ 內鏡消毒效果監測采樣方法有哪些

4.1消毒內鏡采樣
4.1.1采樣方法：
4.1.1.1監測采樣部位為內鏡的內腔面。
4.1.1.2 用無菌注射器抽取10ml含相應中和劑的緩沖液，從待檢內鏡活檢口注入，用15ml無菌試管從活檢出口收集。及時送檢。
4.1.2 菌落計數：將送檢液用漩渦器充分振盪，取0.5ml，加入2隻直徑90mm無菌平皿，每個平皿分別加入已經熔化的45℃-48℃營養瓊脂15ml-18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，於35℃培養48小時後計數。
4.1.3 計算：兩平皿平均菌落數×20
4.2滅菌內鏡及附件
4.2.1腹腔鏡、宮腔鏡、膀胱鏡、關節鏡、腦室鏡等。
4.2.2 內鏡附件：活檢鉗、細胞刷、切開刀、導絲、碎石器、網籃、造影導管、異物鉗等。
4.2.3采樣地點：生物安全櫃、手術室、無菌室等。
4.2.4采樣方法：用無菌棉拭子塗抹後，剪去手接觸部分，放入10ml采樣液的試管中。及時送檢，2小時內檢測
4.3致病菌檢測：將送檢液用漩渦器充分震盪，取0.2ml分別接種90mm血平皿、中國蘭血平皿和SS平皿，均勻塗布，35℃培養48小時，觀察有無病菌生長。
4.4增菌：SCDLP（金葡、銅綠假單胞）、 葡萄糖肉湯（乙型溶血性鏈球菌）、SF（亞硒酸鹽增菌液）、GN（志賀氏增菌液）、乳糖膽鹽發酵管。
4.5致病菌：金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌。
5. 結果判定
5.1消毒後的內鏡合格標准為：細菌總數<20cfu/件，不能檢出致病菌；
5.2滅菌後內鏡合格標准為：無菌檢測合格。
5.3 內鏡結構復雜,關節多、孔道細長 (2--6英尺，直徑 幾毫米)，
5.4.使用時, 易沾掛血液、黏液、組織、排泄物等。
5.5.胃鏡在應用後，可有105-1010cfu/mL的生物負載。
5.6.支氣管鏡在清洗前, 平均負載為6.4×104cfu/mL。

❾ 衛生手消毒效果監測標準是什麼

衛生手消毒效果應達到的要求是細菌數應≤10cfu/cm2。

衛生與消毒是兩個不同的卻是緊密相連的概念。衛生是指用機械的方法，如用打掃、沖洗等，使養雞場的雞舍、運動場、通道等保持清潔衛生，做到無糞便、無分泌物、無雜草雜物、無污水等。

因為這些灰塵、糞便、污水污物等往往混有病原微生物和寄生蟲卵，極易造成疾病的發生和傳播。在打掃後實現清潔衛生的情況下，再進行消毒，這樣才能提高消毒的效果和達到消滅病原體的目的。

因為有機物的存在，不僅能阻斷消毒葯物對病原體的作用，還能降低消毒葯的葯效，甚至使消毒葯發生化學反應而失效。

正確的消毒方法：

1、居室消毒。

將84消毒液大約按照1:24的比例兌水，消毒的時間大約要30分鍾左右。消毒的方法可以利用擦拭、噴灑或者拖洗的方式，在消毒後還要用清水進行洗凈。使用時帶上口罩和橡膠手套，可以大大降低化學物質的危害。

2、餐具消毒。

水開後放入餐具煮15~20分鍾即可。但煮時一定要記住水一定要漫過所煮的餐具。此法既簡便又安全。如果是病毒性肝炎患者用過的食具，可以煮20~30分鍾。

❿ 衛生手消毒效果達到:監測的細菌菌落總數不高於多少

衛生手消毒，監測的細菌菌落總數應≤10cfu/㎝2，外科手消毒，監測的細菌菌落總數應≤5cfu/㎝2

采樣方法：被檢者五指並攏，用浸有含相應中和劑的無菌洗脫液浸濕的棉拭 子在雙手指曲面從指根到指端往返塗擦2次，一隻手塗擦面積約30cm2，塗擦過程中同時轉動棉拭子；將棉拭子接觸操作者的部分剪去，投入10ml含相應中和劑的無菌洗脫液試管內，及時送檢。

(10)手消毒效果檢測采樣方法擴展閱讀

保證衛生手消毒的效果：速干手消毒劑取液要足量確保濕潤揉搓；消毒劑要全手覆蓋確保不留死角；揉搓步驟同流動水洗手確保消毒效果；

揉搓至消毒劑徹底乾燥確保消毒時間。當手部有明顯污染時應選用流動水洗手；當手部無明顯污染時宜選用衛生手消毒。