病原微生物快速鑒定方法

① 細菌鑒定辦法有哪些，常見細菌的鑒定辦法就可以

細菌的鑒定通過分離培養獲得的病原菌，必須達到不含有其他微生物的純培養程度，才能進行系統鑒定。系統鑒定就是通過病原菌的形態結構、生長特性、抗原性和病原性等檢測，並用已知標准免疫血清確定分離細菌的屬、種和型。微生物鑒定的程序通常是根據其形態，生長、生化特性等定種，最後根據抗原的免疫血清學檢查定型。(一)形態學檢查各種細菌的形態，在適宜的環境下是相對穩定的。但環境的改變，如培養基條件的改變，抗生素和化學葯品的作用等，均可使細菌產生不規則的形態，並可出現細胞壁的缺陷和多樣性。為此，在作細菌形態鑒定時，必須按被檢菌的生長要求，選擇適宜的培養基和培養條件，以及適宜的培養時間和檢查方法，才能作出正確的形態學鑒定。形態學檢查一般包括二方面：肉眼觀察和顯微鏡檢查。1.肉眼觀察肉眼觀察主要觀察細菌在固體、液體、半固體，鑒別培養基上的生長情況。在固體培養基上要觀察菌落形態、大小、顏色是否均勻一致，表面是光滑濕潤，還是乾燥無光或呈皺紋狀，邊緣是整齊還是不規則，菌落是隆起、扁平，還是乳頭樣，是透明、半透明或不透明。在液體培養基中，要觀察培養基是否呈均勻渾濁，管底有無沉澱，液面有無菌膜，是否產氣等。在半固體培養基上應觀察細菌是否沿著接種線生長，是呈毛刷樣生長還是均勻生長，上下生長是否一致。在鑒別培養基上，應觀察其生長情況是否與預期的相一致，在血瓊脂培養基上還要觀察是否溶血及溶血圈的特點，在某些培養基上還要注意是否有臭味等。2.顯微鏡觀察在作細菌個體形態學檢查時，要根據被檢菌的種類和檢查項目，選用相應的染色方法，同時要注意選擇適合的培養基以及細菌培養的時間，才能達到預期的目的。一般以18－24小時（生長時間長的細菌除外）的幼嫩培養菌為宜。例如，作革蘭氏染色檢查時，培養時間長的陳舊細菌，可能由陽性變為陰性。作細菌運動性檢查時，液體培養基的幼嫩培養物（幾小時到十幾小時）最為適宜。作炭疽莢膜染色時，因炭疽桿菌在一般培養基上不形成莢膜，而在動物體內形成明顯的莢膜，因此，應先接種小鼠，取死亡動物的病料作塗片標本鏡檢。作鞭毛染色時，以液體培養基為宜。芽胞的形成，因細菌種類不同，往往對培養條件如培養基、空氣和培養時間等而異，但一般均要求較長時間。鏡檢時除注意其基本形態結構和大小（要用測微計測量）外，還應注意其排列狀態、菌端形狀、有無兩極染色、有無形成芽胞和莢胞等。必要時可用電鏡觀察其微細結構。3.常用的幾種染色方法塗片用的載玻片需用清潔液洗凈、擦乾、不留油質，否則培養物不能均勻地推開。被檢材料如果是肉湯培養物，用鉑金耳環取一滴，均勻塗抹於載玻片上，塗抹的范圍約有手指甲大即可。隨後，在酒精燈火焰上加熱使之固定（即火焰固定）；被檢材料如果是固體培養物，先滴一滴水（常用生理鹽水）於載玻片上，用鉑金耳環取少許培養物，在水滴中混勻，培養物不宜太多，菌體看不清楚。膿汁、淋巴液、乳汁也按同樣方法制備抹片。血液和病變組織，直接塗抹在載玻片上，組織抹片也不能太厚，否則看不見細菌，細菌培養物抹片用火焰固定，組織抹片常用甲醇或甲醛固定。

② 病原微生物基因檢測和其他檢測有什麼不同

病原微生物檢測方法包括：

傳統金標准：特殊染色鏡檢，培養葯敏試驗等確定病原菌和耐葯基因

免疫學方法：酶聯免疫技術通過已知的抗體或抗原來檢測病原體的抗原或抗體

PCR檢測：用已知引物引導未知片段中微量待測基因片段擴增

基因晶元：通過微加工將百萬計的基因探針與核酸雜交檢測技術

核酸雜交：探針和核酸按鹼基互補配對原則締成異質雙鏈檢測

宏基因組：從樣品中提取總核酸，構建宏基因組文庫測序分析檢測

病原微生物宏基因檢測法相比於其它方法：其利用宏基因組檢測樣本總核酸鑒定微生物的種類，檢測范圍更廣，一次性可分析10635種微生物，包括RNA病毒，速度快48小時能完成交付，檢測樣本靈活，

重點：

1、可檢出新發病原，解決想不到，

2、可檢也罕見病原，解決沒想到，

3、可檢出低頻率突變，解決做不到，

達瑞基因

③ 鑒定未知病原體的技術有哪些

鑒定未知病原體的技術雀明棗可以用快速測試片技術法，具體介紹如下：

快速測試片是指以紙片、紙膜、膠片等作為培養基載體，將特定的培養基和顯色物質附著在上面，通過微生物在上面的生長、顯色來測定食品中微生物的方法。

細菌總數檢測紙片的研製始於20世紀80年代，其主要優點是簡便、實用、經濟、操作性強。近年來槐閉以濾紙和美國某公司的Petrifilm為載體的測試片已開始被廣泛應用。

每個人一生中可能受到150種以上的病原體感頃拆染，在人體免疫功能正常的條件下並不引起疾病，有些甚至對人體有益，如腸道菌群（大腸桿菌等）可以合成多種維生素。

④ 病原微生物中細菌常見檢測方法有哪些

1、快速測試片技術法

快速測試片是指以紙片、紙膜、膠片等作為培養基載體，將特定的培養基和顯色物質附著在上面，通過微生物在上面的生長、顯色來測定食品中微生物的方法。

細菌總數檢測紙片的研製始於 20 世紀 80 年代，其主要優點是簡便、實用、經濟、操作性強。近年來以濾紙和美國某公司的 Petrifilm 為載體的測試片已開始被廣泛應用。

2、生物電化學方法

生物電化學方法是指通過電極測定微生物產生或消耗的電荷，從而提供分析信號的方法。微生物在滋生代謝過程中，培養基的電化學性質如電流、電位、電阻和電導等會發生變化，所以可以通過檢測分析這些電化學參量的變化來實現對微生物的快速測定。

常見的有：阻抗分析法、電位分析法、電流分析法等。生物電化學方法具有測量快速、直觀、操作簡單、測量設備成本低和信號的可控性等特點。

3、微菌落技術

微菌落是指細菌生長繁殖早期在固相載體上所形成的只能藉助於顯微鏡觀察的微小菌落。微菌落技術具有快速、經濟、實用的特點，其研究始於 20 世紀50年代，定量測定技術從 20 世紀 70 年代開始，國外已有報道將該法應用於水、食品中細菌總數的快速檢測。

4、氣相色譜法

氣相色譜應用到微生物的檢測中，主要是依據不同微生物的化學組成或其產生的代謝產物各異，利用上述色譜檢測可直接分析各種體液中的細菌代謝產物、細胞中的脂肪酸、蛋白質、氨基酸、多肽、多糖等，以確定病原微生物的特異性化學標志成分，協助病原診斷和檢測。

5、高效液相色譜法

利用高效液相色譜檢測可分析各種體液中的細菌代謝產物、病原微生物等，以確定病原微生物的特異性化學標志成分，協助病原診斷和檢測。

⑤ 食源性致病微生物的快檢方法

檢測致病菌大概有如下幾種方法。
1 傳統生物學方法，按照標准檢測，最麻煩，最傳統，但是最經典，可作為其他方法之驗證。
2 顯色培養基方法，用國外進口顯色培養基檢測，比較方便，目前最流行，使用簡單，也不貴。
3 膠體金試紙條檢測，購買國外進口試紙條，現場檢測，這種方法10分鍾可以檢測到結果。但是檢測靈敏度偏低。
4 ELISA，酶聯免疫實驗。目前只有國外進口枝態，歐美四家大公司壟斷了全球95%以上的市場，一個96孔試劑盒，售價高達5000-6000元，非常無奈，但是是國外最流行的快速篩選技術，檢測靈敏度、檢測周期都比較理想，不過國內現在有公司專業在做這方面的試劑盒了，估計價格很快會降下來，可能是將來主流的檢測技術了，部分已經寫進國標了。
5 IC-PCR，免疫捕捉PCR，用抗體特異性識別捕捉，之後再PCR擴增。最大的優勢是，病原經過抗體識別、PCR檢測雙重檢測，可一次鑒定到種，檢測靈敏度可以達到十的兩次方，不用核酸提取，所有反應在一個PCR管里進行，減少了病原的損失，缺點是檢測時間大致在4個小時，是一張理想的驗證手段。
6 Direct-PCR，增菌後直接PCR，比較簡單的驗證手段，增菌後直接擴增，受PCR檢測體系的現實，靈敏度偏低，但是取決於樣品中的菌含量。
7 Nested-PCR，兩對引物巢式PCR。兩對引物兩次擴增，最大的優勢是檢測准確性、靈敏度可絕對保障，劣勢是檢測時間較長。
8膜過濾PCR，利用病原富集裝置，富集之後檢測，最笨的一種方法，但是是最實用的，病原經過微孔濾膜過濾後，可高效富集病原 ，之後去檢測，大大提高檢測靈敏度。
9 BIO-PCR，培養增菌後PCR擴增，這個技術只能做研究用了，就是分離培養後，用PCR檢測，乏善可陳。
10 IMS-PCR，免疫磁珠PCR，用免疫磁珠捕捉，之後進行PCR，用磁珠富集樣品中的病原，之後直接PCR擴增，非常實用的方法，主要是可以富集病原。
11 BAX快速檢測系統，按照系統說明書操作。貴族實驗室用的東西，靈敏度瞎搭仔和其成本、假陽性一樣出色。
12 RiboPrinter快速檢測系統磨汪，按照系統說明書操作。同上，大同小異。

⑥ 微生物室常用的病原真菌檢查方法有哪些

您好！

1、真菌鏡檢
是最簡單也是很有價值的實驗室診斷方法。其優點在於簡便、快速，無菌部位的陽性結果可直接確定真菌感染。但是由於陽性率較低，陰性結果亦不能排除診斷。直 接鏡檢對於淺表和皮下真菌感染最有幫助。在皮膚刮屑、毛發或甲標本中發現皮膚癬菌、念珠菌和馬拉色菌的成分可提供對相應真菌病的可靠診斷。如在無菌體液的 直接鏡檢中發現真菌成分常可確立深部真菌病的診斷，例如在腦脊液中檢測到帶莢膜的新生隱球菌酵母細胞，或外周血塗片中檢測到莢膜組織胞漿菌細胞。但一般在 有菌部位則只有發現大量真菌菌絲方才有意義，通過直接鏡檢一般可以區分念珠菌、隱球菌、暗色真菌、毛霉（接合菌）等菌的感染，進一步明確鑒定菌種需要通過 培養鑒定來完成。

2、真菌培養
真菌培養是實驗室檢查中的重要環節，培養出致病真菌是進一步鑒定菌種的前提條件。真菌培養第一步是從臨床標本中培養真菌的初代培養，初代培養後進一步進行 分離純化培養和鑒定培養。不同致病真菌每一步所採用的培養基，培養時間和培養溫度存在一定的差異。常規的真菌培養需要在28-30°C溫度下培養3-4 周，一般初代培養選用沙氏培養基（SDA）或者馬鈴薯瓊脂培養基（PDA），採用試管培養，一般同時培養兩管，其中一管可添加抗生素（氯黴素或慶大黴素均 可）。在培養1周內，應該每天觀察有無真菌生長。一般培養4周後，如果無真菌生長可報陰性。發現培養出真菌，直接挑取少量菌體或者小培養後，用乳酸酚棉蘭 製成塗片顯微鏡下觀察，結合菌落大體形態，典型菌種可直接報告種屬。不典型菌種根據基本表現，採用適當的標准鑒定培養基，標准培養條件培養，必要時要結合 生理學和分子生物學方法進行鑒定。

3、真菌鑒定
對常見致病真菌要掌握的鑒定原則是首先區分酵母菌和黴菌。
如果初代培養基上培養出酵母樣菌落，在鑒定前應進行分離純化。在去除細菌和其他真菌污染，區分混合感染後，對純菌落進行鑒定。酵母菌鑒定主要根據形態學特 征和生理生化特點，按照一定的流程進行。首先根據菌落顏色進行分類。臨床最為常見的是白色或奶白色菌落，這類菌進一步做芽管試驗，若芽管試驗是陽性則為白 念珠菌，若陰性則通過Vitek YBC或API20C及玉米吐溫瓊脂上培養的形態特徵來鑒定。另外，還可以應用念珠菌顯色瓊脂、尿素酶試驗等試驗來輔助鑒定。
檢驗地帶網

黴菌的鑒定非常復雜，有許多標准包括形態學特徵、溫度耐受性，放線菌酮抗性、雙相性、營養需求、蛋白分解活動以及水解尿素能力等。現代分類學鑒定方法主要 依據分生孢子的個體發生過程結合其他特徵來進行鑒定。初代培養後根據形態學特徵一般可鑒定到屬的水平，再依據不同真菌的鑒定要求，採用標准培養基和培養條 件進一步完成菌種鑒定。例如：麴黴屬鑒定時需要採用標准培養基，即察氏培養基和麥芽瓊脂，25℃培養7天後與麴黴形態鑒定檢索表對應得到正確的結果。

⑦ 病原微生物中細菌常見檢測方法有哪些

傳統檢測有三種方法1、直接顯微鏡觀察，正常情況，在一定的培養條件下（相同的培養基、溫度以及培養時間），同種微生物表現出穩定的菌落特徵。可以通過顯微鏡觀察菌落特徵對微生物種類進行判斷。
2、選擇培養基培養微生物或人為提供有利於目的菌株生長的條件，選擇培養基，其作用是允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他微生物生長。選擇培養一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特徵進行間接判斷，得到的微生物往往並不只有一種，但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特徵從而對其分類。
3、鑒別培養基，根據微生物的代謝特點，在培養基中加入某種指示劑或化學葯品。與選擇培養相比，鑒別培養基的鑒別所得結果的范圍比較小，一般可直接測定某微生物的種類。
現代定義
微生物：個體難以用肉眼觀察的一切微小生物之統稱。微生物包括細菌、病毒、真菌、和少數藻類等。（但有些微生物是肉眼可以看見的，像屬於真菌的蘑菇、靈芝等。）病毒是一類由核酸和蛋白質等少數幾種成分組成的「非細胞生物」，但是它的生存必須依賴於活細胞。根據存在的不同環境分為空間微生物、海洋微生物等，按照細胞機構分類分為原核微生物和真核微生物。
主要特徵
1、體小面大2、吸多轉快3、生長繁殖快
微生物的這一特性使其在工業上有廣泛的應用，如發酵、單細胞蛋白等。微生物是人類不可或缺的好朋友。

⑧ 病原微生物的鑒別染色法有哪些葯劑怎麼配置怎麼操作

檢驗常用染色法包括
1）革蘭氏染色法碼明
2）抗酸染色法
3）美蘭染色法
4）異染顆粒染色法
5）細菌鞭毛染色法
6）莢膜染色法芽孢染色法
7)布氏桿菌科茲洛夫斯基染色法
8)結核桿菌熒光染色法等主要染色法
革蘭氏染色法染液配製
1。結晶紫染液：稱取結晶紫（龍膽紫）14g，溶於95%酒精100ml中，配成飽和液，再取飽和液20ml與1%草酸銨溶液（1g草酸銨溶於100ml蒸餾水溶解即成）80ml混勻即成2。盧戈氏碘液：碘化鉀2g於10ml蒸餾水中，再加碘1g，待碘全部溶解後（時間較長）加蒸餾水200ml即成3。95%酒精4。（1）石碳酸復紅液：稱取鹼性復紅（鹼性品紅）4g溶於95%酒精100ml中成飽和液，再取談鍵飽和液10ml與5%石碳酸溶液（5ml石碳酸溶於100ml蒸餾水）90ml混勻即成，（2）稀釋石碳酸復紅液：取石碳酸復紅液10ml加入蒸餾水90ml即成染色方法：1。塗片
將菌液直接塗在載玻片上，經培養的菌落要加生理鹽水混勻塗片，等待乾燥（固定）2。將結晶紫染液滴加在已固定的塗片上，染色1分鍾後用水沖去剩餘燃料3。滴加盧戈氏碘液1分鍾後水洗，在滴加95%酒精脫色，搖動玻片至紫色不在脫色為止（約需1分鍾），遲侍告水洗4。用稀釋石碳酸復紅液復染30秒至1分鍾5。水洗待干，鏡檢6。革蘭氏陽性菌染成紫色，革蘭氏陰性菌染成紅色

⑨ 病原微生物在培養基上的鑒別

培養鑒別，主要按照各自生理生化特徵鑒別。
1 大腸桿菌 鑒別方法： 培養基中加入伊紅美藍 大腸桿菌遇之，棗塌菌落呈深紫色，並有金屬光澤，可鑒別大腸桿菌。
2。綠膿桿菌綠膿桿菌（p.aeruginosa）或稱銅綠色假單胞菌，鑒別：分解蛋白質能力甚強，而發酵糖類能力較低，分解葡萄糖，伯膠糖，單奶糖，甘露糖產酸不產氣，不分解麥芽糖，菊糖和棉籽糖，甘露醇、乳糖及蔗糖，能液化明凳汪圓膠。分解尿素，不形成吲哚，氧化酶試驗陽性，可利用枸椽酸鹽。不產生H2S，MR試驗和VP試驗均為陰性。

3 鏈球菌：鏈球菌(Streptococcus)是化膿性球菌的另一類常見的細菌，鑒別方法：能發酵簡單的糖類，產酸不產氣。一般不分解菊糖，不被膽汁或1%去氧膽酸鈉所溶解。這兩種特性用來鑒定甲型溶血型鏈球菌和肺炎球菌。

詳細方法 你要按照陵搏標準的操作步驟進行哦。

一般不可以像你那樣鑒別的 因為那些表型不是唯一的 非致病菌也有可能表現出黃色或者白色菌落的 你怎麼知道一定是什麼致病菌呢？
如果你知道你檢測的對象 就只是這幾株菌 那就可以。