⑴ 二次PCR產物，電泳條帶與第一次PCR一樣不明顯，如何解決
首先你的確認你沒有用錯東西。
如果沒有問題，二次PCR的話，那得看你的延伸時間和退火溫度了。
2輪的退火溫度最好調高些，以增強特異性。
延伸時間上，看你的產物大小。如果需要大條帶，那延伸時間意義不大，最好能對一輪產物進行預期條帶的回收後再做2輪，或者進行巢式PCR；要是需要小條帶那就簡單了，直接縮短延伸時間就好了。
⑵ 二次電泳的後果
對於已建成或投入使用的連續式及步進式生產線,為解決因時間不夠造成的電泳漆膜厚不足問題,通過實驗探討了二次電泳工藝所得漆膜的外觀及性能,並說明了工藝控制要點.該工藝解決了電泳漆膜增厚的問題,適用於要求相對稍低的汽車零部件,日用品,玩具等…
⑶ 怎樣解決電泳積油問題
積油，是一直以來電泳行業比較難處理的問題。一般處理方法如下:
1 找出油是哪裡進到槽子的，處理好。
2 將槽子停止循環，待油浮在上面，用吸油氈或者報紙吸取一部分。
3 翻槽。注意排出含油最多的部分槽液。
4 加入抗縮孔劑，是生產不出現問題，慢慢緩解問題。
最主要是1
⑷ 電泳液的最好處理方法
電泳塗裝工藝過程及方法技巧
所謂電泳塗裝，是將被塗物浸漬在水溶性塗料中作為陽極（陽極電泳），另設一與其相對應的陰極，在兩極間通直流電，靠電流所產生的物理化學作用，使塗料均勻塗在被塗物上的一種塗裝技術。
電泳塗裝必須使用電泳漆，電泳漆通常又稱水溶性塗料，電泳漆與蒸餾水必須按一定比例進行稀釋，才能使用。
電泳塗裝一般包括四個同時進行的過程：
1、電泳：在直流電場的作用下，正，負帶電膠體粒子向負，正方向運動，也稱泳動。
2、電解：電極上分別進行著氧化還原反應，反而在電極上形成氧化與還原現象。
3、電沉積：由於電泳作用，移至陽極附近的帶電膠體粒子在模板表體放出電子，而呈不溶狀態沉積，析出的現象，此時漆膜形成。
4、電滲：在電場作用下，固相不動，而液相移動的現象。電滲作用使漆膜內所含水份逐漸被排到塗膜外，最後形成幾乎連電流也通不過去，含水率極低，電阻相當高的緻密漆膜。
5、鐵紅環氧電泳漆為例：該電泳漆系改性環氧樹脂，丁醇，乙醇胺，滑石粉，鐵紅的物質組成，電泳漆與蒸餾水混合後，在直流電場的作用下，即分離成帶正電荷的陽離子和帶負電荷的陰離子，並進行一系列復雜的物理化學膠體化學，電化學變化過程。
電泳塗裝的方法及技巧
（1）一般金屬表面的電泳塗裝，其工藝流程為： 預清理→上線→除油→水洗→除銹→水洗→中和→水洗→磷化→水洗→鈍化→電泳塗裝→槽上清洗→超濾水洗→烘乾→下線。
（2）被塗物的底材及前處理對電泳塗膜有極大影響。鑄件一般採用噴砂或噴丸進行除銹，用棉紗清除工件表面的浮塵，用80#～120#砂紙清除表面殘留的鋼丸等雜物。鋼鐵表面採用除油和除銹處理，對表面要求過高時，進行磷化和鈍化表面處理。黑色金屬工件在陽極電泳前必須進行磷化處理，否則漆膜的耐腐蝕性能較差。磷化處理時，一般選用鋅鹽磷化膜，厚度約1～2μm，要求磷化膜結晶細而均勻。
（3）在過濾系統中，一般採用一級過濾，過濾器為網袋式結構，孔徑為25～75μm。電泳塗料通過立式泵輸送到過濾器進行過濾。從綜合更換周期和漆膜質量等因素考慮，孔徑50μm的過濾袋最佳，它不但能滿足漆膜的質量要求，而且解決了過濾袋的堵塞問題。
（4）電泳塗裝的循環系統循環量的大小，直接影響著槽液的穩定性和漆膜的質量。加大循環量，槽液的沉澱和氣泡減少；但槽液老化加快，能源消耗增加，槽液的穩定性變差。將槽液的循環次數控制6～8次/h較為理想，不但保證漆膜質量，而且確保槽液的穩定運行。
（5）隨著生產時間的延長，陽極隔膜的阻抗會增加，有效的工作電壓下降。因此，生產中應根據電壓的損失情況，逐步調高電源的工作電壓，以補償陽極隔膜的電壓降。
（6）超濾系統控制工件帶入的雜質離子的濃度，保證塗裝質量。在此系統的運行中應注意，系統一經運行後應連續運行，嚴禁間斷運行，以防超濾膜乾枯。乾枯後的樹脂和顏料附著在超濾膜上，無法徹底清洗，將嚴重影響超濾膜的透水率和使用壽命。超濾膜的出水率隨運行時間而呈下降趨勢，連續工作30～40天應清洗一次，以保證超濾浸洗和沖洗所需的超濾水。
（7）電泳塗裝法適用於大量流水線的生產工藝。電泳槽液的更新周期應在3個月以內。以一個年產30萬份鋼圈的電泳生產線為例，對槽液的科學管理極為重要，對槽液的各種參數定期進行檢測，並根據檢測結果對槽液進行調整和更換。一般按如下頻率測量槽液的參數： 電泳液、超濾液及超濾清洗液、陰（陽）極液、循環洗液、去離子清洗液的PH值、固體含量和電導率 每天一次；顏基比、有機溶劑含量、試驗室小槽試驗 每周2次。
（8）對漆膜質量的管理，應經常檢查塗膜的均一性和膜厚，外觀不應有針孔、流掛、橘皮、皺紋等現象，定期檢查塗膜的附著力、耐腐蝕性能等物理化學指標。檢驗周期按生產廠家的檢驗標准，一般每個批次都需檢測。
電泳塗裝及水性漆的運用，標志著塗裝工業的一項重大進步。
電泳塗裝施工速度快，可實現機械化和自動化連續作業，減輕勞動強度，漆膜均勻，附著力強，對一般塗裝方法不易塗到或塗不好的部位，如前所述的筋板焊縫等處都能獲得均勻平整，光滑的漆膜。塗料利用率高達90%-95%，由於電泳塗料是以水作為溶劑的，具有不燃性，無毒、操作方便等優點。電泳後經過烘乾的漆膜，具有優良的附著力，它的防銹性耐腐蝕性，耐候性等性能均優於普通油漆及一般的施工方法。
⑸ 什麼是雙向電泳
雙向電泳（two-dimensional electrophoresis）是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合，即先進行等電聚焦電泳（按照pI分離），然後再進行SDS-PAGE（按照分子大小），經染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖。
：雙向電泳完整的操作步驟 （一）第一向等電聚焦 1. 從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室溫溶解。 2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混勻。 3. 從小管中取出400ml水化上樣緩沖液，加入100ml樣品，充分混勻。 4. 從冰箱中取-20℃冷凍保存的IPG預制膠條（17cm pH 4-7），室溫中放置10分鍾。 5. 沿著聚焦盤或水化盤中槽的邊緣至左而右線性加入樣品。在槽兩端各1cm左右不要加樣，中間的樣品液一定要連貫。注意：不要產生氣泡。否則影響到膠條中蛋白質的分布。 6. 當所有的蛋白質樣品都已經加入到聚焦盤或水化盤中後，用鑷子輕輕的去除預制IPG膠條上的保護層。 7. 分清膠條的正負極，輕輕地將IPG膠條膠面朝下置於聚焦盤或水化盤中樣品溶液上，使得膠條的正極（標有+）對應於聚焦盤的正極。確保膠條與電極緊密接觸。不要使樣品溶液弄到膠條背面的塑料支撐膜上，因為這些溶液不會被膠條吸收。同樣還要注意不使膠條下面的溶液產生氣泡。如果已經產生氣泡，用鑷子輕輕地提起膠條的一端，上下移動膠條，直到氣泡被趕到膠條以外。 8. 在每根膠條上覆蓋2-3ml礦物油，防止膠條水化過程中液體的蒸發。需緩慢的加入礦物油，沿著膠條，使礦物油一滴一滴慢慢加在塑料支撐膜上。 9. 對好正、負極，蓋上蓋子。設置等電聚焦程序。 10.聚焦結束的膠條。立即進行平衡、第二向SDS-PAGE電泳，否則將膠條置於樣品水化盤中，-20℃冰箱保存。 （二）第二向SDS-PAGE電泳 1. 配製10%的丙烯醯胺凝膠兩塊。配80ml凝膠溶液，每塊凝膠40ml，將溶液分別注入玻璃板夾層中，上部留1cm的空間，用MilliQ水（沒有milliq的話ddh2o也行，注，水雲深浪按）、乙醇或水飽和正丁醇封面，保持膠面平整。聚合30分鍾。一般凝膠與上方液體分層後，表明凝膠已基本聚合。 2. 待凝膠凝固後，倒去分離膠表面的MilliQ水、乙醇或水飽和正丁醇，用MilliQ水沖洗。 3. 從-20℃冰箱中取出的膠條，先於室溫放置10分鍾，使其溶解。 4. 配製膠條平衡緩沖液I。 5．在桌上先放置乾的厚濾紙，聚焦好的膠條膠面朝上放在乾的厚濾紙上。將另一份厚濾紙用MilliQ水浸濕，擠去多餘水分，然後直接置於膠條上，輕輕吸干膠條上的礦物油及多餘樣品。這可以減少凝膠染色時出現的縱條紋。 6. 將膠條轉移至溶漲盤中，每個槽一根膠條，在有膠條的槽中加入5ml膠條平衡緩沖液I。將樣品水化盤放在水平搖床上緩慢搖晃15分鍾。 7. 配製膠條平衡緩沖液II。 8. 第一次平衡結束後，徹底倒掉或吸掉樣品水化盤中的膠條平衡緩沖液I。並用濾紙吸取多餘的平衡液（將膠條豎在濾紙上，以免損失蛋白或損壞凝膠表面）。再加入膠條平衡緩沖液II，繼續在水平搖床上緩慢搖晃15分鍾。 9. 用濾紙吸去SDS-PAGE聚丙烯醯胺凝膠上方玻璃板間多餘的液體。將處理好的第二向凝膠放在桌面上，長玻璃板在下，短玻璃板朝上，凝膠的頂部對著自己。 10.將瓊脂糖封膠液進行加熱溶解。 11.將10×電泳緩沖液，用量筒稀釋10倍，成1×電泳緩沖液。趕去緩沖液表面的氣泡。 12.第二次平衡結束後，徹底倒掉或吸掉樣品水化盤中的膠條平衡緩沖液II。並用濾紙吸取多餘的平衡液（將膠條豎在濾紙上，以免損失蛋白或損壞凝膠表面）。 13.將IPG膠條從樣品水化盤中移出，用鑷子夾住膠條的一端使膠面完全浸末在1×電泳緩沖液中。然後將膠條膠面朝上放在凝膠的長玻璃板上。其餘膠條同樣操作。 14.將放有膠條的SDS-PAGE凝膠轉移到灌膠架上，短玻璃板一面對著自己。在凝膠的上方加入低熔點瓊脂糖封膠液。 15.用鑷子、壓舌板或是平頭的針頭，輕輕地將膠條向下推，使之與聚丙烯醯胺凝膠膠面完全接觸。注意不要在膠條下方產生任何氣泡。在用鑷子、壓舌板或平頭針頭推膠條時，要注意是推動凝膠背面的支撐膜，不要碰到膠面。 16.放置5分鍾，使低熔點瓊脂糖封膠液徹底凝固。 17.在低熔點瓊脂糖封膠液完全凝固後。將凝膠轉移至電泳槽中。 18.在電泳槽加入電泳緩沖液後，接通電源，起始時用的低電流（5mA/gel/17cm）或低電壓，待樣品在完全走出IPG膠條，濃縮成一條線後，再加大電流（或電壓）（20-30mA/gel/17cm），待溴酚藍指示劑達到底部邊緣時即可停止電泳。 19.電泳結束後，輕輕撬開兩層玻璃，取出凝膠，並切角以作記號（戴手套，防止污染膠面）。 20.進行染色。
⑹ 電泳車的二次流痕問題該怎麼解決
1.電泳出槽後要立即用UF液噴淋洗，UF1與UF2之間瀝水時間不需要太長，不然容易產生乾漆跡。
2.在工件進入烘箱之前不能有積水多的地方，容易產生水痕跡，可以增加瀝水時間或者用干凈壓縮吹水。
⑺ 第二次電泳和第一次的結果不一樣是怎麼回事
pcr產物本來就不穩定，放久了產生變化也是可能的。