脂肪酸值快速測定新方法

『壹』 脂肪檢測的原理是什麼實驗操作流程

脂肪檢測方法可用索式提取法：

一、索式提取法（經典方法）

1、原理：

樣品經前處理後，放入圓筒濾紙內，將濾紙筒置於索式提取管中，利用乙醚或石油醚在水浴中加熱迴流，使樣品中的脂肪進入溶劑中，回收溶劑後所得到的殘留物，即為脂肪（粗脂肪）
採用這種方法測出遊離態脂，此外還含有磷脂、色素、蠟狀物、揮發油、糖脂等物質，所以用索氏提取法測得的脂肪為粗脂肪。

2、 適用范圍與特點

索氏提取法適用於脂類含量較高，結合態的脂類含量較少，能烘乾磨細，不宜吸濕結塊的樣品的測定。此法只能測定游離態脂肪，而結合態脂肪無法測出，要想測出結合態脂肪需在一定條件下水解後變成為游離態的脂肪方能測出。

另外此法是經典方法，對大多數樣品結果比較可靠，但需要周期長，溶劑量大。

二、實驗操作流程

1、濾紙筒的制備

將濾紙剪成長方形8×375px ，捲成圓筒，直徑為150px，將圓筒底部封好，最好放一些脫脂棉，避免向外漏樣。

2、稱取樣品，將樣品烘乾磨細，稱取一定量與紙筒封好上口，最好用測定水的樣品。

3、索式抽提器的准備

索氏抽提器由三部分組成，迴流冷凝管、提取管、提脂瓶組成。提脂瓶在使用前需烘乾並稱至恆重。其它要乾燥。

4、抽提

將裝好樣的紙筒放入抽提管 ， 倒入乙醚，乙醚的量從提取管加入，加入的量為提取瓶體積的2/3 接上冷凝裝置，在恆溫水浴中抽提，水浴溫度大約為55℃左右，可用濾紙檢驗，理論值抽提6-8小時，實際值3-4小時，但也根據樣品性質來決定。
5、回收乙醚

當乙醚在提取管內即將虹吸時立即取下提取管，將其下口放到乙醚回收瓶內，使之傾斜，然後將提取瓶放到100-150℃烘箱烘至恆重。

6、計算

脂肪%= (W2-W1)/W x 100

W2——瓶和樣品重（g）W1——瓶子重量（g） W——樣品重量（g）

或：脂肪%=（抽提後濾紙與樣品重量—抽提前濾紙重量）/樣品重量 × 100

濾紙筒應事先放入燒杯與100-105℃烘箱烘至恆重。

(1)脂肪酸值快速測定新方法擴展閱讀：

索式提取法注意事項

（1）樣品應乾燥後研細，裝樣品的濾紙筒一定要緊密，不能往外漏樣品，否則重做。

（2）放入濾紙筒的高度不能超過迴流彎管，否則乙醚不易穿透樣品，使脂肪不能全部提出，造成誤差。

（3） 碰到含多糖及糊精的樣品要先以冷水處理，等其乾燥後連同濾紙一起放入提取器內。

（4） 提取時水浴溫度不能過高，一般使乙醚剛開始沸騰即可（約45℃左右），迴流速度以8-12次/時為宜。

（5） 所用乙醚必需是無水乙醚，如含有水分則可能將樣品中的糖以及無機物抽出，造成誤差。

（6） 若用干樣品測定脂肪，可按下式計算原來樣品脂肪的含量

脂肪（%）= （W1-W2）(100-A) / W

A— 100克樣品中水分的含量（g）

(7) 冷凝管上端最好連接一個氯化鈣乾燥管，這樣不僅可以防止空氣中水分進入，而且還可以避免乙醚揮發在空氣中。這樣可防止實驗室微小環境空氣的污染，如無此裝置，塞一團干脫脂棉球亦可。

（8）如果沒有無水乙醚可以自己制備，制備方法如下：在100ml乙醚中，加入無水石膏50克，振搖數次，靜止10小時以上，蒸餾，收集35℃以下的蒸餾液，即可應用。

（9）將提取瓶放在烘箱內乾燥時，瓶口向一側傾斜45度防止揮發物乙醚易與空氣形成對流，這樣乾燥迅速。

（10）如果沒有乙醚或無水乙醇時，可以用石油醚提取，石油醚沸點30-60℃為好。

（11）使用揮發乙醚或石油醚時，切忌直接用火源加熱，應用電熱套、電水浴、電燈泡等。

（12） 這里恆重的概念有區別，它表示最初達到的最低重量，即溶劑和水分完全揮發時的恆重，此後若在繼續加熱，則因油脂氧化等原因會導致重量增加。

（13） 在乾燥器中的冷卻時間一般要一致。

『貳』 脂肪酸的測定方法和原理

脂肪酸的測定方法和原理有標准。直接找國標就可以了。根據食品的類型。查找相關的國標或行業標准。按照標準的方式方法來進行檢驗。

『叄』 買來的脂肪酸如何測量它的酸值 另外還需要測量其他的值嗎

用鹼性標准溶液滴定，計算酸值。
脂肪酸的指標有色澤、水分、酸值、皂化、碘值、碳鏈組成等。檢查哪些項目需要根據用途來決定。

『肆』 玉米脂肪酸值如何檢測

玉米脂肪酸我們經常做，是按照GB/T 20570-2006（在食品夥伴網可以免費下載）里的附錄A操作的，只是把氫氧化鉀的配置方法改成了用蒸餾水配置，他所說的不含二氧化碳的蒸餾水，即將蒸餾水煮沸，沸騰20min後，冷卻，冷卻時要加蓋。

『伍』 脂肪酸值詳細資料大全

糧食脂肪酸值是檢驗糧食中游離脂肪酸含量多少的量值。其檢驗結果以中和100g糧食試樣中游離脂肪酸所需氫氧化鉀的量來表示。脂肪酸值的變化反映了稻穀和玉米常用的品質劣變程度。在國標的穀物儲藏判定規則中，作為稻穀和玉米的宜存指標。

基本介紹

• 中文名 ：脂肪酸值
• 外文名 ：fatty acid value
• 單位 ：(KOH)/(g/100g)

產生原理,測定方法,滴定法,比色法,色譜法,影響因素,儲藏時間,溫度,濕度,黴菌,其他,

產生原理

脂肪酸值是衡量游離脂肪酸含量的指標。游離脂肪酸產生的途徑是脂肪酸值變化的根本原因。天然植物中含有很大比例的油脂。天然油脂主要由3分子高級脂肪酸與1分子甘油組成，故又稱甘油三酯。脂肪的種類不同，油脂性狀不同。如玉米油含90%不飽和脂肪酸，室溫下呈液態。一般來說，不飽和脂肪酸比飽和脂肪酸更加的不穩定。因為不飽和脂肪酸的雙鍵很容易被氧化，這是玉米不耐保存的重要原因。對於稻穀來說，油脂在糙米中約佔2%。大部分含於米糠及胚芽中．因此精米僅含脂0.8%。構成米糠油的脂肪酸以油酸(45%)及亞油酸(33%)為主，總計88%也是不飽和脂肪酸。米糠油酸敗甚速，故其酸值增加很快。完整的糙米不易酸敗，但組織破壞的生米糠及白米則易氧化。因此破碎的稻穀和谷外糙米也是導致脂肪酸上升的重要原因。但是由於稻殼的保護很緻密。並且破碎沒有玉米那麼大，所以它比玉米要好保管一點。 天然植物本身含有一些游離脂肪酸。同時也會有一些脂肪酸從脂肪分子上水解下來。這些都是脂肪酸值的來源。脂肪酸的裂變過程主要是脂肪酸的酸敗過程。酸敗作用有2種類型：即水解型和氧化型。

測定方法

滴定法

滴定法使用氫氧化鉀-乙醇溶液滴定中和提取液中的游離脂肪酸，以酚酞變色顯示終點，該法簡單易行，不需要特殊儀器和試劑。該法存在的主要問題如下： ①由於糧食游離脂肪酸是有機弱酸的混合物，其滴定終點突變不明顯。 ②在糧食游離脂肪酸提取過程中，一些色素進入提取液以及提取液變混濁等增加了終點判斷的難度，使得個體間判斷終點差異增大。 ③氫氧化鉀-乙醇標准溶液較易吸收空氣中的C0 ₂ ，因為生成的碳酸鹽在醇中溶解度比水中小，乙醇較易揮發也會影響標准液的濃度。 ④難以實現自動化操作，不便於大批樣品的測定。

比色法

（1）生成反膠團 該法將有機溶劑(異辛烷)，表面活性劑[雙一(2一乙基己基)磺基丁二酸鈉]和少量水以一定比例混合形成光學透明的穩定反膠團體系，半徑以納米計的細小水滴在該體系中被有機溶劑包圍，而表面活性劑的薄層分布於兩者之間。將酚紅溶於反膠團pH=9的水相中。酚紅的PK ₁ 等於7.8，在鹼性介質中顯紅色，其水溶液於558 nm處有最大吸收。當介質pH下降時，酚紅的分子結構發生變化，分子共軛體系減小，顏色也相應轉變為黃色(弱酸或中性溶液)，最大吸收出現在430 nm處。當測定大米表面脂肪酸含量時，將大米試樣的異丙醇提取液加入到上述反膠團體系，充分混合後於560 nm比色，游離脂肪酸含量通過標准曲線計算得到。標准曲線由0.001%～0.02%油酸異丙醇標准溶液代替試樣提取液按上述方法比色得到。該法測定結果與滴定法相比無顯著差別，但該法測定精密度高於滴定法，可能由於大米表面脂肪酸含量低，致使滴定法難以判斷滴定終點而造成誤差。由於該法靈敏度高、測定速度快，適合測定脂肪酸含量低的試樣及需要快速測定大批樣品的場合。 （2）銅皂比色 2003年Goffman等報導使用銅皂比色法測定米糠游離脂肪酸含量。該法最初由Duncombe提出，使用Cu(N0 ₃ )·3H ₂ O和三乙醇胺為銅試劑和顯色試劑，脂肪酸與上述試劑反應後生成銅皂，通過比色測定含量。

色譜法

色譜法測定游離脂肪酸含量的報導已有許多，但大多用於測定油料、油脂或生物樣品中的游離脂肪酸含量。色譜法需要標准品作對照，該法更適合測定試樣中單個脂肪酸的含量和脂肪酸組分。 2000年Nishiba報導使用薄層色譜和火焰離子化檢測器測定大米游離脂肪酸含量，用於研究大米儲藏期間脂肪酸值的變化。該法將薄層層析操作簡單和火焰離子化檢測器靈敏度高的優點結合在一起，與滴定法相比，該法靈敏度高，所需試樣量少， 能敏感地檢測大米儲藏期間的脂肪酸變化，同時避免肉眼判斷終點導致的主觀誤差。但是該法的分析重現性基於溫度和濕度的穩定，所以保持溫濕度穩定及避免灰塵干擾是准確測定的前提。

影響因素

儲藏時間

儲存時間越長脂肪酸值越高，在儲藏過程中，如保管不當，會發生結露、發熱、霉變，糧食局部或全倉糧溫升高，從而使糧食籽粒內部脂肪發生酸敗反應，使得脂肪酸值升高。新收獲的玉米脂肪酸值較低，一般在30(KOH)/(g/100g)以下，隨著儲藏時間的延長而增加，在華南地區一般一年會升高10(KOH)/(g/100g)左右。如果儲備條件不好。會很快的升到了50(KOH)/(g/100g)以上，就不宜保存了，必須輪換。

溫度

脂肪在高溫高濕下極易發生酸敗，致使游離脂肪酸含量增加，脂肪酸值升高，稻穀品質發生劣變。張瑛等人對稻穀在儲藏過程中品質的變化做了研究認為脂肪酸值隨著儲藏時間延長明顯增加。張玉榮也認為，在高溫(400℃)的條件下，玉米的脂肪酸值和儲藏時間呈正相關。

濕度

控制糧食水分是保證糧食儲藏安全和糧食品質的關鍵。糧食水分高，可導致糧粒中酶活性增強，呼吸加劇，各種代謝活動更加旺盛，消耗干物質速度加快，從而使糧食儲藏穩定性降低，脂肪酸值就隨之升高，糧食的品質發生劣變。

黴菌

在玉米儲藏過程中，黴菌會影響玉米胚及其它部分脂肪的變化。結果表明，溫度和濕度升高，黴菌生長會更加旺盛，玉米胚中脂肪酸值提高不大，而其它部分則顯著提高。這是因為黴菌在胚中生長更旺盛，而胚中產生的脂肪酸能被黴菌分解利用。

其他

糧食破碎粒增大了玉米粒中脂肪與空氣中氧氣的接觸面積，使糧食籽粒更易發生酸敗而使脂肪酸值升高，糧食品質發生劣變。此外，脂肪酸值還和地區也有關，北方的糧食一般儲存時間比較長一些。

『陸』 脂肪酸酸價的測定方法

1、油脂中游離脂肪酸的多少與酸價有直接關系，所謂酸價，是中和一克油脂中的游離脂肪酸所需要氫氧化鉀的mg數。
2、測定酸價時加入乙醇主要是起到稀釋的目的。

『柒』 脂肪酸值的測定國家標准

法律分析：肪酸值是糧食品質劣變的靈敏指標之一.我國目前的測定方法GB5510-85是採用苯提取脂肪酸、GB/T15684-95是採用無水乙醇提取脂肪酸,國際標准ISO7305:1998是用95%乙醇提取脂肪酸.為了與國際標准接軌,對三種標准方法進行對照實驗,並將提取的脂肪酸進行氣相色譜分析,得出方法之間的差異。

法律依據：《中華人民共和國食品安全法》

第一條 為了保證食品安全，保障公眾身體健康和生命安全，制定本法。

第二條 在中華人民共和國境內從事下列活動，應當遵守本法：

（一）食品生產和加工（以下稱食品生產），食品銷售和餐飲服務（以下稱食品經營）；

（二）食品添加劑的生產經營；

（三）用於食品的包裝材料、容器、洗滌劑、消毒劑和用於食品生產經營的工具、設備（以下稱食品相關產品）的生產經營；

（四）食品生產經營者使用食品添加劑、食品相關產品；

（五）食品的貯存和運輸；

（六）對食品、食品添加劑、食品相關產品的安全管理。

『捌』 實驗室玉米提取脂肪酸的方法和步驟！

A.1 范圍

本方法規定了玉米儲存品質判定。

A.2 原理

在室溫下無水乙醇提取玉米中的脂肪酸，用標准氫氧化鉀溶液滴定，計算脂肪酸值。

A.3 試劑和材料

除非另有規定，僅使用分析純試劑。

A.3.1 無水乙醇。

A.3.2 酚酞—乙醇溶液（10g/L）;1.0g酚酞溶於100mL95%（V/V）乙醇。

A.3.3 不含二氧化碳的蒸餾水：將蒸餾水燒沸，加蓋冷卻。

A.3.4 c(KOH)=0.01mol/L氫氧化鉀—95%乙醇標准滴定溶液。

A.3.4.1 c(KOH)=0.5mol/L氫氧化鉀標准儲備液的配置

稱取28g氫氧化鉀，置於聚乙烯容器中，先加入少量無CO2的蒸餾水（約20ml）溶解，再將其稀釋至1000ml，密閉放置24h.吸取上層清液至另一聚乙烯塑料瓶中。

A.3.4.2 c（KOH）=0.5mol/L氫氧化鉀標准儲備液的標定

稱取在105℃烘2h並在乾燥器中冷卻後的鄰苯二鉀酸清鉀2.04g，精確到0.0001g，溶於50ml不含CO2蒸餾水中，滴加酚酞-乙醇指示劑（A3.2）3～5滴，用配製的氫氧化鉀標准儲備液滴定至微紅色，以30s不褪色為終點，記下所耗氫氧化鉀標准儲備液ml數（V1），同時做空白試驗（不加鄰苯二鉀酸氫鉀,同上操作），記下所耗氫氧化鉀標准儲備液ml數（V0）,按式計算氫氧化鉀標准儲備液濃度。

100×m

c(KOH)= —————————…………………. (1)

(V1-V0) ×204.22

式（1）中：

c(KOH)—氫氧化鉀標准儲備液濃度，mol/L;

1000—換算系數：

m—稱取鄰苯二甲酸氫加的質量，g；

V1—滴定所耗情氧化鉀標准儲備液體積，ml;

V0—空白試驗所耗氫氧化鉀標准液體積，ml;

204.22—鄰苯二鉀酸氫鉀的摩爾質量g/mol.

註：氫氧化鉀標准儲備液按要求定時復標。

A.3.4.3 c（KOH）=0.01mol/L氫氧化鉀-95%乙醇標准滴定溶液

准確移取20.0ml/L氫氧化鉀標准儲備液，用95%（V/V）乙醇稀釋定容至1000ml,盛放於聚乙烯塑料瓶中。臨用前稀釋。

註：稀釋用乙醇應事先調整為中性。

A.4 儀器與設備

A.4.1 具塞磨口錐形瓶：250ml.

A.4.2 移液管：50.0ml、25.0ml.

A.4.3 微量滴定管：5ml，最小刻度為0.02ml: 10ml，最小刻度為0.05ml.

A.4.4 天平：感量為0.01g以上。

A.4.5 振盪器：往返式，震盪頻率為100次/min.

A.4.6 粉碎機：錘式旋風磨，具有風門可調和自清理功能，以避免樣品殘留和出樣管堵塞。在粉碎樣品時，磨膛不能發熱。

A.4.7 電動粉篩：按GB/T 5507要求。

A.4.8 玻璃短頸漏斗。

A.4.9 中速定性濾紙。

A.4.10 錐形瓶：150ml.

A.5 試樣制備

取混合均勻樣品約80~100g，用錘式旋風磨粉碎，要求粉碎細度能一次性達95%以上過CQ16（相當於40目）篩，粉碎樣品充分混合後（篩上、篩下的全部篩分范圍樣品）裝入磨口瓶中備用。

註：1：按GB/T 5507檢驗樣品粉碎細度，使用其它類型粉碎機可以達到細度要求，粉碎樣品也只能選用錘式旋風磨。一次粉碎達不到細度要求的，該錘式旋風磨不能使用。

註：2：粉碎樣品時，應按照設備說明書要求，合理調節風門大小，並控制進樣量，防止和減少出料管留存樣品，未必免出料管堵塞，減少磨膛發熱，引起樣品中脂肪酸值的變化，每粉碎10個樣品應將出料管拆下清理。

註：3：制備耗的樣品應盡快完成測定，如需較長時間存放，應存放在冰箱中，全部過程不得超過24h。

A.6 分析步驟

A.6.1 試樣處理

稱取制備試樣約10g，精確到0.01g，於250ml具塞磨口錐形瓶中，並用移液管准確加入50.0ml無水乙醇（A3.1）置往返式震盪器上振搖30min,震盪頻率為100次/min。靜置1~2min，在玻璃漏斗中放入折疊式的濾紙過濾，並加蓋濾紙。棄去最初幾滴濾液，收集濾液25ml以上。

A.6.2 測定

精確移取25.0ml濾液於150ml錐形瓶中，加50ml不含CO2的蒸餾水，滴加3~4滴酚酞-乙醇指示劑後，用0.01mol/L的氫氧化鉀—95%乙醇標准滴定溶液（A3.4.3）滴定至呈微紅色，30s不消褪為止。記下耗用的氫氧化鉀—95%乙醇溶液體積（V1）。

註：樣品提取後一定要及時滴定；滴定應在散射陽光或日光型日光燈下對著光源方向進行；提取液顏色較深，滴定終點不易判定時，可用一已加入去CO2蒸餾水後尚未滴定的提取液作參照，當被滴定液顏色與參照相比有色差時，即可視為已到滴定終點。若上述參照比色法，仍無法准確判定滴定終點時，可在濾紙錐頭放入0.5g粉末活性炭，褪色後滴定。

A.6.3 空白試驗

取25.0ml無水乙醇於150ml錐形瓶中，加50ml不含CO2的蒸餾水，滴加3~4滴酚酞-乙醇指示劑，用0.01mol/L的氫氧化鉀—95%乙醇溶液滴定至成微紅色，30s不消褪為止。記下耗用的氫氧化鉀—95%乙醇溶液體積（V0）.

A.7 結果的計算和表述

A.7.1 脂肪酸值已中和100g干物質試樣中游離脂肪酸值所需氫氧化鉀毫克數表示。按式（2）計算：

50 100

脂肪酸酯（KOHmg/100g干基）=（V1—V0）×56.1×———×—————×100

25 m(100—ω)

11220×（V1—V0）×C 100

=————————————×—————……….（2）

m 100—ω

式（2）中：

V1——滴定試樣所耗氫氧化鉀—95%乙醇溶液體積，mL；

V0——滴定空白所耗氫氧化鉀—95%乙醇溶液體積，mL；

C——氫氧化鉀-95%乙醇溶液的准確濃度，mol/L；

50——提取式樣用無水乙醇的體積，mL；

25——用於滴定的濾液的體積，mL；

100——換算為100g（干）試樣的質量，g；

m——試樣的質量，g；

ω——試樣水百分數，即每100g試樣中含水分的質量，g；

註：用測定脂肪酸值的同一粉碎樣品，按GB/T 5497中105℃恆重法測定樣品水分含量，計算脂肪酸值干基結果。此水分含量結果不得作為樣品水分含量結果報告。

A.7.2 結果表示

每份試樣取兩個平行樣進行測定，以其算術平均值為測定結果，計算結果保留小數點最後一位數。

A.8 重復性

同一分析者對同一試樣同時進行兩次測定，結果差值不超過2mgKOH/100g.

『玖』 國標中橄欖油油脂酸價的測定方案

油脂中的游離脂肪酸與KOH發生中和反應，從KOH標准溶液消耗量可計算出遊離脂肪酸的量，反應式如下： RCOOH+KOH——-RCOOK+H2O

酸價是脂肪中游離脂肪酸含量的標志，脂肪在長期保藏過程中，由於微生物、酶和熱的作用發生緩慢水解，產生游離脂肪酸。而脂肪的質量與其中游離脂肪酸的含量有關。一般常用酸價作為衡量標准之一。在脂肪生產的條件下，酸價可作為水解程度的指標，在其保藏的條件下，則可作為酸敗的指標。酸價越小，說明油脂質量越好，新鮮度和精煉程度越好。

它的大小不僅是衡量毛油和精油品質的一項重要指標，而且也是計算酸價煉耗比這項主要技術經濟指標的依據。而毛油酸價則是煉油車間在鹼煉操作過程中計算加鹼量、鹼液濃度的依據。

在一般情況下，酸價和過氧化值略有升高不會對人體的健康產生損害。但如果酸價過高，則會導致人體腸胃不適、腹瀉並損害肝臟。
測定方法

滴定法（國標法）
GB/T一5530—2005規定了測定動植物油脂酸度的方法包括熱乙醇測定法、冷溶劑測定法和電位滴定法，其中熱乙醇測定法為參考標准法，冷溶劑法只適用於淺色油脂，電位滴定法是利用pH計判斷滴定終點，然後根據滴定所需氫氧化鉀的量計算油脂酸值。滴定法的優點是簡單、易行，無需特殊的儀器設備和化學試劑，但是該法具有如下的局限性：

（1）難以判別指示劑顏色的微弱變化而導致的測定誤差大，尤其是在顏色較深或渾濁的油脂中，個體間終點判斷差異增大；

（2）所需油脂樣品數量大，中和滴定所耗費時間長；

（3）檢測低酸價油脂時，其靈敏度和精確度較低；

（4）該法所需化學試劑與葯品多，需要繁瑣的溶液配製，酸鹼滴定程序，難以實現現場快速檢測的要求。

試紙法
該法的原理是利用食用油酸敗所產生的游離脂肪酸與試紙上的葯劑發生顯色反應，然後根據試紙的顏色變化情況與標準的比色塊比較，從而確定食用油樣品酸敗的程度。

楊漓等開發了一種試紙比色快速法測定食用油酸價，該法利用食用油脂酸敗所產生的游離脂肪酸與試紙中的pH試劑發生顯色反應，試紙的顏色變化反映了食用油的酸價變化，但該試紙法存在穩定性差、誤差稍大的缺點，一般來說只適用於定性或半定量的檢測。所以還需要在提高酸價測試試紙的均勻性和穩定性方面進行研究和改進，提高其分析測試的精確度和穩定性，該法在食用油酸敗程度的快速檢測、現場檢測方面具有很大的發展潛力。

比色法
該法將有機溶劑（異辛烷），表面活性劑[雙一（2一乙基己基）磺基丁二酸鈉]和少量水以一定比例混合形成光學透明的穩定反膠團體系，將酚紅溶於反膠團pH=9的水相中。酚紅在pKl等於7．8時，在鹼性介質中顯紅色，其水溶液於558nm處有最大吸收，游離脂肪酸含量通過標准曲線計算得到，該法靈敏度高、測定速度快，適合測定脂肪酸含量低的試樣及需要快速測定大批樣品的場合。

色譜法
該法首先利用乙醇等溶劑分析油脂中的游離脂肪酸，由於脂肪酸一般極性較強，揮發性低，熱穩定性差，所以一般先用KOH/甲醇將其轉化成相應的衍生物脂肪酸甲酯，從而降低其極性，增加其熱穩定性，然後用Agilent 4890D氣相色譜儀進行分析，使用FID檢測器，其回收率在89%一109%。該法試劑用量少，適合於大批量的樣品測定，但氣相色譜法需要標准品作對照，該法更適合測定試樣中單個脂肪酸的含量和脂肪酸組分。

近紅外光譜法
Chen Man等用0．15%（w/w）酯酶於印℃恆溫水浴下酶解天然棕櫚油，配製成不同游離脂肪酸濃度梯度的棕櫚油，利用近紅外光譜掃描，由多元線性回歸創建校正模型，即可得出棕櫚油中游離脂肪酸含量此法測定速度較快，總分析時間為5min，環境溫和。

Ahmed A1一Alawi等開發了一種傅里葉變換紅外光譜法（F1皿），快速准確測定食用油中游離脂肪酸的含量，該法的可重復性好，與傳統的滴定法具有良好的擬合性，雖然近紅外測定法具有諸多優點，但儀器價格昂貴，需要運用化學計量學方法建立標准樣品的光譜特徵與測定成分含量之間的數學模型，該法在食用油酸價的測定方面，應用文獻較少。

電位滴定法
電位滴定法是一種經典的分析方法，具有設備簡單、操作簡便、精確度高等優點。自20世紀60年代以來，離子選擇電極的迅速發展為電位滴定提供了一批良好的指示電極，提高了靈敏度和選擇性。電位滴定法測定酸度或酸價的准確度比一般的滴定法高，對有色溶液、混濁溶液或沒有合適指示劑判斷終點的滴定分析較為適宜。

其測定原理是將指示電極（玻璃電極）和參比電極（甘汞電極）或復合電極插在油樣溶液中組成一個原電池，其電動勢大小與溶液的氫離子濃度大小有關。測定酸價時，在用標准鹼液滴定油樣溶液的過程中，用pH酸度計不斷測量溶液的mV值（或pH值），隨著滴定劑的加入，由於發生中和反應，游離脂肪酸濃度不斷減少，因而指示電極電位相應變化，等到滴定終點附近時，指示電極電位突躍，測得的mV（或pH值）產生突躍變化，那麼，由測得的mV值（或pH值）與滴定消耗鹼液的體積，作出滴定曲線，就可找出滴定終點對應的鹼液體積，計算出酸價值。

『拾』 總揮發性脂肪酸的測定方法

揮發性脂肪酸（VFA）的測定
揮發性脂肪酸是厭氧消化過程的重要中間產物，甲烷菌主要利用VFA形成甲烷，只有少部分甲烷由CO 2和H 2生成。但CO 2和H 2生成也經過高分子有機物形成VFA的中間過程。由此看來，形成甲烷的過程離不開VFA的形成，但是VFA在厭氧反應器中的積累能反映出甲烷菌的不活躍狀態或反應器操作條件的惡化，較高的VFA（例如乙酸）濃度對甲烷菌有抑製作用。因此在反應器運行中，出水VFA用作重要的控制指標。
在VFA測定中，常進行VFA總量測定，其單位異mmol/L或換算為按乙酸計，以單位mg/L表示。
VFA包括甲酸，乙酸，丙酸，丁酸，戊酸，己酸以及它們的異構體。在運轉良好的高速厭氧反應器中，VFA中乙酸可佔有很高的比例，但是當反應器運行狀態不好時，丙，丁酸濃度會上升。
滴定法分析
1． 原理：將廢水以磷酸酸化後，從中蒸發出揮發性脂肪酸，再以酚酞為指示劑用NaOH溶液滴定餾出液。廢水中的氨態氮可能對測定形成干擾，因此應當首先在鹼性條件下蒸發出氨態氮。
2． 葯品
1) 10% NaOH 溶液；
2) NAOH標准溶液，0.1000mol/L;
3) 10%磷酸溶液，取70ml密度1.7g/cm3的磷酸用水稀釋至1L;
酚酞指示劑，1%的乙醇溶液。
3． 測定步驟
蒸餾瓶中放入50ml待測廢水，其VFA含量不超過30mmol.放入幾滴酚酞指示劑。
加入10% NaOH溶液，使溶解呈鹼性，並使NaOH略過量。
蒸餾至蒸餾瓶中剩餘液體為50~60ml為止。
用蒸餾水將蒸餾瓶中的剩餘液體稀釋至原來體積，用10ml 10%的磷酸酸化，在接收瓶中放入10ml蒸餾水並使接收瓶與蒸餾瓶上的冷凝管連接，導入管應浸入接收瓶的液面以下。蒸餾至瓶中液體為15~20ml為止。待蒸餾瓶冷卻以後，加入50ml蒸餾水再次蒸餾，至10~20ml液體為止。
加入10滴酚酞，用NaOH標准溶液滴定至淡粉色不消失為止。
4． 計算
揮發性脂肪酸含量計算如下：
VFA=V (NaOH)*C*1000/Vs (mmol/L)
式中：V(NaOH)-----滴定消耗的NaOH標准溶液的體積，ml;
c ------ 滴定消耗的NaOH標准溶液的准確濃度，mol/L;
Vs--------被測廢水水樣的體積，ml.