『壹』 影響高效液相色譜組分保留時間因素
色譜柱類型，這是最關鍵的因素，關繫到分離效率的好壞，也關乎各個組分的保留時間；
流動相組成，改變流動相組成，就可以改變流動相的極性(正相、反相色譜)或者流動相的離子比例（離子色譜），從而有效改善不同組分的保留時間；
流動相流速，一般在保證分離度的前提下，流動相流速越快，保留時間越短；
流動相中含鹽量，對於某些有機鹼或者有機酸來說，調變流動相中含鹽量可以有效改變分離效率，從而改變保留時間；
流動相溫度，溫度越高，保留時間提前。
『貳』 操做液相色譜時影響保留時間的變化的因素有哪些
影響液相色譜保留時間的因素：
1、流動相的比例與極性。對於不同的柱子，分離度和保留時間往往都會有點差別，所以在操作的時候：a、可以適當調整流動相的比列，如甲醇—水（90:10），如分離效果與保留時間延長，可以調整88:12或者92:8或者95:5等。b、有時候還需要更換流動相的組成，甲醇就可以換成乙腈，看具體的實際操作而定。
2、柱子與柱溫。不同的柱子保留時間會有所差別，主要是載體的吸附性和固定液的純度不同，但保留時間一般不會相差太大，可以根據對照品或者標准品的保留時間指定。柱溫在HPLC操作時，一般就調整到室溫或者30度。
3、流速。流速的大小，液相色譜一般調整在0.8mL/min或者1.0mL/min。
4、進樣量。進樣量大，保留時間往往會延長。
5、輸液系統的壓力，當高壓流動相通過層析柱時，可降低樣品在柱中的擴散效應，可加快其在柱中的移動速度，保留時間將會縮短。
具體的影響因素還要在實際操作中慢慢考察，經過調整後才可以的到較好的色譜條件。
『叄』 液相色譜的保留時間總是不穩定，該怎麼解決
⑴溫度控制不好，向前或向後單向漂移，解決方法是採用恆溫裝置，保持柱溫恆定。
⑵流動相組成發生變化，向前或向後單向漂移，解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等。
⑶流動相未平衡好（如緩沖溶液或離子對試劑，尤其是低濃度的鹽溶液），向前或向後單向漂移，需對柱子進行更長時間的平衡。
⑷泵或者管路中有氣泡，前後漂移，可通過排氣等將氣泡趕出。
⑸泵單向閥中的寶石球磨損，造成流動相倒流，壓力不穩定，保留時間前後漂移。解決辦法是更換部件。
⑹泵比例閥控制失靈，不同流路流動相比例不斷變化，保留時間前後漂移。解決方法是更換部件。
⑺泵活塞桿密封墊老化，流動相滲漏。解決辦法是換密封墊。
⑻在線混合器混合能力變差，不接梯度測試混合能力，並同手工配置流動相比較。
⑼系統管路有堵塞，引起壓力不穩，導致保留時間漂移。
⑽吸濾頭堵塞，流動相抽取受阻。清洗或更換吸濾頭。
⑾色譜柱樣品超載，解決辦法是減少進樣量。
⑿色譜柱鍵合的固定相流失，注意流動相pH值在容許范圍。
⒀硅膠填料的位點被活化，使用可修飾流動相，加三乙胺或使用鹼滅活柱等。
『肆』 高效液相色譜分析法中如果組分保留時間太長，可採取什麼措施調節
可以適當提高流速，來縮短目標物被固定相吸附的保留時間。也可以改變一下流動相的比例或梯度洗脫的比例，通過調整流動相的極性來縮短目標物被固定相的吸附時間。
『伍』 液相色譜中如何調節樣品組分的保留時間，原理是什麼
估計你做的是反相HPLC吧？如果是梯度洗脫，可以從這幾方面來考慮：
1. 柱子，很多人覺得應該先考慮流動相，但實際上柱子是必須首先考慮的一個因素。一個色譜條件在不同的柱子上都能重現的話，方法的耐用性也就比較理想了。柱子要考慮的因素有，粒徑、表面孔徑、碳載量、鍵合方式、封端方式等，簡單點，多換幾家品牌。
2. 流動相的組成和改性劑，這個不用多說了。
3. 梯度變化率，在出峰的時間點減慢梯度變化速度，要注意不同的系統梯度是有不同的滯後時間的。
4. 柱溫。
5. 樣品溶劑，盡量接近梯度起點。
最後補充一個：減小柱外效應。