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梅里埃快速無菌檢測方法

發布時間:2022-08-30 15:18:02

⑴ 接種10u1無細菌生長是什麼意思

血培養儀器報陽性, 培養卻不見細菌;血培養儀器報陽性,塗片培養見細菌,卻不是菌血症,您見過嗎?

案例一:

血培養儀器上同一時間43個標本同時報陽性,經過逐個查看發現:這43個血培養瓶報陽的時間段不同,生長曲線平緩,曲線上報陽性點有凸起,凸起矮且短,曲線過凸起點回到原來水平,無明顯對數生長期波峰現象,如圖1示,出現大量曲線大致相同的情況,首先考慮是系統誤差引起,那麼到底是什麼引起呢?溫度?電源不穩定?查看室溫是18度,符合血培養儀器室溫要求范圍(15-25度),難道是電源?從夜班同事那裡得知昨晚有短暫斷電情況,心中更加確定是假陽性,但為了結果准確性,我選擇對標本進行盲轉,我特地選20個生長曲線凸起較高的培養瓶進行盲轉,按要求及時轉種至血瓊脂、巧克力瓊脂、麥康凱瓊脂,將血瓊脂、巧克力瓊脂、麥康凱瓊脂置5%CO2培養箱進行培養。同時對這20個陽性瓶血液進行塗片、革蘭染色鏡檢,均未發現細菌。培養24 h後、48h後觀察均未有細菌生長,經過逐一排查最終確定為電源不穩定引起的假陽性,結果報告為陰性。

圖一

案例二:

血培養儀器上有一個血培養瓶報陽性,生長曲線出現明顯波峰,如圖二示。按要求對陽性血培養瓶進行轉種培養,同時塗片染色鏡檢,但均未找到細菌,轉種培養24h,48h,均未有細菌生長,這又是為什麼呢?有明顯對數生長期波峰現象,卻找不到細菌?帶著疑惑我迅速查閱該病人的其他檢查及病歷,發現其血常規結果WBC:329.41×109/L RBC:2.41×1012/L,HBG:74g/L,PLT:60×109/L,臨床診斷為慢性粒細胞白血病,原來是WBC數太高,細胞呼吸代謝產生大量的CO2,而我們科室使用法國生物梅里埃公司BACT/ALERT 3D 120培養儀檢測原理正是與CO2產量有很大關聯,BACT/ALERT 3D 120系統採用自動搜集整理和監測系統,其血培養瓶底部有特殊的CO2感應器 ,有半滲透性薄膜將培養基與感應器隔離 。系統則利用細菌生長產生的代謝產物 CO2 滲透至感應器 ,pH 改變使其顏色改變的原理進行連續檢測,本案例是血液中大量WBC呼吸代謝產生CO2過多導致儀器報陽性反應,可見血培養儀器報陽性反應同時出現明顯波峰曲線的情況不一定就是菌血症。

圖二

案例三:

血培養儀器上有一個血瓶報陽性,生長曲線在培養約72h時出現明顯波峰,如圖三示,該血培養瓶塗片染色鏡檢找到革蘭陽性球菌,培養24h後血平板上見圓形凸起、濕潤、黃色菌落,經ATB細菌鑒定儀鑒定為藤黃微球菌,該菌分布於空氣、土壤、水及動植物體表,是條件致病菌,疑為污染菌,在郭健蓮研究[1]中提到病原菌組陽性報警時間為(13.86±8.19)h,污染組的報陽時間(40.72 ±20.96)h,該細菌報陽性時間約為培養72h,可見污染的可能性大,聯系臨床了解到這位患者是腦出血病人,未有發熱,寒戰的情況,患者各項感染指標均未異常,醫生不排除污染的可能性,重新抽雙側雙瓶再次進行培養,7天後無細菌真菌生長,塗片染色鏡檢均未找到細菌、真菌。

圖三

總結:

血培養是診斷菌血症和敗血症的重要依據,明確病原菌對臨床針對性使用抗生素十分重要,在朱成賓[2]研究中發現在3610份血培養標本中,發現7例假陽性,佔1.7%,因此對血培養陽性報告必須謹慎,對真假陽性應加以鑒別。導致假陽性的主要因素有①血培養儀器環境的改變,實驗室溫度變化較大,儀器電壓不穩定時,會造成血培養生長曲線的變化而導致儀器報陽性反應。②血液異常成分大量增多,見於白血病異常WBC數量大量升高,惡性腫瘤患者惡性腫瘤細胞升高,嚴重感染者WBC大量升高等引起的新陳代謝旺盛,釋放出大量CO2,導致儀器報陽性反應,在李超[3]研究的26例假陽性結果各種疾病的分布中,白血病佔42.31%,惡性腫瘤佔11.54%,嚴重感染佔15.38%。③血培養污染,在吳增斌[4]研究中發現血培養假陽性的根本原因是血培養的污染,中心靜脈導管和血管植入物的普遍應用使血培養的污染更為常態,同時標本不規范採集也是常見原因,見於采血量過多導致血瓶內白細胞富集,成人瓶采血量超過10ml,兒童瓶采血量超過4ml,采血消毒時間短,皮膚表面細菌污染血液,導致儀器報陽性反應。④其他特殊病人,如糖尿病酮症酸中毒,血液中含有大量酸式鹽超出培養液中預置緩沖系統的緩沖能力,從而使瓶內液體的PH值發生變化,導致假陽性。

結語:

假陽性結果的出現將會導致濫用抗生素,增加細菌的耐葯性,因此辨別真假血培養陽性應引起重視,如何保證血培養質量辨別假陽性瓶呢?結合自己工作經驗和查閱相關文獻總結有以下幾點:①保持血培養環境穩定,實驗室溫度相對恆定,室溫保持在15-25℃,儀器電壓維持穩定,實驗室應配置穩壓電源,避免連接大功率的電器。②儀器報陽性反應的血培養瓶首先觀察瓶底顏色和生長曲線以及儀器報陽性的時間,同時要轉種,塗片染色鏡檢找細菌。這5方面相結合分析,如瓶底顏色變黃,生長曲線有對數生長期明顯波峰提示有細菌生長,報警時間為(13.86±8.19)h疑為致病菌,報警時間在(40.72 ±20.96)h疑為污染菌,對鑒定疑為污染菌應及時與臨床醫生聯系是否檢驗結果與患者臨床症狀相符,必要時重新抽血復查鑒別污染菌 ,如瓶底顏色不變,生長曲線上連續監測點有缺失或不規則波動見於儀器斷電電流不穩定。③規范血液標本無菌採集,確定採集部位用70%的酒精擦拭靜脈穿刺點至少30秒,培養瓶的瓶蓋用70%的酒精消毒,接種前乾燥1分鍾④合理應用血培養:不符合血培養指征時不抽血培養,對疑似血流感染的患者進行血培養,針對性做血培養,以提高血培養的陽性預測值,降低因污染而帶來的資源浪費和患者醫療開支。

血培養陽性是致病菌還是污染菌,目前還沒有金標准,控制好各個環節的質量,嚴格審核好每一項檢驗結果,注重實驗室與臨床密切溝通,檢驗結果與患者症狀相結合是有效的鑒別方法。練就火眼金睛,發准確的檢驗報告,為臨床提供准確有價值的信息。

⑵ 有關大腸桿菌、金色葡萄糖球菌等有關醫療監測的檢測指標和方法啊

檢測原理:
大腸菌群是一群能發酵乳糖、產酸產氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌,該菌主要來源於人畜糞便,故以此作為糞便污染指標來評價食品的衛生質量,推斷食品中有否污染腸道致病菌的可能。食品中的大腸菌群數系以100ml(g)檢樣內大腸菌群最可能數(MPN)表示。
2.儀器設備與器具:
2.1 恆溫培養箱:36±1℃。
2.2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
2.3 接種針。
2.4 顯微鏡。
2.5 超凈工作台。
2.6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
2.7 天平:感量0.01g。
2.8 滅菌釜。
2.9 培養皿(直徑為90mm)、試管,經121℃、30分鍾滅菌。
2.10試管夾、酒精燈、秒錶、載玻片 3.培養基及試劑:
3.1 乳糖膽鹽發酵管:按照製造廠家使用說明進行配製,滅菌。
3.2 伊紅美蘭瓊脂平板: 按照製造廠家使用說明進行配製,滅菌。
3.3 乳糖發酵管: 按照製造廠家使用說明進行配製,滅菌。
3.4 革蘭氏染色液。
3.4.1 結晶紫染色液:
結晶紫 1g
95%乙醇 20ml
1%草酸銨水溶液 80ml
將結晶紫溶解於乙醇中,然後與草酸銨溶液混合。
3.4.2 革蘭氏碘液:
碘 1g
碘化鉀 2g
蒸餾水 300ml
將碘與碘化鉀先進行混合,加入蒸餾水少許,充分振搖,待完全溶解後,再加蒸餾水至300 ml。
3.4.3 沙黃復染液:
沙黃 0.25g
95%乙醇 10ml
蒸餾水 90ml
將沙黃溶解於乙醇中,然後用蒸餾水稀釋。
3.5 生理鹽水。
4.檢驗程序:
檢樣

稀釋

乳糖膽鹽發酵管,36±1℃,24±2hr

↓ ↓
不產氣 產氣
↓ ↓
大腸菌群陰性 伊紅美蘭瓊脂平板,36±1℃,24±2hr

報告 ↓ ↓
革蘭氏染色 乳糖發酵管,36±1℃,24±2hr

↓ ↓ ↓ ↓
G+ G-,無芽孢桿菌 產氣 不產氣
↓ ↓
大腸菌群陰性 大腸菌群陰性
↓ ↓ ↓
報告 大腸菌群陽性 報告

5.測定方法:
5.1 檢樣稀釋:
5.1.1 以無菌操作將檢樣25ml(或25g)放於含有225ml滅菌生理鹽水的滅菌塑料燒杯中,經充分振搖成1:10均勻稀釋液。
5.1.2 用1ml滅菌吸管吸取1:10稀釋液1ml,注入含有9ml滅菌生理鹽水的 試管中,振搖成1:100稀釋液。
5.1.3 重復5.1.2的操作,使成1:1000稀釋液。
5.2乳糖膽鹽發酵試驗:根據食品衛生標准要求或對檢樣污染情況的估計,選擇二個稀釋度,每一稀釋度接種3管,接種量在1ml以上者,用雙料乳糖膽鹽發酵管。1ml及1ml以下者,用單料乳糖膽鹽發酵管。然後置於36±1 ℃培
養箱內,培養24±2hr,如所有乳糖膽鹽發酵管都不產氣,則可報告為大腸菌
群陰性;如有產氣者,則可按以下程序進行。
5.3分離培養:將產氣的發酵管分別接種於伊紅美蘭瓊脂平板上,置36±1℃溫箱內,培養24hr後取出,觀察菌落形態,並作革蘭氏染色。
5.4證實試驗:在上述平板上,挑取可疑大腸菌群菌落1~2個進行革蘭氏染色同時接種乳糖發酵管,置於36±1℃溫箱內培養24±2hr,觀察產氣情況。乳糖發酵管產氣,革蘭氏染色為陰性的無芽孢桿菌,即可報告為大腸菌群陽性。
5.5報告:根據證實為大腸菌群陽性的管數,查MPN檢索表,報告每100ml(g)大腸菌群的最可能數。
食品中金黃葡萄球菌的檢測方法
金黃色葡萄球菌是一種引起人類和動物化膿感染的重要致病菌,也是造成人類食物中毒的常見致病菌之一。本菌廣泛分布於自然界,如空氣、土壤、水及其它環境中。在人類和動物的皮膚及外界相通的腔道中,也經常有本菌存在。據報導,在正常人群中的帶菌率可達30%~80%,其中皮膚帶菌率為8~22%,鼻腔和咽喉部等上呼吸道的帶菌率在40~50%以上,因此其可通過各種途徑和方式,尤其是經工作人員的手和上呼吸道而污染食品。由於致病金黃葡萄球菌能產生腸毒素,故一旦細菌污染食品,並在合適的溫度環境下,細菌可以大量繁殖並產生腸毒素,從而引起消費者食物中毒。
由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒,在世界各國都極為普遍。特別是在北美及歐洲等地區發病率更高。在上述這些國家中,每年有金黃色葡萄球菌引起的食物中毒病例,僅次於沙門氏菌,而在細菌性食物中毒病例排到第2~3位,有此而造成的經濟損失也相當慘重,在我國由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒病例也時有報導,所以目前世界各國都把金黃色葡萄球菌列為食品衛生的法定檢測項目。
我國對金黃色葡萄球菌目前採用的方法是以國家標准GB.4789-10-84及檢驗檢疫系統行業標准SN.0172-92作為依據。整個檢測過程獲得最終結果須時5天左右,既費時又費力,並造成貨物積壓,也影響貨物的及時出運,並使貨主的倉儲成本提高,造成較大的經濟損失。
多年來很多食品微生物實驗室都在探索和尋找一些准確性高,並快速的檢測方法,最近我們分別從美國3M公司和法國生物梅里埃公司獲得兩種快速檢測致病性金黃色葡萄球菌的培養基,其名稱為:
① Petrifilm RSA. Count Plate(由美國3M公司研製生產),是一種薄膜型快速檢測金黃色葡萄球菌的計數平板。
② Baird-parker + RPF Agar.(由法國生物梅里埃公司研製生產的用Baird-Parker瓊脂加免血漿纖維蛋白原的金黃色葡萄球菌檢測計數平板)。
原理:Petrifilm. RSA. 測試薄膜是由二部分組成。第一部分是由黃金色葡萄球菌培養基片,此培養基中含有經修正的Barid-Parker,營養成分加上以冷水可溶解的膠質。第二部分是一種耐熱核酸酶(TNase)反應片,含有DNA及甲苯胺蘭 ( Toluidine Blue - O )及四唑指示劑 (Tetraeolium)。此指示劑有助於菌落的計數及確定葡萄球菌耐熱核酸酶的存在。
耐熱去氧核糖核酸(deoxyribonulcas Dnase)為產毒金葡菌之典型特徵,此酶非常耐熱,在100℃加熱30min,不易喪失活性,在130℃之下,其D值為16.6min,此酶之分子量為16800,等電點PH為9.6,耐熱去氧核糖酸與檢測血漿凝固酶相似,是一種鑒定金黃色葡萄球菌的方法,在Petrifilm. RSA 檢測片上,耐熱DNA酶反應看起來,呈粉紅色環帶包圍著一個紅色或蘭色的菌落。
Petrifilm.RSA檢測片,必須與Peyrifilm耐熱核酸酶反應片一起使用,單獨使用將不會顯示菌落,因為具有輔助計數菌落的指示劑是在反應片上,而不是在Petrifilm.RSA檢測片上。
Baird-parker + RPF agar,這一培養基中含有豐富的營養成分,其中以氯化鋰代替亞碲酸鉀,使菌落顏色呈黑色,RPF補充有兔血漿和牛纖維蛋白原,以便檢測凝固酶活力,胰酶可以抑制全部或部分圍繞凝固酶陽性菌落周圍沉澱暈環纖維蛋白的溶解,因此凡存在血漿凝固酶陽性的金黃色葡萄球菌,將在培養基中呈現有暈環的黑色菌落,即可確認,並作計數。

實驗實施
材料和方法:
本次實驗採用以下3種試劑:
1. 美國3M公司提供的Petrifilm. Rapid. S. aureus Count Plate.
2. 法國生物~梅里埃公司提供的Baird-Parker + RPF agar .
3. 實驗室自配Baird-Park瓊脂(英國Oxoid)及新鮮兔血漿。

菌種來自美國菌種保存中心(America TyP Culture Collection)。金黃色葡萄球菌共10株菌株,其菌號分別為:
ATCC 27661 ATCC 27664 ATCC 13565 ATCC 51704
ATCC(K) 12600 ATCC(R) 65389 ATCC 25923 ATCC 29213
ATCC 8095 ATCC 12598
非金黃色葡萄球菌菌種5株,其菌號分別為:
ATCC 51813 (大腸桿菌)、ATCC 624 (無乳鏈球菌)、ATCC 51816 (陰溝腸桿菌)、ATCC 6051 (枯草桿菌)、ATCC 49214 (腸炎沙門氏菌)、自然食品檢樣,任意購自市場。
本次實驗是以同一測試樣品經均質並通過無菌生理鹽水作10倍遞增稀釋後取1至2個稀釋度同時接種上述三種培養基作平行實驗,在取得最終結果後相互進行比對。
上述三種培養基的接種方法是按生產商所提供的使用說明進行操作,另外Baird-Parker Agar 培養基是按SN0172-92標准進行操作。
A、 本次實驗共測試已知標准菌種共15株,其中葡萄球菌10株,其他菌種5株(包括大腸桿菌、陰溝腸桿菌、腸炎沙門氏菌、枯草桿菌和無乳鏈球菌)。
B、 測試自然食品檢樣共101隻(其中包括肉11隻、肉類14隻、水產品17隻、牛奶25隻、蔬菜22隻、豆製品12隻)。

結果:
A、 被檢菌種10株,金黃色葡萄球菌在三種培養基上都能檢出生長情況良好,同一稀釋度的菌液,除個別菌株外在3種培養基計數檢測結果基本都在一個數量級上,無顯著差異。而5株非金黃色葡萄球菌的菌株在三種培養基上全部不能生長。
B、 自然食品檢樣共接種101隻,每一檢樣同一稀釋濃度分別同時種三種培養基,最終共檢出金黃色葡萄球菌45隻,佔全部檢樣的44.5%,其中Petrifilm RSA 檢出陽性結果為42隻,佔全部陽性檢樣的93.3%,Baird-Parker+RPF Agar. 檢出陽性結果26隻,佔全部陽性檢樣的57.7%。Baird-Parker. Agar 檢出陽性結果32隻,佔全部陽性檢樣的71.1%。

討論
1. 用15株標准菌在3種培養基中的檢測,10株金黃色葡萄球菌以同一濃度接種,結果生長良好,其最終計數基本一致,定位在同一數量級,5株非金黃色葡萄球菌接種上述三種培養基全部不長,說明上述三種培養基對金黃色葡萄球菌選擇良好。
2. 以101隻自然樣品同一均質稀釋液,同時接種三種培養基,從最終結果來看,對金黃色葡萄球菌的陽性檢出率為44.5%
3. 從檢測程序來年,Petrifilm. RSA及Baird-Parker+RPF. Agar. 都在樣品接種後28~30h觀察結果,並不必再做證實試驗,而如以Baird-Parker Agar檢測,須在接種後48h觀察平板,並挑取可疑菌落轉種到營養肉湯中,在經18-24h後做血漿凝固酶或耐熱DNA酶試驗進行證實,最終計數,前後約須80h。
4. 從本次試驗中觀察,使用上述三種培養基對食品中金黃色葡萄球菌含量的直接計數檢測,其樣品接種液的含量擬控制在100個/ml以內,比較容易分清並計數,如菌量過濃,則將會影響最後的讀數,因此對新送的被檢樣品,如在不了解污染的情況下一般必須要做2個以上的稀釋度,同時分別接種,才能獲得較為滿意的結果。
而在Baird-Parker+RPF Agar及Baird-Parker. Agar接種時必須將1ml樣液作三隻平板塗布(0.3、0.3、0.4ml)這樣就會造成手續繁瑣試劑消耗較大,但Baird-Parker. RPF. 培養基也可以1ml樣液作傾注培養,並作計數。
5. 在整個測試過程中,我們發現,按使用說明對Petrifilm. RSA. 及Barid-Parker+RPF. Agar,操作規定在接種24h後觀察結果,此時往往由於菌落長得經較小,特徵瓜不明顯,但如果繼續放置一夜以後金葡萄菌落特徵明顯,並可能會經第一天觀察數量有所增加,這樣可以提高檢測結果的可信度。
6. 由於對上述兩種培養基的試用期間我們尚未獲得供應商的報價,故無法測算每一樣品的測試成本價格。但可以予計上述兩面種快速檢測培養基的耗材費用要高於常規經典方法(Baird-Parker Agar)的費用。
7. 通過本次實驗,我們感到使用美國3M公司生產的Petrifilm. RSA Plate培養基和法國生物-梅利埃公司生產的Baird-Parker RPF. Agar培養基檢測中的金黃色葡萄球菌。可以比目前常規檢測方法時間可縮短一半。並可以明顯節省大量人力。這完全符合實驗室快速檢測的要求,尤其是對基層較簡陋的實驗室條件中,更顯其使用方便的優越性。

⑶ vitek全自動微生物鑒定系統出現slashline是什麼細菌

探討VITEK2Compact全自動微生物分析系統對無錫市常見12種食源性致病微生物金黃色葡萄球菌、蠟樣芽胞桿菌、變形桿菌、副溶血性弧菌、O139群霍亂弧菌、沙門菌、腸出血性大腸埃希菌(EHEC)O157︰H7、志賀菌、溶血性鏈球菌、單核細胞增生李斯特菌、空腸彎麴菌、小腸結腸炎耶爾森菌鑒定的准確性。[方法]按照VITEK2Compact全自動微生物分析系統儀器說明書中的標准操作流程進行。選擇法國生物梅里埃API系統、常規法作為參照,同時與PCR快速檢測方法進行比對,以驗證PCR快速檢測方法的符合性。[結果]從本試驗結果來看VITEK2Compact全自動微生物分析系統儀對無錫市常見12種食源性致病微生物的鑒定結果與API鑒定系統鑒定結果的總體符合率為99.6%(223/224),PCR快速檢測方法結果與API鑒定系統鑒定結果的總體符合率為97.3%(218/224)。[結論]VITEK2Compact全自動微生物分析系統儀對無錫市常見11種食源性致病微生物鑒定的准確性極好,但對革蘭陽性鏈球菌的鑒定還應結合細菌的其他生物學特性綜合評定。

⑷ 梅里埃微生物鑒定儀與杜邦的微生物快速測定儀有何別

梅里埃微生物鑒定儀:

一、 系統的功能
1. 細菌鑒定:ATB系統的鑒定資料庫源自於響譽全球的細菌鑒定金標准-API細菌鑒定系統,並將其20項生化反應增加到32項,這樣ATB系統的鑒定范圍更廣,鑒定準確性更高。ATB系統的鑒定資料庫有:
a.腸桿菌科細菌;
b.非發酵革蘭氏陰性桿菌;
c.葡萄球菌和微球菌;
d.鏈球菌和腸球菌;
e.酵母樣真菌;
f.厭氧菌等;
另外,本系統可以通過人工閱讀方式鑒定棒狀桿菌、彎麴菌、李斯特菌、奈瑟球菌和嗜血桿菌、革蘭氏陽性芽孢桿菌及乳酸桿菌等。鑒定的菌種在600以上。其中,腸桿菌科細菌、能快速生長的鏈球菌和腸球菌及厭氧菌有4小時就能出結果的快速鑒定試劑條。特別是厭氧菌鑒定試劑條,試劑條不用在厭氧環境中,而在普通的孵箱中4小時就能出結果。
2. 葯敏試驗:採用微量瓊脂稀釋法,不同的葯敏試劑條其抗生素的種類及相應葯物濃度符合NCCLS的抗生素選擇和臨界值判斷標准。幾乎所有的能在體外做葯敏試驗的致病菌都有其相應的葯敏試劑條。
如:a.尿道感染的腸桿菌科細菌;
b.非尿道性腸桿菌科細菌;
c.革蘭氏陰性桿菌(包括除假單胞菌和不動桿菌以外的非發酵菌);
d.葡萄球菌;
e.鏈球菌(包括肺炎鏈球菌和腸球菌);
f.奈瑟菌和嗜血桿菌;
g.酵母樣真菌;
h.假單胞菌和不動桿菌;
i. 厭氧菌等,
其中,腸桿菌科的致病菌(包括尿道感染的腸桿菌科細菌)和金黃色葡萄球菌利用快速的鑒定試劑(條)和相應的葯敏試驗條,在培養陽性的當天就能出鑒定和葯敏報告。
3. 讀數器可自動閱讀細菌鑒定和葯敏試劑條的結果。
4. 系統可解釋自動閱讀和人工閱讀的數據,並保存結果。
5. 隨時列印樣本管理資料和病人報告,並可隨時查詢。
6. 對儲存的結果可進行多種形式的統計分析並將統計結果列印出來。
7. 葯敏試驗報告敏感(S)、中界度(I)和 耐葯(R)結果並有專家系統進行審核。

杜邦的微生物快速測定儀:

產品綜述:

BAX® System 全自動病原微生物快速檢測系統以病原微生物獨特的基因序列為靶標,利用實時定量PCR(Real-time PCR)和多重核酸檢測(Multiplex PCR)結合的原理,對病原菌的多重靶標實現高靈敏性和高特異性的擴增及檢測,並針對各種食品、葯品和環境樣本的特點進行反應體系的優化以消除抑制並提高檢測性能,從而對樣品中目標微生物做出定性和定量檢測,相比傳統方法具有準確、快速和標准化的優勢。屢獲大獎的BAX® 系統為食品、制葯、第三方檢測、政府監管技術部門的用戶提供了一種快速簡便,同時又非常准確和標准化的食品、葯品和環境樣品的檢測手段。

產品特點:

超過20種病原菌全自動快速檢測,提供一站式采購體驗,包括:產志賀毒素致瀉大腸埃希氏菌(STEC)(包含致瀉大腸篩查試劑盒及6大血清型鑒定試劑盒),大腸埃希氏菌O157:H7,志賀氏菌,沙門氏菌,金黃色葡萄球菌,單增李斯特氏菌,李斯特屬,弧菌(副溶血、霍亂、創傷),彎曲桿菌(空腸、大腸、海鷗),克羅諾阪崎腸桿菌,黴菌和酵母等,以及不含探針和引物的開放試劑盒。
高靈敏度:檢測限可達增菌後104 cfu/mL(部分檢驗項目可低至103 cfu/mL)。
高特異性:引物和探針的雙重特異性設計確保包容性(Inclusivity)和排他性(Exclusivity)≥99%,在高於AOAC International食品微生物檢測指導法規要求的條件下,驗證的包容性和排他性結果均高達100%,並且具有理想的穩定性和重現性。
高效率:高通量和高並行性,可進行1-96孔的同批次檢測,多數檢測上機時間為1小時,並可實現單孔檢測多種目標微生物或同批次進行多個微生物項目檢測。
高穩定性(Robustness)和重現性(Reprocibility):標准化流程,最大程度避免主觀因素干擾和交叉污染。
無需核酸抽提即可上機檢測,操作簡便並減少污染風險。
專門為食品、葯品和環境樣本的檢測進行反應體系的優化,最大程度減少樣品對PCR反應的抑制和干擾。
葯片化試劑保質期為3年,更長的使用期,更省心的采購和庫存管理流程。
預裝IPC陽性質控內參,幫助正確判讀陰性結果。
自動化程度極高,操作簡單,標准化檢測程序內設,結果自動判讀,避免主觀因素。
原廠試劑盒及標准檢測法全部通過國際權威機構認證(AOAC International, AOAC Research Institute, AFNOR, NordVal etc.)和多國政府檢驗部門批准,獲得30個以上國際權威機構的認證認可,並收入中國國標GB/T 4789.36-2008 食品衛生微生物學檢驗大腸埃希氏菌 O157:H7檢測法,及行標SN/T 1869-2007 沙門氏菌,大腸埃希氏菌O157:H7,單增李斯特氏菌,克羅諾阪崎腸桿菌和空腸彎曲桿菌。

⑸ 快速檢測生化反應的成套細菌鑒定系統有哪些

1、API板條
API板條是法國梅里埃公司生產的一種快速微量的生化反應系統.
2、紙片法
紙片法已經列入了我們國家的國家標准,它是美國3M公司生產的產品。採用3M紙片可以鑒定菌落總數、大腸菌群計數、黴菌和酵母計數、沙門菌的鑒定以及金黃色葡萄球菌。由於紙片的價格比較昂貴,因而限制了在基層單位的應用。
3、選擇、鑒定用培養基法
它的原理是在培養基中加入特異性的生化反應底物、抗體、熒光反應底物、酶反應底物等,可使目標培養物的選擇、分離、鑒定一次性完成。主要包括以下幾個公司生產的顯色培養基
(1)首先就是法國科瑪嘉公司生產的科瑪嘉顯色培養基
沙門菌培養基:用於鑒別包括傷寒桿菌在內的沙門氏菌
李斯特菌培養基:用於分離和鑒定產單核李斯特菌
金黃色葡萄球菌培養基:用於金黃色葡萄球菌的鑒定和計數
O157:H7培養基:用於分離和鑒定大腸桿菌O-157
大腸桿菌培養基:用於大腸桿菌鑒定和計數
ECC培養基:用於大腸桿菌和大腸菌群的鑒定和計數
弧菌培養基:用於霍亂弧菌、副溶血弧菌的分離和鑒別
(2)法國生物梅里埃公司生產的BP+RPF,兔血漿+纖維蛋白原培養基,可以在24小時內鑒定金黃色葡萄球菌,這也是一種比較常用的顯色培養基。
(3)德國的Merk公司生產的chromocultColiformAgar培養基。大腸桿菌為墨綠色或者是大紅色的菌落,沙門菌為淡綠色至藍綠色菌落。檸檬酸桿菌和克雷伯菌為橙紅色至紅色菌落,其他腸道菌為無色菌落。

⑹ 龜頭炎怎麼

龜頭炎是龜頭粘膜的炎症,是常見的男性疾病。日常生活中,龜頭炎會引起諸多不適症狀,雖然危害很大,但患有龜頭炎也不必太緊張,只要科學施治、正規治療便可快速痊癒。那麼,那種方法治療好呢?什麼是龜頭炎?包皮龜頭炎的危害有哪些? 包皮龜頭炎是指包皮內板與陰莖頭的炎症。可因各種病原體感染、包皮垢刺激包皮和陰莖頭等因素引起。分為包皮炎和龜頭炎,有感染性的和非感染性的兩種類型,由於實際合並發作,所以臨床多稱為包皮龜頭炎。1、危害生殖系統健康:包皮龜頭炎易導致前列腺炎,睾丸炎,附睾炎已經輸精管等器官的炎症。假如不能及時有效治療,相互合並感染,對生殖健康造成很大的傷害。
2、導致泌尿系統疾病:包皮龜頭炎還易引起泌尿系統的上行感染,一般多見於膀胱炎,腎炎,腎盂腎炎等,尤其是慢性龜頭炎久治不愈者最輕易導致泌尿系統疾病,急性期發病處理不當可危機生命。3、可導致性功能障礙:包皮龜頭炎症期龜頭部性感應神經處於敏感期,加之炎症的損傷,使得在性糊口中易早泄,長期可導致陽痿的發生。 患上龜頭炎嚴重影響男性患者的正常的生活、工作和學習,患上龜頭炎應積極的採取治療措施,去正規的大醫院接受治療;目前,治療龜頭炎效果效果好、見效最快的方法是:基因晶元阻斷系統。基因晶元病原體檢測技術——快速精確檢測 基因晶元阻斷術運用國際先進的法國梅里埃公司金牌產品——基因晶元病菌檢測系統,該系統包括分子生物學基因檢測系統、DNA病菌檢測設備、DPP微生物培養等全套尖端設備,能夠精確的檢測出病原體DNA序列,定性定量的分析出病原體種類數量,為疾病的精確分型診治提供科學詳細的數據結果。基因晶元阻斷系統——針對基本,避免發作 鄭州博大泌尿外科醫院引進的基因晶元病原體檢測技術採用世界領先的DNA免疫激活治療方法,針對「病菌、病毒基因具有極強、極復雜的生物基因鏈」,通過葯敏性實驗,找到能破壞其復雜生物鏈的葯物分子,葯物治療的同時配合光導介入、磁能介入、微米波等國際高端男科治療設備,迅速殺滅病原體,激活增強白細胞吞噬功能及局部供氧,整體提高機體免疫力,使疾病得到全面的治療。基因晶元阻斷系統治療生殖感染的四大突破1、定量定性檢測,病毒精確分型 運用國際前沿的基因晶元病毒檢測系統、DPP微生物培養全面排查,精確檢測各類病毒細菌、真菌等病原體,避免誤診漏診。2、快速清除病毒,療效更有保障 根據致病菌的特點,將生物制劑、特效葯物直接作用於病灶處,在局部造成高濃度葯離子,能夠快速殺滅病毒,清除病毒產生的毒物,迅速消除病毒產生的症狀,具有見效快、療效可靠的優點。 3、阻斷基因生物鏈,避免再次發作 基因晶元阻斷系統能有效的干擾病毒的基因表達過程,破壞病毒的生物鏈,導致病毒無法復制,避免了病毒的再生。另外,從病毒基因控制病毒的發展態勢,有效的破壞了病毒感染途徑,直接阻斷和控制毒素發作和蔓延,從基本上保證了治療痊癒後不再發作。4、恢復生理功能,全面修復免疫機制 基因強化技術激發人體免疫細胞活性能力,修復受損細胞,調節人體內環境,在應用先進技術治療的同時,還很好的融合了中醫精華,採用中醫辨證施治理論,精選中草葯,科學配伍,既能從整體上提升免疫力,提高抗病能力,又能從局部促使病灶痊癒,修復受損的細胞組織,避免病毒反復發作,實現標本兼治。【溫馨提示】男科疾病大都為難於啟齒的「隱疾」,要提高群眾對疾病的辨別能力,一旦懷疑或發現異常,不應諱疾忌醫,養癰成患,看男性疾病,不要覺得不好意思。男人應該正確重視生殖健康,光明正大地到醫院咨詢和檢查。

⑺ 微生物快速檢測技術

1 即用型紙片法
3M公司的perrifilmTM Plate系列微生物測試片,可分別檢測菌落總數、大腸菌群計數、黴菌和酵母計數。由RCP Sci-entific Inc公司開發上市的Regdigel系列,除上述項目外還有檢測乳桿菌、沙門菌、葡萄球菌的產品 ,這兩個系列的產品
與傳統檢測方法之間的相關性非常好。
2、PCR 技術
4 基因探針技術
選擇、鑒定用培養基法
在培養基中加入特異性的生化反應底物、抗體、熒光反應
底物、酶反應底物等,可使目標培養物的選擇、分離、鑒定一次
性完成。如生物一梅里埃公司的BP + RPF (兔血漿+纖維蛋
白原)培養基,可在24 h內鑒定金黃色葡萄球菌[ 8 ] 。Merk公
司的chro2mocult Coliform Agar培養基上,大腸桿菌為墨綠色
至紫色菌落,沙門菌為淡綠色至藍綠色菌落。檸檬酸桿菌和
克雷伯桿菌為橙紅色至紅色菌落, 其他腸道菌為無色菌
落[ 9 ]。
5 ATP生物發光法是近年發展較快的一種用於食品生產加
工設備潔凈度檢測的快速檢測方法。利用ATP生物發光分
析技術和體細胞清除技術,測量細菌ATP和體細胞ATP, 細
菌ATP的量與細菌數成正比,用ATP生物發光分析技術檢測
肉類食品細菌污染狀況或食品器具的現場衛生學檢測,都能
夠達到快速適時的目標[
6、 細菌直接計數法
主要包括流式細胞儀( flow cytometry, FCM)和固相細胞
計數( solid phase cytometry, SPC)法。FCM通常以激光作為發
光源,經過聚焦整形後的光束垂直照射在樣品流上,被熒光染
色的細胞在激光束的照射下產生散射光和激發熒光。光散射
信號基本上反映了細胞體積的大小;熒光信號的強度則代表
了所測細胞膜表面抗原的強度或其核內物質的濃度,由此可
通過儀器檢測散射光信號和熒光信號來估計微生物的大小、
形狀和數量。流式細胞計數具有高度的敏感性,可同時對目
的菌進行定性和定量[ 18 ]。目前已經建立了細菌總數[ 19 ]、致
病性沙門菌、大腸埃希氏菌[ 20 ]等的FCM檢驗方法。固相細
胞計數可以在單個細胞水平對細菌進行快速檢測[ 21 ]。濾過
樣品後,存留的微生物在濾膜上進行熒游標記,採用激光掃描
設備自動計數。每個熒光點可直觀地由通過計算機驅動的流
動台連接到ChemScan上的落射熒光顯微鏡來檢測,尤其對於
生長緩慢的微生物,檢測用時短使該方法明顯優於傳統平板
計數法

⑻ 求一篇環境污染造成人類重大食物中毒事件的案例分析報告

2003年10月12日我市某學院的一食堂發生一起由下水
道滴漏污染餐具及食堂用具等,未及時清洗消毒引起多菌感
染的食物中毒, 144名在該食堂用餐的學生出現不同程度的中
毒症狀。經流行病學調查、臨床症狀分析和實驗室檢查證實
為多菌混合感染所致,由於誘發食物中毒的原因較特殊,其中
一些病原菌在國內少見報道,為此我們對其進行了較全面的
分析、鑒定,現將結果報告如下。
1 臨床資料
1·1 臨床症狀
144名食物中毒病人中均有腹痛、腹瀉症狀,其他為惡心
123人,佔85·4%;嘔吐98人,佔68·1%;發熱(體溫在38℃
左右)38人,佔26·4%。腹痛多為陣發性疼痛或絞痛,部位為
上腹部和臍周,腹瀉多為水樣便,以黃色水樣便為主,部分學
生有米泔樣及洗肉水樣便,腹瀉最多6次,最少2次。臨床診
斷為急性腸胃炎,病人經輸液和抗生素治療後1~3 d康復,無
死亡病例。
1·2 潛伏期
本次食物中毒潛伏期最短的為2·25 h,最長為31 h,平均
潛伏期10·15 h,發病曲線有高峰無餘波,符合細菌性食物中
毒發病曲線特徵。
2 流行病學調查
2·1 發病經過
該學院在校學生6 000多名,有教工和學生食堂5家。1
月12日發生食物中毒的學生食堂,在正常情況下去那裡就中
餐、晚餐的學生,據估計每天約有1 200餘名學生在該食堂就
餐。由於在校學生較多,學生就餐的食堂相對固定,但具體就
餐人數難以統計,粗略估計發病當天去該食堂就中餐的約有
500餘名學生,就晚餐的約有700餘名。首例病人出現在當晚
5點,晚7點到次日早7點為發病高峰,次日21點後未新增病
人,其間陸續有144人發生不同程度的腹瀉、腹痛、惡心、嘔吐
等中毒症狀,發病率約為12%。
2·2 現場情況
食堂的粗加工間葷、素食品未分池洗滌;餐廳和廚房未使
用防蠅設施,廚房切配區天花板、蒸飯區天花板下水管彎角、
熱灶烹飪區右上方天花板處均可見從二樓下水管道處滲漏的
水滴,垃圾容器未加蓋,待洗滌餐具容器雜亂堆放,引發原因
是二樓另一食堂於11日下午打掃衛生時,因下水管道堵塞捅
破了一樓食堂消毒間內上方下水道彎角,下水道中污水直接
滴入消毒間內的保潔櫃、餐具和其他容器,而一樓食堂人員未
對受污染的餐具、容器予以重新清洗和消毒。
2·3 中毒餐次分析
選擇不在該食堂用餐、無症狀的學生142名與中毒病人配
對作相對危險度(OR)分析,確定其中毒餐次,由於中餐和晚
餐的菜餚一樣,結果在該食堂吃中餐和晚餐的OR分別為
0·542(χ2=6·43,P<0·05)和2·487(χ2=7·14,P<0·01),暴
露組與非暴露組罹病率差異非常顯著性,結合平均潛伏期,推
算本次食物中毒的中毒餐次應為10月12日中餐和晚餐,無明
確的致病原因食物。
3 實驗室檢查
3·1 標本來源
採集81名中毒學生肛拭、3份大便、1份嘔吐物、10月12
日晚餐留樣菜餚14份、米飯1份、其它食品2份(生鹹肉、色拉
油各1份)和餐具15份,共117份樣品。
3·2 檢測方法及結果
檢樣按GB·4789 -1994[1]、全國臨床檢驗操作規程方
法[2]和文獻方法[3]進行食物中毒病原菌檢測,從84份病人糞
便中檢出副溶血弧菌7株,溶藻弧菌6株,威隆氣單胞菌6株,
非O1群霍亂弧菌2株、嗜水氣單胞菌2株,其中1人同時檢出
溶藻弧菌和威隆氣單胞菌。在14份菜餚中,筍烤排骨中檢出
副溶血弧菌;炒魚圓和清蒸鯿魚中檢出溶藻弧菌;帶豆炒方
腿、油燜筍、肉末海帶中檢出奇異變形桿菌;韭菜茭白絲炒河
蝦和青瓜炒蛋同時檢出溶藻弧菌和奇異變形桿菌, 1份米飯和
1份生鹹肉均檢出奇異變形桿菌,未檢出沙門菌、志賀菌、各種
致瀉性大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等,嘔吐物等未檢出沙門
菌、志賀菌、各種致瀉性大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、致病性氣
單胞菌、致病性弧菌等。
3·3 食物中毒菌株鑒定
從各選擇性平板上挑取的可疑菌落,分別用GNI+測試
卡,在細菌自動鑒定系統VITEK-AMS儀(梅里埃公司生產)
上進行細菌的鑒定,其鑒定百分率(% id)在92% ~99%之
間,有8株細菌定為副溶血弧菌, 11株細菌定為溶藻弧菌, 6株
細菌定為威隆氣單胞菌, 2株細菌定為非O1群霍亂弧菌、2株
細菌定為嗜水氣單胞菌, 7株細菌定為奇異變形桿菌。
3·4 葯敏試驗
用K-B法進行,葯敏紙片由杭州天和微生物試劑有限公
司提供,在效期內使用。受檢菌對氯黴素、丁安卡那、紅黴素、
萬古黴素、頭孢唑啉、復達欣、先鋒黴素Ⅴ、環丙沙星、氟哌酸、
強力黴素、菌必治、頭孢噻肟、慶大黴素均敏感,除嗜水氣單胞
菌和威隆氣單胞菌對青黴素和氨苄青黴素抗性外,其它菌株
對該兩種抗生素敏感。
3·5 毒力試驗
對8株副溶血弧菌, 11株溶藻弧菌, 6株威隆氣單胞菌、2
株非O1群霍亂弧菌和2株嗜水氣單胞菌進行小鼠急性毒性
試驗,結果腹腔注射副溶血弧菌肉湯培養物的小鼠,在6~7 h
內全部死亡,注射非O1群霍亂弧菌培養物的小鼠在24 h內全
部死亡;注射11株溶藻弧菌肉湯培養物的小鼠,其中3株培養
物接種的9隻小鼠48 h內全部死亡,另5株培養物接種的小
鼠48 h內,每菌株有1~2隻小鼠死亡,其餘3株培養物接種
菌株的小鼠均未死亡; 3株注射威隆氣單胞菌肉湯培養物的9
只小鼠在48 h內全部死亡,其餘3株48 h內每株有1~2隻
死亡; 1株注射嗜水氣單胞菌肉湯培養物的3隻小鼠在48 h
內全部死亡,另1株注射嗜水氣單胞菌肉湯培養物的小鼠,在
48 h死亡2隻。
3·6 Dienes現象測定
分別從菜餚、米飯、生鹹肉中分離的7株奇異變形桿菌與
12例病人中檢出的變形桿菌進行拮抗試驗,結果來源於食物
的菌株與分離於病人的菌株產生拮抗現象,而分離於食物中
的菌株之間有明顯的融合性,未發生拮抗現象,為具有同源
性。
4 討論
本起食物中毒潛伏期短,發病急,中毒症狀重,病人與在
該食堂用過中、晚餐相關,相關危險度分別為OR=0·542和
OR=2·487,並從剩餘食品中和某些原料中檢出了與病人相同
的病原菌,根據臨床症狀、流行病學調查及實驗室檢查證實,
本次食物中毒是由於下水管道滴漏污染餐具,引起副溶血弧
菌、溶藻弧菌、威隆氣單胞菌、非O1群霍亂弧菌、嗜水氣單胞
菌、奇異變形桿菌等多種細菌混合感染所致,由於是多種病原
菌引起的食物中毒,症狀復雜,從而給病因的確定以及預防、
治療帶來新的困難,而且近年來多種病原菌混合感染引起的
食物中毒在本市呈上升趨勢,應引起我們的注意。
現場調查發現二樓下水道滴漏污染一樓食堂餐具,而食
堂工作人員未加以清洗、消毒等處理,是造成本起食物中毒的
主要原因,加上食物中毒發生在炎熱的夏秋季節,食堂的衛生
狀況很差,廚房內蒼蠅密度較高,病原菌繁殖快,進一步增加
了食物中毒的危險性,從生食品(鹹肉)中檢出奇異變型桿菌
可見食品原料已受到污染,說明該食堂的污染嚴重程度,發生
本次食物中毒是必然的。食堂人員要以本起食物中毒為戒,
提高衛生意識,加強工作責任性,管理者應強化食堂的食品衛
生管理,衛生監督部門應加強對學校食堂的食品衛生監督力
度,盡早發現,消除隱患,保障師生身體健康,杜絕此類事件的
發生。本起食物中毒看起來是一件偶然事件,但隨著學校食
堂社會化經行,一些經營者和工作人員為經濟利益和度方便,
不遵守食品衛生等有關的規定和要求,導致食物中毒的發生,
應引起我們的關注。
本起食物中毒病原復雜,菌種多,由此給實驗室分析帶來
困難。副溶血性弧菌、溶藻弧菌、非O1群霍亂弧菌、嗜水氣單
胞菌是國內外公認的食物中毒病原菌,單獨引起的食物中毒
在本市發生過多次,也曾有過多次報道,但從一起食物中毒標
本中檢出6種食物中毒病原菌在國內較少見。毒力試驗結果
顯示副溶血弧菌、溶藻弧菌、非O1群霍亂弧菌、嗜水氣單胞菌
對小鼠具有較強的致病性,因而可確定該4種細菌是引起本
次食物中毒的主要病原菌。奇異變形桿菌也是一種常見的食
物中毒病原菌,常與食品的腐敗有關,其致病性相對較弱,為
一種條件性致病菌,分析其是否為同一菌型非常重要,但變形
桿菌的分型血清國內尚無供應,抗蔓延試驗、交互凝集試驗、
凝集吸收試驗、雙份血清試驗等所需的檢測時間較長一般不
常用,而該菌對動物試驗的反應又不夠典型,因此常用拮抗試
驗來確定其同源性,食物中檢出的7株奇異變形桿菌無拮抗
現象的結果,說明該些菌株具有同源性,因此,實驗室將奇異
變形桿菌也確定為本次食物中毒的病原菌。威隆氣單胞菌是
80年代後期發現的一個致病性氣胞菌新種,由其引起的食物
中毒報道甚少,一般情況正常人群的腸道中很少攜帶該菌,從
食物中毒病人的糞便中檢出該菌6株,數量不少,可確定該菌
也是引起本次食物中毒的病原之一。以前我市發生的食物中
毒中從未檢出過該菌,因此,應引起我們的注意,在今後的食
物中毒調查中應加以檢測。

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