Ⅰ 生物的基因工程中，將重組DNA進入動物用什麼方法，轉入植物中用什麼方法
將目的基因導入動物細胞使用的是顯微注射技術。基本操作程序：首先將含有目的基因的表達載體提純，並使DNA濃度保持在1~3μg/mL；然後，從從雌性動物體內取出卵（卵可以在體內受精，也可以在體外受精），採用顯微注射儀進行顯微注射；再將注射了目的基因的受精卵，經胚胎早期早期培養一段時間後，再植入到雌性動物的輸卵管或子宮內，使其發育成為具有新性狀的動物。——這是高中生物選修3三上的內容。
將目的基因導入植物細胞採用最多的方法是農桿菌轉化法（農桿菌是一種在土壤中生活的微生物，能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物，而對大多數單子葉植物沒有感染能力。）除此之外還有基因槍法（又稱微彈轟擊法，對單子葉植物較好，但是成本太高了）和花粉管通道法（我國科學家獨創的哦，支持這個，是一種十分簡便經濟的方法）——這也是在高中生物選修3上的，課上老師會詳細講，仔細聽就行了。希望對你有用。o(∩_∩)o
Ⅱ 基因工程中怎樣把兩段目的基因連接起來
1、把兩個目的片段PCR擴增出來，或許兩頭都還要酶切一下，以形成互補的粘性末端。PCR時注意所用種類的熱聚合酶是否在產物末端添加A，酌情處理。
2、兩個互補粘性末端用連接酶連接，兩個平末端用DNA聚合酶連接，兩個非互補粘性末端用DNA聚合酶一邊補平一邊連接。
Ⅲ 基因工程又叫基因拼接技術．（1）在該技術中，用人工合成方法獲得目的基因的途徑之一是：以目的基因轉錄
（1）目的基因的獲取主要有兩種途徑，一是從供體細胞的DNA中直接分離基因，二是人工合成基因．人工合成的方法之一有反轉錄法，即以目的基因轉錄的mRNA為模板，逆轉錄成互補的單鏈DNA，然後在酶的作用下合成雙鏈DNA（目的基因）．
（2）由於真核生物基因中有不表達的核苷酸序列（內含子），所以要想真核生物的基因在原核細胞中表達，就必須除去目的基因中的內含子．
（3）由於同種限制酶切割形成的粘性末端相同，因此目的基因和運載體上具有相同的粘性末端．當把切割後的運載體與目的基因放在一起，並加入DNA連接酶，將會出現3種環狀的DNA分子，即運載體自連的、目的基因片段自連的、運載體與目的基因片段相連的環狀DNA分子．
故答案為：
（1）信使RNA（mRNA）逆轉錄（反轉錄）雙鏈DNA（目的基因）
（2）動植物細胞除去內含子
（3）3運載體自連的、目的基因片段自連的、運載體與目的基因片段相連的環狀DNA分子
Ⅳ 基因工程
不好意思，搞錯了
一,逆轉錄法
逆轉錄法是先分離純化目的基因的mRNA,再反轉錄成cDNA,然後進行cDNA的克隆表達.
1,mRNA的純化
mRNA的特點:3'末端含有一多聚腺苷酸組成的末端.
方法:親和層析法
2,cDNA第一鏈的合成
一般 mRNA都帶有3'-polyA,所以可以用寡聚dT作為引物,在逆轉錄酶的催化下,開始cDNA鏈的合成.
用放射性探針法檢測.
3,cDNA第二鏈的合成
以cDNA第一鏈為模板合成第二鏈.
4,cDNA克隆
用於cDNA克隆的載體有兩類:質粒DNA和噬菌體.又將其分為表達型載體和非表達型載體.選用表達型載體可以增加目的基因的篩選方法,有利於目的基因的篩選.
cDNA片段與載體的連接通常採用下面方法:
加同聚尾連接:在載體和cDNA的3'末端加上互補的同型多聚酶序列.
人工接頭連接:所謂人工接頭是指用人工合成的,連接在目的基因兩端的含有某些限制酶切點的寡核苷酸片斷.
5,將重組體導入宿主細胞
6, cDNA文庫的鑒定
7,目的cDNA克隆的分離和鑒定
(1)核酸探針雜交法
(2)免疫反應鑒定法
逆轉錄-聚合酶反應法.該方法是mRNA經逆轉錄合成cDNA第一鏈,不需再合成第二鏈,而是在特異引物的協助下,用PCR法進行擴增,特異地合成目的cDNA鏈,用於重組,克隆.
Ⅳ 植物基因工程的內容(基因克隆方法、連接、轉化、篩選及鑒定)
1）目的基因制備和分離：一般通過文庫篩選、同源序列比對等方法進行克隆。
2）DNA重組載體的構建：選擇植物表達載體，根據載體選擇或添加酶切位點，然後進行酶切連接，構建重組載體。
3）轉化：轉化方法有多種：農桿菌法：將重組載體用電擊或熱激的方法將其轉入農桿菌中，再用農桿菌侵染植物；基因槍法：將重組載體與金粉混合後用基因槍轟擊組織塊；此外還有其他一些方法。
4）植物陽性植株的篩選和鑒定：一般先用抗性初次篩選後，在基因水平上用PCR擴增目的片段或做Southern雜交；在RNA水平上做半定量或Nouthern雜交.
5）基因表達產物的分離純化和鑒定：這是蛋白水平上的鑒定，一般是提取純化蛋白，做蛋白分析。
Ⅵ 在基因工程中，獲取目的基因的方法有哪些
..剛好學到
基因工程流程的第一步就是獲得目的DNA片段,如何獲得目的DNA片段就成為基因工程的關鍵問題。所需目的基因的來源,不外乎是分離自然存在的基因或人工合成基因。常用的方法有PCR法、化學合成法、cDNA法及建立基因文庫的方法來篩選
直接獲取
1.從基因文庫中獲取 這個沒什麼就是現成的基因儲存在受體菌上你用的時候提取出來就好了（基因組文庫法 就是原教材中的用限制性內切酶直接獲取。利用λ噬菌體載體構建基因組文庫的一般操作程序如下：① 選用特定限制性內切酶， DNA進行部分酶解，得到DNA限制性片段② 選用適當的限制性內切酶酶解λ噬菌體載體DNA。③ 經適當處理，將基因組DNA限制性片段與λ噬菌體載體進行體外重組。④ 利用體外包裝系統將重組體包裝成完整的顆粒。⑤ 以重組噬菌體顆粒侵染大腸桿菌，形成大量噬菌斑，從而形成含有整個DNA的重組DNA群體，即文庫。）經典解釋
2.cDNA文庫法（即原教材中提到的逆轉錄法）。cDNA文庫，是指匯集以某生物成熟mRNA為模板逆轉錄而成的cDNA序列的重組DNA群體。雖然可用基因組文庫法來獲取真核生物的目的基因，但是由於高等真核生物基因組DNA文庫比其cDNA文庫大得多，相關工作量同樣大得多。更為重要的是，在真核生物基因組中合有大量的間隔序列或內含子，但在大腸桿菌等原核生物中沒有類似序列的存在，所以大腸桿菌不能從真核生物基因的初級轉錄本中去除間隔序列，即不能表達真核生物DNA。而在真核生物成熟mRNA中已不存在間隔序列（已在拼接過程中被去除），所以可以以真核生物成熟mRNA為模板，逆轉錄而成的cDNA可被大腸桿菌表達。因此，在基因工程中，cDNA文庫法是從真核生物細胞中分離目的基因的常用方法。
3.直接分離基因最常用的方法是「鳥槍法」，又叫「散彈射擊法」。這種方法有如用獵槍發射的散彈打鳥，無論哪一顆彈粒擊中目標，都能把鳥打下來。鳥槍法的具體做法是：用限制酶（即限制性內切酶）將供體細胞中的DNA切成許多片段，將這些片段分別載入運載體，然後通過運載體分別轉入不同的受體細胞，讓供體細胞所提供的DNA（外源DNA）的所有片段分別在受體細胞中大量復制（在遺傳學中叫做擴增），從中找出含有目的基因的細胞，再用一定的方法吧帶有目的基因的DNA片段分離出來。如許多抗蟲，抗病毒的基因都可以用上述方法獲得。
用「鳥槍法」獲取目的基因的優點是操作簡便，缺點是工作量大，具有一定的盲目性。
人工合成
1.(主要是序列已知的基因)。主要是通過DNA自動合成儀，通過固相亞磷酸醯胺法合成，具體過程可以網上查詢，反正是可以按照已知序列將核苷酸一個一個連接上去成為核苷酸序列，一般適於分子較小而不易獲得的基因。對於大的基因一般是先用化學合成法合成引物，再利用引物獲得目的基因。
2.聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點；能在一個試管內將所要研究 的目的基因或某一DNA片段於數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷；可從一根毛發、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的DNA供分析研 究和檢測鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情，用PCR幾小時便可完成。PCR技術是生物醫學領域中的一項革命性創舉和里程碑
他只是給目的基因的擴增
Ⅶ 簡述基因工程操作的幾個步驟
基因操作的基本步驟
進行基因操作一般要經歷四個基本步驟，也就是基因操作的「四步曲」。
提取目的基因
基因操作的第一步，是取得人們所需要的特定基因，也就是目的基因(如圖)。如前
面提到的蘇雲金芽孢桿菌中的抗蟲基因，還有植物的抗病(抗病毒、抗細菌)基因、
種子的貯藏蛋白的基因，以及人的胰島素基因、干擾素基因等，都是目的基因。
要從浩瀚的「基因海洋」中獲得特定的目的基因，猶如大海撈針，是十分不易的。科學家們經過不懈地探索，想出了許多辦法，概括地說，主要有兩條途徑：一條是從供體細胞的dna中直接分離基因；另一條是人工合成基因。
直接分離基因最常用的方法是「鳥槍法」，又叫「散彈射擊法」。這種方法猶如用獵槍發射的散彈打鳥，無論哪一顆彈粒擊中目標，都能把鳥打下來。鳥槍法的具體做法是：用限制酶將供體細胞中的dna切成許多片段，將這些片段分別載入運載體，然後通過運載體分別轉入不同的受體細胞，讓供體細胞所提供的dna(外源dna)的所有片段分別在各個受體細胞中大量復制(在遺傳學中叫做擴增)，從中找出含有目的基因的細胞，再用一定的方法把帶有目的基因的dna片段分離出來。如許多抗蟲、抗病毒的基因都可以用上述方法獲得。
用「鳥槍法」獲取目的基因的缺點是工作量大，具有一定的盲目勝。又由於真核細胞的基因含有不表達的dna片段，不能直接用於基因的擴增和表達，因此，在獲取真核細胞中的目的基因時，一般是用人工合成基因的方法。
目前人工合成基因的方法主要有兩條途徑。一條途徑是以目的基因轉錄成的信使rna為模板，反轉錄成互補的單鏈dna，然後在酶的作用下合成雙鏈dna，從而獲得所需要的基因。另一條途徑是根據已知的蛋白質的氨基酸序列，推測出相應的信使rna序列，然後按照鹼基互補配對原則，推測出它的結構基因的核苷酸序列，再通過化學的方法，以單核苷酸為原料合成目的基因(如圖)。如人的血紅蛋白基因、胰島素基因等就可以通過人工合成基因的方法獲得。
Ⅷ 高中生物基因工程，正反兩種結構是指怎樣連接
因為同種限制酶切割,產生的黏性末端相同，即目的基因兩端暴露出來的鹼基序列相同,與質粒相連時,若目的基因的正確鹼基序列由左到右,則與質粒連接為正確連接。由於目的基因兩州黏性末端相同,可以造成右側連上（說簡單點,就是啟動子位置改變)這就是反向相連.