分子熒光分析方法發展

Ⅰ 原子熒光分光光度法與分子熒光法的比較

原子熒光分光光度法(Atomic fluorescence spec-trophotometry) 通過測量待測元素的原子蒸氣在輻射能激發下所產生的熒光發射強度,來測定待測元素含量的儀器分析方法稱為原子熒光分光光度法。 這種方法比原子吸收法靈敏度高,但需要採用高強度光源。例如:可待因、嗎啡、那可汀、罌粟鹼及蒂巴因在丙二酸-醋酐試劑中,可用熒光光度計在適宜的波長下,測定其含量。
分子熒光分光光度法,是利用某些物質被紫外光或可見光照射後所產生的,並且能夠反映出該物質特性的熒光,對其進行定性和定量的分析,是當前普遍使用並有發展前途的一種光譜分析技術.目前,熒光分析方法己成為一種重要且有效的光譜化學分析手段,具有重大的應用價值和深遠的科學意義.

Ⅱ 分子熒光光譜分析的基本原理

從微觀分子學得知，分子中具有不同的能級分布，而電子處於不同的能級中。通常情況下電子保持在最低的能級狀態中，光照射到某些原子時，光的能量使原子核周圍的一些電子由原來的軌道躍遷到了半徑更大的軌道，即從基態變到了第一單線態或第二單線態等。第一單線態或第二單線態等是不穩定的，所以通過輻射躍遷和非輻射躍遷失去能量返回基態，當電子由第一單線態恢復到基態時，能量會以光的形式釋放，所以產生熒光。

Ⅲ 試說明分子熒光法的基本原理和影響因素

原理：當一些物質被光照射後，物質的分子吸收光以後，便以基態躍遷到激發態，成為激發分子，然後通過相互碰撞或和其它溶劑分子碰撞等去活化的過程而消耗了能量，回到第一激發態的最低振動能級，這種躍遷稱為無輻射躍遷，它不會發光。當電子由激發態的最低振動能級躍遷回基態的不同振動能級時，則以熒光的形態發出能量。
影響因素：（1）發光分子中要具有共軛π鍵體系。共軛的程度越大，π電子越容易激發，分子放光越容易產生。（2）具有剛性平面結構分子有利於熒光發射分子的共平面越大，其π電子的共軛程度越大。如熒光素和酚酞結構十分相似，熒光素有很強的熒光，而酚酞沒有，這是由於熒光素有剛性平面結構，減少了分子振動，減少了去活化的概率。（3）取代基的作用。給電子基增強熒光: －OH, －NH2,－NHR,－NR2,－C≡N；吸電子基減弱熒光：－Br , －Cl , － NO2, －N＝N, －COOH
望採納~

Ⅳ 分子熒光光譜分析的作用

對於稀溶液（ 吸光度A=εcl≤0.05 ）而言，其熒光強度F=2.3jI0εcl。式中j是熒光物質的熒光效率；I0為入射光強度；ε為熒光物質的摩爾吸光系數，c為熒光物質的濃度 ，l為樣品池的厚度。該式表明，在稀溶液（A≤0.05）和I0及l不變的條件下，熒光強度與該物質的濃度成正比。溶液的熒光強度還受到溶劑、溫度、pH值的影響。還會因熒光物質和其他溶質分子的相互作用而降低，這種現象稱為熒光猝滅 。

Ⅳ 單分子熒光檢測的發展歷史

單分子熒光檢測自從1976年Hirschfeld第一次嘗試用全內反射熒光法實現以來，就一直在分析化學、生命科學等領域受到極大重視，但期間發展較慢，隨著熒光檢測技術的發展，直到1989年Moerner等人才成功地在低溫下首次觀察到固體基質中的單個分子的熒光。此後單分子檢測由低溫條件下發展到可在室溫下進行，趨於溫和，並且陸續實現液流、微滴和溶液中的單分子熒光檢測。1995年，Nie等用共焦熒光顯微技術首次測出溶液中自由移動的單個羅丹明分子，這種實時測量使單分子熒光記錄不僅反映出特定分子在探測區的停留時間，而且包含特徵性間歇信息。自由布朗運動中的單分子檢測的實現為以後許多實際生物體系的應用提供了可能性。
單分子光譜的獲取具有特別重要的意義。Betzig等首次獲得了室溫條件下的單分子光譜，觀察到分散在PMMA中的一種酚菁分子在不同的空間位置呈現出各異的熒光光譜。Xie等採用遠場熒光技術在室溫條件下測繪了一系列單個染料分子的熒光光譜，發現其熒光光譜的形狀和強度隨時間而波動，這種波動源自單分子熒光的典型特徵——量子跳躍現象。這些固有的漲落包含著有關單分子和其周圍環境之間豐富的動態信息。單分子熒光光譜的獲取現已可在極短的時間內完成，這就意味著光譜測量時，分子無須空間上固定化，而可在自由溶液中進行。這種單分子光譜法可用於高通量篩查疾病標記物的單分子及監控單一分子的相互作用。

Ⅵ 分子熒光光譜分析的分子熒光光譜分析

molecular fluorescence analysis
當物質分子吸收了特徵頻率的光子，就由原來的基態能級躍遷至電子激發態的各個不同振動能級。激發態分子經與周圍分子撞擊而消耗了部分能量，迅速下降至第一電子激發態的最低振動能級，並停留約10－9秒（10的負9次方秒）之後，直接以光的形式釋放出多餘的能量 ，下降至電子基態的各個不同振動能級，此時所發射的光即是熒光。產生熒光的第一個必要條件是該物質的分子必須具有能吸收激發光的結構，通常是共軛雙鍵結構；第二個條件是該分子必須具有一定程度的熒光效率，即熒光物質吸光後所發射的熒光量子數與吸收的激發光的量子數的比值。使激發光的波長和強度保持不變，而讓熒光物質所發出的熒光通過發射單色器照射於檢測器上，亦即進行掃描，以熒光波長為橫坐標，以熒光強度為縱坐標作圖，即為熒光光譜，又稱熒光發射光譜。讓不同波長的激發光激發熒光物質使之發生熒光，而讓熒光以固定的發射波長照射到檢測器上，然後以激發光波長為橫坐標，以熒光強度為縱坐標所繪制的圖，即為熒光激發光譜。熒光發射光譜的形狀與激發光的波長無關 。

Ⅶ 為什麼分子熒光分析法的靈敏度通常比分子吸光光度法的要高

因為與分子吸光光度法比較，螢光是從入射光的直角方向檢測，即在黑暗背景下檢測熒光的發射。分子吸光光度法中有入射光的背景干擾，因而分子熒光分析法的靈敏度通常比分子吸光光度法的要高2——4個數量級。

熒光或磷光分析法是在入射光的直角方向測定熒光強度，即在黑背景下進行檢測，因此可以通過入射光強度i或者增大熒光或者磷光信號的放大倍數來提高靈敏度；

而紫外-可見法中測定的參數是吸光度，該值與入射光強度和透射光強度的比值相關，入射強度增大，透射光強度也隨之增大，增大檢測器的放大倍數也同時影響入射光和透射光的檢測，因而限制了靈敏度的提高。

(7)分子熒光分析方法發展擴展閱讀：

根據物質分子吸收光譜和熒光光譜能級躍遷機理，具有吸收光子能力的物質在特定波長光（如紫外光）照射下可在瞬間發射出比激發光波長長的光，即熒光。在穩定的條件下，這些參數也隨之確定，k可視為常數。因此，式中I=kC表示的紫外熒光光強I與樣氣的濃度C成線性關系。這是紫外熒光法進行定量檢測的重要依據。

分子在室溫時基本上處於 電子能級的基態。當吸收了紫外-可見光後，基態分子中的電子只能躍遷到激發單重態的各個不同振動-轉動能級，根據自旋禁阻選律, 不能直接躍遷到激發三重態的各個振動-轉動能級。

Ⅷ 分子熒光分析法的應用

分子熒光分析法主要用於物質的定量分析及定性分析，如大氣煙塵中的苯並（a）芘的測定。