單抗類葯毒代研究方法

Ⅰ 什麼是單克隆抗體有何特點及應用價值

分類：分子生物學知識 字型大小： 大大 中中 小小 1975年Kohler和Milstein首先報道，用細胞雜交技術，使經綿羊紅細胞(SRBC)免疫的小鼠的脾細胞，與小鼠的骨髓瘤細胞融合，並由此創建了第一個B細胞雜交瘤細胞株，獲得了抗SRBC的單克隆抗體。他倆首先創立了將能分泌特異性抗體的B淋巴細胞同無限繁殖的骨髓瘤細胞融合技術,為單克隆抗體的制備奠定了基礎。這是免疫學，乃至醫學史上的一個里程碑。

所謂的單克隆抗體是指由單一克隆雜交瘤細胞產生的只識別某一特定抗原表位的同源抗體。

單克隆抗體是經過人工制備的一類特殊抗體,它具有一般抗體的性質;它是B細胞增殖分化為漿細胞所產生的一類球蛋白,存在於體液中,具有免疫功能 ,介導體液免疫;它能與相應抗原(如病原體)特異性結合,在其他免疫分子和細胞的參入下發揮免疫效應.

單克隆抗體的本質是球蛋白,具有球蛋白的理化性質,空間結構和生物學活性.球蛋白對熱和化學物質敏感,加熱和加入化學試劑易破壞其結構,具有一定的半衰期.它和球蛋白一樣具有可變區和恆定區,可變區結合抗原,形成抗原抗體復合物;恆定區有補體結合位點,介導補體發揮作用,形成攻膜復合物,殺傷變異的細胞.

單克隆抗體除了具有抗體的一般性質外,還具有其特殊性.它在結構和組成上高度均一,其類型抗原結合特異性和親和力完全相同,易於體外大量制備和純化,可以廣泛的應用於醫學和微生物學領域.單克隆抗體有小鼠免疫脾細胞(B細胞)和無限繁殖的骨髓瘤細胞融合在一起形成一個雜交瘤細胞.而這個雜交瘤細胞不僅具有無限繁殖的能力,還具有分泌抗體能力,因此在體外培養後,可無限的分泌抗體.

單克隆抗體的制備比較復雜,其中涉及多種生物學技術,在此簡述其過程.用特定的抗原免疫純系動物(如BALA--C小鼠),多次反復經背部皮下多點注射,每次注射應定量,也要注重接種的時間間隔,可適當的添加弗氏佐劑.經過一段時間的飼養後,選擇血清抗體高的接種動物在無菌的情況下處死,取出脾臟剪碎,分離,離心取其懸浮細胞置入培養皿中,備用.在另取純系小鼠的骨髓瘤細胞放進培養皿中,加入一些飼養細胞(如胸腺細胞,巨噬細胞)促使其生長,在該混合液中有多種細胞,為了提取目的細胞--雜交瘤細胞,必須進行HAT選擇,培養獲得純代雜交瘤細胞.在眾多的雜交瘤細胞中,有的不表達免疫球蛋白,有的表達其他類型的球蛋白,因此,要用特異性的檢測方法從眾多的細胞中篩選出陽性雜交瘤細胞.將目的細胞分離成單個細胞讓其克隆化形成細胞株,再轉移至其他培養基中擴大培養.為了大量的獲得抗體,還需要經過小鼠腹腔接種,然後從腹水中分離提純抗體.

單克隆抗體的分離,提純,檢驗.將體外擴大培養液或者小鼠腹腔接種的腹水裝入離心管中置於離心機上高速離心,取其上清液置於玻片上,加入相應的抗原,看是否有凝聚現象.

單克隆抗體問世後取得了輝煌的成就,如應用白喉外毒素單克隆抗體治療白喉棒狀桿菌;應用抗內毒素類脂A的單克隆抗體治療G~菌敗血症等.單克隆技術也因此獲得了1984年的諾貝爾醫學獎.它的主要作用是:用單克隆抗體代替多克隆抗體克服了交叉反應,提高了免疫學實驗的特異性和敏感性,從而促進了醫學檢驗學的發展;用單克隆作親和柱,可分離提純含量極底的可溶性的抗原,如激素,細胞因子和難以純化的腫瘤抗原等;為物質提純開辟了一條新途徑;制備的單克隆抗體識別細胞表面特異性受體,若將抗腫瘤葯物(如毒素或放射性物質)偶連到其上,構建生物導彈,有望攻克人類頑疾--腫瘤.

單克隆抗體有廣闊的發展前景,但有其局限性.單克隆抗體作為外源性的抗原,多次反復的注射後能促使機體發生免疫應答,產生相應的抗抗體,產生排斥現象,因此單克隆抗體應用於臨床有其風險性,在緊急預防的情況下,可以慎用.

總之,單克隆抗體為人類在檢驗疾病,治療疾病方面取得了重大突破,盡管它還有些弊端,相信在不久的將來人類會制備出更加優良的單克隆抗體,為攻克腫瘤作出更大的貢獻!

單克隆抗體的特點是：理化性狀高度均一、生物活性單一、與抗原結合的特異性強、便於人為處理和質量控制，並且來源容易。這些優點使它一問世就受到高度重視，並廣泛應用於生物學和醫學研究領域。

1 作為親合層析的配體

單克隆抗體能與其相應的抗原特異性結合，因而能夠從復雜系統中識別出單個成分。只要得到針對某一成分的單克隆抗體，利用它作為配體，固定在層析柱上，通過親合層析，即可從復雜的混和物中分離、純化這一特定成分。如用抗人絨毛膜促性腺激素(hCG)親合層析柱，就可從孕婦尿中提取到純的hCG。與其它提取方法(沉澱法、高效疏水色譜法等)相比，具有簡便、快速、經濟、產品活性高等優點。

2 作為生物治療的導向武器

脂質體是由既親水又親油的兩親磷脂組成的連續雙分子層微囊，內含水相空間，可包裹水溶性物質。包有細胞毒劑的脂質體膜上偶聯抗體，可定向攻擊靶細胞，稱為免疫脂質體。這種「導向治療」，在動物試驗與體外試驗中已獲得滿意效果。如熱敏免疫脂質體，由抗人乳癌細胞抗體經疏水長鏈脂肪酸修飾，抗體帶上長的疏水碳鏈，部分插入脂質體的脂雙層膜中，抗體Fab段仍暴露在膜表面，因而保持了抗體活性。熱敏免疫脂質體可特異識別靶細胞(人乳癌細胞)，並通過相變溫度引起脂質體破裂，從而定向釋放葯物。另外，可將化療葯物、細菌毒素、植物毒素或放射性同位素等細胞毒劑與抗腫瘤抗原的單克隆抗體直接交聯，利用其導向作用，使細胞毒劑定位於腫瘤細胞把它直接殺傷。這不僅提高了抗體的療效，也可降低細胞毒劑對正常細胞的毒性反應。如應用抗T細胞單抗和柔紅黴素結合物，在體外對非T淋巴細胞就無殺傷作用。但是，要把這種方法應用於臨床，目前還存在不少技術難關，包括人體對鼠源單抗的排異問題等。

3 作為免疫抑制劑

抗人T淋巴細胞單抗(McAb)作為一種新型免疫抑制劑，已廣泛應用於臨床治療自身免疫疾病和抗器官移植的排斥反應。其作用機理有賴於McAb的種類及其免疫學特性。注射抗小鼠Thy-1抗原的單抗，可以抑制小鼠同種皮膚移植的排斥反應。此外，對用於同種骨髓移植的供體骨髓，在體外經抗T細胞單抗加補體處理，能減輕移植物抗宿主病的發生。

4 作為研究工作中的探針

單克隆抗體只與抗原分子上某一個表位(即抗原決定簇)相結合，利用這一特性就可把它作為研究工作中的探針。此時，可以從分子、細胞和器官的不同水平上，研究抗原物質的結構與功能的關系，進而並可從理論上闡明其機理。如用熒光物質標記單抗作為探針，能方便地確定與其結合的相應生物大分子(蛋白質、核酸、酶等)在細胞中的位置和分布。

5 增強抗原的免疫原性

抗體對抗原免疫原性的增強作用由來已久，60年代就已發現幼豬對破傷風類毒素難以產生抗體，注射相應特異性抗體IgG，就能有效地提高對委內瑞拉馬腦炎病毒的免疫應答。1984年以來，Celis等發現，抗乙肝病毒(HBs)IgG可增強HBs抗原對特異性人T細胞克隆的刺激增殖，並可誘生干擾素。在小鼠中發現，當低劑量的HBs抗原不產生免疫反應時，加入抗HBs抗體組成的復合物，則可有效地誘生免疫反應。根據這一作用，現已研製出乙肝的抗原—抗體復合物型治療性疫苗。

6 作為醫學檢驗試劑

單克隆抗體作為醫學檢驗試劑，更能充分發揮其優勢。單克隆抗體的特異性強，大大提高了抗原—抗體反應的特異性，減少了和其它物質發生交叉反應的可能性，使試驗結果可信度更大。單抗的均一性和生物活性的單一性，使抗原—抗體區應結果便於控制，利於標准化和規范化。目前已有許多檢驗試劑盒用單抗製成，其主要用途如下：

(1)診斷各類病原體

這是單抗應用最多的領域，已有大量診斷試劑商品供選擇。如用於診斷乙肝病毒、丙肝病毒、皰疹病毒、巨細胞病毒、EB病毒和各種微生物、寄生蟲感染的試劑等。單抗所具有的靈敏度高、特異性好的特點，使其在鑒別菌種的型及亞型、病毒變異株，以及寄生蟲不同生活周期的抗原性等方面更具獨特優勢。

(2)腫瘤特異性抗原和腫瘤相關抗原的檢測

用於腫瘤的診斷、分型及定位。盡管目前尚未制備出腫瘤特異性抗原的單抗，但對腫瘤相關抗原(如甲胎蛋白、腫瘤鹼性蛋白和癌胚抗原)的單抗早就用於臨床檢驗。

隨著淋巴細胞雜交瘤技術的應用，許多抗人腫瘤標記物的雜交瘤細胞株已經建立，這為腫瘤的早期診斷及其闡明腫瘤的發生、發展，了解腫瘤細胞的生物學活性及其定量研究奠定了基礎。用抗腫瘤單抗檢查病理標本，可協助確定轉移腫瘤的原發部位。以放射性核素標記單抗可用於體內診斷，再結合X-線斷層掃描技術，可對腫瘤的大小及其轉移灶作出定量診斷。

(3)檢測淋巴細胞表面標志

用於區分細胞亞群和細胞的分化階段。例如檢測CD系列標志，有利於了解細胞的分化和T細胞亞群的數量和質量變化，這對多種疾病診斷具有參考意義。細胞表面抗原的檢測，將對白血病患者的疾病分期、治療效果、預後判斷等方面有指導作用。組織相容性抗原檢測是移植免疫學的重要內容，應用單抗對其進行位點檢測可得到更可信的結果。

(4)機體微量成分的測定

應用單抗結合其它技術，可對機體的多種微量成分進行測定。如放射免疫分析，即是利用了同位素的靈敏性和抗原-抗體反應的特異性而建立起來的方法，它可以測至10-9～10-12g，使原來難以測定的激素能夠進行定量分析。除了激素，還可檢測諸多酶類、維生素、葯物和其它生化物質。這對受檢者健康狀態判斷、疾病檢出、指導診斷和臨床治療均具有實際意義。

綜上所述，單克隆抗體在理論和實踐上的應用成為解決生物學和醫學等許多重大問題的重要手段。但是，上述應用的單抗屬於鼠源性，用於人類疾病的預防和治療時會產生異種蛋白變態反應，大大限制了其臨床應用價值。而且，鼠源性抗體在人體內半衰期縮短，生物活性降低。因此，人們一直致力於人源性抗體的研究，如用人脾細胞與鼠骨髓瘤細胞雜交；用EB病毒轉化人的B淋巴細胞；用基因工程法制備嵌合抗體等。但都遇到相當的困難。以分子生物學技術提取、擴增編碼人抗體的DNA，構建質粒，建立組合抗體文庫，再利用供者文庫建立針對某一特定抗原的子文庫是近年來形成的最新方法。以該技術制備的抗體片段(Fab)是人源抗體，具有建庫簡單、抗體表達穩定等特點。迄今已有多種抗體產生。可以預見，該技術具有良好的發展和應用前景。

單克隆抗體綜述

一、抗體的定義和第一代單克隆抗體（經雜交瘤細胞生產）

抗體是在對抗原刺激的免疫應答中，B淋巴細胞產生的一類糖蛋白。它是能與相應抗原特異的結合、產生各種免疫效應（生理效應）的球蛋白。國際衛生組織將具有抗體活性及化學結構與抗體相似的一類蛋白統一命名為免疫球蛋白，它與抗體都是指同一類蛋白質。70000之間，稱為「重鏈」（H鏈）。輕、重鏈之間和兩重鏈之間由二硫橋連接，這樣的四鏈結構（L2H2）組成一個免疫球蛋白分子。550個氨基酸殘基，相對分子質量在55000;抗體的基本結構如圖所示，由四條肽鏈組成，其中兩條相對分子質量較低的肽鏈約含210個氨基酸殘基，相對分子質量約24000，稱為「輕鏈」（L鏈）；另兩條相對分子量較高的肽鏈約含450，其相應的抗體分別命名為IgG、IgM、IgA、IgE和IgD。以重鏈抗原性差異來進行抗體的血清學分類：用分離純化的各種重鏈免疫動物獲得相應的抗血清，再通過免疫交叉反應等血清學檢測方法，分析其結構的異同，反復的驗證，最後發現人類有5類不同的重鏈，分別為）與多種細胞結合，(5)可能造成免疫損傷。IgG占成人血清中抗體總量的75%以上，是人類血清中主要的一類抗體，由B細胞產生，其功能結構也是研究最清楚的。它主要的生理功能有：(1)中和毒素和病毒，(2)凝集和沉澱抗原，(3)激活補體，(4)通過特異的膜受體（Fc單克隆抗體技術的應用是現代生物科學領域中的重要進展之一。單克隆抗（Monoclonalantibody，簡稱McAb）具有廣泛的應用價值，它為生物學和醫學等自然科學的研究開辟了新的途經。

二、 第二代單克隆抗體：經過基因重組的嵌合或人源化單克隆抗體

嵌合抗體：指用人的恆定區取代小鼠的恆定區，保留鼠單抗的可變區序列，形成一個人-鼠雜合的抗體。其研製程序快，可大幅度降低異源抗體的免疫原性，卻幾乎保持親本鼠單抗全部的特異性和親和力。另外，它還具有人抗體的效應功能，如補體固定、抗體依賴細胞介導的細胞毒作用（ADCC）等。嵌合抗體成功的例子有：

Rituxan：Idec Pharmaceutical/Genentech的小鼠抗CD20抗體，含人IgG1κ恆定區，用於治療B淋巴瘤。它的抗淋巴瘤作用主要可能來自於補體作用、ADCC和誘導腫瘤細胞凋亡。

Remicade：Centocor公司的抗TNF-α抗體，用於治療風濕性關節炎和節段性回腸炎。

Simulect: Novartis公司的抗CD25抗體，用於抗移植排斥。

Erbitux：美國Imclone公司的抗EGFR（Her-1）單克隆抗體，目前FDA已批准其用於治療結直腸癌。

人源化抗體：利用現有的無數已詳細分析過的小鼠抗體，取其與抗原直接接觸的那段抗體片段（互補決定區，CDR）與人的抗體框架嫁接，經親和力重塑，可維持其特異性和大部分的親和力，同時幾乎去除免疫原性和毒副作用。

成功的例子：

Herceptin：Genentech公司的抗HER2/neu抗體，用於治療乳腺癌。

Synsgis：Medimmune公司的抗F抗體，用於治療呼吸道病毒感染。

Zenapax：Protein Design Labs（PDL）/Roche的抗CD25抗體，用於抗移植排斥。

h-R3：古巴分子免疫學中心的抗EGFR（Her-1）單克隆抗體，用於治療頭頸癌。

三、 噬菌體展示抗體和全人抗體

（1）噬菌體顯示技術制備人源性抗體

基於噬菌體可把抗體片段表達在外膜的能力而建立一系列的抗體文庫，然後用目的抗原來篩選文庫中相應的抗體片段，再經體外加工可形成有功能的完全人抗體。用此方法可制備針對簡單或復雜抗原的單抗，並得到中等親和力的抗體，但該方法需用高通量篩選。現有一些已進入臨床II/III期研究，如Cambridge Antibody Technology（CAT）的D2E7和CAT-152，分別用於治療風濕性關節炎和青光眼。D2E7是抗TNF-α單抗，現正由Abbott Laboratories開發。從其2002年6月份提供的臨床III期數據看，有望於近期進入市場。

（2）轉基因動物制備人源性抗體

抗體衍生物：有的研究者正在開發更容易生產和使用的單抗衍生物，最成功者當屬賓夕法尼亞大學的Mark Greene。他在尋找抗體互補決定區CDR衍生的多肽小分子[16]，並成立了CDR Therapeutics（現屬Xcyte Therapies）以加速其多肽生產的商業化。他的多肽有親本單抗的親和力和選擇性，但作為小分子，多肽應無免疫原性，且更容易制備。

Ⅱ 【討論】葯代和毒代有什麼區別

不同點：葯代主要是關注葯物在體內的吸收分布代謝轉化等特徵
相同點：研究方法相同，都需要作方法學，樣品處理，PK數據分析
不同點：葯代主要是關注葯物在體內的吸收分布代謝轉化等特徵
毒代關注的是毒性劑量下在體內的毒性暴露，關注AUC、Cmax、Tmax等 似乎明白點了，是不是在給葯劑量上也有區別，毒代的劑量需要達到毒性劑量，而葯代的劑量是低於這個劑量的吧？

Ⅲ 葯理學的常用研究方法包括哪些。。。。。

實驗葯理學方法，實驗治療學方法，臨床葯理學方法

Ⅳ 葯物毒代動力學研究的內容有哪些

你是說葯物毒理學和葯物代謝動力學嗎？

1. 葯代動力學：是研究葯物在體內處置的葯理學分支學科，重點是研究葯物的吸收，分布，代謝，排泄四個主要環節。

2. 葯物毒理學：研究葯物對生命有機體有害作用的科學。

葯物是一把雙刃劍，既能治病也會致病。葯物毒理學是以分子生物學、遺傳學、解剖學、動物學、病理學、統計學等為基礎學科而發展起來的。它研究的內容包括對葯物的一般毒性、特殊毒性以及對靶器官的毒性作用機制研究，通過這些這些研究為正確評價葯物的安全性、危害性提供科學依據，對臨床的安全用葯具有重要意義。

我是生科院但不是醫學院的，只能幫你到這了

Ⅳ 貝伐珠單抗注射液的葯代動力學

貝伐珠單抗的葯代動力學參數都是通過分析血清總的貝伐珠單抗濃度來評估的（即檢測方法不能區分游離的貝伐珠單抗和與VEGF 結合的貝伐珠單抗）。貝伐珠單抗的葯代動力學數據來自於10項在實體瘤患者中進行的研究。在所有試驗中，貝伐珠單抗採用靜脈輸注的方式給葯。輸注的速率基於患者的耐受性，首次靜脈輸注時間需持續90 分鍾。在1～10 mg/kg 的劑量范圍內，貝伐珠單抗的葯代動力學呈線性關系。吸收不適用。分布女性和男性患者的典型中央室體積（Vc）值分別為2.73L 和3.28L，都在所描述的IgG 和其它單克隆抗體的范圍之內。當貝伐珠單抗與抗腫瘤葯物合用時，女性和男性患者的典型的外周室體積（Vp）值分別為1.69L 和2.35L。對體重進行校正以後，男性患者的Vc 值高於女性患者（＋20%）。代謝在家兔中，通過IV 單劑量給予125I-貝伐珠單抗後，對貝伐珠單抗的代謝進行評價，結果表明它的代謝特性與那些未與VEGF 結合的天然IgG 的預期結果相似。貝伐珠單抗的代謝與消除與內源性IgG 相似，即主要通過人體包括內皮細胞的蛋白水解分解代謝，不是主要通過腎臟和肝臟的消除。IgG 與FcRn 的結合保護其不被細胞代謝，具有長的終末半衰期。清除女性和男性患者的平均清除值分別相當於 0.188 和0.220 L/天。對體重進行校正後，男性患者的貝伐珠單抗清除率高於女性（＋17%）。根據雙室模型，典型女性患者的清除半衰期估計值為18天，典型男性患者為20 天。特殊人群的葯代動力學對群體葯代動力學進行了分析以對人口學特徵的影響進行評價。結果顯示，貝伐珠單抗的葯代動力學在不同年齡之間沒有顯著差異。兒童與青少年：貝伐珠單抗的葯代動力學在有限數量的兒童患者上進行了研究。產生的葯代動力學數據提示，貝伐珠單抗的分布容積和清除率與實體瘤成年患者的相當。腎損害：沒有進行腎損傷患者的貝伐珠單抗葯代動力學研究，因為腎臟不是貝伐珠單抗代謝或者排泄的主要器官。肝損害：沒有在肝損害患者上進行貝伐珠單抗的葯代動力學研究，因為肝臟不是貝伐珠單抗代謝或者排泄的主要器官。國內患者的葯代動力學BP20689 是一項在患有晚期惡性腫瘤的中國患者上進行的關於貝伐珠單抗安全性及葯代動力學特徵的I 期研究。對貝伐珠單抗的三個劑量水平（5mg/kg, 10mg/kg 和15mg/kg）進行了評價。共有39 名受試者參與該試驗。試驗結果顯示，在5-15mg/kg 范圍內，貝伐珠單抗為線性葯代動力學。貝伐珠單抗多次用葯的葯動學參數與單次用葯的相似。多次用葯與單次用葯的清除率、中央分布容積、穩態分布容積的參數均值比，5mg/kg 分別為0.85, 1.01 和1.21；10mg/kg 分別為0.97, 1.01和1.02；15mg/kg 分別為1.01, 1.01 和1.01。本研究中，中國受試者在5mg/kg 和10mg/kg 貝伐珠單抗多次給葯後，血清貝伐珠單抗的PK 參數與在美國進行的3mg/kg 和10mg/kg 的I 期研究（AVF0737g）所獲得的PK 參數接近（表7）。表7. 西方受試者（AVF0737g）與中國受試者（BP20689）間PK 結果的比較 根據該葯代動力學研究結果和國外臨床試驗結果的比較，未發現貝伐珠單抗存在種族差異。

Ⅵ 葯物毒理學主要進行哪些方面的研究

1、起源：葯物毒理學是研究葯物在一定條件下，可能對機體造成的損害作用及其機理的一門科學。葯物毒理學作為一門應用學科，在20世紀90年代興起以後，就一直受到人們的重視。這是因為葯物毒理學在新葯開發評審中發揮著重要的作用，尤其是它能發現動物對葯物產生的毒性反應，為臨床用葯安全性和毒副作用觀察提供信息等。 葯物毒理學研究葯物毒性，葯物對人危害以及防止發生危害的安全劑量。月滿則缺，物極必反，其實在現代醫學中許多葯物的研究與研發都是基於葯物毒理學展開的。最普通的例子就是對於蛇毒的應用以及對於嗎啡的應用。
微量的蛇毒可以治療心臟疾病，但是過多的劑量則是致命的；同樣的道理，嗎啡可以緩解疼痛，過量服用則會讓人產生生理依賴。葯物毒理學在亞歷山大時期就已經開始，不同的是在那時人們主要研究的是葯物的毒性作用而非葯理作用，用來謀殺和刺殺，亞歷山大就可能死於這樣的一次毒葯謀殺，因為對於他的死有眾多的疑點。
2、研究內容：葯物毒理學是以分子生物學、遺傳學、解剖學、動物學、病理學、統計學等為基礎學科而發展起來的。它研究的內容包括對葯物的一般毒性、特殊毒性以及對靶器官的毒性作用機制研究，通過這些這些研究為正確評價葯物的安全性、危害性提供科學依據，對臨床的安全用葯具有重要意義。
3、發展歷史：早期毒理學：研究不同毒物的使用，著重毒物對機體的急性危害或致死作用。現代毒理學：研究在特定情況下，生命有機體接觸化學、生物或物理物質產生有害作用（毒性）的科學。葯理學是研究葯物的治療作用及其有效劑量，從而發揮其在預防、治療或診斷疾病中的效能。毒理學是研究毒性物質對機體的有害作用及其發生、機制、結果以及危害因素的科學。主要用於對外源性物質的安全性評價和危險性評估。葯物毒理學是毒理學的一個相對年輕的分支，已廣泛體現在新葯臨床前安全性評價、臨床試驗及臨床合理用葯。 研究人類在應用葯物防病治病過程中，葯物不可避免地導致的機體局部或全身病理學改變，甚至引起不可逆的損傷或致死作用；同時也研究對機體有害作用的發生、機制、結果及危險因素的科學。 包括新葯臨床前安全性評價，臨床試驗及臨床合理用葯等方面。
4、學科意義：葯物毒理學負擔著現有的和新生產的葯物對健康影響的安全評價，探討葯物對靶器官的毒性作用機制個對人的危害及防止發生危害的安全劑量。葯物毒理學的任務：包括臨床毒理學、新葯臨床試驗、葯物流行病學研究等任務。葯物毒理學對葯物毒性的研究，無論過去、現在和將來對人類的健康仍將起到重要和不可缺少的作用。 葯物毒理學的基本目的：認識並掌握葯物的毒性作用，葯物是用於防病治病，但是有很強的兩重性。葯物毒理學研究的目的就是發現受試葯物的中毒劑量，初步了解反復給葯時產生毒性反應的劑量，為臨床安全用葯提供科學依據；確定葯物毒作用的靶組織或靶細胞，進而確定葯物毒性作用的機制；確定毒性作用的劑量范圍；了解葯物的毒性作用是否具有可變性，有些葯物在治療劑量下，其毒副作用會伴隨治療作用一起出現，另一些葯物則可能由於誤用、濫用或故意超劑量使用而產生某些毒副作用，一個葯物的毒性是否可逆，在停葯或採取某些治療後被毒性作用所損害的正常的生理功能是否可以恢復也是至關重要的問題之一，在新葯的開發中也是決定一個葯物命運的重要依據之一；研究解毒葯及葯物中毒後的解救措施；通過對動物實驗的重復給葯，為闡明葯物的毒性作用及其作用機制提供線索，作為葯物開發研究的毒理學部分，從方法上看其特點，其中較長時間地重復給葯是臨床前葯理學研究所不能及的，為生命學提供資料，開發新葯。 凡是不符合用葯目的並為病人帶來不適或痛苦的有害反應統稱為葯物不良反應 。

Ⅶ 葯代動力學的研究方法

根據不同的葯，有具體不同要求。如果是人的葯代動力學，可以找CRO公司；如果是動物的，也可以找臨床前CRO，在我的網站上有很多。

Ⅷ 貝伐珠單抗注射液的葯理毒理

毒理研究長期用葯毒性發育不良：在獼猴中進行的長達26 周的研究中，貝伐珠單抗引起了發育異常。發育異常的特徵主要是生長板軟骨增厚、軟骨下骨板形成和生長板血管侵入受到抑制。根據平均血清濃度可知產生這一效應的劑量≥0.8 倍的人類治療劑量，而且暴露水平略低於預期的人類臨床暴露劑量。但是，值得注意的是發育異常只發生於具有開放性生長板的生長活躍的動物。因為貝伐珠單抗最有可能給予具有封閉性生長板的成年患者，因此在臨床人群中不太可能出現發育異常。腎功能：在正常的獼猴中，採用貝伐珠單抗每周給葯一次或兩次，最長至26 周，對腎功能未產生可測量的影響，而且在家兔中給予兩次劑量高達100 mg/kg（大約是臨床建議劑量的80 倍）的貝伐珠單抗後，在腎臟中也沒有發生蓄積。在家兔中採用腎功能不全模型進行的毒性研究顯示貝伐珠單抗沒有加劇牛血清白蛋白引起的腎小球損傷或者由順鉑引起的腎小管損傷。白蛋白：在雄性獼猴中，將貝伐珠單抗以10 mg/kg 的劑量每周給葯兩次或者以50 mg/kg 的劑量每周給葯一次，26 周後，白蛋白和白蛋白/球蛋白比值出現了具有統計學顯著性意義的降低，而球蛋白出現了具有統計學顯著性意義的增加。停葯後，這些效應都是可逆的。因為這些終點參數都保持在正常參考值范圍之內，因此認為這些改變不具有臨床意義。凝血：在獼猴中進行的長達26 周的非臨床毒理學研究中發現包括血小板計數、凝血酶原和活化的部分凝血活酶時間在內的血液學或凝血參數都沒有發生變化。在家兔中採用凝血模型探討了貝伐珠單抗對血栓形成的影響，結果顯示相對於貝伐珠單抗賦形劑對照給葯的動物，貝伐珠單抗組動物的血塊形成速度或其它任何一種血液學參數都沒有改變。一般葯理傷口癒合：在家兔中研究了貝伐珠單抗對圓形傷口癒合的影響。在家兔中，在兩個星期的時間內，給予五次劑量在2-50 mg/kg 范圍內的貝伐珠單抗後，表皮細胞再生延遲，而且觀察到具有劑量依賴關系的趨勢。對傷口癒合的影響程度與給予皮質類固醇時產生的效應相似。給予動物2 mg/kg 或10mg/kg 的貝伐珠單抗，停葯後，傷口完全閉合。2 mg/kg 的較低劑量大約相當於建議的臨床劑量。在家兔中還對另外一個更靈敏的線性傷口癒合模型進行了研究。在0.5－2 mg/kg 范圍內的三個劑量的貝伐珠單抗都可以導致傷口的抗張強度出現具有劑量依賴性的、顯著性的降低，從而使傷口癒合延遲。0.5 mg/kg 的低劑量比臨床建議劑量低5 倍。因為在家兔中，在低於臨床建議劑量的劑量水平上即觀察到了傷口癒合效應，因此應該密切關注在人類貝伐珠單抗對傷口癒合產生的不良影響，避免該類人群使用。在獼猴中，貝伐珠單抗對線性切口癒合的影響具有高度的變異性，而且不存在明確的劑量效應關系。高血壓：在獼猴中以高達50 mg/kg 的劑量每周給葯兩次，結果顯示貝伐珠單抗對血壓沒有影響。致癌性尚無貝伐珠單抗的致癌性研究。致突變性尚無貝伐珠單抗的致突變性研究。生殖毒性生育力的損傷在動物中尚無專門的研究來評價貝伐珠單抗對生育力的影響。在以獼猴為研究對象進行的重復給葯毒性研究中觀察到貝伐珠單抗對雄性生殖器官沒有產生不良影響。採用貝伐珠單抗對獼猴進行13 周或26 周的給葯，貝伐珠單抗對卵巢功能的抑製作用表現為卵巢和/或子宮重量降低以及黃體數量減少，子宮內膜增殖功能減弱，而且卵泡的成熟也受到抑制。根據雌猴的平均血清濃度可知產生這種效應的劑量是人類治療劑量的4 倍以上或者人類預期暴露劑量的2 倍以上。在家兔，給予50 mg/kg 的貝伐珠單抗後，導致卵巢重量和黃體數量明顯降低。停葯後，獼猴和家兔的結果都是可逆的。給予貝伐珠單抗後對血管生成的抑製作用可能對雌性生育力具有不良影響。致畸性將貝伐珠單抗給予家兔時，結果顯示它具有胚胎毒性和致畸性。觀察到的效應包括母親和胎兒的體重下降，胎兒吸收數目增多，而且胎兒的特異性大體和骨骼改變的發生率升高。在10-100mg/kg 之間的各個檢測劑量水平上都觀察到了不良的胎兒結局。葯理作用貝伐珠單抗是一種重組的人源化單克隆抗體，可以選擇性地與人血管內皮生長因子（VEGF）結合並阻斷其生物活性。貝伐珠單抗中包含人類抗體的框架區以及可結合VEGF 的人源化鼠抗體的抗原結合區。採用重組DNA 技術在哺乳動物細胞表達系統中國倉鼠卵巢細胞中產生貝伐珠單抗，然後採用包括病毒滅活和去除步驟在內的工藝進行純化。成品中檢測到的慶大黴素濃度≤0.35 ppm。貝伐珠單抗中含有214 種氨基酸，分子量大約為149,000 道爾頓。貝伐珠單抗可以抑制VEGF 與其位於內皮細胞上的受體―Flt-1 和KDR 相結合。通過使VEGF 失去生物活性而減少了腫瘤的血管形成，從而抑制了腫瘤的生長。將貝伐珠單抗或其鼠親本抗體給予裸鼠腫瘤異種移植模型後，可以對包括結腸癌、乳腺癌、胰腺癌和前列腺癌在內的多種人類腫瘤產生廣泛的抗腫瘤活性。結果是轉移性疾病的進展受到了抑制，而且微血管浸潤也有所減少。