A. 免疫診斷方法有哪些
應用免疫學的理論、技術和方法診斷各種疾病和測定免疫狀態。在醫學上,它是確定疾病的病因和病變部位,或是確定機體免疫狀態是否正常的重要方法。此外,還應用於法醫學的血跡鑒定、生物化學的血清成分鑒定和物種進化關系的研究等。可在體內和體外進行。從免疫學的角度免疫診斷可應用於:(1)檢查免疫器官和功能發生改變的疾病:如免疫缺陷病、自身免疫病。(2)由免疫機制引起的疾病:如輸血反應、移植排斥反應。(3)一些內分泌性的疾病:從臨床學的角度來說,免疫診斷可應用於檢查傳染性疾病、免疫性疾病、腫瘤和其他臨床各科疾病。就所檢測的反應物免疫診斷大致可以分為兩類,即:(1)免疫血清學診斷:檢測病人血清或組織內有無特異性抗體或特異性抗原。(2)免疫細胞學診斷:測定病人細胞免疫力的有無和強弱。免疫診斷須體現3項要求:(1)特異性強,盡量不出現交叉反應,不出現假陽性,以保證診斷的准確性。(2)靈敏度高,能測出微量反應物質和輕微的異常變化,有利於早期診斷和排除可疑病例。(3)簡便、快速、安全。
B. 免疫工程學研究什麼
免疫工程學-Immunoengineering 利用免疫系統的力量來治療疾病,比如說癌症,並且通過促進組織再生去改善癒合和修復,該項目通過應用工程方法去定量地理解在和臨床相關背景下的免疫系統,以改善現有的並開發新的治療方法。
C. 免疫學的檢測方法
免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫。
D. 免疫相關新基因怎麼進行功能研究
對蝦免疫相關基因QM的功能研究
對蝦白斑綜合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)是危害養殖對蝦的最主要病原,其致病能力強,傳播范圍廣,給世界對蝦養殖業造成了巨大的損失,然而至今仍無有效的防治方法。要進行病害的有效防治,必須了解對蝦免疫的機理。本論文首先利用WSSV建立對蝦病毒基因功能研究的RNAi技術,在此基礎上開展對蝦QM蛋白在對蝦免疫過程中的作用研究,為建立有效的對蝦病害防治方法提供科學依據。 採用RNAi方法,選擇在WSSV的感染中起重要作用的vp28基因(編碼WSSV主要的膜蛋白)作為干擾目的基因,在體外合成siRNA後,利用體外注射的方法進行干擾實驗。結果發現vp28基因的轉錄和表達被序列特異的siRNA干擾抑制,此時用競爭性定量PCR檢測發現,對vp28進行干擾後,顯著降低對蝦體內的病毒粒子拷貝數,同時能延緩對蝦的死亡。因此,在WSSV中建立了基因功能研究的RNAi方法。在重復注射3次siRNA後,對蝦體內WSSV被完全清除,說明RNAi在對蝦體內具有抗病毒效果,這為對蝦白斑綜合症病毒(WSSV)的防治提供一種新的有效方法。 通過RACE等得到對蝦QM基因(PjQM),序列分析發現,PjQM具備QM蛋白的基本特徵和功能結構域。對該基因進行了原核表達,並純化得到融合蛋白。RT-PCR和Western blot分析發現,PjQM在對蝦各組織中均有轉錄和表達。Real-time PCR分析發現,在受到病毒刺激後PjQM基因表達上調,說明PjQM參與了對蝦的免疫過程。通過GST下拉、質譜鑒定等分析發現,PjQM蛋白與血藍蛋白、肌球蛋白(myosin)之間存在相互作用,進一步的體外和體內試驗證明,PjQM與血藍蛋白之間確實存在互作。蛋白質互作提示,PjQM可能通過酚氧化酶激活系統等途徑參與對蝦免疫。採用上述在WSSV基因功能研究中建立的RNAi技術,研究PjQM的功能。Northern blot和Western blot結果顯示,PjQM基因的轉錄和表達被PjQM序列特異的siRNA抑制,此時對蝦酚氧化酶(PO)活性顯著下降。因此,RNAi試驗結果表明,QM可調控對蝦酚氧化酶(PO)活性。以上研究結果說明,QM蛋白參與抗病毒免疫的可能途徑之一是,QM通過與血藍蛋白的互作,調控PO的活性。這是首次發現QM在動物免疫反應中起作用。
E. 免疫學主要研究的內容是什麼
這個問題太大了。從大的方面回答就是研究抗原和免疫系統方面的學問。細說那就太多了沒法說。
F. 我們現在打防疫針這種免疫方法是由誰發明的
掌握了製做疫苗的方法,巴斯德就開始研究人類疾病的病菌。他在研究所里,組織學生和助手們廣泛試驗,製成了傷寒、霍亂、白喉、鼠疫等多種疫苗,控制了多種傳染病。現在,我們不是每年要打防疫針嗎?這種免疫方法,就是巴斯德教授發明的。
G. 有哪些免疫學方法常在葯學中的應用
"葯學"的范圍很廣啊,葯劑學、葯理學、葯物化學和葯物分析都包括,那麼免疫學一般的方法都會用到吧。比如葯理學,研究作用機制,那麼免疫熒光、放射免疫分析、發光免疫、免疫膠體金技術、生物素標記等免疫標記技術都能用到;還有免疫學檢測方法,如ELISA,免疫共沉澱等,用於檢測特異蛋白。
H. 免疫分析方法有哪些
(1)放射免疫分析法(radioimmunoassay,RIA)。RIA技術是使用以放射性同位素(如125I、32P、3H等)作標記的抗原或抗體,用γ-射線探測儀或液體閃爍計數器測定γ-射線或β-射線的放射性強度,來測定抗體或抗原量的技術。它包括以標記抗原為特點的放射免疫分析和以標記抗體為特點的免疫放射分析(immunoradiometricassay,IRMA)。前者以液相競爭結合法居多,既測大分子抗原又測小分子抗原;後者以固相法測大分子抗原為主。
RIA在早期建立的農葯免疫分析方法中佔了很大比重,建立了狄氏劑、艾氏劑、2,4-D和2,4,5-T、對硫磷和百草枯等農葯的放射免疫分析法。盡管該方法靈敏度非常敏銳(RIA通常為10-9g、10-12g,甚至10-15g),應用范圍廣,但進行RIA需使用昂貴的計數器,也存在放射線輻射和污染等問題,因此在農葯殘留檢測領域的應用和發展受到了一定的限制,並逐步為其他免疫分析方法所取代。
(2)酶免疫分析法(enzymeimmunoassay,EIA)。EIA是繼RIA之後發展起來的一項免疫分析技術。其檢測原理與放射免疫法類似,但所用的標記物為酶,它將抗原、抗體的特異性免疫反應和酶的高效催化作用有機結合起來,通過測定結合於固相的酶的活力來測定被測定物的量。用做標記物的酶有辣根過氧化物酶(horseradishperoxidase,HRP)和鹼性磷酸酶(alkalinephosphatase,AKP)、葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase,GO)、脲酶(urease)等。酶標記反應的固相支持物有聚苯乙烯塑料管、膜等。目前大多數採用96孔酶標板(MTP)作為固相支持物。這種板的檢測容量大,樣本數量多,只需有台簡單的酶標儀就可得出准確的檢測數據。也有學者採用磁珠作為固相材料進行EIA研究,其原理是將高分子材料(聚苯乙烯、聚氯乙烯等)包裹到金屬小顆粒(Fe2O3,Fe3O4)外面,再通過化學方法鍵合上氨基(-NH2)、羧基(-COOH)、羥基(-OH)等活性基團,再與抗體或抗原耦聯,製成免疫性微珠。該方法的優點是微珠比表面積大,吸附能力強,能懸浮在液相中快速均勻的捕獲樣品中的待測物,通過外加磁場後能夠實現微珠與樣品液的快速分離,從而減少檢測時間、提高檢測靈敏度。
由於酶標試劑制備容易、穩定、價廉,酶免疫分析的靈敏度接近放射免疫技術,故近年來EIA技術發展很快,已開發了多種EIA方法。其中酶聯免疫法(,ELISA)是目前農葯殘留檢測中應用最廣泛的酶免疫分析技術。
(3)熒光免疫分析法(fluorescenceimmunoassay,FIA)。FIA檢測的基本原理是將抗原抗體的高度特異性與熒光的敏感可測性有機地結合,以熒光物質作為示蹤劑標記抗體、抗原或半抗原分子,制備高質量的特異性熒光試劑。當抗原抗體結合物中的熒光物質受到紫外光或藍光照射時,能夠吸收光能進入激發態。當其從激發態回復基態時,能以電磁輻射形式放射出所吸收的光能,產生熒光。繪制農葯濃度-熒光強度曲線,可以定性、定量檢測樣品中的農葯殘留量。
適用於抗體、抗原或半抗原分子標記的熒光素須符合要求:①應具有能與蛋白質分子形成穩定共價鍵的化學基團,或易轉變成這類反應形式而不破壞其熒光結構;②標記後,熒光素與抗體或抗原各自的化學結構和性質均不發生改變;③熒光效率高,與蛋白質結合的需要量很少;④熒光素與蛋白質結合的過程簡單、快速,游離的熒光素及其降解產物容易除去;⑤結合物在一般儲存條件下性能穩定,可保存使用較長時間。
(4)化學發光免疫分析法(luminescentimmunoassay,LCIA)。LCIA又可分為化學發光免疫測定(chemiluminescentimmunoassay,CLCIA)和生物發光免疫測定(bio-luminescentImmunoassay,BLCIA)。
1976年,Shroeder首先用生物素(B)-親和素(A)系統建立了均相化學發光免疫測定技術,爾後Halman和Velan又將其引伸到非均相體系,現已滲入到生物學研究的各個領域。其原理是以發光指示抗原與抗體的結合,當發游標記物與相應的抗體或抗原結合後,底物與酶作用,或與發光劑產生氧化還原反應,或使熒光物質(例如紅熒烯等)激發,釋放光能。最後用光度計測定其發光強度,進行定量分析。常用發游標記物有辣根過氧化物酶(HRP)、魯米諾(luminol)、異魯米諾(isoluminol)、咯粉鹼(lophine)、光澤精(lucigen)、雙(2、4、6-三氯苯)草酸酯、聯苯三酚和6[N-(4-二氨基丁基)-N-乙基]-氨基-2,3-二氫吩嗪-1,4-二酮(ABEI)等。用上述發游標記物標記的抗體(或抗原)在一定的pH緩沖溶液中與相應的抗原(或抗體)結合時,在協同因子(例如H2O2等)的作用下發光,其發光強度與被測物的濃度成正比,故可以用於定量分析。
發光免疫測定具有特異性強、靈敏度高(檢測限量達10-15mol/L)、快速(1~3h)、發光材料易得等優點。但其發光過程和強度常受到發光物質本身的化學結構、介質的pH、協同發光物質和金屬離子雜質等影響。
(5)金免疫層析分析法(goldimmuno-chromatographyassay,GICA)。GICA檢測原理是將配體(抗體或抗原)以線狀包被固化於硝酸纖維素膜等微孔薄膜上,膠體金標記另以配體或其他物質並以干態固定在吸水材料上,通過毛細作用,使樣品溶液在層析條上泳動,當泳動至膠體金標記物處時,如樣品中含有待檢受體,則發生第一步高度特異性的免疫反應,形成的免疫復合物繼續泳動至線狀包被區時,發生第二步高度特異性的免疫反應,形成的免疫復合物被截留在包被的線狀區,通過標記的膠體金而顯紅色條帶(檢測帶),而游離的標記物則越過檢測帶,與結合的標記物自動分離。通過檢測帶上顏色的有無或色澤深淺來實現定性或定量測定2。
2金標試紙條檢測
GICA法具有快速(5~20min)、廉價、結果明確、無需復雜操作技巧和特殊設備、攜帶方便等優點。但相對於其他免疫分析方法,該方法檢測靈敏度稍低,主要適合現場快速定性或半定量測定。目前該方法已被應用於醫學和生物學等眾多研究領域,尤其在發達國家已經得到了廣泛的應用。
(6)免疫分析與儀器分析技術的聯用技術。使用單一的IA技術進行農葯殘留分析獲得的信息量少,而理化分析方法的選擇性又比較差。Kramer等人將免疫分析法和液相色譜法(LC)聯合起來使用,從而簡化了分析方法,提高了檢測效率。LC-IA的聯用,將LC的高分離能力和IA的高靈敏性和高特異性融為一體。該分析法尤其適合多組分殘留分析和微量分析。免疫分析與氣相色譜/質譜(GC/MS)的聯用可減少結構相似的農葯或代謝產物分析中的交叉反應,以降低假陽性。