中葯分析驗證方法

① 質量標准——中葯質量標准分析方法驗證指導原則2

三、專屬性

專屬性系指在其他成分可能存在下，採用的方法能正確測定出被測成分的特性。鑒別、限量檢查、含量測定等方法，均應考察其專屬性。

1.鑒別

應能與可能共存的物質或結構相似化合物區分。不含被測成分的供試品，以及結構相似或組分中的有關化合物，均不得干擾測定，顯微鑒別、色譜光譜鑒別等應附相應的代表性圖象或圖譜。

2.含量測定和限量檢查

色譜法和其他分析方法，應附代表性圖譜，以不含被測成分的供試品（除去含待測成分葯材或不含待測成分的模擬復方）試驗說明方法的專屬性。並標明相關成分在圖中的位置，色譜法中的分離度應符合要求。必要時可採用二極體陣列檢測或質譜檢測進行驗證。

四、檢測限

檢測限系指供試品中被測物能被檢測出的最低量。確定檢測限常用的方法如下。

1.直觀法

可用於非儀器分析方法，也可用於儀器分析方法。

用一系列已知濃度的供試品進行分析，試驗出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。

2.信噪比法

僅適用於能顯示基線噪音的分析方法，即把已知低濃度供試品測出的信號與空白樣品測出的信號進行比較，算出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。一般以信噪比為3∶1或2∶1時相應濃度或注入儀器的量確定檢測限。

3.數據要求

應附測試圖譜，說明測試過程和檢測限結果。

五、定量限

定量限系指供試品中被測成分能被定量測定的最低量，其測定結果應具一定準確度和精密度。用於定量測定的分析方法均應確定定量限。

常用信噪比法確定定量限。一般以信噪比為10∶1時相應的濃度或注入儀器的量進行確定。

六、線性

線性系指在設計的范圍內，測試結果與供試品中被測物濃度直接呈正比關系的程度。

應在規定的范圍內測定線性關系。可用一貯備液經精密稀釋，或分別精密稱樣，制備一系列供試樣品的方法進行測定，至少制備5個濃度的樣品。以測得的響應信號作為被測物濃度的函數作圖，觀察是否呈線性，再用最小二乘法進行線性回歸。必要時，響應信號可經數學轉換，再進行線性回歸計算。

數據要求：應列出回歸方程、相關系數和線性圖。

七、范圍

范圍系指能達到一定精密度、准確度和線性，測試方法適用的高低限濃度或量的區間。

范圍應根據分析方法的具體應用和線性、准確度、精密度結果及要求確定。中葯由於含量差異大，對於有毒的、特殊功效或葯理作用的成分，其范圍應大於被限定含量的區間。溶出度或釋放度中的溶出量測定，范圍應為限度的±20%.

八、耐用性

耐用性系指在測定條件有小的變動時，測定結果不受影響的承受程度，為把方法用於常規檢驗提供依據。開始研究分析方法時，就應考慮其耐用性。如果測試條件要求苛刻，則應在方法中寫明。典型的變動因素有：被測溶液的穩定性，樣品提取次數、時間等。液相色譜法中典型的變動因素有：流動相的組成和pH值，不同廠牌或不同批號的同類型色譜柱，柱溫，流速等。氣相色譜法變動因素有：不同廠牌或批號的色譜柱、固定相，不同類型的擔體、柱溫，進樣口和檢測器溫度等。薄層色譜的變動因素有：不同廠牌的薄層板，點樣方式及薄層展開時溫度及相對濕度的變化等。

經試驗，應說明小的變動能否通過設計的系統適用性試驗，以確保方法有效。

附表檢驗項目和驗證內容

項 目內 容 鑒 別 限量檢查 含量測定及溶出量測定
定量 限度
准確度
重復性
中間精密度
重現性②
專屬性③
檢測限
定量限
線性
范圍
耐用性 -
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+
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+ +
+
+①
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+
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+

①已有重現性驗證，不需驗證中間精密度。

②重現性只有在該分析方法將被法定標准採用時做。

③如一種方法不夠專屬，可用其他分析方法予以補充。

上表中列舉了在不同類型的分析方法驗證中被認為是最重要的項目，「-」表示通常不需要驗證的項目，「+」表示通常需要驗證的項目，如遇特殊情況，仍應根據具體分析對象和情況而定。

② 簡述中葯制劑分析用於總成分的含量測定方法有哪些

中葯制劑分析中，用於總成分含量測定的方法多種多樣。其中，化學分析法是一種常見的手段，包括重量分析法與滴定分析法。重量分析法通過精確稱量樣品的質量來測定總生物鹼、總有機酸、總皂苷以及礦物葯成分等。滴定分析法則通過加入標准溶液與待測物質反應，計算出待測物質的含量，同樣適用於上述成分的測定。

分光光度法也是測定中葯制劑中總成分含量的有效方法之一。這種方法基於物質在特定波長下的吸光度與濃度成正比的原理，可以用於測定總皂苷、總生物鹼、總黃酮等成分。通過對樣品溶液在不同波長下的吸光度進行測量，可以計算出這些成分的具體含量。

值得注意的是，化學分析法與分光光度法各有優缺點。化學分析法操作相對簡單，但對樣品預處理要求較高；分光光度法則操作更為簡便，但對儀器設備的要求較高。因此，在實際應用中，應根據具體需求和條件選擇合適的方法。

隨著科學技術的進步，還出現了其他一些測定中葯制劑總成分含量的方法，例如高效液相色譜法、氣相色譜法等。這些方法可以更准確地測定復雜的中葯制劑中的各種成分，進一步提高了中葯制劑分析的精確度和可靠性。

③ 如何進行中葯的化學成分鑒定

注意實驗現象要寫完整，要從整個儀器分析，而且不能寫出物質的名稱。

熟記實驗目地以及實驗原理（即方程式），如果有計算題就得注意物質是否為純凈物才能代入方程式。而猜想就要根據實驗目地去寫，步驟要完整，記住取樣，結論也要根據實驗目地。

一般理化鑒別：

1.化學定性分析：利用葯材中的化學成分能與某些試劑產生特殊的氣味、顏色、沉澱或結晶等反應來鑒別中葯的真偽。

2.微量升華：在顯微鏡下觀察其結晶形狀、顏色及化學反應作為鑒別特徵。

3.熒光分析：某些化學成分，在紫外光或自然光下能產生一定顏色的熒光性質進行鑒別。