1. 怎麼做硅膠柱層析分離
常說的過柱子應該叫柱層析分離,也叫柱色譜,具體原理和方法如下:
柱層析原理:柱層析法的分離原理是根據物質在硅膠上的吸附力不同而使各組分分離。一般情況下極性較大的物質易被硅膠吸附,極性較弱的物質不易被硅膠吸附。
當採用溶劑洗脫時,發生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的過程,吸附力較強的組分,移動的距離小,後出柱;吸附力較弱的組分,移動的距離大,先出柱。
柱層析分離的注意事項
裝柱子時從下往上裝,先塞棉花,這個主要是為了不漏石英砂和硅膠。然後倒入石英砂,到圖示那麼多就可以了,主要是為了填補柱子下面的空間,讓硅膠柱是一個上下面粗細一致的圓柱形。
裝柱子過程不在這里贅述,裝好柱子後,上樣品,注意用吸管小心翼翼,沿著柱壁繞圈,均勻上樣,盡量不要弄壞硅膠表面。樣品倒入後,讓樣品靠重力完全滲入硅膠,最後再隨意倒入一些石英砂在最上面。這主要是為了保護已經上樣完成的硅膠表面,這樣以後再倒溶劑時,就不用擔心破壞上層硅膠表面的平整了。