用科學研究的方法分析病毒

『壹』 科學研究發現艾滋病毒起源於

艾滋病毒起源於非洲。

關於艾滋病毒的起源，科學研究已經取得了一些重要的發現。主流觀點認為，艾滋病毒可能起源於非洲。以下是關於這一觀點的具體解釋：

1. 非洲是HIV-1型病毒的主要起源地：根據對全球艾滋病病毒樣本的基因序列分析，科學家們普遍認為HIV-1型病毒起源於非洲。這一結論是基於對大量病毒樣本進行遺傳多樣性分析得出的。

2. 病毒傳播與人口遷徙有關：隨著人口遷徙和社交活動，HIV病毒從非洲逐漸傳播到全球各地。特別是在過去幾個世紀中，隨著非洲與其他大陸的交往增多，這種病毒的傳播速度加快。

3. 需要更多研究來確認起源細節：雖然普遍認為HIV起源於非洲，但關於具體的起源地點和時間仍存在爭議。這需要更多的研究，包括更多的基因序列分析和考古證據來進一步確認。目前，科學家們正在努力開展這些研究，以更准確地了解艾滋病毒的起源和發展歷程。

總的來說，科學研究發現艾滋病毒起源於非洲，但關於具體的起源地點和時間仍有待進一步的研究確認。

『貳』 如何利用電鏡技術測定病毒粒體的特徵

隨著科學的發展，電鏡已成為一種綜合的分析儀器，在植物病毒的診斷和鑒定中發揮著重要作用。植物病毒學上用得較多的是透射電鏡。

1 透射電鏡的成像原理

顯微鏡的解析度與其使用光源的波長呈負相關，即波長越短分辨本領越大。可見光的波長范圍為0.4～0.7μm，它決定了光鏡的分辨極限為0.2μm，有效放大倍數不能超過2000倍。電鏡用的光源為電子槍產生的高速電子束，其波長比可見光短十萬倍以上，因而大大地提高了解析度。電鏡解析度接近0.lnm，有效放大倍數在百萬倍以上。

在電子顯微鏡下可觀察病毒粒體外形、大小以及在寄主細胞中的位置等。植物病毒粒子常見的有球形、長桿狀、線形和彈狀。

2 制樣技術

樣品處理技術多種多樣，適用於不同的材料和觀察目的。如金屬投影和復型技術，主要用於病毒或其他大分子的表面結構和大小觀察；冰凍蝕刻用於細胞化學、生物膜等研究；另外還有放射自顯影電鏡技術、免疫電鏡技術等。而植物病毒學上廣泛應用的是負染技術和超薄切片技術。負染制樣操作簡單，所需時間少；而超薄切片制樣方法操作復雜，所需時間長，但這種方法可以觀察到病毒粒子在組織中的情況。

2.1 負染技術

負染是相對正染而言的。是指在樣品的周圍包被高電子密度的染料，背景呈深色，而樣品呈白色，反襯出樣品的輪廓。病毒負染後能很清楚地看到其大小和細微結構。此法簡便、易行、快速，為病毒診斷提供了一種可靠手段。現在鑒定病毒，一般先用病汁液做負染觀察，根據看到的病毒的大小和形狀等，能為進一步研究提供許多有用信息，如採用什麼方法提純、病毒的分類地位如何等。其中有六個病毒屬的形態特徵非常典型，幾乎可以憑此特徵就能確定它們屬於哪個病毒科、屬，見表1。

表1 六個典型特徵病毒屬

pH調節用1mol/L HCl或1mol/L NaOH，而鉬酸銨用醋酸銨調，甲酸鈾用氫氧化銨調。

強大電子束的轟擊，是造成病毒變形和失去結構細節的另一重要原因，觀察時要採用盡量低亮度光斑，動作迅速，以減少轟擊時間。Forvmor膜等在電子束照射下，容易漂移，這樣病毒會被拉長或拉寬，因此，在測量病毒顆粒大小等精確觀察時，最好使用碳膜，或在Forvmor膜上加噴一層碳膜。

（5）病毒粒體大小測量 目前病毒學工作者已經注意到，同一病毒的大小不一樣，有些甚至相差甚遠。這可能是由於不同分離物或不同株系本身就不同，但大部分可能是由於實驗誤差或方法上的差別造成的。測量病毒大小，一般不宜提純病毒，而要用病株粗提液。因為病毒在提純過程中的形態結構，會由於提純過程中離子環境等的變化和物理因素的影響發生而變化。染色要用兩種以上染料，測量病毒顆粒的數量要盡量多，尤其是線狀病毒容易斷裂，數量應在100個以上。

2.2 超薄切片技術

根據電鏡成像原理可知，用於電鏡觀察樣品其厚度要求在數十納米，而通常單個細胞的厚度在數十微米，比要求厚度大100倍，而徒手切片或用於光鏡的切片機，其切片厚度一般在單個細胞水平，所以電鏡觀察必須做超薄切片。

超薄切片一般程序為：取材—固定—脫水—包埋—切片—染色—電鏡觀察。

（1）取材 取材要求典型、迅速，機械損傷小。材料切成1mm3大小，離體後1min之內進入固定液。應取不同寄主材料、同一寄主的不同組織和不同接種時期的樣品。

（2）固定 是用物理的或化學的方法迅速將細胞殺死，並且盡可能地使保存和固定細胞內各種結構、生物大分子生活時的狀態和位置。電鏡中常用的固定方法是化學固定。常用四氧化鋨、戊二醛、高錳酸鉀或重鉻酸鉀等固定劑。在病毒學中一般採用2%～3%戊二醛—1%～2%四氧化鋨（用0.2mol/LPBS，pH7.2配製）雙固定法，這樣細胞中的多種成分，如蛋白質、脂類、多糖、核酸等，大部分都能固定下來。戊二醛固定12～24h，四氧化鋨固定2～4h。戊二醛遇到鋨酸會形成沉澱，因此戊二醛固定後一定要用緩沖液充分清洗後再進行四氧化鋨固定。固定在超薄切片中很關鍵，固定液的種類、濃度、pH、滲透壓、離子組成、固定時間、溫度和方式都與固定的質量密切相關。因此，整個固定過程應該在4℃下進行。固定劑一定要用緩沖液配製。固定好的材料，電鏡下細胞內各種膜系統應該完整，沒有斷裂，雙層膜要基本平行，細胞質呈精細顆粒狀，沒有空白。固定後緩沖液要充分清洗後再進行下面的步驟。

（3）脫水 常用的包埋劑是疏水的，因此包埋前要用既親水又親脂的乙醇或丙酮進行脫水。從低濃度到高濃度的脫水劑脫水，最後用絕對無水的脫水劑脫水。

（4）包埋 包埋的目的是增強樣品的機械強度，使樣品具有一定的機械形狀，適於切片機工作；另一個重要作用是進一步固定細胞結構。包埋劑種類很多，有水溶性的，也有脂溶性的。常用的是Epon812等環氧樹脂。包埋過程中發生的化學反應，叫聚合過程。聚合過程中實際上發生了兩類反應，一類是環氧樹脂末端環氧基之間在胺類化合物（如DMP-30）催化下，化合生成長鏈；另一類是樹脂中間的羥基和交聯劑（也稱固定劑）的酸酐發生反應，生成橫向連橋，加固了樹脂分子之間的聯系。為了增強樹脂聚合形成的包埋塊的切割性能，常加入一些增塑劑，如樹脂、催化劑、固化劑。

（5）切片 准確、熟練地掌握切片機操作技術，包埋塊軟硬適度，修塊好，就能切出要求質量的片子來。這里技巧很重要。

（6）超薄切片的染色 也叫電鏡技術的正染色。觀察內容不一樣，採用染色方法不同，病毒內含體和細胞病理學研究則常用醋酸雙氧鈾—檸檬酸鉛染色法。切片在1%～2%醋酸雙氧鈾中染色20min，用50%乙醇沖洗後用檸檬酸鉛染色30min，0.01mol/L NaOH沖洗。染色的關鍵是要防止醋酸鈾和檸檬酸鉛生成沉澱。防止污染的主要措施是防止CO2和檸檬酸鉛反應。如用剛制備出的蒸餾水配製染料和沖洗劑，染色時在小室中進行，小室中放入吸收CO2的固體NaOH，防止人呼吸時CO2進入小室中，戴口罩等。染色和沖洗完畢，切片自然乾燥後就可以電鏡觀察。

電子顯微鏡的出現及各種電鏡技術的發展，為植物病毒的直接觀察起到了巨大的推動作用，使檢疫工作人員能得到受病毒感染的病毒粒子電鏡照片以作為直接證據。但電鏡觀察結果需要和其他方法的檢測結果相結合，才能確定病毒的分類地位。這是因為許多病毒都有類似的形態和結構。由於一些植物汁液中病毒濃度過低，在進行常規的電鏡觀察檢測中，很難發現病毒粒子，這樣就要求對一些植物病毒進行分離和提純，以便進行有效的電鏡觀察和其他理化檢測。病毒的分離和提純主要是採用差速離心、PEG沉澱的方法，進一步的純化則採用密度梯度離心和柱層析法。為了直接檢測植物體內的帶毒情況，常採用植物組織的超薄切片和電鏡觀察進行。超薄切片的電鏡觀察可以直接用於對植物組織內部的病毒形態、內含體形態、病毒所在的部位、受感染的植物組織發生的病理學變化等進行檢查。

『叄』 新研究發現冠狀病毒致命弱點

新研究發現冠狀病毒致命弱點：揭示病毒復制機制的突破性發現
引言：
自新冠疫情爆發以來，全球科學家們一直在努力研究冠狀病毒，希望找到有效的治療方法。最近的一項研究取得了突破性的進展，揭示了冠狀病毒的致命弱點，為疫苗和葯物研發提供了新的方向。本文將對這一研究進行直接解答，並介紹相關內容。
一、研究背景
冠狀病毒是一類常見的病毒，包括了SARS-CoV、MERS-CoV以及最近爆發的SARS-CoV-2等。這些病毒都具有高度傳染性和致命性，給全球公共衛生安全帶來了巨大挑戰。因此，科學家們一直在尋找冠狀病毒的弱點，以便開發出有效的治療方法。
二、研究方法
該研究團隊採用了先進的生物技術手段，通過對冠狀病毒的基因組進行深入分析，揭示了病毒復制的關鍵機制。他們發現，冠狀病毒在復制過程中依賴於一種特定的酶，這個酶被稱為「RNA依賴性RNA聚合酶」（RdRp）。RdRp在病毒復制過程中起到了關鍵的作用，因此成為了研究的重點。
三、研究發現
通過對RdRp的深入研究，科學家們發現了冠狀病毒的致命弱點。他們發現，RdRp在復制過程中需要與一種輔助蛋白相互作用，這種輔助蛋白被稱為「核糖核酸結合蛋白」（Nsp9）。Nsp9的功能是穩定RdRp的結構，並促進其在病毒復制中的活性。因此，如果能夠干擾Nsp9和RdRp的相互作用，就有可能阻斷冠狀病毒的復制過程。
四、研究意義
這項研究的突破性發現為冠狀病毒的治療提供了新的方向。科學家們可以通過設計針對Nsp9和RdRp相互作用的葯物，來干擾病毒的復制過程。此外，這一發現還為疫苗研發提供了新的思路。科學家們可以利用Nsp9和RdRp的相互作用來設計疫苗，以增強人體免疫系統對冠狀病毒的防禦能力。
結論：
新研究發現了冠狀病毒的致命弱點，即Nsp9和RdRp的相互作用。這一發現為冠狀病毒的治療和疫苗研發提供了新的方向。科學家們可以通過干擾Nsp9和RdRp的相互作用來阻斷病毒的復制過程，從而達到治療的目的。這一突破性的研究成果將為全球公共衛生安全帶來重要的影響。