1. 自動生化分析儀常用分析方法有哪幾種
自動生化分析儀上常用的分析方法主要有以下三種：
(1)終點分析法(平衡法)包括一點終點法、兩點終點法和雙波廳猜長法終點法。
(2)連續監測法(又稱動態分析法、速率法或動力學法)是測定底物的消耗或產物生成速度的化學方法。
(3)比濁測定法是通過檢測物質對光的散射或透射強度來咐此測定物質的方衡伏迅法。另外，還有均相酶免疫分析法。
2. 全自動生化分析儀基本測定方法
全自動生化分析儀檢測方法：
1、終點法（endessay）完全被轉化成產物，不再進行反應達到終點，取反應終點的吸光度來計算被測物質的濃度。生化檢驗中除酶和BUN、CRE外幾乎都用終點法來進行檢測。
2、一點終點法：取反應達終點時的一個點的吸光度來計算結果。
3、二點終點法：取反應尚未開始時讀取一個點的吸光度，待反應達終點時再取第二點的吸光度。用第二點吸光度減去第一點吸光度的差值來計算結果。主要用於扣除試劑和樣品空白。保證結果的准確性。一般雙試劑用。
4、固定時間法（兩點法）：是取尚在反應中的兩點間的差值來計算結果。此兩點既不是反應起始點也不是終點。主要用於檢測一些非特異性的項目，如肌酐。
5、連續監測法（動力學法、速率法）：是在測定酶的活性或酶代謝產物時，連續取反應曲線中呈線性變化吸光度值（△；A/min）來計算結果。因在反應線性時間內各點間的吸光度差值為零故又稱謂零級反應。
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(2)均相免疫分析方法舉例擴展閱讀：
全自動生化分析儀的原理：
自動化分析儀就是將原始手工操作過程中的取樣、混勻、溫浴（37℃）檢測、結果計算、判斷、顯示和列印結果及清洗等步驟全部或者部分自動運行。
如今，生化檢驗基本上都實現了自動化分析，還有專為大型或超大型臨床實驗室和商業實驗室設計的全自動生化分析系統，可根據實驗室的檢測量任意配置。
無論是當今運行速度最快（9600Test/h）的模塊式全自生化分析儀，還是原始手工操作用於比色的光電比色計，其原理都是運用了光譜技術中吸收光譜法。是生化儀最基本核心。
3. 免疫分析方法有哪些
（1）放射免疫分析法（radioimmunoassay，RIA）。RIA技術是使用以放射性同位素（如125I、32P、3H等）作標記的抗原或抗體，用γ－射線探測儀或液體閃爍計數器測定γ－射線或β－射線的放射性強度，來測定抗體或抗原量的技術。它包括以標記抗原為特點的放射免疫分析和以標記抗體為特點的免疫放射分析（immunoradiometricassay，IRMA）。前者以液相競爭結合法居多，既測大分子抗原又測小分子抗原；後者以固相法測大分子抗原為主。
RIA在早期建立的農葯免疫分析方法中佔了很大比重，建立了狄氏劑、艾氏劑、2，4－D和2，4，5－T、對硫磷和百草枯等農葯的放射免疫分析法。盡管該方法靈敏度非常敏銳（RIA通常為10-9g、10-12g，甚至10-15g），應用范圍廣，但進行RIA需使用昂貴的計數器，也存在放射線輻射和污染等問題，因此在農葯殘留檢測領域的應用和發展受到了一定的限制，並逐步為其他免疫分析方法所取代。
（2）酶免疫分析法（enzymeimmunoassay，EIA）。EIA是繼RIA之後發展起來的一項免疫分析技術。其檢測原理與放射免疫法類似，但所用的標記物為酶，它將抗原、抗體的特異性免疫反應和酶的高效催化作用有機結合起來，通過測定結合於固相的酶的活力來測定被測定物的量。用做標記物的酶有辣根過氧化物酶（horseradishperoxidase，HRP）和鹼性磷酸酶（alkalinephosphatase，AKP）、葡萄糖氧化酶（glucoseoxidase，GO）、脲酶（urease）等。酶標記反應的固相支持物有聚苯乙烯塑料管、膜等。目前大多數採用96孔酶標板（MTP）作為固相支持物。這種板的檢測容量大，樣本數量多，只需有台簡單的酶標儀就可得出准確的檢測數據。也有學者採用磁珠作為固相材料進行EIA研究，其原理是將高分子材料（聚苯乙烯、聚氯乙烯等）包裹到金屬小顆粒（Fe2O3，Fe3O4）外面，再通過化學方法鍵合上氨基（－NH2）、羧基（－COOH）、羥基（－OH）等活性基團，再與抗體或抗原耦聯，製成免疫性微珠。該方法的優點是微珠比表面積大，吸附能力強，能懸浮在液相中快速均勻的捕獲樣品中的待測物，通過外加磁場後能夠實現微珠與樣品液的快速分離，從而減少檢測時間、提高檢測靈敏度。
由於酶標試劑制備容易、穩定、價廉，酶免疫分析的靈敏度接近放射免疫技術，故近年來EIA技術發展很快，已開發了多種EIA方法。其中酶聯免疫法（，ELISA）是目前農葯殘留檢測中應用最廣泛的酶免疫分析技術。
（3）熒光免疫分析法（fluorescenceimmunoassay，FIA）。FIA檢測的基本原理是將抗原抗體的高度特異性與熒光的敏感可測性有機地結合，以熒光物質作為示蹤劑標記抗體、抗原或半抗原分子，制備高質量的特異性熒光試劑。當抗原抗體結合物中的熒光物質受到紫外光或藍光照射時，能夠吸收光能進入激發態。當其從激發態回復基態時，能以電磁輻射形式放射出所吸收的光能，產生熒光。繪制農葯濃度－熒光強度曲線，可以定性、定量檢測樣品中的農葯殘留量。
適用於抗體、抗原或半抗原分子標記的熒光素須符合要求：①應具有能與蛋白質分子形成穩定共價鍵的化學基團，或易轉變成這類反應形式而不破壞其熒光結構；②標記後，熒光素與抗體或抗原各自的化學結構和性質均不發生改變；③熒光效率高，與蛋白質結合的需要量很少；④熒光素與蛋白質結合的過程簡單、快速，游離的熒光素及其降解產物容易除去；⑤結合物在一般儲存條件下性能穩定，可保存使用較長時間。
（4）化學發光免疫分析法（luminescentimmunoassay，LCIA）。LCIA又可分為化學發光免疫測定（chemiluminescentimmunoassay，CLCIA）和生物發光免疫測定（bio-luminescentImmunoassay，BLCIA）。
1976年，Shroeder首先用生物素（B）－親和素（A）系統建立了均相化學發光免疫測定技術，爾後Halman和Velan又將其引伸到非均相體系，現已滲入到生物學研究的各個領域。其原理是以發光指示抗原與抗體的結合，當發游標記物與相應的抗體或抗原結合後，底物與酶作用，或與發光劑產生氧化還原反應，或使熒光物質（例如紅熒烯等）激發，釋放光能。最後用光度計測定其發光強度，進行定量分析。常用發游標記物有辣根過氧化物酶（HRP）、魯米諾（luminol）、異魯米諾（isoluminol）、咯粉鹼（lophine）、光澤精（lucigen）、雙（2、4、6－三氯苯）草酸酯、聯苯三酚和6[N-（4－二氨基丁基）－N－乙基]－氨基-2，3－二氫吩嗪-1，4－二酮（ABEI）等。用上述發游標記物標記的抗體（或抗原）在一定的pH緩沖溶液中與相應的抗原（或抗體）結合時，在協同因子（例如H2O2等）的作用下發光，其發光強度與被測物的濃度成正比，故可以用於定量分析。
發光免疫測定具有特異性強、靈敏度高（檢測限量達10-15mol/L）、快速（1～3h）、發光材料易得等優點。但其發光過程和強度常受到發光物質本身的化學結構、介質的pH、協同發光物質和金屬離子雜質等影響。
（5）金免疫層析分析法（goldimmuno-chromatographyassay，GICA）。GICA檢測原理是將配體（抗體或抗原）以線狀包被固化於硝酸纖維素膜等微孔薄膜上，膠體金標記另以配體或其他物質並以干態固定在吸水材料上，通過毛細作用，使樣品溶液在層析條上泳動，當泳動至膠體金標記物處時，如樣品中含有待檢受體，則發生第一步高度特異性的免疫反應，形成的免疫復合物繼續泳動至線狀包被區時，發生第二步高度特異性的免疫反應，形成的免疫復合物被截留在包被的線狀區，通過標記的膠體金而顯紅色條帶（檢測帶），而游離的標記物則越過檢測帶，與結合的標記物自動分離。通過檢測帶上顏色的有無或色澤深淺來實現定性或定量測定2。
2金標試紙條檢測
GICA法具有快速（5～20min）、廉價、結果明確、無需復雜操作技巧和特殊設備、攜帶方便等優點。但相對於其他免疫分析方法，該方法檢測靈敏度稍低，主要適合現場快速定性或半定量測定。目前該方法已被應用於醫學和生物學等眾多研究領域，尤其在發達國家已經得到了廣泛的應用。
（6）免疫分析與儀器分析技術的聯用技術。使用單一的IA技術進行農葯殘留分析獲得的信息量少，而理化分析方法的選擇性又比較差。Kramer等人將免疫分析法和液相色譜法（LC）聯合起來使用，從而簡化了分析方法，提高了檢測效率。LC-IA的聯用，將LC的高分離能力和IA的高靈敏性和高特異性融為一體。該分析法尤其適合多組分殘留分析和微量分析。免疫分析與氣相色譜/質譜（GC/MS）的聯用可減少結構相似的農葯或代謝產物分析中的交叉反應，以降低假陽性。
4. 免疫膠體金技術在免疫學中的應用
膠體金標記技術因其簡便、敏感、特異的標記物制備方法，在免疫學領域得到廣泛應用，無需放射性同位素或潛在致癌物質的酶顯色底物，也無需熒光顯微鏡。該技術的應用范圍廣泛，不僅限於光鏡或電鏡的免疫組化法，還廣泛應用於液相免疫測定、金標記流式細胞術及膠體金固相免疫測定法等。
在液相免疫測定中，膠體金與抗體結合，建立微量凝集試驗檢測抗原，通過直接觀察凝集顆粒的顏色變化進行檢測。例如，通過均相溶膠顆粒免疫測定法（SPIA）成功應用於PCG的檢測，並能直接進行定量分析。
金標記流式細胞術利用膠體金改變紅色激光的散射角，適用於分析不同類型細胞的表面抗原。膠體金標記的細胞在波長632nm時，90度散射角可放大10倍以上，同時不影響細胞活性。與熒光素共同標記時，二者互不幹擾。
膠體金固相免疫測定法有多種應用形式，如斑點免疫金銀染色法（Dot－IGS/IGSS）和斑點金免疫滲濾測定法（DIGFA）。斑點免疫金染色法（Dot－IGS）將蛋白質抗原直接點樣在硝酸纖維膜上，與特異性抗體反應後，滴加膠體金標記的第二抗體，形成肉眼可見的紅色斑點。通過銀顯影液增強，即斑點金銀染色法（Dot－IGS/IGSS）。
斑點金免疫滲濾測定法（DIGFA）與斑點免疫金染色法原理相同，區別在於硝酸纖維膜下墊有吸水性強的墊料，形成滲濾裝置。在加抗原（抗體）後，迅速加抗體（抗原），再加金標記第二抗體，由於有滲濾裝置，反應迅速，在數分鍾內即可顯出顏色反應。此方法已成功應用於HIV的檢查和人血清中甲胎蛋白的檢測。
免疫膠體金技術(Immune colloidal gold technique) 是以膠體金作為示蹤標志物應用於抗原抗體的一種新型的免疫標記技術。膠體金是由氯金酸（HAuCl4）在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，聚合成為特定大小的金顆粒，並由於靜電作用成為一種穩定的膠體狀態，稱為膠體金。膠體金在弱鹼環境下帶負電荷，可與蛋白質分子的正電荷基團形成牢固的結合，由於這種結合是靜電結合，所以不影響蛋白質的生物特性。 膠體金除了與蛋白質結合以外，還可以與許多其它生物大分子結合，如SPA、PHA、ConA等。根據膠體金的一些物理性狀，如高電子密度、顆粒大小、形狀及顏色反應，加上結合物的免疫和生物學特性，因而使膠體金廣泛地應用於免疫學、組織學、病理學和細胞生物學等領域。