⑴ 植物NiR（亞硝酸還原酶）酶活性測定，急急急！！！不勝感激！
可採用「微量擴散比色法測定植物體內硝酸還原酶與亞硝酸還原酶的活性」方法來測定，原理為：植物體內硝酸還原酶(NR) 和亞硝酸還原酶(NiR)活性的測定一般是根據底物的減少來衡量的。本方法則是根據酶促反應的最終產物(氨)的釋放來衡量的,能較真實地反映酶活性的大小。測定時,可通過外源基質的選擇來衡量硝酸還原酶或亞硝酸還原酶的活性。
⑵ 香菇呼吸作用相關的酶有哪些，以及測定酶活的方法有哪些
酶是植物體內普遍存在的、活性較高的一種酶,它與呼吸作用、光合作用及生長素的氧化等都有密切關系,在植物生長發育過程中,它的活性不斷發生變化,因此測量這種酶,可以反映某一時期植物體內代謝的變化.
一、原理
在有過氧化氫存在下,過氧化物酶能使愈創木酚氧化,生成茶褐色物質,該物質在 470 nm 處有最大吸收,可用分光光度計測量 470 nm 的吸光度變化測定過氧化物酶活性.
二、實驗材料、試劑與儀器設備
（一）實驗材料
馬鈴薯塊莖.
（二）試劑
1 ． 100 mmol ／ L 磷酸緩沖液 pH6.0 （見附錄）.
2 ．反應混合液：100 mmol ／ L 磷酸緩沖液（ pH6.0 ） 50 mL 於燒杯中,加入愈創木酚 28 μl ,於磁力攪拌器上加熱攪拌,直至愈創木酚溶解,待溶液冷卻後,加入 30 % 過氧化氫 19 μl ,混合均勻,保存於冰箱中.
（三）儀器設備
分光光度計,研缽,恆溫水浴鍋,100 mL 容量瓶,吸管,離心機.
三、實驗步驟
1 ．稱取植物材料 1 g ,剪碎,放入研缽中,加適量的磷酸緩沖液研磨成勻漿,以 4000 r ／ min 離心 15 min ,上清液轉入 100 mL 容量瓶中,殘渣再用 5 mL 磷酸緩沖液提取一次,上清液並入容量瓶中,定容至刻度,貯於低溫下備用.
2 ．取光徑 1 cm 比色杯 2 只,於 1 只中加入反應混合液 3 mL 和磷酸緩沖液 1mL ,作為對照,另 1 只中加入反應混合液 3 mL 和上述酶液 1mL （如酶活性過高可稀釋之）,立即開啟秒錶記錄時間,於分光光度計上測量波長 470 nm 下吸光度值,每隔 1min 讀數一次.
四、結果計算
以每分鍾吸光度變化值表示酶活性大小,即以 ΔA 470 /[min • g （鮮重） ] 表示之.也可以用每 min 內 A 470 變化 0.01 為 1 個過氧化物酶活性單位（ u ）表示.
過氧化物酶活性 [u/ （ g • min ） ]=
式中：Δ A 470 ——反應時間內吸光度的變化.W ——植物鮮重,g .
V T ——提取酶液總體積,mL .
V s ——測定時取用酶液體積 ,mL .
t ——反應時間,min .