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多糖的色譜分析方法

發布時間:2024-06-24 02:38:21

㈠ 大家是如何測定多糖的

季宇彬.《中葯多糖的化學與葯理》. 北京:人民衛生出版社.2005.5多糖含量測定(1)顯色試劑硫酸法:根據單糖、多糖及其衍生物在硫酸作用下水解、脫水生成糖醛類化合物,與酚類、芳胺類等縮合成有色化合物。苯酚硫酸法生成橙黃色溶液,在490nm處有特徵吸收;蒽酮硫酸法生成亮綠色溶液,在630nm處有特徵吸收;咔哇硫酸法用於測定糠醛酸(伯醇基氧化:形成糠醛酸,斐林(Fehling)試劑可定量。苯酚-硫酸試劑可與游離的寡糖、多糖中的己糖、糠醛酸起顯色反應,己糖在490nm處(戊糖及糠醛酸在480nm處)有最大吸收,吸收值與糖含量呈線性關系)。顯色試劑硫酸法方便簡單,但需嚴格控制水解條件。(2)DNS法:一個能消除還原性雜質干擾的方法(在氫氧化鈉和丙三醇的存在下,還原糖能使DNS還原生成3-氨基-5-硝基水楊酸,在沸水浴中顯色2~5min,此化合物在過量的氫氧化鈉鹼性溶液中呈橘紅色,波長在540nm下有最大吸收峰,並且吸光度與還原糖含量有線性關系。試驗過程中諸多因素如吸收光譜、顯色劑用量、顯色時間等均對測定結果有直接影響)。利用3,5-二硝基水楊酸與多糖水解產物還原糖共熱後還原成棕紅色氨基化合物,於540nm處有特徵吸收。(主要參考文獻:董文慧,等.雲芝肝泰中雲芝多糖的工業分析方法.中成葯,1990,12(2):33.齊香君,等.3,5-二硝基水楊酸比色法測定溶液中還原糖的研究. 纖維素科學與技術.2004,12(3):17~19)(3)滴定法:有斐林氏滴定法,間接碘量滴定法。(4)氣相色譜法:可定性、定量分析多糖的組分及含量,常採用衍生物法以增加其揮發性。一般是將多糖酸水解物或甲醇解(用鹽酸-甲醇)物,用三甲基硅烷基化(TMS)或三氟乙醯化(TFA)轉化為硅烷化產物或二醯化產物進行氣相色譜分析。但乙醯化之前,糖先用KBO4或NaBH4作還原成開鏈的糖醇化合物較好。多糖用甲醇解方式把半縮醛甲基化,形成甲基糖苷後再TMS化,異構物減少,有利於分辨。常以甘露醇或肌醇為內標,用已知的各種單糖作標准。(5)高效液相色譜法:選用TSK、SW凝膠排斥色譜柱為分離柱,樣品經簡單預處理,在示差折光檢測器中進行檢測,以不同分子量的標准右旋糖酐作標准,同時測定樣品中多糖的分子量分布情況及其含量。換算因子F的測定參見附件還陽參多糖的定性分析及含量測定.pdf|||常見的方法有:GPC測定多糖分子量及其分布瓊脂糖電泳法HPLC方法測定多糖。不同的方法會有些差異。

㈡ 如何測定多糖組分用什麼方法可以測定多糖組分,測定出來的是組成多糖的單糖,還是多糖混合物中的某一多

第一,我認為你把「提取
」和"測定"搞混了。提取是獲得目標物,測定是測定目標物的純度和活性。
第二。測定的化是單糖還是多糖?這當然取決你的目的物!! 單糖有單糖的方法,多糖有多糖的方法,除非你把多糖水解,否則不可能因為測定把多糖變成單糖。那算是測定嗎?成分都變了,那是測雜質?
第三。下面的是多糖的測定方法。
1.蒽酮硫酸比色法。根據糖類脫水生成糠醛或者衍生物。糠醛能夠與蒽酮發生藍綠色顏色反應。直接620nm測一下就好。
2.DNS比色法測定還原糖
3.苯酚硫酸比色法
4.葡萄糖氧化酶測定葡萄糖
5.Nelson法
直接復制名字去網路。
如果想要知道多糖是由什麼單糖組成的。可以酶解掉然後跑色譜,根據吸收峰找相應單糖。不過你不做化學合成做這個幹嘛,有活性的是多糖。

㈢ 緇嗚弻鑴傚氱硸鐨勯壌瀹氭柟娉

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㈣ 多糖純度鑒定方法有哪些

答案要點:多喊吵糖水解後進行
(1)薄層色譜法和紙色譜法鑒別;
(2)濾紙電泳、玻鄭升侍璃纖維電泳、醋酸纖維薄膜電泳和凝膠電泳等電泳方法;
(3)HPLC法鑒別;
(4)氣相色譜—質譜聯用笑宴等。

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