比較光學分析六種方法

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Ⅱ 光度分析的方法

光度分析的方法
（1）目視比色法
用眼睛比較溶液顏色的深淺以確定待測組分含量的方法，稱為目視比色法。最常用的是標准系列法。它是用一套質料相枯滲同、大小形狀相同、帶有刻度、等體積的比色管組成。將一系列不同體積的標准溶液依次加入比色管中，取一定量的待測溶液置於另一比色管中，然後分別加入等量的顯色劑及其它試劑，最後用水稀釋至刻度（比色管容量有10、25、50、100mL等幾種）。搖勻並放置一定時間待反應達平衡後，從管口垂直向下觀察，比較待測液與標准溶液顏色的深淺。若待測液與某一標准液顏色深度一致，則說明兩者濃度相等；如果待測液的顏色深度介於某相鄰兩標准之間，則取其平均值作為待測液的濃度。
目視比色法儀器簡單、操作簡便、靈敏度也較高、顯色反應如不遵從比耳定律也能進行。因而它被廣泛應用於准確度要求不高的常規分析野搜中。
目視比色法的主要缺點是准確度不高，如果待測溶液中存在第二種有色物質，甚至無法進行測定。另外，由於許多有色溶液顏色不夠穩定，標准系列不能久存，經常在測定時需同時配製。
（2）光度分析法
通常，將使用光電比色計測定有色溶液的吸光度進行定量分析的方法稱為光電比色法，將使用分光光度計進行測定的方法稱為分光光度法。兩種方法的測定原理是相同的，所不同的僅在於獲得單色的方法不同，光電比色法是採用濾光片，而分光光度法是利用棱鏡或光柵單色器。由於兩者均基於吸光度的測定，所以可統稱為光度分析法。操作步驟都是測量一系列標准溶液的吸光度，繪制工作曲線。並在相同條件下，測量待測試樣的吸光度，由工作曲線上查出試樣中待測物的含量。
光度沒脊脊法與目視比色法比較，具有下列優點：
a.使用儀器代替人眼進行測量，消除了人工的主觀誤差，從而提高了准確度。
b.測定溶液中有其它有色物質共存時，可以選擇適當的單色光和參比溶液來消除干擾，因而可提高選擇性。
c.使用標准曲線法可簡化手續，加快分析速度。

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Ⅲ 光學分析法有哪些類型

光學分析法是基於物質對光的吸收或激
發後光的發射所建立起來的一類方法，
比如紫外-可見分光光度法，紅外及拉曼
光譜法，原子發射與原子吸收光譜法，
原子和分子熒光光譜法，核磁共振波譜
法，質譜法等。

Ⅳ 光學分析的分類

光學分析可分為非光譜法及光譜法兩大類方法。 分子信標技術是熒光分析方法在DNA檢測領域的又一延伸。分子信標的概念是1996年由Tyagi等提出的。分子信標是一段與特定核酸互補的DNA探針，空間結構上呈「發夾」結構，其中環序列是與靶DNA互補的探針；莖的一端連接上一個熒光分子，另一端連上一個淬滅分子。當靶序列不存在時，分子信標呈「發夾」結構，莖部的熒光分子與淬滅分子非常接近（7～10nm），熒光分子發出的熒光被淬滅分子吸收，此時檢測不到熒光信號；當有靶序列存在時，分子信標的環序列與靶序列特異性結合，形成穩定的雙鏈體線性結構，此時熒光分子與淬滅分子分開，產生可被檢測的熒光信號。分子信標技術具有背景信號低、靈敏度高、特異性強等優點，在DNA檢測中有著廣闊的應用前景。目前，分子信標技術已應用於PCR靶標的實時熒光定量檢測。Perlette等在袋鼠腎細胞質中注入分子信標，實時檢測了活細胞中的RNA及RNA/DNA雜交過程。通過選擇不同的熒光分子-淬滅分子對，可設計出多色分子信標，熒光系統檢測到不同顏色的熒光，可實現多個靶序列的同時檢測。另外，可利用金錶面對熒光的淬滅作用，將熒游標記的「發夾」分子固定在金錶面，沒有靶序列時熒光被金錶面淬滅，有靶序列雜交後產生熒光。
實際上，分子信標是一種基於熒光能量轉移（FRET）的技術。熒光能量轉移是指當熒光給體和受體間的分子距離足夠近時，發生分子間的能量轉移，熒光從一個分子向另一個分子轉移。因為DNA的存在可影響體系的能量轉移，引起熒光強度的改變，熒光能量轉移技術在DNA檢測中有著廣泛的應用。高峰等研究了吖啶橙-羅丹明B二聚體能量體系作為熒光探針用於DNA的測定。Bazan等在帶正電的共軛聚電解質(cationicconjugatedpolymers，CCP）中加入熒游標記的肽苷酸（PNA-C*），由於PNA本身不帶電，不會和共軛聚電解質發生作用。當溶液中加入和PNA互補的DNA時，DNA帶有很強的負電荷，會和帶正電的共軛聚電解質形成復合物，同時DNA和熒游標記的肽苷酸雜交，形成共軛聚電解質-DNA-(PNA-C*）的三元復合物，拉近了共軛聚電解質和熒光探針C*熒光強度即可判斷出是否有待測DNA。 常用的比色法有兩種：目視比色法和光電比色法，兩種方法都是以朗伯-比爾定律（A=εbc）為基礎。常用的目視比色法是標准系列法，即用不同量的待測物標准溶液在完全相同的一組比色管中，先按分析步驟顯色，配成顏色逐漸遞變的標准色階。試樣溶液也在完全相同條件下顯色，和標准色階作比較，目視找出色澤最相近的那一份標准，由其中所含標准溶液的量，計算確定試樣中待測組分的含量。
光電比色法是在光電比色計上測量一系列標准溶液的吸光度，將吸光度對濃度作圖，繪制工作曲線，然後根據待測組分溶液的吸光度在工作曲線上查得其濃度或含量。與目視比色法相比，光電比色法消除了主觀誤差，提高了測量准確度，而且可以通過選擇濾光片來消除干擾，從而提高了選擇性。但光電比色計採用鎢燈光源和濾光片，只適用於可見光譜區和只能得到一定波長范圍的復合光，而不是單色光束，還有其他一些局限，使它無論在測量的准確度、靈敏度和應用范圍上都不如紫外-可見分光光度計。20世紀30～60年代，是比色法發展的旺盛時期，此後就逐漸為分光光度法所代替。

Ⅳ 三種常用的光譜分析方法

三種常用的光譜分析方法如下：

光譜分析法指的是物質的一類分析方法，主要有原子發射光譜法、原子吸收光譜法、紫外-可見吸收光譜法、紅外光譜法等。

其在飼料加工分爛睜析領域應用相當廣泛，特別是在測定飼料中的鉛、鐵、鉛、銅、鋅等離子的含量中的應用。熒光分析也是近年來發展迅速的痕量分析方法，該方法操作簡單、快速、靈敏度高、精密度和准確度好，並且線形范圍寬，檢出限低。